項(xiàng)目3-4 有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的測(cè)定 (1)課件講解

有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的測(cè)定有機(jī)磷農(nóng)藥：是用于防治植物病、蟲(chóng)、害的含有磷原子的一類農(nóng)藥的總稱。這一類農(nóng)藥品種多，劇毒類：甲拌磷、對(duì)硫磷等；高毒類甲基對(duì)硫磷、甲胺磷等；中毒類：樂(lè)果、敵百蟲(chóng)等；低毒類：馬拉硫磷等近年來(lái)，由于有機(jī)磷農(nóng)藥的過(guò)量和不當(dāng)使用造成中毒事件屢屢發(fā)生，對(duì)人類的健康造成了嚴(yán)重的威脅。因此，檢測(cè)有機(jī)磷農(nóng)藥在食品中的殘留十分重要。海南“毒豇豆”事件2010年1月，武漢市農(nóng)業(yè)局在抽檢來(lái)自于海南省英洲鎮(zhèn)和崖城鎮(zhèn)的5種豇豆樣品中發(fā)現(xiàn)水胺硫磷農(nóng)藥殘留，繼而在廣州、上海、深圳等地都發(fā)現(xiàn)了毒豇豆。

僅武漢銷毀毒豇豆3596.9公斤。

水胺硫磷，是一種高毒性農(nóng)藥，早在2002年，農(nóng)業(yè)部已將它例如黑名單中，禁止在水果蔬菜、中草藥植物上使用。它能經(jīng)由食道、皮膚和呼吸道，引起人體中毒。毒韭菜事件2010年4月，青島市某醫(yī)院接診一名患者，診斷：食品中毒——有機(jī)磷中毒！罪魁禍?zhǔn)祝壕虏酥屑装枇讎?yán)重超標(biāo)，青島市共發(fā)現(xiàn)8例患者。工商執(zhí)法人員共檢查農(nóng)產(chǎn)品批發(fā)、零售市場(chǎng)、商場(chǎng)超市和農(nóng)村集市1650個(gè)(次)，分別在華中、撫順路、城陽(yáng)三大蔬菜批發(fā)市場(chǎng)查出農(nóng)殘超標(biāo)韭菜共1930公斤。河南南陽(yáng)毒韭菜事件2011年3月，河南南陽(yáng)4個(gè)家庭的10口人中毒住進(jìn)醫(yī)院。中毒原因系在流動(dòng)菜販購(gòu)買殘余農(nóng)藥（甲拌磷）超標(biāo)的韭菜。經(jīng)過(guò)調(diào)查這些菜販，以前他們就沒(méi)有種過(guò)韭菜。就在一邊莊稼地中間種了一點(diǎn)，也沒(méi)有種植的經(jīng)驗(yàn)，自己私自使用一些違禁的農(nóng)藥，就造成了超標(biāo)的現(xiàn)象。GB2763-2012《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中農(nóng)藥最大殘留限量》食品類別/名稱最大殘留限量（mg/kg）谷物小麥0.02高粱0.02玉米0.05油料及制品大豆0.05花生仁0.1花生油0.05棉籽0.05食品類別/名稱最大殘留限量（mg/kg）蔬菜鱗莖類蔬菜0.01蕓苔屬類蔬菜0.01葉菜類蔬菜0.01茄果類蔬菜0.01瓜類蔬菜0.01豆類蔬菜0.01莖類蔬菜0.01根莖類和薯芋類蔬菜0.01水生類蔬菜0.01芽菜類蔬菜0.01甲拌磷的最大殘留量GB2763-2012《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中農(nóng)藥最大殘留限量》食品類別/名稱最大殘留限量（mg/kg）谷物糙米0.5油料棉籽0.1蔬菜鱗莖類蔬菜0.05蕓苔屬類蔬菜0.05葉菜類蔬菜0.05茄果類蔬菜0.05瓜類蔬菜0.05豆類蔬菜0.05莖類蔬菜0.05食品類別/名稱最大殘留限量（mg/kg）蘿卜0.1根莖類和薯芋類蔬菜（蘿卜除外）0.05水生類蔬菜0.05芽菜類蔬菜0.05其他多年生蔬菜0.05水果仁果類水果0.05柑橘類水果0.05核果類水果0.05漿果和其他小型水果0.05熱帶和亞熱帶水果0.05瓜果類水果0.05甲胺磷的最大殘留量知識(shí)目標(biāo)：

1.會(huì)說(shuō)出有機(jī)磷農(nóng)藥測(cè)原理；

2.會(huì)說(shuō)出氣相色譜的組成部分及作用；技能目標(biāo)：

1.會(huì)熟練使用漩渦振蕩器、氮吹儀等對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理

2.會(huì)正確使用氣相色譜儀對(duì)樣品進(jìn)行測(cè)定和數(shù)據(jù)處理

3.能準(zhǔn)確進(jìn)行數(shù)據(jù)記錄和處理

4.能根據(jù)正確評(píng)價(jià)食品中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留是否符合標(biāo)準(zhǔn)素質(zhì)目標(biāo)：

1.培養(yǎng)學(xué)生嚴(yán)謹(jǐn)、務(wù)實(shí)的學(xué)習(xí)精神；

2.培養(yǎng)學(xué)生開(kāi)拓創(chuàng)新、團(tuán)結(jié)協(xié)作的職業(yè)素質(zhì)。

學(xué)習(xí)目標(biāo)檢測(cè)依據(jù)NY/T761-2008第1部分：蔬菜水果中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的測(cè)定（方法二）適用范圍：適用于蔬菜和水果中敵敵畏、甲拌磷、甲胺磷等54種有機(jī)磷類農(nóng)藥殘留的檢測(cè)測(cè)定原理：

試樣中有機(jī)磷類農(nóng)藥用乙腈提取，提取液經(jīng)過(guò)過(guò)濾、濃縮后，用丙酮定容，注入氣相色譜儀，農(nóng)藥組分經(jīng)毛細(xì)管柱分離，用火焰光度檢測(cè)器（FPD）檢測(cè)，以保留時(shí)間定性、外標(biāo)法定量。具體工作任務(wù)分解任務(wù)3：提取液的濃縮與定容任務(wù)2：樣品制備與提取任務(wù)4：氣相色譜測(cè)定任務(wù)5：定性判斷與定量任務(wù)1：主要儀器設(shè)備氮吹儀任務(wù)一：主要儀器設(shè)備氣相色譜儀

多功能食品加工機(jī)漩渦振蕩器任務(wù)二、樣品制備與提取黃瓜去皮，切成小塊，放入攪拌機(jī)中，打漿準(zhǔn)確稱取10.00±0.1g黃瓜勻漿于50mL離心管中旋渦振蕩器上混勻2min

準(zhǔn)確加入20.0mL乙腈

過(guò)濾，濾液收集到裝有2g~3g氯化鈉的50mL具塞量筒中

收集濾液20mL左右蓋上塞子，劇烈震蕩1min

室溫下靜置30min，使乙腈相和水相完全分層從具塞量筒中移取4.0mL乙腈提取液于10mL刻度試管中

將試管置于氮吹儀中用移液管移入2.0mL丙酮

溫度設(shè)為75℃，緩緩?fù)ㄈ氲獨(dú)?，蒸發(fā)近干

在旋渦混合器上混勻用0.2um濾膜過(guò)濾至樣瓶中供氣相色譜測(cè)定不能完全干，也不能有明顯殘留任務(wù)三、提取液濃縮與定容任務(wù)四、氣相色譜測(cè)定儀器：氣相色譜儀（帶有火焰光度檢測(cè)器FPD）色譜條件：①色譜柱：HP-1701

30m×0.325mm×0.25um

（或相當(dāng)者）②氣體及流量：載氣：氮?dú)猓兌取?9.999%），流速10mL/min燃?xì)猓簹錃猓兌取?9.999%），流速75mL/min助燃?xì)猓嚎諝?，流?5mL/min③溫度：進(jìn)樣口溫度：220℃檢測(cè)器溫度：250℃柱溫：150℃（保持2min）250℃（保持12min）8℃/min空心毛細(xì)管柱任務(wù)四、氣相色譜測(cè)定色譜分析：由自動(dòng)進(jìn)樣器或手動(dòng)進(jìn)樣器分別吸取1.0μL標(biāo)準(zhǔn)混合液和凈化后的樣品溶液注入色譜儀中，以保留時(shí)間定性，以樣品溶液峰面積與標(biāo)準(zhǔn)溶液峰面積比較定量。重復(fù)平行123樣品質(zhì)量m(g)提取溶劑總體積V1（mL）

吸取出用于檢測(cè)的提取溶液的體積V2（mL）

樣品溶液定容體積V3（mL）根據(jù)圖譜判斷加入的標(biāo)準(zhǔn)農(nóng)藥名稱，打勾；并填寫對(duì)應(yīng)表格

A．甲拌磷

B.毒死蜱該農(nóng)藥保留時(shí)間（min）

樣品溶液中該農(nóng)藥的峰面積A

標(biāo)準(zhǔn)溶液中的該農(nóng)藥質(zhì)量濃度ρ(mg/L)標(biāo)準(zhǔn)溶液中該農(nóng)藥的峰面積As

計(jì)算公式樣品被測(cè)農(nóng)藥的殘留量w（mg/kg）

農(nóng)藥的殘留量平均值w（mg/kg）w=

任務(wù)五、定性與定量計(jì)算計(jì)算公式：w=

式中：w——樣品中被測(cè)農(nóng)藥的殘留量，單位毫克每千克（mg/kg）ρ——標(biāo)準(zhǔn)溶液中農(nóng)藥的質(zhì)量濃度，單位為毫克每升（mg/L）A——樣品溶液中被測(cè)溶液的峰面積As——農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液中被測(cè)農(nóng)藥的峰面積V1——提取溶劑的總體積，單位為毫升（mL）V2——吸取出用于檢測(cè)的提取溶液的體積，單位為毫升（mL）V3——樣品溶液定容體積，單位為毫升（mL）m——試樣的質(zhì)量，單位為克（g）知識(shí)拓展1、氣相色譜儀氣相色譜法是二十世紀(jì)五十年代出現(xiàn)的一項(xiàng)重大科學(xué)技術(shù)成就，是一種新的分離、分析技術(shù)，它可分離和分析復(fù)雜的多組分混合物。在工業(yè)、農(nóng)業(yè)、國(guó)防、建設(shè)、科學(xué)研究中都得到了廣泛應(yīng)用。

安捷倫氣相色譜儀（6890N）

安捷倫氣相色譜儀（7890A）

2、氣相色譜儀原理氣相色譜儀是以氣體作為流動(dòng)相（載氣）。利用試樣中各組份在流動(dòng)相（載氣）和固定相之間的分配系數(shù)不同，當(dāng)汽化后的試樣被載氣帶入色譜柱中運(yùn)行時(shí)，組分就在其中的兩相間進(jìn)行反復(fù)多次分配，由于固定相對(duì)各組分的吸附或溶解能力不同，因此各組分在色譜柱中的運(yùn)行速度就不同，經(jīng)過(guò)一定的柱長(zhǎng)后，便彼此分離，按順序離開(kāi)色譜柱進(jìn)入檢測(cè)器，產(chǎn)生的離子流信號(hào)經(jīng)放大后，在記錄器上描繪出各組份的色譜峰。2、氣相色譜儀的組成氣相色譜由氣路系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測(cè)系統(tǒng)和記錄系統(tǒng)五部分組成近樣系統(tǒng)分離系統(tǒng)氣路系統(tǒng)記錄系統(tǒng)檢測(cè)系統(tǒng)2、氣相色譜儀的組成（1）氣路系統(tǒng)：由高壓氣瓶、減壓閥、氣流調(diào)節(jié)閥和有關(guān)連接管道組成。作用是提供載氣、推動(dòng)組分在柱中運(yùn)行的動(dòng)力，常用載氣：氮?dú)?、氦氣、氫氣或氬氣，一般使用氮?dú)饣驓錃?。要求凈化純度達(dá)99.999%（2）進(jìn)樣系統(tǒng)：由樣品盤、自動(dòng)進(jìn)樣器、進(jìn)樣口組成，作用是將樣品瞬間氣化為蒸汽并引入色譜柱。要求：進(jìn)樣量（毛細(xì)管柱一般允許進(jìn)樣量為1～2uL)，進(jìn)樣時(shí)間小于1s。（3）分離系統(tǒng)：由柱箱、色譜柱組成色譜柱是氣相色譜儀的核心部件，柱子一般是用不銹鋼或玻璃管制成U型或螺旋形。它分為填充柱和空心毛細(xì)管柱。柱箱為色譜柱提供溫度控制。在氣相色譜測(cè)定中，溫度是重要的指標(biāo)，直接影響色譜柱的選擇分離。色譜柱的溫度控制方式有恒溫和程序升溫兩種．空心毛細(xì)管柱（4）檢測(cè)系統(tǒng)：檢測(cè)器也是色譜儀的重要部件，是把色譜柱分離的各組分的濃度或質(zhì)量轉(zhuǎn)換成電信號(hào)的裝置．檢測(cè)器種類：a、火焰光度檢測(cè)器(FPD)：又稱硫、磷檢測(cè)器，它是一種對(duì)含硫、磷有機(jī)化合物具有高選擇性和高靈敏度的質(zhì)量型檢測(cè)器，檢出限可達(dá)10-12g·S-1（對(duì)P）或10-11g·S-1（對(duì)S）；這種檢測(cè)器可用于大氣中痕量硫化物以及農(nóng)副產(chǎn)品、水中的納克級(jí)有機(jī)磷和有機(jī)硫農(nóng)藥殘留量的測(cè)定．b、氫火焰檢測(cè)器(FID)：典型的質(zhì)量型檢測(cè)器，對(duì)有機(jī)化合物具有很高