反相色譜柱的性能優(yōu)點 色譜柱操作規(guī)程

第第頁反相色譜柱的性能優(yōu)點色譜柱操作規(guī)程反相色譜柱采納高純和高機(jī)械強(qiáng)度的硅膠，采納先進(jìn)的鍵合技術(shù)制備而成,色譜柱表面鍵合率高，覆蓋完全，對堿性和酸性化合物具有良好的峰形。色譜柱柱容量高，壽反相色譜柱采納高純和高機(jī)械強(qiáng)度的硅膠，采納先進(jìn)的鍵合技術(shù)制備而成,色譜柱表面鍵合率高，覆蓋完全，對堿性和酸性化合物具有良好的峰形。色譜柱柱容量高，壽命長，是一款具有較高性價比的色譜柱。反相色譜柱性能優(yōu)點：（1）在正相和反相中都能有應(yīng)用（2）穩(wěn)定的高覆蓋率的單鍵合相，充分封端球型（3）較低的疏水性，由于氰基的存在，具有獨(dú)特的選擇性（4）與裸硅膠不同的選擇特性；與裸硅膠柱相比，色譜柱的平衡時間快。反相色譜柱在使用緩沖液的過程中還要注意以下幾點：a.避開使用鹽酸鹽，鹽酸鹽對鋼質(zhì)有腐蝕作用；b.緩沖液zui好要現(xiàn)配現(xiàn)用，往往緩沖液是良好的菌類培育液，隔天或放置長時間試驗時會發(fā)生很多怪現(xiàn)象；c.使用緩沖液要適時把握pH范圍，做到胸中有數(shù)；d.清洗液路和柱子時，有溫控可加熱到30攝氏度易于沖洗；e.長時間用緩沖溶液要注意察看接頭處有無析出，若有白色鹽類析出，定期用10%硝酸沖洗液路可以避開液路的堵塞；f.選擇緩沖液要用牢靠的試劑，避開不純的鹽類造成不必要的麻煩；過渡流動相是指有機(jī)相和水相的構(gòu)成與分析流動相相同，但是不含緩沖鹽的溶液。反相色譜柱為色譜柱供給便利、經(jīng)濟(jì)和有效的保護(hù)，延長了色譜柱的壽命，保證分析結(jié)果的重現(xiàn)性。隨著使用時間的加添，高效液相色譜柱分別效能下降，柱壓增高，其原因重要是由于色譜柱進(jìn)口段的少量填料被污染引起的，而色譜柱整個柱床并未被破壞，使用保護(hù)柱，相當(dāng)于在色譜柱前加添了一段額外的填料，起到了保護(hù)整個色譜柱的作用。,試驗室儀器設(shè)備交易網(wǎng),儀器行業(yè)專業(yè)網(wǎng)絡(luò)宣揚(yáng)媒體。相關(guān)熱詞：等離子清洗機(jī),反應(yīng)釜,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,高精度溫濕度計,露點儀,高效液相色譜儀價格,霉菌試驗箱,跌落試驗臺,離子色譜儀價格,噪聲計,高壓滅菌器,集菌儀,接地電阻測試儀型號,柱溫箱,旋渦混合儀,電熱套,場強(qiáng)儀萬能材料試驗機(jī)價格,洗瓶機(jī),勻漿機(jī),耐候試驗箱,熔融指數(shù)儀,透射電子顯微鏡。色譜柱的柱效能是評價色譜性能的一項緊要指標(biāo)，混合物能否在色譜柱中得到分別，除取決于選擇合適的固定相外，還與色譜操作條件及色譜柱的裝填情形等因素有關(guān)。那么，如何有效地提高色譜柱的柱效呢？在肯定的色譜操作條件下，色譜柱的柱效可用理論塔板數(shù)或理論塔板高度來衡量。一般說來塔板數(shù)愈多，或塔板高度愈小，色譜柱的分別效能愈好。如何提高HPLC柱效？要提高液相色譜的效率可從以下幾方面入手。以下介紹了幾種國際上流行的測量和計算柱效值的方法。1、提高液相色譜柱柱效的方法要提高液相色譜的效率可從以下幾方面入手。（1）降低移動相的流速,但會使分析時間延長。（2）削減固定相的量,但色譜柱中樣品的負(fù)載量也隨之減小。（3）減小固定相的顆粒度,但不能過分,過分后色譜柱的滲透率也會減小。（4）選用低粘度的移動相,以利于快速傳質(zhì),但卻不利于多組份分析。（5）適當(dāng)提高柱溫,可降低移動相的粘度,但柱效和分別度也隨之降低。（6）盡量減小停滯移動相的體積,但卻加快了移動相的流速。從以上介紹可看出,在色譜分析過程中,各種因素是相互聯(lián)系和制約的。只有通過對柱效值的跟蹤測算,對本身分析方法不斷的討論和實踐,才能找到zui佳的工作條件。2、對柱效值進(jìn)行跟蹤測算應(yīng)注意的問題我們也應(yīng)記住柱效值并不足以推測在全部條件下的柱性能，對大多數(shù)色譜工來說,柱性能指的是色譜柱用于特定分別的本領(lǐng),而僅僅有高柱效并不能保證這種分別本領(lǐng)。不管用什么特定的測試方法,都會有幾個參數(shù)影響柱效的測定。這些參數(shù)包括:洗脫液的成分和粘度及其線流速,測定塔板數(shù)所用的溶質(zhì),溫度,柱長,填料裝填方式,顆粒度,還有所選用的測量和計算方法。而測量和計算方法對柱效值的確定起著極大的作用。3、幾種測量和計算柱效值的方法由于色譜峰是假定樣品濃度在移動相和固定相中呈正態(tài)分布而得到的樣品譜帶分布,故常常把色譜峰型看作正態(tài)曲線來計算理論塔板數(shù)。因此計算柱效（以理論塔板數(shù)n為單位）的公式習(xí)慣上定義為:式中：tR為色譜峰的保留時間；2是以時間為單位測量色譜峰的偏差；a是和峰高（從測峰寬的基線量起）有關(guān)的常數(shù),b是峰寬,表示由色譜峰頂點與色譜峰兩側(cè)拐點處做切線與峰底基線相交兩點間的距離。假如一個色譜峰真是正態(tài)峰型,那么每種計算方法都會得到同樣的結(jié)果。然而即使一些比較理想的儀器和傾向于得到對稱峰型的溶質(zhì),由于柱內(nèi)的槽或空隙,也會顯現(xiàn)非正態(tài)峰型。所以不同的計算方法將會得到相差較大的n值。通常偏離正態(tài)模型的峰型表示為“前延”或“拖尾”。對于這些峰型,越在峰的高處測量,計算的理論塔板數(shù)值就越大（精準(zhǔn)性越低）。在很多情況下,色譜工需要能反映整個峰型（包括拖尾）的柱效值,同時為了保證定量的重復(fù)性,也需要色譜峰很好的對稱性。這時對色譜峰非對稱性敏感的計算方法適合。假如目的僅僅是要監(jiān)測色譜柱從次使用到使用壽命結(jié)束這一過程中的柱效,那么以上任何一種方法都可以,應(yīng)選擇簡便的方法。如何提高氣相色譜柱柱效？在實際工作中，我們通過對載氣流速、進(jìn)樣技術(shù)、氣化室溫度、色譜柱、柱溫、檢測器溫度這六個方面的選擇，有效地提高了柱效率，使分析出的色譜峰峰形正常，無峰形擴(kuò)張、拖尾、峰漏檢等不良現(xiàn)象顯現(xiàn)，分別度高，從而提高了分析結(jié)果的精準(zhǔn)性。所為柱效就是在較短的時間內(nèi)，用較短的柱子達(dá)到充足的分析結(jié)果。為了提高色譜柱的柱效率，削減色譜峰擴(kuò)張、拖尾及峰漏檢等現(xiàn)象，在實際工作中，我們從以下六個方面入手，對柱操作條件的選擇進(jìn)行了探討。1、載氣流速的選擇氣相色譜常用的載氣是：氫氣、氮?dú)?、氬氣、氦氣。由速率理論可知，載氣流速慢有利于傳質(zhì)，有利于組分的分別，但分析時間會加長；假如載氣流速快有利于加快分析速度，削減分了擴(kuò)散，但分別度降低。有時為了縮短分析時間，加大流量，但此時分別效果并不好?？梢娸d氣流速的快慢都會降低柱效。經(jīng)過長時間的試驗，發(fā)覺對于一般色譜儀而言，載氣流量為20—100ml/min。目前我們分析液化氣用的是熱導(dǎo)檢測器，載氣用的是氫氣，其流量掌控是30ml/min。分析戊烷發(fā)泡劑用的是氫火焰離子化檢測器，載氣用的是氮?dú)?、燃燒氣氫氣和氧氣，這三種氣體的體積比是氮?dú)猓簹錃猓貉鯕鉃?：1：10，分析效果都是較好的。2、進(jìn)樣技術(shù)的選擇在氣相色譜分析中，一般采納注射器或六通閥門進(jìn)樣。在考慮進(jìn)樣技術(shù)的時候，以注射器進(jìn)樣為主來討論。進(jìn)樣量：假如在進(jìn)樣過程中進(jìn)樣量大會導(dǎo)致：分別度??；保留值變化難于定性；峰高和峰面積與進(jìn)樣量不成線性關(guān)系，不能定量。進(jìn)樣量與氣化溫度、柱容量和儀器的線性響應(yīng)范圍等因素有關(guān)。進(jìn)樣量應(yīng)掌控在瞬間氣化，達(dá)到規(guī)定分別要求和線性響應(yīng)的允許范圍內(nèi)。填充柱沖洗法的瞬間進(jìn)樣量:液體樣品或固體樣品溶液一般為0.01～10l,氣體樣品一般為0.11～10ml,在定量分析中,應(yīng)注意進(jìn)樣量讀數(shù)精準(zhǔn)。注射器里空氣的排出：用微量注射器抽取液體樣品,只要重復(fù)地把液體抽入注射器又快速把其排回樣品瓶,就可以將空氣排出。還有一種更好的方法,那就是用計劃注射量的約2倍的樣品置換注射器3～5次,每次取到樣品后,垂直拿起注射器,針尖朝上，留在注射器里的空氣都應(yīng)當(dāng)跑到針管頂部，推動注射器塞子,空氣就會全部被排掉。保證進(jìn)樣量的精準(zhǔn)：用經(jīng)置換過的注射器取約計劃進(jìn)樣量2倍左右的樣品,垂直拿起注射器,針尖朝上,讓針穿過一層紗布,這樣可用紗布汲取從針尖排出的液體。推動注射器塞子,直到讀出所需要的數(shù)值。用紗布擦干針尖。至此精準(zhǔn)的液體體積已經(jīng)測得,需要再抽若于空氣到注射器里。假如不慎推動柱塞,空氣可以保護(hù)液體使之不被排走。進(jìn)樣手法：雙手拿注射器。用一只手（通常是左手）扶針插入墊片,注射大體積樣品（即氣體樣品）或柱前壓力極高時,要防止從氣相色譜儀注樣器來的壓力把注射器活塞彈出（即用右手的大拇指按壓住活塞頂部）。讓針尖穿過墊片盡可能深的進(jìn)入進(jìn)樣口,壓下注射器活塞停留1秒鐘,然后盡可能快而穩(wěn)地抽出針尖（抽出的同時連續(xù)壓住注射器活塞）。進(jìn)樣時間：進(jìn)樣時間長短對柱效率影響很大。若進(jìn)樣時間過長,遇使色譜區(qū)域加寬而降低柱效率。因此,對于沖洗法色譜而言,進(jìn)樣時間越短越好,一般必需小于1秒鐘。3、氣化室溫度的選擇氣化室溫度取決于樣品的化學(xué)和熱穩(wěn)定性、沸程范圍、進(jìn)樣口類型等。合適的氣化室溫度即能保持樣品瞬間完全氣化，又不引起樣品分解。溫度過低，氣化速度比較慢，使峰形不規(guī)定，顯現(xiàn)平頭峰或伸舌峰；溫度過高使出峰數(shù)目變化，產(chǎn)生前延峰，甚至樣品分解。為選擇合適的氣化室溫度，在多次的進(jìn)樣中我們發(fā)覺，氣化室溫度比柱溫高50—100℃或比樣品組分中高沸點高50—70℃較為合適。溫度過高過低都會影響柱效。市場上，國產(chǎn)和進(jìn)口色譜柱種類繁多，如何選擇一根適合本身試驗室分析的色譜柱？我們在購買毛細(xì)色譜柱的時候，需要知道哪些基礎(chǔ)的常識呢？一、固定液使用固定相:ATSE—30,ATOV—1構(gòu)成100%甲基聚硅氧烷極性非極性應(yīng)用碳?xì)浠衔锿愋吞朌B（HP）—1、AC1、SPB—1、CPSIL5、DM—1、RT—1使用溫度50—300固定相:ATOV—101構(gòu)成100%甲基聚硅氧烷（膠體）極性非極性應(yīng)用氨基酸、基油同類型號HP—101、AC1、SP—2100使用溫度0—350固定相:ATSE—52ATSE—54構(gòu)成5%苯基甲基聚硅氧烷，1%乙烯基5%苯基甲基聚硅氧烷極性非極性應(yīng)用多核芳烴、酚、酯、碳?xì)浠衔?、藥物、醇同類型號DB（HP）—5、AC5、SPB—5、DM—5、CPSiL8、Rtx—5使用溫度50—350固定相:ATOV—1701構(gòu)成7%氰丙基7%苯基甲基聚硅氧烷極性非極性應(yīng)用藥物、醇、酯、硝基化合物同類型號DB（HP）—1701、AC10、DB—1701、SPB—1701、RT—1701、CP—Sil19CB使用溫度0—280固定相:ATXE—60構(gòu)成25%氰乙基甲基聚硅氧烷極性中極性應(yīng)用酯、硝基化合物同類型號DB（HP）—225、AC225使用溫度0—280固定相:ATOV—17構(gòu)成50%苯基甲基聚硅氧烷極性中極性應(yīng)用藥物、農(nóng)藥同類型號DB（HP）—17、AC10使用溫度0—250固定相:ATFFAP構(gòu)成聚乙二醇—TPA改性極性極性應(yīng)用酸、醇、醛、酯、腈、酮、基油同類型號DB（HP）—FFAP、SP—1000、Supecl—NUKOL、AC20使用溫度50—250固定相:ATPEG—20M構(gòu)成聚乙二醇—20M極性極性應(yīng)用同類型號HP—Wax、DB—Wax、AC20使用溫度50—200固定相:AT農(nóng)殘Ⅰ號AT農(nóng)殘Ⅱ號構(gòu)成極性應(yīng)用六六六、DDT等八種含氯農(nóng)藥擬除蟲菊酯類、含磷類農(nóng)藥同類型號SPB—608、HP—608使用溫度25—300二、毛細(xì)管柱內(nèi)徑0.53mm具有貌似填充柱的負(fù)荷量，總柱效則遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過填充柱。達(dá)到同樣的分別度時，0.53mm大口徑柱的分析時間顯著快于填充柱?？杀憷牟杉{柱上進(jìn)樣或直接進(jìn)樣技術(shù)，適合于分析不太多而雜的樣品，是填充柱理想的替代柱。0.32mm柱效稍低于0.25mm常規(guī)柱，負(fù)荷量大于常規(guī)柱的60%，用特制注射針可做柱上進(jìn)樣。0.25mmzui常用的內(nèi)徑規(guī)格。有較高的柱效，負(fù)荷量較低，必需分流進(jìn)樣或無分流進(jìn)樣。用于多而雜多組份樣品分析。0.20mm柱效高,負(fù)荷量低，流失較小，適合與