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文檔簡介

1豬瘟病毒競爭磁微粒CLIA抗體檢測方法本文件適用于定量檢測豬血清中針對豬瘟病毒的特GB/T6682分析實(shí)驗室用水規(guī)格和試GB/T35906豬瘟抗體間接ELISANY/T541獸醫(yī)診斷樣品采集、保存與運(yùn)輸技術(shù)規(guī)范4符號和縮略語CLIA:化學(xué)發(fā)光免疫分析法（ChemiluminescenceImmunoassELISA:酶聯(lián)免疫吸附試驗（EnzymeLinkedImCSFV:豬瘟病毒（ClassicalSwineFeverV5.2磁微粒工作液（偶聯(lián)鏈霉親和素的磁性微粒）。5.5抗體工作液（吖啶酯標(biāo)記的CSFV單克隆抗體）。2于無菌血清管中，按照GB19489樣品處理的生物安全措施、實(shí)驗室生在一周內(nèi)檢測，可置2℃~8℃條件下保存，若超過一周檢測，應(yīng)置于-20℃以下冷凍保存。取8.1中的樣品，8000rpm，離心2min，取上清放于1.5mL尖底離心管中，體積應(yīng)檢；若樣品中存在沉淀或絮狀物等雜質(zhì)，應(yīng)離心39操作步驟9.1校準(zhǔn)曲線擬合將CSFV抗體工作校準(zhǔn)品1～工作校準(zhǔn)品6放入樣本架，按照99.2校準(zhǔn)曲線校準(zhǔn)9.4樣品檢測），整個檢測過程在全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀上進(jìn)行，具體檢測過9.5結(jié)果計算4檢測完成后，以工作校準(zhǔn)品抗體含量（3.125U、12.5U、50U、200U、800U、3200U）為橫坐標(biāo)、相應(yīng)檢測發(fā)光值為縱坐標(biāo)擬合四參數(shù)為標(biāo)準(zhǔn)曲線，四參數(shù)公式為Y=(a-d)/[1+(x/c)*b]+d，當(dāng)R2高抗體含量≥10U時，判為CSFV抗體陽5將表A.1中的試劑依次加入燒杯中，加滅菌蒸餾水至600mL，溶解，定容至1000mL，置于2～8℃按表A.2中的試劑依次加入燒杯中，加滅菌蒸餾水至600mL，溶解，6d后檢測抗體水平，如達(dá)不到要求，再進(jìn)行第三、四次免疫。抗體水平達(dá)到35906的豬瘟抗體間接ELISA檢測方法檢測抗體水平，以檢測樣本為陽性的最大7取B.1所制備的CSFV高免血清，用校準(zhǔn)品稀釋液稀釋至抗體含量為50U和800取B.1所制備的CSFV高免血清，用校準(zhǔn)品稀釋液稀釋至抗體含量為6.25U和20質(zhì)控品1和質(zhì)控品2，用CSFV抗體磁微?；瘜W(xué)發(fā)光免疫分析檢測方法檢測5次，計

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