(高清版)GBT 40220-2021 植物代謝產(chǎn)物大豆凝集素測定 酶聯(lián)免疫吸附法

ICSCCS07.080A40GB/T40220—2021植物代謝產(chǎn)物大豆凝集素測定酶聯(lián)免疫吸附法國家市場監(jiān)督管理總局國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)IGB/T40220—2021本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。本文件由全國生化檢測標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)(SAC/TC387)提出并歸口。本文件起草單位：江南大學(xué)、綠城農(nóng)科檢測技術(shù)有限公司、北京工商大學(xué)、北京薩姆伯科技有限公司。GB/T40220—2021植物代謝產(chǎn)物大豆凝集素測定酶聯(lián)免疫吸附法本文件規(guī)定了植物代謝產(chǎn)物大豆凝集素的酶聯(lián)免疫吸附測定方法。本文件適用于大豆及其制品中植物代謝產(chǎn)物大豆凝集素的測定。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法3術(shù)語和定義本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。4原理5試劑和材料5.2大豆凝集素：純度≥95%,CAS號(hào)為68513-95-1。5.3應(yīng)按照試劑盒說明書配制所需溶液。6儀器設(shè)備6.1小型粉碎機(jī)。6.3勻漿機(jī)。12GB/T40220—20216.7微孔板酶標(biāo)儀：帶450nm濾光片。6.8試劑盒所要求的儀器。7樣品的制備與保存稱取100g樣品，用小型粉碎機(jī)進(jìn)行粉碎，粉碎后的樣本過孔徑0.9mm分樣篩。裝入清潔密封容7.2半固態(tài)樣品制備7.3液態(tài)樣品制備8試驗(yàn)步驟8.1樣品前處理稱取1.00g制備的樣品，置于15mL具塞離心管中，加入試劑盒所要求提取液，按照試劑盒說明書所述方法進(jìn)行稀釋和檢測。8.2測定按照酶聯(lián)免疫試劑盒所述操作步驟對(duì)待測試樣(液)進(jìn)行定量檢測。8.3平行試驗(yàn)按以上步驟，對(duì)同一標(biāo)準(zhǔn)溶液、同一樣品溶液均應(yīng)進(jìn)行平行試驗(yàn)測定。除不稱取試樣外，均按上述步驟進(jìn)行。根據(jù)待測樣本中大豆凝集素的含量，選擇一個(gè)合適的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)，以確定試驗(yàn)過程的操作準(zhǔn)確性。9試驗(yàn)數(shù)據(jù)處理9.1酶聯(lián)免疫試劑盒定量檢測的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線繪制按照試劑盒說明書提供的計(jì)算方法或者軟件，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)量濃度與吸光度變化關(guān)系繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。9.2待測液質(zhì)量濃度計(jì)算按照試劑盒說明書提供的計(jì)算方法以及計(jì)算機(jī)軟件，將待測液吸光度代入9.1所獲得標(biāo)準(zhǔn)工作曲GB/T40220—20219.3結(jié)果計(jì)算樣品中大豆凝集素的含量按式(1)計(jì)算： (1)式中：X——樣品中大豆凝集素的含量，單位為微克每千克(μg/kg);p——從標(biāo)準(zhǔn)工作曲線上得到的樣品中大豆凝集素質(zhì)量濃度，單位為納克每毫升(ng/mL);V——樣本提取液體積，單位為毫升(mL);a——在前處理過程中的稀釋倍數(shù)；m——試樣的稱樣量，單位為克(g)。計(jì)算結(jié)果以重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的算術(shù)平均值表示，保留3位有效數(shù)字。10精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對(duì)差值不得超過算術(shù)平均值的20%。11準(zhǔn)確度本方法供酶聯(lián)免疫試劑盒測試的大豆凝集素溶液加標(biāo)濃度為100ng/mL時(shí)，平均回收率為76.2%~120.9%;當(dāng)供酶聯(lián)免疫試劑盒測試的大豆凝集素溶液加標(biāo)濃度為1000ng/mL時(shí)，平均回收率為82.7%～111.9%;當(dāng)供酶聯(lián)免疫試劑盒測試的大豆凝集素溶液加標(biāo)濃度為5000ng/mL時(shí)，平均回收率為89.4%～107.6%。當(dāng)稱取大豆、豆粕等固態(tài)和半固態(tài)樣本1.00g時(shí)，大豆凝集素的檢出限為300μg/kg,定量限為500μg/kg;當(dāng)稱取豆奶、豆?jié){等液態(tài)樣本1.00g