動物血液原蟲病病原檢查技術(shù)

動物血液原蟲病病原檢查技術(shù)一、試驗?zāi)康囊蟀盐談游镅涸x病的血液涂片技術(shù)和染色方法；正確推斷各種常見血液原蟲的形態(tài)特點。二、試驗器材〔一〕儀器設(shè)備生物顯微鏡〔帶油鏡鏡頭、載玻片、注射針頭、剪刀、染色缸〔二〕試劑姬姆薩氏染料、甘油、甲醇、香柏油〔三〕試驗動物雞〔四〕示教標(biāo)本伊氏錐蟲雙芽巴貝斯蟲環(huán)形泰勒蟲卡氏住白細(xì)胞蟲沙氏住白細(xì)胞蟲三、試驗方法、步驟和操作要領(lǐng)〔一〕姬姆薩氏染色液的配制姬姆薩氏染色液原液配方。姬姆薩氏染色粉 0.5g中性純甘油 25ml無水中性甲醇 25ml姬姆薩氏染色液原液配制過程。先將姬姆薩氏染色粉置研缽中，加少量甘油充分研磨，再加甘油再研磨，直至甘油全部加完為止。將其倒入棕色小口中，在研缽中參加少量甲醇以沖洗甘油染液，沖洗液仍倒入上述瓶中，25ml甲醇全部用完為止。塞緊瓶蓋，充分搖勻，而后將瓶置于6524h3～5d，并不時搖動，然后過濾到棕色小口中，即為原液。〔二〕血液涂片的制作及染色血液涂片的制作。薄片法〔適合于觀看紅細(xì)胞內(nèi)蟲體，如巴貝斯蟲。①用消毒注射針頭刺破雞的翅下靜脈。②用干凈載玻片的一端，從雞的翅下靜脈穿刺處接觸血滴外表，蘸取少量血液。③另取一塊邊緣光滑的載玻片，作為推片。先將此推片的一端置于血滴的前方，然后稍向后移，觸及血滴，使血液均勻分布于兩玻片之間，形成一線。30～45°角，平穩(wěn)地向前推動，使血液接觸面散布均勻，即成薄的血片。⑤抹片完成后，馬上置流淌空氣中枯燥，以防血球皺縮或裂開，并加甲醇固定，待干。厚滴法〔適合于觀看血漿內(nèi)蟲體，如伊氏錐蟲。1～2滴置干凈載玻片上。②用另一塊載玻片之角，將血滴涂散至直徑1cm即可。③置室溫中待其自行枯燥(1h之久，否則血膜附著不牢，染色時易脫)。④染色前先將血片置于蒸餾水中，使紅細(xì)胞溶解，血紅蛋白脫落，血膜呈灰白色為止，再進(jìn)展染色。血液涂片的染色過程。2min。10130min2∶110min。血片取出后，用干凈的水沖洗。待干鏡檢。〔16-1〕圖16-1 血液抹片的制作及染色流程圖四、試驗留意事項配制染色液時姬姆薩氏染料必需充分研磨。采血前先用酒精棉消毒待干，以免皮屑污染血片和酒精溶血。取血滴時必需在針頭刺破后流出的表層血液用玻片快速蘸取，以免血液凝固。留意在病畜消滅高溫期，未作藥物處理前采血，以提高蟲體檢出率。涂片時血膜不宜過厚，使紅細(xì)胞均勻分布于玻片上。血片必需充分枯燥后再用甲醇固定，以免血膜脫落。五、試驗報告如何制作染色效果好且無雜質(zhì)污染的血液涂片？試作分析、闡述。附：參考資料家畜常見血液原蟲的形態(tài)特征描述。伊氏錐蟲。伊氏錐蟲寄生于動物血漿內(nèi)，蟲體呈紡錘或柳葉狀，體長18～24μm，寬1～2μm。前端比后端更尖。經(jīng)姬姆薩染色后，蟲體呈淡藍(lán)色。在顯微鏡下可觀察以下幾局部構(gòu)造：①原生質(zhì)：淺藍(lán)色局部。②核：在蟲體中部呈紫紅色橢圓形。③副基體：在蟲體后端呈紫紅色的小圓點。④波動膜：在蟲體的一側(cè)呈波狀。⑤鞭毛：在蟲體后端，從付基體四周的毛基體開頭圍繞波動膜邊緣，直到蟲體的前端游離，呈瘦長鞭毛狀〔16-216-3〕16-216-21.核23.副基體4.生毛體56.空泡7.鞭毛16-3血液涂片中的錐蟲雙芽巴貝斯蟲。雙芽巴貝斯蟲寄生在紅細(xì)胞內(nèi)。蟲體較大，有梨形、環(huán)形、橢圓形、變形蟲形等。典型蟲體呈雙梨形，細(xì)的一端聯(lián)在一起成銳角排列。蟲體大于紅細(xì)胞半徑，經(jīng)姬姆薩染色后，原生質(zhì)淺藍(lán)色，邊緣較深，有二團(tuán)紫紅色的染色質(zhì)〔16-4〕圖圖16-4 血液涂片中的雙芽巴貝斯蟲環(huán)形泰勒蟲。環(huán)形泰勒蟲寄生在牛的淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞及紅細(xì)胞內(nèi)。配子體呈小環(huán)形，短棒狀或逗點狀。在每個紅細(xì)胞中通常有1～5個蟲體，大小為0.7～2.9μm，染色后原生質(zhì)呈淺藍(lán)色，染色質(zhì)呈紫紅色〔16-5〕裂殖體，又稱石榴體，有不同外形和大小，存在于淋細(xì)胞的胞漿中或淋巴液中。通?？煽吹綔\藍(lán)色的原生質(zhì)背景上有暗紫色數(shù)目不等的染色質(zhì)核〔16-6〕16-516-5泰勒蟲配子體圖16-6 泰勒蟲裂殖體〔石榴體〕家禽常見血液原蟲的形態(tài)特征描述?？ㄊ献“准?xì)胞蟲?？ㄊ献“准?xì)胞蟲配子體寄生在雞的血細(xì)胞內(nèi)。配子體剛侵入紅細(xì)胞時呈圓點狀或逗點，每個紅細(xì)胞內(nèi)可有～3蟲體〔圖16-。隨著蟲體的發(fā)育長大，紅細(xì)胞的胞漿及胞核萎縮消逝，配子體變?yōu)榻鼒A形，大小為15.5×15.0μｍ；有一紫紅色的核仁〔圖16-。圖16-7 卡氏住白細(xì)胞蟲第Ⅰ期配子體圖16-