植物組織培養(yǎng)的基本條件（植物組織培養(yǎng)技術(shù)課件）

組培常用的儀器設(shè)備

及使用方法目錄基本儀器與設(shè)備無菌操作設(shè)備培養(yǎng)器皿及實(shí)驗(yàn)工具滅菌設(shè)備材料培養(yǎng)設(shè)備一、基本儀器與設(shè)備

1、天平天平存放的環(huán)境要求：干燥、無震動(dòng)、無腐蝕性藥品的地方，避免移動(dòng)，天平匣內(nèi)應(yīng)放硅膠或其他中性干燥劑以保持干燥（如萬分之一天平）。A.電子天平精度高、稱量快。B.分析天平精度為0.0001g，用來稱取微量元素和植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)及微量附加物。選擇平穩(wěn)，干燥，沒有腐蝕性藥品和水氣的地方放置。2、冰箱和冰柜A.普通冰箱很多材料需要提前配制（如母液），于冰箱內(nèi)保存。B.低溫冰箱某些試劑、藥品和母液需要低溫保存，有些材料需低溫處理。3、烘箱、干燥箱、恒溫箱和恒溫水浴鍋A.烘箱類有些材料需要烘干，或器皿需要干燥，實(shí)驗(yàn)室需要配備烘干設(shè)備。烘箱和干燥箱差別不大，主要在烘干時(shí)間上以及強(qiáng)度上有差異。迅速干燥，在烘箱內(nèi)烘干，80-100℃為宜。干熱滅菌，溫度升至150-180℃，持續(xù)1-3h。培養(yǎng)物分析，在80℃條件下烘干。恒溫箱B.恒溫箱類恒溫箱用于原生質(zhì)體和酶制劑保溫，也用于暗培養(yǎng)。恒溫箱內(nèi)裝上日光燈可進(jìn)行溫度及光照小型實(shí)驗(yàn)。恒溫水浴鍋可用于超低溫保存的材料的解凍實(shí)驗(yàn)。恒溫水浴鍋4、培養(yǎng)箱生化培養(yǎng)箱光照培養(yǎng)箱生化培養(yǎng)箱光照培養(yǎng)箱5、解剖鏡用于剝離莖尖。多采用雙筒實(shí)體解剖鏡，在分離莖尖等較小組織時(shí)，便于觀察、操作，通常放大5-80倍。6、顯微鏡雙目體視顯微鏡用的較多，多用于剝離莖尖以及隔瓶觀察內(nèi)部植物組織生長(zhǎng)情況。雙目體視顯微鏡生物顯微鏡，用以觀察花粉發(fā)育時(shí)期以及培養(yǎng)過程中細(xì)胞核的變化生物顯微鏡倒置顯微鏡，可以從培養(yǎng)器皿的底部觀察培養(yǎng)物，如液體培養(yǎng)物的觀察。倒置顯微鏡7、酸度計(jì)（或PH試紙）培養(yǎng)基中的PH十分重要，一般為5.8-6.0。在配制培養(yǎng)基時(shí)，需要用酸度計(jì)測(cè)定和調(diào)整，也可以用PH試紙代替。生產(chǎn)育苗多用PH4-7的精密試紙。測(cè)定培養(yǎng)基PH值時(shí)，應(yīng)攪拌均勻后再測(cè)。8、蒸餾水器或純水器蒸餾水可用金屬蒸餾水器大批制備，要求更高的用硬質(zhì)玻璃蒸餾水器制備。去離子水是用離子交換器制備的，成本低，但不能去除水中的有機(jī)成分。生產(chǎn)性的組培育苗，對(duì)水要求不高，除配制各種母液用蒸餾水或去離子水外，配制培養(yǎng)基所用水可以用自來水代替。蒸餾水器純水器9、空氣調(diào)節(jié)器高溫不利于試管苗生長(zhǎng)繁殖。高溫造成組培苗生長(zhǎng)不良、玻璃化等反應(yīng)。10、電磁攪拌器瓊脂、難溶藥品，如鐵鹽等物質(zhì)的溶解。二、滅菌設(shè)備1.高溫高壓滅菌鍋有大型臥式、中型立式、和小型手提式多種。

大型滅菌鍋2.紫外殺菌燈用于接種室、緩沖室、超凈臺(tái)、培養(yǎng)室的環(huán)境的殺菌。

超凈工作臺(tái)三、無菌操作設(shè)備超凈工作臺(tái)有單人、雙人、三人式的，有單面和雙面，也有開放式和密閉式的。有水平風(fēng)的，也有垂直風(fēng)的。超凈工作臺(tái)原理是通過風(fēng)機(jī)，將送入的空氣經(jīng)過細(xì)菌過濾裝置，濾去0.3微米的塵埃、細(xì)菌和真菌孢子，再流過工作臺(tái)面。使用時(shí)間過久會(huì)引起堵塞，需要常清洗和更換過濾器。無菌接種箱四、材料培養(yǎng)設(shè)備1.培養(yǎng)架通常設(shè)計(jì)5-7層，每層間隔30cm左右，長(zhǎng)為1.3m，寬度為40-50cm，架高1.7-2.3m。隔板用玻璃板、金屬板、木板、纖維板等。培養(yǎng)架每層上方安裝日光燈（40瓦燈管長(zhǎng)度是1.2m）。2.搖床用于液體培養(yǎng)。通過搖床的振動(dòng)來改善液體培養(yǎng)基中的細(xì)胞或組織的營(yíng)養(yǎng)及氧氣供應(yīng)，加快細(xì)胞或組織的生長(zhǎng)速度。搖床有旋轉(zhuǎn)式和往復(fù)式。五、培養(yǎng)器皿及實(shí)驗(yàn)工具2、金屬材質(zhì)工具3、小型滅菌工具酒精燈、電熱滅菌器4、其他電磁爐微波爐小推車試管架細(xì)菌過濾器量筒、量杯、容量瓶、移液管、玻璃棒等

組培室設(shè)計(jì)原則01選址科學(xué)目錄02設(shè)施完備03布局合理04經(jīng)濟(jì)實(shí)惠05環(huán)境調(diào)控06環(huán)境調(diào)控

一、選址科學(xué)

1、選址要求避開各種污染源，周圍環(huán)境清潔，空氣清新，光線充足，通風(fēng)良好，水電供應(yīng)充足，交通運(yùn)輸便利，地下水位不太高，有排灌水設(shè)施。一、選址科學(xué)2、選址也可以因地制宜利用現(xiàn)有房舍，按照植物組培技術(shù)要求改造成組培室，做到因陋就簡(jiǎn)，既能開展研究和生產(chǎn)工作，又不花費(fèi)過多。

二、設(shè)施完備

1、整個(gè)植物組織培養(yǎng)過程要用到多種儀器設(shè)備，需要不同環(huán)境條件，需要設(shè)施完備、功能齊全。二、設(shè)施完備2、組培室內(nèi)儀器設(shè)備齊全，水路、電路安全暢通，器皿器械配備充足，環(huán)境達(dá)標(biāo)，場(chǎng)地夠用，保證植物組培工作順利進(jìn)行。三、布局合理1、根據(jù)組培生產(chǎn)流程將組培室按照使用功能分成多個(gè)功能區(qū)。2、各功能區(qū)的布局要合理，按照組培操作順序安排各個(gè)功能區(qū)，使其成為一條連續(xù)的生產(chǎn)線。3、不同環(huán)節(jié)需要的工作面積不同，各功能室和功能區(qū)的大小比例要合理。四、經(jīng)濟(jì)實(shí)惠墻壁交界處呈弧形1、組培室墻體應(yīng)采用產(chǎn)生灰塵量最少的建筑材料，具有防水，耐酸堿和耐腐蝕。2、墻壁和天花板、地面交界處宜做成弧形，便于日常清洗。管道盡量暗裝，安排好暗敷管道的走向，便于日后維修。四、經(jīng)濟(jì)實(shí)惠洗手池、下水道的位置要適宜，不得對(duì)培養(yǎng)環(huán)境造成污染。接種室、培養(yǎng)室的裝修材料經(jīng)得起消毒、清潔和沖洗，并設(shè)置能確保與其清潔度相應(yīng)的控溫控濕和通風(fēng)的設(shè)施。組培室應(yīng)有備用電源，確保停電時(shí)組培室的正常運(yùn)轉(zhuǎn)。五、環(huán)境調(diào)控

植物組培需要一定的溫度、濕度、光照、通風(fēng)等氣候條件，組培室建設(shè)時(shí)要充分考慮到氣候調(diào)控問題，力求便于調(diào)節(jié)、節(jié)省能源。墻壁、頂棚用材保溫性能要好，達(dá)到一定厚度。五、環(huán)境調(diào)控窗子要大，以便采光，節(jié)省能源，同時(shí)又要達(dá)到保溫要求；房間大小要合適，這