生物產(chǎn)品降解植物纖維素功效評價技術(shù)規(guī)范征求意見稿

GB/TXXXXX–2012GB/TXXXXX–2012IIGB/TXXXXX—201X中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)GB/TXXXXX—201X中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)ICS07ICS07.080A21生物產(chǎn)品降解植物纖維素功效生物產(chǎn)品降解植物纖維素功效評價技術(shù)規(guī)范Technicalspecificationofevaluationfordegradationofplantcelluloseinbiologicproducts（征求意見稿）發(fā)布中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會201X-XX-XX發(fā)布發(fā)布中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會201X-XX-XX發(fā)布201X-XX-XX實(shí)施GB/T××××—201×PAGEIGB/T××××—201×PAGE4生物產(chǎn)品降解植物纖維素功效評價技術(shù)規(guī)范1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了生物產(chǎn)品降解植物纖維素效果評價試驗(yàn)原理、儀器設(shè)備及器具、試劑與材料、試驗(yàn)步驟、結(jié)果分析。本標(biāo)準(zhǔn)適用于微生物和酶生物產(chǎn)品降解植物纖維效果評價。2規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB1886.232食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品添加劑羧甲基纖維素鈉GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法3術(shù)語和定義3.1生物產(chǎn)品biologicalproducts利用生物技術(shù)獲得的產(chǎn)品。3.2植物纖維素cellulose由D-葡萄糖以β-1,4糖苷鍵組成的大分子多糖，不溶于水及一般有機(jī)溶劑，是植物細(xì)胞壁的主要成分。4原理在一定條件下，纖維素底物（羧甲基纖維素鈉）能夠被微生物或酶制劑降解，底物粘度隨之降低，通過粘度計測得粘度的數(shù)值，以粘度的降低換算出纖維素底物降解率。5儀器與設(shè)備5.1pH計：精度±0.01pH。5.2恒溫水浴鍋：溫度制范圍在30℃~100℃，精度為0.1℃。5.3電子天平：精度為0.001g和0.01g。6試劑與材料本標(biāo)準(zhǔn)使用的試劑均為分析純，水均為符合GB/T6882中規(guī)定的二級水。6.1羧甲基纖維素鈉（CMCNa）溶液準(zhǔn)確稱取5g羧甲基纖維素鈉，溶解于8090℃的熱水中，完全溶解后，冷卻至室溫定容至100mL。6.2基礎(chǔ)營養(yǎng)基溶液按照GB/T15818要求進(jìn)行配制。7試驗(yàn)步驟7.1試驗(yàn)設(shè)計不同類型生物產(chǎn)品降解植物纖維素效果試驗(yàn)設(shè)計應(yīng)符合表1要求。表1生物產(chǎn)品降解植物纖維素效果試驗(yàn)設(shè)計項(xiàng)目產(chǎn)品種類微生物產(chǎn)品酶產(chǎn)品處理設(shè)計1.供試樣品2.失活樣品3.空白對照重復(fù)次數(shù)不少于3次反應(yīng)條件按正交試驗(yàn)結(jié)果確定7.2待測微生物試驗(yàn)實(shí)施7.2.1供試樣品處理固體產(chǎn)品應(yīng)進(jìn)行研磨處理，制成粉末狀供試樣品。7.2.2失活樣品處理取供試的固體或液體微生物樣品進(jìn)行121oC，30min殺菌處理。7.2.3最佳反應(yīng)體系確定250ml三角瓶中加入100ml基礎(chǔ)營養(yǎng)基溶液，121℃，20min滅菌，冷卻。設(shè)計正交實(shí)驗(yàn)，按照供試樣品的影響因素宜選取反應(yīng)溫度、反應(yīng)轉(zhuǎn)速、底物濃度、反應(yīng)時間等，確定最佳反應(yīng)體系條件。7.2.4降解處理試驗(yàn)取250mL三角瓶9個，空白樣3個，供試樣品瓶3個，失活樣品瓶3個。分別向9個瓶中加入100mL基礎(chǔ)營養(yǎng)基溶液，進(jìn)行滅菌處理后備用。按照最佳反應(yīng)體系條件進(jìn)行降解試驗(yàn)。7.3待測酶試驗(yàn)實(shí)施7.3.1供試樣品處理固體產(chǎn)品應(yīng)用緩沖溶液溶解。7.3.2失活樣品處理用緩沖溶液溶解后的固體樣品或液體酶樣品在100oC環(huán)境下進(jìn)行15min去酶活處理。7.3.3最佳反應(yīng)體系確定250ml三角瓶中加入100ml緩沖溶液，設(shè)計正交實(shí)驗(yàn)，影響因素宜選取酶量、底物濃度、pH值、反應(yīng)時間等，確定最佳反應(yīng)體系條件。7.3.4降解處理試驗(yàn)取250mL三角瓶9個，空白樣品瓶3個，供試樣品瓶3個，失活樣品瓶3個。分別向9個瓶中加入100mL緩沖溶液。按照最佳反應(yīng)體系進(jìn)行降解試驗(yàn)。7.4濃度測定按GB1886.232要求進(jìn)行。8結(jié)果分析8.1結(jié)果計算微生物產(chǎn)品降解率按照式（1）計算：D=0?1?0式中：D——底物的降解率（%）；0——為反應(yīng)開始時的起始溶液粘度（mPa·s）；1——為供試樣品反應(yīng)后的溶液粘度（mPa·s）；2——為失活樣品反應(yīng)后的溶液粘度（mPa·s）；3——為微生物樣品瓶反應(yīng)后的溶液粘度（mPa·s）；3′——為微生物樣品瓶反應(yīng)前的溶液粘度（mPa·s）；′——為空白樣品反應(yīng)后的溶液粘度（mPa·s）。酶產(chǎn)品降解率按照式（2）計算：D=0?1?0式中：D——底物的降解率（%）；0——為反應(yīng)開始時的起始溶液粘度（mPa·s）；1——為供試樣品反應(yīng)后的溶液粘度（mPa·s）；2——為失活樣品反應(yīng)后的溶液粘度（mPa·s）；′——為空白樣品反應(yīng)后的溶液粘度（mPa·s）。以平行樣的平均值為最終的降解率值，計算結(jié)果保留到小數(shù)點(diǎn)后兩位。8.2結(jié)果判定以降解率的大小評價被測試生物產(chǎn)品的降解功效：降解率大于等于80%，小于100%時，降解效果為好；降解率大于等于60%，小于80%時，降解效果為良好；降解率大于等于40%，小于60%時，降解效果為較好；降解率大于等于20%，小于40%時，降解效果為一般；降解率小于20%時，降解效果為差。8.3重復(fù)性在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的10%。__________________________前言本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1—2009給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)由中國標(biāo)準(zhǔn)化研究院提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：前言本標(biāo)