血小板檢查2014教材

血小板檢查檢驗(yàn)系臨檢教研室劉協(xié)紅目的要求掌握血小板計(jì)數(shù)的原理、方法、質(zhì)量控制、參考值、方法學(xué)平價(jià)及臨床意義。重點(diǎn)

血小板計(jì)數(shù)難點(diǎn)

血小板形態(tài)一、概述骨髓外周血（一）血小板的生成造血多能干細(xì)胞TPO調(diào)控分化原巨核細(xì)胞顆粒巨細(xì)胞產(chǎn)板巨細(xì)胞血小板，platelet7~14天1/3滯留于脾竇和脾髓的細(xì)胞間2/3位于循環(huán)池（二）血小板的生理血小板的平均壽命為7~14天，具有止血功能僅開始2天。衰老的血小板在單核巨噬細(xì)胞破壞，主要在脾破壞。脾池化：全身約有1/3的血小板滯留于脾竇和脾髓的細(xì)胞間，血小板在脾內(nèi)的這種滯留現(xiàn)象即“脾池化”。（三）血小板檢測(cè)常用項(xiàng)目血小板計(jì)數(shù)(PLT):手工單項(xiàng)或血液分析儀多項(xiàng)檢測(cè)血小板平均體積(MPV)血小板分布寬度(PDW)

血小板比積(PCT)血液分析儀二、血小板計(jì)數(shù)

（手工法）（一）原理將血液稀釋一定倍數(shù)，充入計(jì)數(shù)池內(nèi)計(jì)數(shù)，計(jì)算出每一升血中血小板數(shù)。稀釋液破壞RBC,固定Pt并防止聚集。（二）試劑1.草酸銨稀釋液草酸銨1.0g,EDTA-Na20.012g，蒸餾水加至100mL。2.許汝和稀釋液（復(fù)方尿素稀釋液）

尿素10g，枸櫞酸鈉0.5g，40%甲醛0.1mL蒸餾水加至100mL。過濾冰箱保存。（三）器材光學(xué)顯微鏡血球計(jì)數(shù)板

Hb吸管試管采血針等（四）操作1.在小試管中加入plt稀釋液0.38mL;2.取末梢血20μL加入試管中，迅速搖勻。室溫放置>10分鐘;3.充池，靜置10~15分鐘;4.高倍鏡下計(jì)數(shù)中央大方格中四角及正中共5個(gè)中方格內(nèi)的plt數(shù)。（五）計(jì)算血小板數(shù)/L=5個(gè)中方格內(nèi)血小板數(shù)（N）×5×10×20×106/L=N×109/L（六）結(jié)果報(bào)告PLT:△△△×109/L（七）注意事項(xiàng)全部用具和稀釋液要特別清潔，防塵、防菌，以免計(jì)數(shù)時(shí)誤認(rèn)。針刺要深，吸血及稀釋動(dòng)作要快，防聚集。同時(shí)做多項(xiàng)檢查時(shí)，優(yōu)先采plt計(jì)數(shù)之血。充池前應(yīng)充分搖勻，充池后需靜置10分鐘以上待plt全部下沉后再計(jì)數(shù)。1h內(nèi)完成。（八）方法學(xué)平價(jià)草酸銨法對(duì)RBC破壞力強(qiáng)，使視野清晰，plt形態(tài)清楚，是全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程推薦方法。由于Plt體積小，易粘附、聚集及破壞等，結(jié)果不甚理想。復(fù)方尿素法優(yōu)點(diǎn)是plt脹大易辨認(rèn)，但不能完全溶解RBC，且尿素易分解，試劑保存時(shí)間短。血液分析儀法可同時(shí)測(cè)MPV、PDW等多個(gè)指標(biāo)，快速，臨床適用。但不能鑒別紅細(xì)胞碎片、灰塵等與plt大小相似之物，故計(jì)數(shù)誤差大。當(dāng)直方圖出現(xiàn)變化時(shí)，應(yīng)用顯微鏡計(jì)數(shù)法校準(zhǔn)。流式細(xì)胞儀法：用血小板單克隆抗體染色標(biāo)記血小板，根據(jù)熒光強(qiáng)度和散射光強(qiáng)度，用獨(dú)立的流式細(xì)胞儀檢測(cè)可得到準(zhǔn)確性極高的血小板數(shù)。流式細(xì)胞儀法式目前血小板計(jì)數(shù)參考方法。相差顯微鏡法：相差顯微鏡下，血小板立體感增強(qiáng)，有助于識(shí)別血小板，還可照相后核對(duì)計(jì)數(shù)結(jié)果，作為手工法血小板計(jì)數(shù)的參考方法。（九）參考值（100~300）×109/L（十）質(zhì)量保證原則是：避免血小板被激活、破壞，避免雜物污染。1.檢測(cè)前：采血要順暢，抗凝劑選用合適，儲(chǔ)存時(shí)間適當(dāng)；2.檢測(cè)中：手工法計(jì)數(shù)要定期檢查稀釋液質(zhì)量，儀器法要質(zhì)控合格；3.檢測(cè)后：（1）用同一份標(biāo)本制備學(xué)血涂片染色精簡(jiǎn)觀察血小板數(shù)量、大小、分布情況，并注意有無異常增多的紅、白細(xì)胞碎片。（2）用參考方法核對(duì)。（3）同一份標(biāo)本2次計(jì)數(shù)誤差要<10%。（十一）臨床意義生理變化：①新生兒<嬰兒，出生后3個(gè)月達(dá)成人水平;②晨間<午后，春季<冬季，毛細(xì)血管<靜脈;③運(yùn)動(dòng)、飽餐后上升，休息后恢復(fù);④月經(jīng)期低，經(jīng)期后上升;⑤妊娠中晚期，分娩后1~2天。病理變化1.plt減少：①生成障礙：急性白血病，再障，巨幼貧等②破壞過多：ITP、脾亢、SLE等；③消耗過多：DIC、血栓性血小板減少性紫癜④分布異常：脾腫大、血液被稀釋等；⑤先天性：新生兒plt減少癥、巨大plt綜合征2.plt增多：①原發(fā)性：慢粒、原發(fā)性plt增多癥、真性紅細(xì)胞增多癥等；②反應(yīng)性：急性化膿性感染、大出血、急性溶血、腫瘤等；③其他：外科手術(shù)后、脾切除等。2.血小板增高性疾?、賞lt

，而MPV:脾切除，慢粒等；②plt

，而MPV：嚴(yán)重感染。3.血栓前狀態(tài)或血栓性疾病時(shí)MPV常增高

五、血小板形態(tài)檢查形態(tài)檢查內(nèi)容血小板大小有無巨大血小板或小型血小板形態(tài)胞質(zhì)的顏色，顆粒有無、分布、粗細(xì)、空泡PLT分布(一)正常形態(tài)1.5~3μm，呈圓形、橢圓形、逗點(diǎn)形或不規(guī)則形；胞質(zhì)呈淡藍(lán)或粉紅，中心有若干細(xì)小紫紅色顆粒，無細(xì)胞核血片上3~5成群。血小板（血涂片）(二)異常形態(tài)

1、大小異常（1）大血小板：直徑4~7μm，巨型血小板直徑>7.5μm。見于ITP、巨大血小板綜合征、脾切除等。（2）小血小板：直徑<1.5μm，主要見于缺鐵貧、再障等。巨大血小板2.形態(tài)異常（1）幼稚形：顆粒少。（2）老年形:邊緣不規(guī)則，顆粒粗，呈離心分布，有空泡。（3）病理幼稚形：體積大，胞質(zhì)淡藍(lán)，幾乎無顆粒。（4）病理刺激形：體積增大，形態(tài)不一，胞質(zhì)呈淡藍(lán)/紫紅，顆粒多而大小一致。（5）退化形：大小、形態(tài)不一，有大空泡，無顆?；蝾w粒聚集。正常人異常plt<2%，異常plt>10%才有意義。（6）血小板衛(wèi)星現(xiàn)象：血小板粘附、圍繞于中性粒細(xì)胞（或偶爾粘附于單核細(xì)胞