考點(diǎn)35微生物的培養(yǎng)技術(shù)及其應(yīng)用（原卷版）

考點(diǎn)35微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用（精講+精練）目錄知識點(diǎn)精準(zhǔn)記憶典型例題剖析微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用微生物的選擇培養(yǎng)和計(jì)數(shù)易混易錯(cuò)辨析2022高考真題感悟五、高頻考點(diǎn)精練第一部分：知識點(diǎn)精準(zhǔn)記憶第一部分：知識點(diǎn)精準(zhǔn)記憶微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用1．培養(yǎng)基的配制(1)概念：人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。(2)用途：用以培養(yǎng)、分離、鑒定、保存微生物或積累其代謝物。(3)類型：按物理狀態(tài)分類液體培養(yǎng)基：①特點(diǎn)：不含凝固劑，呈液體狀態(tài)②用途：工業(yè)生產(chǎn)固體培養(yǎng)基：①特點(diǎn)：含凝固劑(如瓊脂)，呈固體狀態(tài)②用途：微生物的分離、鑒定，活菌計(jì)數(shù)，菌種保藏(4)成分碳源：①特點(diǎn)：提供碳元素的物質(zhì)②作用：構(gòu)成生物體的細(xì)胞的物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物，有些也是異養(yǎng)生物的能源物質(zhì)③來源：無機(jī)碳源：CO2、NaHCO3等；有機(jī)碳源：糖類、牛肉膏等氮源：①特點(diǎn)：提供氮元素的物質(zhì)②作用：合成蛋白質(zhì)、核酸等物質(zhì)③來源：無機(jī)氮源：N2、NH3、銨鹽、硝酸鹽等；有機(jī)氮源：蛋白胨等無機(jī)鹽：①特點(diǎn)：為微生物提供除碳、氮之外的各種重要元素，包括大量元素和微量元素②作用：為微生物提供無機(jī)營養(yǎng)，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH等③來源：無機(jī)化合物：KH2PO4、K2HPO4、NaCl等水：①特點(diǎn)：生物體含量最高的無機(jī)化合物②作用：良好的溶劑，參與化學(xué)反應(yīng)等③來源：培養(yǎng)基、代謝產(chǎn)物（5）提醒：除了上述主要營養(yǎng)物質(zhì)外，還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的需求。例如，在培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)，需要在培養(yǎng)基中添加維生素；在培養(yǎng)霉菌時(shí)，一般需要將培養(yǎng)基調(diào)至酸性；在培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)，一般需要將培養(yǎng)基調(diào)至中性或弱堿性；在培養(yǎng)厭氧微生物時(shí)，需要提供無氧的條件。2．無菌技術(shù)(1)目的：獲得純凈的培養(yǎng)物。(2)關(guān)鍵：防止雜菌污染。(3)區(qū)別：消毒與滅菌的比較比較項(xiàng)目條件結(jié)果常用方法應(yīng)用范圍消毒較為溫和的物理、化學(xué)或生物等方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分微生物煮沸消毒法日常用品巴氏消毒法不耐高溫的液體化學(xué)藥物消毒法操作空間、操作者的衣物和手等紫外線消毒法接種室、接種箱或超凈工作臺滅菌強(qiáng)烈的理化方法殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子濕熱滅菌法培養(yǎng)基、容器等干熱滅菌法玻璃器皿、金屬用具等灼燒滅菌法接種工具等（4）提醒：選擇無菌技術(shù)的原則：一要考慮無菌技術(shù)的效果，滅菌的效果比消毒要好；二要考慮操作對象的承受能力，活體生物材料、操作者的手等只能采用消毒，而不能用滅菌(5)其他操作①做好消毒和滅菌工作后，要注意避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品接觸。②為了避免周圍環(huán)境中微生物的污染，接下來的許多操作都應(yīng)在超凈工作臺上并在酒精燈火焰附近進(jìn)行。3．微生物的純培養(yǎng)(1)概念辨析培養(yǎng)物：接種于培養(yǎng)基內(nèi)，在適合條件下形成特定種類的微生物的群體純培養(yǎng)物：由單一個(gè)體繁殖所獲得的微生物群體菌落：分散的微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部繁殖形成的肉眼可見的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體純培養(yǎng)：獲得純培養(yǎng)物的過程酵母菌純培養(yǎng)的操作步驟(3)平板劃線法操作步驟（1）實(shí)驗(yàn)成功關(guān)鍵點(diǎn)①第一次劃線及每次劃線之前都需灼燒接種環(huán)滅菌，劃線操作結(jié)束仍需灼燒接種環(huán)。②灼燒接種環(huán)之后，要等其冷卻后才能伸入菌液，以免溫度太高殺死菌種。③在做第二次以及其后的劃線操作時(shí)，總是從上一次劃線的末端開始劃線，這樣才能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來的菌落。④劃線時(shí)最后一區(qū)域不要與第一區(qū)域相連。⑤劃線用力大小要適當(dāng)，防止用力過大將培養(yǎng)基劃破。（2）平板劃線操作中幾次灼燒接種環(huán)的目的項(xiàng)目第一次操作每次劃線之前劃線結(jié)束目的殺死接種環(huán)上原有的微生物殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留的菌種，使下次劃線的菌種直接來源于上次劃線的末端，使每次劃線菌種數(shù)目減少殺死接種環(huán)上殘存的菌種，避免微生物污染環(huán)境和感染操作者二、微生物的選擇培養(yǎng)和計(jì)數(shù)1．區(qū)分選擇培養(yǎng)基與鑒別培養(yǎng)基1）.選擇培養(yǎng)基：①特點(diǎn)：允許特定種類的微生物生長，同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長②用途：從眾多微生物中分離所需的微生物③舉例：加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌2）.鑒別培養(yǎng)基：①特點(diǎn)：根據(jù)微生物的代謝特點(diǎn)在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品，進(jìn)而產(chǎn)生特定的顏色或其他變化②用途：鑒別不同種類的微生物③舉例：用伊紅—亞甲藍(lán)培養(yǎng)基鑒別大腸桿菌3）.提醒常見選擇培養(yǎng)基舉例：①缺少氮源的培養(yǎng)基可以篩選能利用大氣中N2的微生物。②含青霉素的培養(yǎng)基可淘汰細(xì)菌，篩選出真菌。③無有機(jī)碳源的培養(yǎng)基可篩選出自養(yǎng)微生物。2．微生物的選擇培養(yǎng)和數(shù)量測定(1)稀釋涂布平板法步驟①系列稀釋操作：該操作常用在將細(xì)胞接種到培養(yǎng)基之前，通過液體稀釋的方法分散細(xì)胞，隨著稀釋程度的增大，單位體積中的微生物細(xì)胞數(shù)量減少，細(xì)胞得以分散。操作步驟：②涂布平板操作步驟(2)微生物的數(shù)量測定方法①顯微鏡直接計(jì)數(shù)法原理：利用特定細(xì)胞計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，在顯微鏡計(jì)數(shù)一定容積的樣品中微生物的數(shù)量方法：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)缺點(diǎn)：不能區(qū)分死菌與活菌而使計(jì)數(shù)結(jié)果偏大②間接計(jì)數(shù)法——活菌計(jì)數(shù)法(即稀釋涂布平板法)原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長的一個(gè)單菌落，來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。3．土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)的實(shí)驗(yàn)操作(1)實(shí)驗(yàn)原理分離原理：①土壤中的細(xì)菌之所以能分解尿素，是因?yàn)樗麄兡芎铣呻迕涪谂渲埔阅蛩貫槲ㄒ坏吹呐囵B(yǎng)基，能夠在該培養(yǎng)基中生長的細(xì)菌就是能分解尿素的細(xì)菌實(shí)驗(yàn)流程土壤取樣：從酸堿度接近中性的潮濕土壤中，鏟去表層土，取距地表3-5厘米的土壤層樣品的稀釋：通常選取一定稀釋范圍的樣品液進(jìn)行培養(yǎng)，以保證獲得的菌落數(shù)在30-300的平板適于計(jì)數(shù)微生物的培養(yǎng)與觀察：①接種：用稀釋涂布平板法接種②培養(yǎng)條件：30-37℃培養(yǎng)1-2天③觀察：根據(jù)菌落的特征區(qū)分微生物④計(jì)數(shù)：每隔24小時(shí)統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目，選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果(3)實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析與評價(jià)第二部分：典型例題剖析第二部分：典型例題剖析考向一、微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用1.應(yīng)用特定的測序技術(shù)發(fā)現(xiàn)某明代古沉船船體飽水木材樣品與沉積物中含有豐富的原核微生物類群，與漆黑海底現(xiàn)場取的木材樣品與沉積物中的菌群種類相似，但是菌群含量存在明顯的差異。下列敘述正確的是（

）A．海底沉積物中的原核微生物結(jié)構(gòu)簡單，以RNA為遺傳物質(zhì)B．在漆黑的海底現(xiàn)場獲取的木材樣品中含有大量能夠進(jìn)行化能合成作用的硝化細(xì)菌菌群C．海底沉積物為多種多樣的細(xì)菌菌群提供了生長、繁殖所需的全部的碳源和氮源D．用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板統(tǒng)計(jì)海底某細(xì)菌的種群數(shù)量時(shí)發(fā)現(xiàn)平均每小格中有3個(gè)細(xì)菌，可估算一個(gè)計(jì)數(shù)室內(nèi)有1200個(gè)細(xì)菌考向二、微生物的選擇培養(yǎng)和計(jì)數(shù)2.下列是關(guān)于“檢測土壤中細(xì)菌總數(shù)”實(shí)驗(yàn)操作的敘述，其中錯(cuò)誤的是（

）A．配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基；牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基也要滅菌B．取104、105、106倍的土壤稀釋液和無菌水各0．1ml，分別涂布于各組平板上C．將實(shí)驗(yàn)組和對照組平板倒置，37℃恒溫培養(yǎng)24﹣48小時(shí)D．確定對照組無菌后，選擇菌落數(shù)多的實(shí)驗(yàn)組平板進(jìn)行計(jì)數(shù)第三部分：易混易錯(cuò)辨析第三部分：易混易錯(cuò)辨析1.與微生物培養(yǎng)有關(guān)的6個(gè)易錯(cuò)點(diǎn)（1）固體培養(yǎng)基中的瓊脂僅作為凝固劑，不能為微生物生長提供能量和碳源。（2）灼燒接種環(huán)，待其冷卻后才能伸入菌液，以免溫度太高殺死菌種。（3）劃線時(shí)最后一區(qū)不要與第一區(qū)相連。（4）劃線時(shí)用力大小要適當(dāng)，這是為了防止用力過大將培養(yǎng)基劃破。（5）用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低，這是因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落。（6）尿素分解菌和纖維素分解菌的分離都運(yùn)用了選擇培養(yǎng)基，前者所用的培養(yǎng)基中尿素是唯一的氮源，后者所用的培養(yǎng)基中纖維素是唯一的碳源。2.教材結(jié)論性語句（1）（選擇性必修3P18）當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目少。（2）（選擇性必修3P18）同一稀釋度下，應(yīng)至少對3個(gè)平板進(jìn)行重復(fù)計(jì)數(shù)，然后求出平均值。第四部分：高考真題感悟第四部分：高考真題感悟1．（2022·海南·高考真題）為探究校內(nèi)植物園土壤中的細(xì)菌種類，某興趣小組采集園內(nèi)土壤樣本并開展相關(guān)實(shí)驗(yàn)。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（

）A．采樣時(shí)應(yīng)隨機(jī)采集植物園中多個(gè)不同地點(diǎn)的土壤樣本B．培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)，可選用牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基C．土壤溶液稀釋倍數(shù)越低，越容易得到單菌落D．鑒定細(xì)菌種類時(shí)，除形態(tài)學(xué)鑒定外，還可借助生物化學(xué)的方法2．（2022·湖北·高考真題）滅菌、消毒、無菌操作是生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常見的操作。下列敘述正確的是（）A．動、植物細(xì)胞DNA的提取必須在無菌條件下進(jìn)行B．微生物、動物細(xì)胞培養(yǎng)基中需添加一定量的抗生素以防止污染C．為防止蛋白質(zhì)變性，不能用濕熱滅菌法對牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌D．可用濕熱滅菌法對實(shí)驗(yàn)中所使用的微量離心管、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等進(jìn)行滅菌3．（2022·湖北·高考真題）解脂菌能利用分泌的脂肪酶將脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸收利用。脂肪酸會使醇溶青瓊脂平板變?yōu)樯钏{(lán)色。將不能直接吸收脂肪的甲，乙兩種菌分別等量接種在醇溶青瓊脂平板上培養(yǎng)。甲菌菌落周圍呈現(xiàn)深藍(lán)色，乙菌菌落周圍不變色，下列說法錯(cuò)誤的是（

）A．甲菌屬于解脂菌B．實(shí)驗(yàn)中所用培養(yǎng)基以脂肪為唯一碳源C．可將兩種菌分別接種在同一平板的不同區(qū)域進(jìn)行對比D．該平板可用來比較解脂菌分泌脂肪酶的能力4．（2021·天津·高考真題）1．下列操作能達(dá)到滅菌目的的是（

）A．用免洗酒精凝膠擦手 B．制作泡菜前用開水燙洗容器C．在火焰上灼燒接種環(huán) D．防疫期間用石炭酸噴灑教室第五部分：高頻考點(diǎn)精練第五部分：高頻考點(diǎn)精練1．某樣液經(jīng)濾膜過濾后，轉(zhuǎn)移到完全培養(yǎng)基上并適宜條件下培養(yǎng)，每隔12h統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目，選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的數(shù)據(jù)作為結(jié)果，統(tǒng)計(jì)某種菌菌落數(shù)為205個(gè)，如圖所示。下列說法正確的是（）A．若用濾膜測定硝化細(xì)菌數(shù)量，則培養(yǎng)基中可不添加氮源B．若計(jì)算出樣液中該種菌的密度為41個(gè)/L，該值比實(shí)際值偏大C．為了提高準(zhǔn)確度，需設(shè)平行重復(fù)實(shí)驗(yàn)，但不用空白對照D．菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)，大小不同的菌落形成的起始時(shí)間一般不同2．藥物敏感試驗(yàn)簡稱藥敏試驗(yàn)，旨在了解某病原微生物對各種抗生素的敏感程度，以指導(dǎo)臨床合理選用抗生素。紙片擴(kuò)散法是藥敏試驗(yàn)中一種常用的方法，在紙片周圍會形成透明的抑菌圈。下列敘述正確的是（

）A．圖1所示操作需待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時(shí)進(jìn)行，不需要在酒精燈旁操作B．圖3中Ⅳ的抑菌圈中出現(xiàn)了部分菌落可能是該病原微生物發(fā)生了基因突變C．進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，需將平板上布滿測試菌，需使用的接種工具是接種環(huán)D．接種后的平板在培養(yǎng)時(shí)的放置應(yīng)如圖2中②所示，可以防止污染3．某興趣小組為研究“使用公筷對餐后菜品細(xì)菌數(shù)量的影響”，將每道菜分為3盤，一盤取樣冷藏，一盤使用公筷，一盤不用公筷，實(shí)驗(yàn)過程如下圖。下列敘述正確的是（

）A．在固體培養(yǎng)基X上用稀釋涂布平板法進(jìn)行接種B．固體培養(yǎng)基X對菜品中的細(xì)菌有選擇作用C．根據(jù)菌落的特征可以準(zhǔn)確判斷細(xì)菌的種類D．理論上，不食用組的培養(yǎng)基上不會有菌落出現(xiàn)4．為了觀察手掌上附著的微生物，某小組成員將自己的手掌在配制的牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基上輕輕按壓后，蓋上培養(yǎng)皿蓋，將平板倒置放在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h，結(jié)果如圖所示。下列說法錯(cuò)誤的是（

）A．配制的培養(yǎng)基經(jīng)高壓蒸汽滅菌后，還要調(diào)節(jié)pH才能用于接種B．待高溫滅菌后的培養(yǎng)基冷卻至50℃左右后，再進(jìn)行倒平板C．在超凈工作臺上和酒精燈火焰旁進(jìn)行操作，是為了防止雜菌污染D．手掌上的某些微生物在該培養(yǎng)基上并沒有生長繁殖形成菌落5．野生型大腸桿菌菌株能在未添加某種維生素的基本培養(yǎng)基上生長，氨基酸營養(yǎng)缺陷型突變株無法合成某種氨基酸，只能在添加了多種維生素的完全培養(yǎng)基上生長，下圖為純化某氨基酸營養(yǎng)缺陷型突變株的部分流程圖，①②③④代表培養(yǎng)基，A、B、C表示操作步驟，D、E為菌落。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．圖中①②④為基本培養(yǎng)基，③為完全培養(yǎng)基B．紫外線的目的是提高突變率，增加突變株的數(shù)量C．B的正確操作是用涂布器把菌液均勻地涂布在②表面D．經(jīng)C過程原位影印及培養(yǎng)后，可從④中挑取D進(jìn)行純化培養(yǎng)6．AM真菌能促進(jìn)根瘤菌（Rh）刺激根的局部膨大形成根瘤。為研究AM真菌促進(jìn)Rh形成根瘤的機(jī)制，研究人員分別取經(jīng)AM-+Rh-、AM++Rh-和AM++Rh+處理的大豆根系分泌物（+代表有，-代表無），滅菌后裝滿毛細(xì)管，將毛細(xì)管束放入含有根瘤菌菌液的試管中，實(shí)驗(yàn)裝置如圖1（此培養(yǎng)條件下根瘤菌能生存但并不增殖）。每隔兩天取出毛細(xì)管，用無菌水沖洗其外壁，打碎研磨沖洗定容后進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)，結(jié)果如圖2。下列有關(guān)上述實(shí)驗(yàn)操作及分析敘述正確的是（

）A．根瘤菌與AM真菌都具有生物膜系統(tǒng)，二者本質(zhì)區(qū)別是有無核膜包被的細(xì)胞核B．實(shí)驗(yàn)中可采用高壓蒸汽滅菌鍋對大豆根系分泌物和根瘤菌菌液進(jìn)行滅菌處理C．可取一定量的毛細(xì)管研磨液劃線接種在增殖平板培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)計(jì)數(shù)D．AM真菌與根瘤菌共同存在時(shí)，根系分泌物對根瘤菌的吸引作用更強(qiáng)7．為了從反芻動物的瘤胃中分離出能分解尿素的微生物，某興趣小組設(shè)計(jì)了如下實(shí)驗(yàn)流程。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．為創(chuàng)造無氧環(huán)境，可采用穿刺接種法B．該實(shí)驗(yàn)使用的固體培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基C．細(xì)菌能分解尿素，是因?yàn)樗鼈兡芎铣呻迕窪．脲酶將尿素分解為氨和CO2，會使培養(yǎng)基pH降低8．剛果紅是一種染料，可與纖維素反應(yīng)形成紅色復(fù)合物，但不會與纖維素水解產(chǎn)物發(fā)生反應(yīng)。研究人員利用該原理從土壤中分離纖維素分解菌并計(jì)數(shù)，培養(yǎng)結(jié)果如下圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．剛果紅培養(yǎng)基以纖維素為唯一碳源B．將菌液分散在培養(yǎng)基表面用平板劃線法C．圖中菌落丁分解纖維素的能力最強(qiáng)D．用顯微鏡直接計(jì)數(shù)統(tǒng)計(jì)的結(jié)果往往比活菌實(shí)際數(shù)目多9．利用纖維素酶降解秸稈生產(chǎn)燃料乙醇，對緩解全球能源危機(jī)有重大意義?？蒲腥藛T開展篩選、誘變及選育高產(chǎn)纖維素酶菌株的相關(guān)研究，過程如圖。下列敘述正確的是（

）A．采集的黑土壤需經(jīng)過高壓蒸汽滅菌進(jìn)行富集培養(yǎng)B．需用牛肉膏、纖維素、瓊脂等配制CMC平板C．誘變處理使每個(gè)細(xì)菌的產(chǎn)纖維素酶能力提高D．人工篩選可以使產(chǎn)纖維素菌株發(fā)生定向進(jìn)化10．肉制品在發(fā)酵過程中會產(chǎn)生一類具有生物活性的含氮低分子化合物一生物胺。適量生物胺可促進(jìn)人體的正常生理活動，但含量較高時(shí)有一定的毒性?？蒲腥藛T擬采用水解圈（微生物水解生物胺產(chǎn)生的透明圈）的方法，從魚露發(fā)酵液中篩選高效生物胺降解菌，其操作思路如下：①從距發(fā)酵缸上表面8-12cm處吸取1mL發(fā)酵液→②→③取100uL均勻涂布在培養(yǎng)基x上→④挑取目標(biāo)菌落分離純化→⑤測定菌株的生物胺降解活性。下列相關(guān)分析中錯(cuò)誤的是（

）A．操作②是指用適量的蒸餾水稀釋魚露發(fā)酵液B．操作③采用的接種方法也可用于微生物計(jì)數(shù)C．配置培養(yǎng)基X時(shí)，應(yīng)以生物胺作為唯一氮源D．選擇目標(biāo)菌落時(shí)，應(yīng)挑取水解圈較大的菌落11．尿素容易保存，是目前使用量較大的一種化學(xué)氮肥，尿素分子并不能直接被農(nóng)作物吸收，只有被尿素分解菌分解成氨之后，才能被植物利用。如圖是從土壤中分離、計(jì)數(shù)尿素分解菌的過程，有關(guān)分析不正確的是（）A．若②過程稀釋了10倍，則乙錐形瓶里盛有18mL無菌水B．③的接種方法可用稀釋涂布平板法C．a(chǎn)、b、c培養(yǎng)基可以用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基D．若①②過程稀釋了10倍，a、b、c培養(yǎng)基上的菌落數(shù)依次為57、58、56個(gè)，則10g土樣中的尿素分解菌數(shù)量為5.7×108個(gè)12．為了研究抗生素X對四種不同細(xì)菌（1、2、3、4）的作用效果，有人做了如圖的抗菌實(shí)驗(yàn)，四天后菌落形態(tài)如圖所示，則下列分析正確的是（

）A．抗生素X對細(xì)菌3的抑制效果最好 B．抗生素X對細(xì)菌4的抑制效果最差C．抗生素X對細(xì)菌2的抑制比對細(xì)菌3的抑制效果好 D．可以用抗生素X去治療由細(xì)菌1引起的疾病13．為宣傳正確佩戴口罩可降低呼吸道傳染疾病的風(fēng)險(xiǎn)，某同學(xué)進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)中將牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基置于距正確佩戴口罩的實(shí)驗(yàn)者口部前方50cm處，然后對著培養(yǎng)基講話1min或咳嗽2次，再進(jìn)行微生物培養(yǎng)和觀察。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．實(shí)驗(yàn)中培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基并需要進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌B．實(shí)驗(yàn)者對培養(yǎng)基進(jìn)行處理后，放入10℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)1-2天C．實(shí)驗(yàn)中還應(yīng)設(shè)置不戴口罩直接講話或咳嗽進(jìn)行實(shí)驗(yàn)對照D．培養(yǎng)結(jié)束后可根據(jù)菌落的形狀、大小、顏色等特征確定微生物的種類14．做“微生物的分離與培養(yǎng)”實(shí)驗(yàn)時(shí)，下列敘述正確的是（

）A．高壓滅菌加熱結(jié)束時(shí)，打開放氣閥使壓力表指針回到零后，開啟鍋蓋B．倒平板時(shí)，應(yīng)將打開的皿蓋放到一邊，以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上C．為了防止污染，接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)立即去挑取菌落D．用記號筆標(biāo)記培養(yǎng)皿中菌落時(shí)，應(yīng)標(biāo)記在皿底上15．微生物需要從外界吸收營養(yǎng)物質(zhì)來維持正常的生長和繁殖。下列關(guān)于微生物營養(yǎng)的敘述，正確的是（

）A．尿素分解菌和纖維素分解菌的培養(yǎng)基中可能含有相同的無機(jī)鹽B．篩選硝化細(xì)菌（自養(yǎng)型）的培養(yǎng)基中需加入適宜濃度的有機(jī)碳源C．只含有水和無機(jī)鹽兩類成分的培養(yǎng)基中不可能形成生物群落D．乳酸菌需要的特殊營養(yǎng)物質(zhì)是指其自身不能合成的某些無機(jī)物16．培養(yǎng)基是指供給微生物、植物或動物細(xì)胞（或組織）生長繁殖的，由不同物質(zhì)組合配制而成的營養(yǎng)基質(zhì)。針對下表中的三組培養(yǎng)基，下列敘述錯(cuò)誤的是（）組別培養(yǎng)基成分a蛋白胨、酵母提取物、甘露醇、水b葡萄糖、尿素、NaCl、K2HPO4、酚紅、瓊脂糖c礦質(zhì)元素、蔗糖、維生素、甘氨酸、水、瓊脂A．a(chǎn)組培養(yǎng)基可用于醋化醋桿菌的擴(kuò)大培養(yǎng)，該培養(yǎng)過程需用到磁力攪拌器和搖床B．b組培養(yǎng)基可用于分離含脲酶的微生物，該實(shí)驗(yàn)中需用全營養(yǎng)LB固體培養(yǎng)基作對照C．c組培養(yǎng)基可用于誘導(dǎo)植物愈傷組織再分化，添加的植物生長調(diào)節(jié)劑需事先過濾滅菌D．上述培養(yǎng)基不僅要為相應(yīng)的細(xì)胞提供營養(yǎng)物質(zhì)還要為其生存和繁殖提供適宜的環(huán)境17．結(jié)核桿菌是對抗生素極易產(chǎn)生耐藥性的細(xì)菌。為探究不同結(jié)核桿菌耐藥性的大小，研究人員提取患者體內(nèi)的病原菌進(jìn)行培養(yǎng)（如圖甲），過程Ⅰ接種純化的結(jié)果如圖乙。下列說法正確的是（

）A．在病原菌的培養(yǎng)過程中只采用一種滅菌方法即可B．對單一菌落進(jìn)行液體培養(yǎng)的目的是獲得更多的結(jié)核桿菌C．培養(yǎng)中各培養(yǎng)基均需加入抗生素的目的是抑制雜菌生長D．過程Ⅰ接種時(shí)劃線的順序是①→②→③，該方法無法完成對菌落的計(jì)數(shù)18．下列有關(guān)無菌技術(shù)的說法，正確的是（

）①可以通過化學(xué)藥劑消毒法處理水源；②培養(yǎng)基需經(jīng)高壓蒸汽滅菌后方可調(diào)節(jié)pH；③配制培養(yǎng)基和接種時(shí)，均必需在酒精燈火焰旁操作；④接種室、接種箱或超凈工作臺在使用前，可用紫外線照射30min進(jìn)行消毒；⑤高壓蒸汽滅菌是在壓力為201kPa，溫度為121℃的條件下維持15-30min來滅菌的；A．①③ B．③⑤ C．③④ D．①④19．經(jīng)誘變處理后，某細(xì)菌群體中基因突變頻率增大，但突變體數(shù)量仍占極少數(shù)。梯度平板法是篩選抗藥性突變型的一種簡單有效的方法，其操作要點(diǎn)是：先在培養(yǎng)皿中倒入不含抗生素的培養(yǎng)基，立即傾斜培養(yǎng)皿到凝固為一個(gè)斜面，再將培養(yǎng)皿平放，繼續(xù)倒入含一定濃度抗生素的培養(yǎng)基，直至形成平面，培養(yǎng)基內(nèi)的抗生素濃度呈線性梯度，一端濃度高，另一端濃度低，將誘變處理的濃菌液涂在梯度平板上進(jìn)行培養(yǎng)及篩選。篩選出的抗藥性突變型再做抗藥性的測定。下列推斷不合理的是（

）A．抗藥性突變型個(gè)體的主要誘因是培養(yǎng)基中的抗生素B．制作含有抗生素的平板時(shí)，藥物須與培養(yǎng)基混合均勻C．培養(yǎng)后，在高濃度抗生素處出現(xiàn)的菌落為抗藥性突變型菌株且抗藥性強(qiáng)D．含抗生素的梯度平板上會出現(xiàn)未經(jīng)誘變處理的該細(xì)菌群體菌落20．高中生物實(shí)驗(yàn)中用到了不同體積分?jǐn)?shù)的酒精，下列說法正確的是（

）A．微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，用50%酒精給實(shí)驗(yàn)者的雙手消毒B．觀察花生細(xì)胞中的脂肪顆粒，需要用70%的酒精洗去浮色C．DNA粗提取實(shí)驗(yàn)中，用95%冷酒精進(jìn)一步提純DNA，DNA溶解于95%冷酒精D．綠葉中色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)中，可用無水乙醇作為提取液21．采后的葡萄在運(yùn)輸、貯藏等過程中，易受黑曲霉感染而腐爛引起“黑粉病”，食用價(jià)值下降。為解決這一問題，研究人員從葡萄園土壤中分離、純化和篩選出對黑曲霉有較強(qiáng)抑制作用的拮抗細(xì)菌，具體流程如圖。(1)黑曲霉與拮抗細(xì)菌都具有的結(jié)構(gòu)或物質(zhì)是_________。①質(zhì)膜

②核膜

③核酸

④核糖體

⑤線粒體(2)步驟Ⅰ采用的接種方法是_________，采用固體平板培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)進(jìn)行倒置培養(yǎng)的原因是_________。(3)在微生物培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿進(jìn)行_________（填“消毒”或“滅菌”）處理；操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和_________；靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使其內(nèi)蛋白質(zhì)變性，還能損傷它的_________結(jié)構(gòu)。(4)下列關(guān)于步驟Ⅳ的說法正確的有_________。A．桔抗細(xì)菌與黑曲霉競爭營養(yǎng)與生存空間B．桔抗細(xì)菌可能產(chǎn)生了某種物質(zhì)抑制黑曲霉的生長繁殖C．黑曲霉可能產(chǎn)生了某種抗生素抑制描抗細(xì)菌的生長繁殖D．桔抗細(xì)菌對黑曲霉抑制作用越大，則其周圍的透明圈越大(5)為進(jìn)一步研究抽抗細(xì)菌對葡萄中黑曲霉的抑制效果，研究人員進(jìn)行了圖實(shí)驗(yàn)，其中施加的處理①是_________、②是_________。22．從遠(yuǎn)古到現(xiàn)代，從傳統(tǒng)發(fā)酵到分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，生物技術(shù)一直與我們的生活息息相關(guān)。回答下列問題。(1)微生物培養(yǎng)技術(shù)是最基本、最核心的生物技術(shù)。在實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物，一方面需要為培養(yǎng)的微生物提供合適的______________________(答出2點(diǎn)即可)，另一方面需要確保無處不在的其他微生物不會對實(shí)驗(yàn)造成干擾。(2)在生產(chǎn)上，人們使用果膠酶、纖維素酶等提高水果的出汁率和澄清度。①由霉菌發(fā)酵生產(chǎn)的果膠酶是食品加工業(yè)中使用量最大的酶制劑之一，被廣泛地應(yīng)用于果汁加工業(yè)。培養(yǎng)霉菌可以用查氏培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基一般含有___________________(答出2種即可)、氮源和碳源，碳源進(jìn)入細(xì)胞后，可參與_______________(答出2種即可)、蛋白質(zhì)和核酸等有機(jī)物的合成。②果膠酶是分解果膠的一類酶的總稱，包括多聚半乳糖醛酸酶、果膠分解酶和果膠酯酶等。在果汁的工業(yè)生產(chǎn)中，分離果膠酶的方法有__________________(答出2種即可)。③果汁中可能含有大腸桿菌，果汁中大腸桿菌的數(shù)量可以通過濾膜法來測定，具體做法是______________________，根據(jù)培養(yǎng)基上的菌落數(shù)目，計(jì)算出果汁中大腸桿菌的數(shù)量。(3)植物芳香油的提取方法有蒸餾、壓榨和萃取等，具體采用哪種方法要根據(jù)_____________________來決定。胡蘿卜素易溶于有機(jī)溶劑，提取胡蘿卜素可以采用有機(jī)溶劑萃取的方法，萃取胡蘿卜素的有機(jī)溶劑應(yīng)該具有________________(答出3點(diǎn)即可)的特點(diǎn)。此外，還需要考慮萃取效率、對人的毒性、是否易燃、有機(jī)溶劑是否能從產(chǎn)品中完全除去、會不會影響產(chǎn)品質(zhì)量等問題。23．原核生物繁殖快、多為單細(xì)胞，且遺傳物質(zhì)相對較少，因此早期的基因工程操作都用原核生物作為受體細(xì)胞，其中以大腸桿菌應(yīng)用最為廣泛。目前市場上供應(yīng)的降血糖藥物多為重組人胰島素，即應(yīng)用基因工程技術(shù)生產(chǎn)的、與內(nèi)源激素結(jié)構(gòu)和生物活性相同的胰島素。用于生產(chǎn)重組人胰島素的表達(dá)系統(tǒng)主要有大腸桿菌和酵母菌，這兩個(gè)系統(tǒng)各有利弊，大腸桿菌系統(tǒng)表達(dá)效率高，但后處理較難；酵母系統(tǒng)表達(dá)量雖然低，但對表達(dá)產(chǎn)物的處理較簡便。下圖為某研究小組設(shè)計(jì)的酵母菌培養(yǎng)流程，回答下列有關(guān)問題：(1)