糖化血紅蛋白測(cè)定試劑盒綜述資料

PAGEPAGE2糖化血紅蛋白測(cè)定試劑盒（膠乳免疫比濁法）綜述資料目錄目錄 11．產(chǎn)品預(yù)期用途 11.1產(chǎn)品預(yù)期用途 11.2與預(yù)期用途相關(guān)的臨床適應(yīng)癥背景情況 11.3相關(guān)的臨床或?qū)嶒?yàn)室診斷方法等 12.產(chǎn)品描述 12.1技術(shù)原理 12.2主要原料及來(lái)源 12.3主要生產(chǎn)工藝過(guò)程 22.3.1儀器設(shè)備 22.3.2領(lǐng)料 22.3.3R1配制 22.3.4R2a的配制 22.3.5R2b的配制 32.3.6R3的配制 32.3.7半成品檢驗(yàn) 32.3.8分裝和密封 32.3.9貼標(biāo) 32.3.10包裝 32.3.11成品檢驗(yàn) 32.3.12貯存 33.試劑盒主要研究結(jié)果總結(jié)和評(píng)價(jià) 33.1．主要研究結(jié)果簡(jiǎn)述 33.2．試劑盒主要性能指標(biāo) 43.2.1空白吸光度 43.2.2準(zhǔn)確度評(píng)價(jià) 43.2.3分析靈敏度 43.2.4重復(fù)性 43.2.5批間差 43.2.6測(cè)定范圍 43.2.7相關(guān)性 43.2.8試劑效期穩(wěn)定性 43.2.9試劑開(kāi)蓋穩(wěn)定性 44．有關(guān)生物安全性方面的說(shuō)明 45.其它 45.1同類產(chǎn)品在國(guó)內(nèi)外批準(zhǔn)上市情況 45.2相關(guān)產(chǎn)品所采用的技術(shù)方法臨床應(yīng)用情況 5糖化血紅蛋白測(cè)定試劑盒（膠乳免疫比濁法）綜述資料1．產(chǎn)品預(yù)期用途1.1產(chǎn)品預(yù)期用途本試劑盒為體外診斷試劑，用于檢測(cè)人全血中的糖化血紅蛋白的含量。1.2與預(yù)期用途相關(guān)的臨床適應(yīng)癥背景情況糖化血紅蛋白是血紅蛋白生成后與糖類經(jīng)非酶促結(jié)合而成，它的結(jié)合過(guò)程緩慢且相對(duì)不可逆，持續(xù)存在于紅細(xì)胞120天生命期中，其合成率與紅細(xì)胞所處環(huán)境中糖的濃度成正比。因此，糖化血紅蛋白所占比率能反映測(cè)定前1～2個(gè)月內(nèi)平均血糖水平。目前，糖化血紅蛋白HbA1c作為糖尿病的篩選、診斷、血糖控制、療效評(píng)價(jià)指標(biāo)已被臨床上廣泛使用。1.3相關(guān)的臨床或?qū)嶒?yàn)室診斷方法等HbA1c的測(cè)定方法主要有四類：色譜法、電泳法、免疫法和化學(xué)法。其中色譜法主要有離子交換層析法、高效液相色譜法（HPLC）和親和層析法。免疫法主要包括放射免疫法（RIA）、酶免疫法（EIA）和膠乳免疫凝集法（LIAA）。測(cè)定糖化血紅蛋白，目前臨床主要采用乳膠凝集反應(yīng)法和離子交換高效液相色譜法兩種，分別用生化分析儀和糖化血紅蛋白自動(dòng)分析儀進(jìn)行測(cè)定。本試劑盒采用的膠乳免疫比濁法具有靈敏度高，特異性好，重復(fù)性好，線性范圍寬，干擾小的優(yōu)點(diǎn)。2.產(chǎn)品描述2.1技術(shù)原理本試劑盒是利用抗原抗體反應(yīng)直接測(cè)定總血紅蛋白（Hb）中糖化血紅蛋白（HbA1c）的百分含量。樣品中總Hb和HbA1c與膠乳有相同的非特異性吸附而固相化，當(dāng)加入HbA1c的特異性單克隆抗體后形成膠乳-HbA1c-鼠抗人HbA1c單克隆抗體的復(fù)合物，此復(fù)合物由于羊抗鼠lgG抗體而形成凝集，凝集量因膠乳表面固相化的HbA1c量的不同而不同。通過(guò)測(cè)定吸光度并與HbA1c百分濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線比較后，可求出樣品中HbA1c占總Hb的百分含量。2.2主要原料及來(lái)源試劑盒的主要原材料來(lái)源列表如下：試劑名稱級(jí)別來(lái)源膠乳微球生物級(jí)別北京邁迪卡科技有限公司_鼠抗人HbA1c單克隆抗體生物級(jí)別深圳菲鵬公司羊抗鼠IgG抗體生物級(jí)別深圳菲鵬公司2.3主要生產(chǎn)工藝過(guò)程2.3.1儀器設(shè)備電子天平：BP310S；BP3100S分析儀器：HITACHI7180/7060以及OlympusAU400全自動(dòng)生化分析儀其它儀器：pH計(jì)、量筒、移液器、配液桶、超聲波清洗器、離心機(jī)、儲(chǔ)液罐、灌裝機(jī)、貼標(biāo)機(jī)2.3.2領(lǐng)料根據(jù)生產(chǎn)指令領(lǐng)取物料，并核實(shí)物料的名稱、批號(hào)、數(shù)量，確認(rèn)無(wú)誤后方可領(lǐng)用。2.3.3R1配制甘氨酸緩沖液：按設(shè)計(jì)量準(zhǔn)確稱取甘氨酸若干克，溶解在一定量的純水中，攪拌3分鐘，至完全溶解。稱取一定量的NaOH，緩慢加到溶液中，邊加入邊攪拌，同時(shí)用pH計(jì)進(jìn)行監(jiān)控，調(diào)整緩沖液至25℃時(shí)pH9.0（8.95~9.05）。按設(shè)計(jì)量量取90nm膠乳微球若干毫升，加入甘氨酸緩沖液，混合均勻。按設(shè)計(jì)量稱取EDAC若干克，倒入到膠乳溶液中，溶解后混合均勻，再室溫旋轉(zhuǎn)混合20分鐘。按設(shè)計(jì)量量取二抗若干毫升，加入到膠乳溶液中，充分混勻，室溫旋轉(zhuǎn)混合3小時(shí)。將膠乳溶液用離心機(jī)4500rpm，離心30分鐘，離心后棄上清液，沉淀物用甘氨酸緩沖液重懸，混合均勻。定容，混勻。用0.45μm的濾膜，對(duì)R1溶液進(jìn)行過(guò)濾，收集濾液。2.3.4R2a的配制配制甘氨酸緩沖液：按設(shè)計(jì)量準(zhǔn)確稱取Gly若干克，溶解在一定量的純水中，攪拌3分鐘，至完全溶解。準(zhǔn)確稱取一定量的NaOH，緩慢加到溶液中，邊加入邊攪拌，同時(shí)用pH計(jì)進(jìn)行監(jiān)控，調(diào)整緩沖液至25℃時(shí)pH9.0（8.95~9.05）。準(zhǔn)確稱取一定量的PEG6000，加入到緩沖液中，攪拌5分鐘，至完全溶解。準(zhǔn)確稱取一定量的N3防腐劑，加入到緩沖液中，攪拌5分鐘，至完全溶解。定容，混勻。用0.45μm的濾膜，對(duì)R2a溶液進(jìn)行過(guò)濾，收集濾液。2.3.5R2b的配制按設(shè)計(jì)量準(zhǔn)確量取一抗和二抗若干，溶解在一定量的純水和甘油的混合液中，攪拌10分鐘，至完全溶解。定容，混勻。2.3.6R3的配制配制溶血?jiǎng)喊丛O(shè)計(jì)量準(zhǔn)確分別稱取TTAB和N3防腐劑若干克，溶解在一定量的純水中，攪拌3分鐘，至完全溶解。用0.45μm的濾膜，對(duì)R3溶液進(jìn)行過(guò)濾，收集濾液。2.3.7半成品檢驗(yàn)從配制好的R1、R2a、R2b和R3中分別取樣，按相應(yīng)的《糖化血紅蛋白試劑盒（膠乳免疫比濁法）半成品檢驗(yàn)規(guī)程》進(jìn)行檢驗(yàn)，合格后分裝。2.3.8分裝和密封將R1、R2a、R2b、R3按規(guī)格分裝到相應(yīng)塑料瓶或螺口管中，然后進(jìn)行旋蓋密封2.3.9貼標(biāo)將分裝后的試劑用帖標(biāo)機(jī)或手工帖標(biāo)。2.3.10包裝將貼標(biāo)后的試劑按照包裝規(guī)格和組件要求，包裝成成品。2.3.11成品檢驗(yàn)隨機(jī)抽取包裝好的試劑盒，按《糖化血紅蛋白試劑盒（膠乳免疫比濁法）成品檢驗(yàn)規(guī)程》進(jìn)行檢驗(yàn)，合格后即可入庫(kù)儲(chǔ)存。2.3.12貯存將包裝好的成品放入2℃～8℃3.試劑盒主要研究結(jié)果總結(jié)和評(píng)價(jià)3.1．主要研究結(jié)果簡(jiǎn)述如：產(chǎn)品研究中對(duì)反應(yīng)體系中的緩沖體系、pH值以及主要原料的選擇和濃度進(jìn)行了有效的探索，并確定了檢測(cè)時(shí)間及其它參數(shù)特征。在配方確定后，對(duì)試劑盒進(jìn)行了全性能驗(yàn)證和確認(rèn)，結(jié)果顯示了性能特征完全符合臨床檢測(cè)需要。在效期穩(wěn)定性跟蹤測(cè)試和開(kāi)蓋穩(wěn)定性測(cè)試中，結(jié)果滿足產(chǎn)品研制要求，也符合臨床需要。3.2．試劑盒主要性能指標(biāo)3.2.1空白吸光度在波長(zhǎng)660nm（640~680nm）（光徑1cm）處，試劑空白吸光度（A）應(yīng)≤1.0。3.2.2準(zhǔn)確度評(píng)價(jià)檢測(cè)中生糖化血紅蛋白質(zhì)控品，測(cè)定結(jié)果與靶值的相對(duì)偏差應(yīng)≤±15％。3.2.3分析靈敏度測(cè)定中生HbA1c校準(zhǔn)品，對(duì)應(yīng)于8.5%的HbA1c所引起的吸光度差值（△A）的絕對(duì)值應(yīng)在0.05～0.20的范圍內(nèi)。3.2.4重復(fù)性重復(fù)性測(cè)定結(jié)果的變異系數(shù)（CV）≤10%。3.2.5批間差試劑盒的批間差（R）≤10%。3.2.6測(cè)定范圍在2%～14%范圍內(nèi)，線性相關(guān)系數(shù)（r）應(yīng)≥0.990；絕對(duì)偏差應(yīng)不超過(guò)±2％。3.2.7相關(guān)性本試劑盒與同類試劑進(jìn)行比對(duì)實(shí)驗(yàn)，在2%～14%的范圍內(nèi)，對(duì)兩試劑的測(cè)值進(jìn)行線性回歸，其相關(guān)性系數(shù)可滿足R2≥0.975。3.2.8試劑效期穩(wěn)定性試劑盒有效期為12個(gè)月。在效期滿后三個(gè)月以內(nèi)