微生物的選擇培養(yǎng)和計(jì)數(shù)練習(xí) 高二下學(xué)期生物人教版（2019）選擇性必修3

1/1微生物的選擇培養(yǎng)和計(jì)數(shù)練習(xí)一、選擇題1．下列關(guān)于倒平板、平板劃線法和稀釋涂布平板法的敘述，正確的是()A．倒平板時(shí)將培養(yǎng)皿打開，培養(yǎng)皿皿蓋倒放在桌子上B．平板劃線法除了第一次劃線需要將接種環(huán)灼燒滅菌外，以后的劃線可以不用滅菌C．應(yīng)用稀釋涂布平板法對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)的估計(jì)值比實(shí)際值偏大D．與平板劃線法相比，稀釋涂布平板法形成單菌落的效果更好2．下列環(huán)境中易得到纖維素分解菌的是()A．濕潤(rùn)的環(huán)境中 B．腐殖質(zhì)豐富的環(huán)境中C．富含無(wú)機(jī)鹽的環(huán)境中 D．養(yǎng)魚的池塘中3．用來(lái)判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用，需要設(shè)置的對(duì)照是()A．未接種的選擇培養(yǎng)基B．未接種的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基C．接種了的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基D．接種了的選擇培養(yǎng)基4．下列培養(yǎng)基能鑒定分解尿素細(xì)菌的是()A．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、尿素、瓊脂、水、酚紅指示劑B．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、水、酚紅指示劑C．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、瓊脂、水、酚紅指示劑D．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、牛肉膏、蛋白胨、瓊脂、水、酚紅指示劑5.生長(zhǎng)圖形法是一種測(cè)定微生物營(yíng)養(yǎng)需求的簡(jiǎn)便方法。為探究某嗜熱菌所需生長(zhǎng)因子的種類，研究小組將該菌的懸浮液在不含任何生長(zhǎng)因子但含有其他必需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的平板培養(yǎng)基上涂布均勻，然后在平板上劃分?jǐn)?shù)區(qū)，將甲、乙、丙三種生長(zhǎng)因子分別添加到不同區(qū)域，培養(yǎng)結(jié)果如圖所示。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是()A．倒平板后不接種，直接培養(yǎng)可判斷培養(yǎng)基是否被污染B．倒平板后需要進(jìn)行滅菌處理C．圖示結(jié)果表明該菌需要生長(zhǎng)因子乙和丙D．生長(zhǎng)圖形法還可用于某些菌種的篩選6.平板接種常用在微生物培養(yǎng)中。下列說(shuō)法正確的是()A．不含氮源的平板不能用于微生物培養(yǎng)B．平板涂布時(shí)涂布器使用前必須進(jìn)行消毒C．接種后未長(zhǎng)出菌落的培養(yǎng)基可以直接丟棄D．利用以尿素為唯一氮源的平板能分離出合成脲酶的微生物7．某實(shí)驗(yàn)小組欲從土壤中篩選出能分解淀粉的芽孢桿菌。下列敘述錯(cuò)誤的是()A．采樣與培養(yǎng)：稱量1g土樣置于剛配制的液體培養(yǎng)基中，30℃振蕩培養(yǎng)B．接種：為避免培養(yǎng)液中菌體濃度過(guò)高，需經(jīng)過(guò)系列梯度稀釋后接種C．選擇：選用淀粉作唯一碳源的固體培養(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng)D．篩選：將適量的碘液滴加到平板中的菌落周圍，出現(xiàn)透明圈說(shuō)明此種菌能分解淀粉8．下表所列培養(yǎng)基配方中，能作為選擇培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基的依次是()原料①②③④蛋白胨10g10g10g10g乳糖5g5g5g5g蔗糖5g5g5g5gKH2PO42g2g2g2g伊紅0.4g亞甲藍(lán)0.065g瓊脂10g20g20g青霉素20g蒸餾水1000mL1000mL1000mL1000mLA.①③B．③①C．②④D．①②9．生物興趣小組的三位同學(xué)吃冰激凌后有兩人嚴(yán)重腹瀉，他們懷疑冰激凌中大腸桿菌超標(biāo)。于是他們?cè)O(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)對(duì)此冰激凌進(jìn)行檢測(cè)。下列實(shí)驗(yàn)操作，合理的是()A．再去買一個(gè)同樣品牌的同種冰激凌，然后配制伊紅—亞甲藍(lán)培養(yǎng)基(該培養(yǎng)基可用來(lái)鑒別大腸桿菌)，滅菌、倒平板B．取10mL剛?cè)诨谋ち枳鳛樵哼M(jìn)行梯度稀釋，稀釋倍數(shù)為1×10～1×105C．取各個(gè)稀釋濃度的冰激凌液各0.1mL，用涂布平板法進(jìn)行接種，每個(gè)濃度涂3個(gè)平板，共培養(yǎng)18個(gè)平板，在適宜溫度下培養(yǎng)48hD．統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目，以菌落數(shù)代表大腸桿菌數(shù)會(huì)導(dǎo)致統(tǒng)計(jì)結(jié)果比實(shí)際值偏小10．如圖所示，科研人員利用誘變方式選育可高產(chǎn)β－胡蘿卜素的三孢布拉霉負(fù)菌。未突變菌不能在含有β－紫羅酮的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。隨β－胡蘿卜素含量增加，菌體顏色從黃色加深至橙紅色。圖甲為選育菌種及獲得β－胡蘿卜素的流程，以下相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A．要得到圖乙所示的菌落，可用稀釋涂布平板法進(jìn)行②操作，然后培養(yǎng)B．經(jīng)過(guò)程①紫外線照射的三孢布拉霉負(fù)菌都能在含β－紫羅酮培養(yǎng)基上生長(zhǎng)C．進(jìn)行③操作時(shí)，應(yīng)選擇較大的橙紅色菌落中的菌株繼續(xù)接種培養(yǎng)D．能在添加了β－紫羅酮的乙上長(zhǎng)成菌落的細(xì)菌，其遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變11．產(chǎn)脂肪酶細(xì)菌可用于含油廢水處理?？蒲腥藛T用射線照射從土壤中分離的菌株，反復(fù)篩選后獲得產(chǎn)酶能力提高的菌株，具體流程如圖。下列相關(guān)敘述正確的是()A．步驟①取土壤樣品溶于無(wú)菌水中制成菌懸液B．步驟②中的固體平板可以是以脂肪作為唯一氮源的培養(yǎng)基C．步驟②中射線照射可以引起細(xì)菌基因突變或染色體變異D．步驟③透明圈越大的菌落，其脂肪酶的活性一定越高二、非選擇題12．將馬鈴薯去皮切塊，加水煮沸一定時(shí)間，過(guò)濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出液中加入一定量蔗糖和瓊脂，用水定容后滅菌，得到M培養(yǎng)基?；卮鹣铝袉?wèn)題：(1)M培養(yǎng)基若用于真菌的篩選，則培養(yǎng)基中應(yīng)加入鏈霉素以抑制___________的生長(zhǎng)，加入了鏈霉素的培養(yǎng)基屬于___________培養(yǎng)基。(2)M培養(yǎng)基中的馬鈴薯浸出液為微生物生長(zhǎng)提供了多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)類型除氮源外還有________________(答出兩點(diǎn)即可)。氮源進(jìn)入細(xì)菌后，可參與合成的生物大分子有________________________________________________________________________(答出兩點(diǎn)即可)。(3)若在M培養(yǎng)基中用淀粉取代蔗糖，接種土壤濾液并培養(yǎng)，平板上長(zhǎng)出菌落后可通過(guò)加入顯色劑篩選出能產(chǎn)生淀粉酶的微生物，加入的顯色劑是__________，該方法能篩選出產(chǎn)生淀粉酶微生物的原理____________________________________________________。(4)甲、乙兩位同學(xué)用稀釋涂布平板法測(cè)定某一土壤樣品中微生物的數(shù)量，在同一稀釋倍數(shù)下得到以下結(jié)果：甲同學(xué)涂布了3個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是110、140和149，取平均值133。乙同學(xué)涂布了3個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是27、169和176，取平均值124。有人認(rèn)為這兩位同學(xué)的結(jié)果中，乙同學(xué)的結(jié)果可信度低，其原因是________________________________________________________________________。13．研究深海獨(dú)特的生態(tài)環(huán)境對(duì)于開發(fā)海洋資源具有重要意義。近期在“科學(xué)號(hào)”考察船對(duì)中國(guó)南海科考中，中國(guó)科學(xué)家采集了某海域1146米深海冷泉附近沉積物樣品，分離、鑒定得到新的微生物菌株并進(jìn)一步研究了其生物學(xué)特性。回答下列問(wèn)題：(1)研究者先制備富集培養(yǎng)基，然后采用________________法滅菌，冷卻后再接入沉積物樣品，28℃厭氧培養(yǎng)一段時(shí)間后，獲得了含擬桿菌的混合培養(yǎng)物，為了獲得純種培養(yǎng)物，除了稀釋涂布平板法，還可采用____________________法。據(jù)圖分析，擬桿菌新菌株在以______________為碳源時(shí)生長(zhǎng)狀況最好。(2)研究發(fā)現(xiàn)，將采集的樣品置于各種培養(yǎng)基中培養(yǎng)，仍有很多微生物不能被分離篩選出來(lái)，推測(cè)其原因可能是______________________________________________。(答一點(diǎn)即可)(3)藻類細(xì)胞解體后的難降解多糖物質(zhì)，通常會(huì)聚集形成碎屑沉降到深海底部。從生態(tài)系統(tǒng)組成成分的角度考慮，擬桿菌對(duì)深海生態(tài)系統(tǒng)碳循環(huán)的作用可能是________________________________________________________________________。(4)深海冷泉環(huán)境特殊，推測(cè)此環(huán)境下生存的擬桿菌所分泌的各種多糖降解酶，除具有酶的一般共性外，其特性可能還有_____________________________________________。14．產(chǎn)脂肪酶酵母可用于含油廢水處理。為篩選產(chǎn)脂肪酶酵母菌株，科研人員開展了相關(guān)研究。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1)常規(guī)微生物實(shí)驗(yàn)中，下列物品及其滅菌方法錯(cuò)誤的是__________(填編號(hào))。編號(hào)①②③④物品培養(yǎng)基接種環(huán)培養(yǎng)皿涂布器滅菌方法高壓蒸汽火焰灼燒干熱臭氧(2)稱取1.0g某土壤樣品，轉(zhuǎn)入99mL無(wú)菌水中，制備成菌懸液，經(jīng)__________后，獲得細(xì)胞密度不同的菌懸液。分別取0.1mL菌懸液涂布在固體培養(yǎng)基上，其中10倍稀釋的菌懸液培養(yǎng)后平均長(zhǎng)出了46個(gè)酵母菌落，則該樣本中每克土壤約含酵母菌__________個(gè)。(3)為了進(jìn)一步提高酵母菌產(chǎn)酶能力，對(duì)分離所得的菌株，采用射線輻射進(jìn)行__________育種。將輻射處理后的酵母菌涂布在以__________為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時(shí)間后，按照菌落直徑大小進(jìn)行初篩，選擇直徑________的菌落，純化后獲得A、B兩突變菌株。(4)在處理含油廢水的同時(shí)，可獲得單細(xì)胞蛋白，實(shí)現(xiàn)污染物資源化。為評(píng)價(jià)A、B兩菌株的相關(guān)性能，進(jìn)行了培養(yǎng)研究，結(jié)果如圖。據(jù)圖分析，應(yīng)選擇菌株_______進(jìn)行后續(xù)相關(guān)研究，理由是___________________________________________________________。答案：1．D倒平板時(shí)不能把培養(yǎng)皿皿蓋完全打開并放到桌面上，這樣會(huì)污染培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基，A錯(cuò)誤；除了第一次劃線需要將接種環(huán)灼燒滅菌外，以后的每一次劃線前也要將接種環(huán)進(jìn)行灼燒滅菌，目的是將上次劃線結(jié)束后殘留的微生物殺死，確保以后的劃線接種環(huán)上的菌種直接來(lái)源于上次劃線的末端，使目的菌盡快分散成單個(gè)，B錯(cuò)誤；應(yīng)用稀釋涂布平板法對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)的估計(jì)值比實(shí)際值偏小，因?yàn)榭赡軙?huì)有兩個(gè)或多個(gè)微生物連在一起長(zhǎng)成一個(gè)菌落，C錯(cuò)誤；與平板劃線法相比，稀釋涂布平板法分離得到單菌落的效果更好，D正確。2．B生物與環(huán)境之間存在相互依存的關(guān)系，在富含纖維素的環(huán)境中，更容易尋找到纖維素分解菌，故纖維素分解菌主要分布在腐殖質(zhì)豐富的環(huán)境中，B正確。3．C將菌液稀釋相同的倍數(shù)并接種，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上的菌落數(shù)目應(yīng)明顯多于選擇培養(yǎng)基上的菌落數(shù)目，因此，應(yīng)選擇接種的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作為對(duì)照。4．CA項(xiàng)的培養(yǎng)基中沒有碳源；B項(xiàng)的培養(yǎng)基中沒有瓊脂，為液體培養(yǎng)基，而鑒定分解尿素的細(xì)菌應(yīng)該用固體培養(yǎng)基；C項(xiàng)的培養(yǎng)基中有瓊脂，以尿素為唯一氮源，且含有碳源、無(wú)機(jī)鹽、水和酚紅指示劑，可以鑒定分解尿素的細(xì)菌；D項(xiàng)的培養(yǎng)基沒有尿素，不能鑒定分解尿素細(xì)菌。5.B可通過(guò)培養(yǎng)空白培養(yǎng)基判斷培養(yǎng)基是否被污染，A正確；應(yīng)該先將培養(yǎng)基滅菌后再倒平板，B錯(cuò)誤；圖中菌落生活在乙、丙區(qū)域之間，說(shuō)明需要生長(zhǎng)因子乙和丙，C正確；不同菌種所需生長(zhǎng)因子不同，可利用生長(zhǎng)圖形法篩選某些菌種，D正確。6.D不含氮源的平板可用于固氮微生物的培養(yǎng)，A錯(cuò)誤；平板涂布時(shí)涂布器使用前必須浸在酒精中，然后在火焰上灼燒滅菌，B錯(cuò)誤；使用后的培養(yǎng)基即使未長(zhǎng)出菌落也要在丟棄前進(jìn)行滅菌處理，不能直接丟棄，以免污染環(huán)境，C錯(cuò)誤；只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，利用以尿素為唯一氮源的平板能分離出合成脲酶的微生物，D正確。7．A配制的液體培養(yǎng)基需要經(jīng)過(guò)高壓蒸汽滅菌后才能使用，A錯(cuò)誤；接種時(shí)為避免培養(yǎng)液中菌體濃度過(guò)高，需經(jīng)過(guò)系列梯度稀釋降低細(xì)菌的濃度后，再用涂布平板法接種，B正確；實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖呛Y選出能分解淀粉的芽孢桿菌，所以需要選用淀粉作唯一碳源的固體培養(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng)，C正確；淀粉遇碘液變成藍(lán)色，所以為了篩選目的菌株，將適量的碘液滴加到平板中的菌落周圍，出現(xiàn)透明圈說(shuō)明淀粉被分解，則此種菌能分解淀粉，D正確。8．B③加了青霉素，能抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)，有選擇作用，故③能作為選擇培養(yǎng)基；①加了伊紅、亞甲藍(lán)，可作為鑒別培養(yǎng)基。9．D若只對(duì)一個(gè)冰激凌進(jìn)行檢測(cè)，樣品太少，實(shí)驗(yàn)結(jié)果不具有準(zhǔn)確性，A項(xiàng)說(shuō)法不合理；測(cè)定細(xì)菌的數(shù)量，一般選用104、105、106倍稀釋的稀釋液進(jìn)行培養(yǎng)，應(yīng)取10mL剛?cè)诨谋ち枳鳛樵哼M(jìn)行梯度稀釋，稀釋倍數(shù)為1×10～1×106，B項(xiàng)說(shuō)法不合理；實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置對(duì)照，取各個(gè)稀釋濃度的冰激凌液各0.1mL，用涂布平板法進(jìn)行接種，每個(gè)濃度涂3個(gè)平板，再取一個(gè)平板接種等量無(wú)菌水(作為對(duì)照)，共培養(yǎng)19個(gè)平板，C項(xiàng)說(shuō)法不合理；因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，故統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目，以菌落數(shù)代表大腸桿菌數(shù)會(huì)導(dǎo)致統(tǒng)計(jì)結(jié)果比實(shí)際值偏小，D項(xiàng)說(shuō)法合理。10．B圖乙中的菌落均勻分布于平板，說(shuō)明采用的接種方法是稀釋涂布平板法，A正確；過(guò)程①紫外線照射的作用是利用物理因素誘導(dǎo)基因發(fā)生突變，由于突變的低頻性和不定向性，被照射的三孢布拉霉負(fù)菌不可能都能在含β－紫羅酮的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，B錯(cuò)誤；橙紅色的菌體為高產(chǎn)菌，進(jìn)行③操作時(shí)，應(yīng)選擇較大的橙紅色菌落中的菌株繼續(xù)接種培養(yǎng)，C正確；能在添加了β－紫羅酮的乙上長(zhǎng)成菌落的細(xì)菌是經(jīng)過(guò)紫外線照射后的高產(chǎn)菌，其遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變，D正確。11．A土壤樣品中包含目的菌株，可取土壤樣品溶于無(wú)菌水中制成菌懸液，再通過(guò)平板劃線法或稀釋涂布平板法接種到固定培養(yǎng)基上進(jìn)行篩選，A正確；組成脂肪的化學(xué)元素有C、H、O，要篩選可以產(chǎn)生脂肪酶的細(xì)菌，需要用以脂肪作為唯一碳源的固體培養(yǎng)基，B錯(cuò)誤；細(xì)菌是原核生物，沒有成形的細(xì)胞核和染色體，不會(huì)發(fā)生染色體變異，C錯(cuò)誤；透明圈大的菌落，酶活性不一定大，因此對(duì)初篩選的透明圈大的菌落要進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，進(jìn)一步對(duì)發(fā)酵液進(jìn)行酶活性檢測(cè)，D錯(cuò)誤。12．(1)細(xì)菌選擇(2)碳源、無(wú)機(jī)鹽蛋白質(zhì)、核酸(DNA、RNA)(3)碘液淀粉遇碘顯藍(lán)色，產(chǎn)淀粉酶菌落周圍淀粉被水解，不會(huì)與碘液發(fā)生顏色反應(yīng)(4)乙同學(xué)的結(jié)果中，1個(gè)平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與另2個(gè)相差懸殊，結(jié)果的重復(fù)性差解析：(1)M培養(yǎng)基若用于真菌的篩選，說(shuō)明M培養(yǎng)基能滿足真菌的生長(zhǎng)，而能抑制其他微生物的生長(zhǎng)，鏈霉素是一種抗生素，可以抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)。加入了鏈霉素的培養(yǎng)基能篩選出真菌，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。(2)微生物生長(zhǎng)需要多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，除氮源外，還需要碳源、無(wú)機(jī)鹽、水以及特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)等。氮元素是蛋白質(zhì)和核酸等生物大分子的組成元素，因此氮源進(jìn)入細(xì)胞后，可參與合成的生物大分子有蛋白質(zhì)和核酸(DNA、RNA)。(3)篩選產(chǎn)淀粉酶的微生物，加入的顯色劑是碘液，原理是淀粉遇碘顯藍(lán)色，產(chǎn)淀粉酶的菌落周圍淀粉被水解，不會(huì)與碘液發(fā)生顏色反應(yīng)。(4)乙同學(xué)的結(jié)果可信度低，因?yàn)?個(gè)平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與另2個(gè)相差懸殊，結(jié)果的重復(fù)性差，不能簡(jiǎn)單地用其平均數(shù)作為最終結(jié)果。13．(1)高壓蒸汽滅菌平板劃線纖維素(2)某些微生物只有利用深海冷泉中的特有物質(zhì)才能生存(或某些微生物只有在深海冷泉的特定環(huán)境中才能存活)(3)擬桿菌作為分解者，將沉降到深海底部的難降解多糖物質(zhì)分解為無(wú)機(jī)物，歸還到非生物環(huán)境中，有利于碳循環(huán)的順利進(jìn)行(4)耐低溫解析：(1)富集培養(yǎng)基通常采用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌?？梢圆捎孟♂屚坎计桨宸ɑ蚱桨鍎澗€法對(duì)微生物進(jìn)行分離純化。分析題圖可知，在以纖維素為碳源的培養(yǎng)基中細(xì)胞數(shù)最多，故擬桿菌新菌株在以纖維素為碳源時(shí)生長(zhǎng)狀況最好。(2)深海冷泉中某些微生物只有利用深海冷泉中的特有物質(zhì)和在深海冷泉的特定環(huán)境中才能生存，故將采集的樣品置于各種培養(yǎng)基中培養(yǎng)，仍有很多微生物不能