第三章 紅細(xì)胞檢驗(yàn)

第三章紅細(xì)胞檢驗(yàn)

第一節(jié)紅細(xì)胞生理

第二節(jié)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)

第三節(jié)血紅蛋白測(cè)定

第四節(jié)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)和血紅蛋白測(cè)定的臨床意義

第五節(jié)網(wǎng)織紅細(xì)胞概述

第六節(jié)紅細(xì)胞比容測(cè)定

第七節(jié)紅細(xì)胞直徑測(cè)定

第八節(jié)計(jì)算紅細(xì)胞平均數(shù)

第九節(jié)紅細(xì)胞形態(tài)檢驗(yàn)

第十節(jié)點(diǎn)彩紅細(xì)胞檢驗(yàn)

學(xué)習(xí)目標(biāo)

1.概述紅細(xì)胞的生成、形態(tài)與功能以及血紅蛋白的結(jié)構(gòu)和吸收光譜。

2.敘述紅細(xì)胞顯微鏡計(jì)數(shù)原理、試劑、操作、計(jì)算、注意事項(xiàng)。

3.比較紅細(xì)胞計(jì)數(shù)和白細(xì)胞計(jì)數(shù)的異同。

4.概述紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的計(jì)數(shù)誤差及質(zhì)量控制。

第一節(jié)紅細(xì)胞生理

一、紅細(xì)胞的發(fā)育過程

二、紅細(xì)胞形態(tài)與功能

三、血紅蛋白結(jié)構(gòu)與吸收光譜

紅細(xì)胞的發(fā)育過程

造血干細(xì)胞

f早幼紅細(xì)胞一中幼紅細(xì)胞f晚幼紅細(xì)胞

f網(wǎng)織紅細(xì)胞一成熟紅細(xì)胞

一、紅細(xì)胞的發(fā)育過程

成熟紅細(xì)胞

120天

二、紅細(xì)胞的形態(tài)與功能

形態(tài)：雙凹圓盤狀；

直徑：6~9um,平均7.2Rm；

厚度：邊緣部分約2Hm,中央約1Hm

側(cè)面觀呈啞鈴形。

在高滲溶液中：

紅細(xì)胞皺縮，邊緣呈鋸齒狀；

在低滲溶液中：

紅細(xì)胞腫漲甚至破裂，血紅蛋白逸出后形成影細(xì)胞。

血涂片經(jīng)瑞特染色后，細(xì)胞呈粉紅色，中央著色較淡，有明顯的

中央淡染區(qū)，淡染區(qū)的直徑約占紅細(xì)胞直徑的1/3?2/5。

紅細(xì)胞主要成分

血紅蛋白和水（64%?70%）,其余成分為蛋白質(zhì)、磷脂、無機(jī)鹽和

酶。

功能：

1.運(yùn)輸02和CO2

2.調(diào)節(jié)酸堿平衡

3.免疫粘附

三、血紅蛋白結(jié)構(gòu)與吸收光譜

Hb的結(jié)構(gòu)：

Hb的分子量：64458o

1分子Hb：4個(gè)亞鐵血紅素，4個(gè)Fe,

可結(jié)合4個(gè)02。

ImolHb：4moiFe,可結(jié)合4moi02。

1克Hb：含3.47mgFe,結(jié)合1.39ml02。

在正常情況下，外周血中的血紅蛋白主要有：

氧合血紅蛋白(HbO2)

還原血紅蛋白(Hbred)

碳氧血紅蛋白(HbCO)

高鐵血紅蛋白(Hi或MHb)。

吸收光譜特征：

氧合血紅蛋白(HbO2)：呈鮮紅色，在578nm(黃色光)和540nm(綠

色光)處有兩條

吸收光帶。

還原血紅蛋白(Hbred)：呈暗紅色，在556nm(黃、綠色光之間)處

有一條吸收光

市o

碳氧血紅蛋白(HbCO)：呈櫻紅色，在572nm(黃色光)和535nm(綠

色光）處有兩

條吸收光帶。

高鐵血紅蛋白（Hi）：呈紅褐色，在634nm、578nm、540nm和500nm

處有4條吸收光

市o

第二節(jié)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)

原理

第二節(jié)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)

器材

稀釋液

甲醛枸椽酸鹽稀釋液

Hayem稀釋液

稀釋液

1.甲醛枸椽酸鹽稀釋液

成分功能

枸椽酸鈉抗凝、維持滲透壓

36%甲醛液防腐并固定紅細(xì)胞

氯化鈉維持滲透壓

蒸儲(chǔ)水

稀釋液

2.Hayem稀釋液

成分功能

氯化鈉調(diào)節(jié)滲透壓

硫酸鈉提高相對(duì)密度，防止細(xì)胞粘連

氯化高汞防腐劑

蒸儲(chǔ)水

操作

加稀釋液：2.0ml

I

采血：10UI

I

混勻

I

充液

I

靜貉：2?3min

操作

I

計(jì)數(shù)：高倍鏡下中央大方格

五個(gè)中方格的RBC

I

計(jì)算：

RBC/L=五個(gè)中方格的RBC

Z5Z10Z200Z106

報(bào)告：RBC：△.AAZ1012/L

請(qǐng)您練習(xí)

取稀釋液1.99ml,加血10口I,計(jì)數(shù)中央大格內(nèi)五個(gè)中方格紅細(xì)胞為500

個(gè)，請(qǐng)報(bào)告結(jié)果？

答案：

RBC=500=5Z10=200=106

=5.00Z1012/L

請(qǐng)您練習(xí)

取稀釋液2.0ml,加血20口I,計(jì)數(shù)中央大格內(nèi)10個(gè)中方格紅細(xì)胞為800

個(gè)，請(qǐng)報(bào)告結(jié)果？

答案：

RBC=800/10=25Z10=(2000+20)/20Z106

=2.02Z1012/L

壓線紅細(xì)胞的計(jì)數(shù)方法：

注意事項(xiàng)

1,血量要準(zhǔn)確。

2.稀釋液要過濾。

3.紅細(xì)胞計(jì)數(shù)池內(nèi)要分布均勻。

注意事項(xiàng)

4.實(shí)驗(yàn)器材應(yīng)清潔干燥。

5.自身凝集素增高者，宜用不含甲醛的枸椽酸鹽稀釋液。

6.同時(shí)做白細(xì)胞計(jì)數(shù)、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定，應(yīng)先取紅細(xì)胞計(jì)

數(shù)用血。

7.如實(shí)記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果，每次簽發(fā)報(bào)告前應(yīng)仔細(xì)核對(duì)。

計(jì)數(shù)誤差

1.技術(shù)誤差

同白細(xì)胞計(jì)數(shù)

白細(xì)胞數(shù)過高時(shí)應(yīng)進(jìn)行校正。

2.固有誤差

嚴(yán)重貧血的標(biāo)本，應(yīng)縮小稀釋倍數(shù)或擴(kuò)大計(jì)數(shù)

范圍。

質(zhì)量控制

1.兩差比值評(píng)價(jià)法

DR=--------------

質(zhì)量控制

2.變異系數(shù)評(píng)價(jià)法

|Xm-X|

V=----------------Z100

Xm

質(zhì)量得分=100-（2ZV）

目標(biāo)形成性檢測(cè)與校正

請(qǐng)您思考

紅細(xì)胞計(jì)數(shù)與白細(xì)胞計(jì)數(shù)方法上有哪些不同？

答案

（1）紅細(xì)胞稀釋液是等滲溶液而白細(xì)胞稀釋液是低滲溶液。pH也不

相同。

（2）紅細(xì)胞稀釋液不破壞細(xì)胞。

（3）稀釋倍數(shù)不同。

（4）選用計(jì)數(shù)池區(qū)域不同。

（5）計(jì)數(shù)域誤差大小不同。

思考題：

1.試著比較顯微鏡紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、白細(xì)胞計(jì)數(shù)、嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)的異

同。

2.常用紅細(xì)胞稀釋液由哪些成分配成，各有何作用？為什么有的患者

可致渾濁？該怎樣處理？

作業(yè)

1.測(cè)知一Hb含鐵量是416mg/L,氧結(jié)合量是16.68%,問含血紅蛋白

多少？

2.取紅細(xì)胞稀釋液1.98ml,加外周血20HI,混勻后充入計(jì)數(shù)池，計(jì)數(shù)

中央大

方格中5個(gè)中方格，平均每個(gè)中方格的紅細(xì)胞為80個(gè)，試報(bào)告該標(biāo)

本的RBC計(jì)數(shù)結(jié)果。

第三節(jié)血紅蛋白測(cè)定

一、氧化高鐵血紅蛋白測(cè)定

二、其他測(cè)定方法

學(xué)習(xí)目標(biāo)

敘述血紅蛋白HiCN法的原理、操作、注意事項(xiàng)。

說出HiCN轉(zhuǎn)化液的成分及作用。

概述十二烷基硫酸鈉.堿羥高鐵血紅素血紅蛋白測(cè)定方法。

復(fù)習(xí)舊課

HiCN的吸收光譜與Hi、HbO2、HbCO、Hbred等的吸收光譜有何不同？

第三節(jié)血紅蛋白測(cè)定

【定義】

Hb測(cè)定包括濃度測(cè)定和質(zhì)量測(cè)定。本單元是指測(cè)定血液中各種血紅蛋

白的總濃度，用g/L表示。

第三節(jié)血紅蛋白測(cè)定

【方法】

比密法

氧化高鐵血紅蛋白測(cè)定法

比色法十二烷基硫酸鈉法

堿羥高鐵血紅素法

血氧結(jié)合力法

全血鐵法

一、氟化高鐵血紅蛋白測(cè)定法

HiCN法：ICSH推薦

WHO確認(rèn)的參考方法

我國推薦為首選方法

一、氟化高鐵血紅蛋白測(cè)定法

原理

表面活性劑溶解紅細(xì)胞膜，釋放血紅蛋白。血紅蛋白被高鐵氟化鉀氧

化

一為高鐵血紅蛋白（Hi）,在一定的PH值下，Hi與鼠離子（C

N）結(jié)合生成穩(wěn)

定棕紅色氟化高鐵血紅蛋白（HiCN）。HiCN在540nm處有一吸

收峰，測(cè)定其吸光度，可求得血紅蛋白濃度（g/L）o

一、氟化高鐵血紅蛋白測(cè)定法

一、氟化高鐵血紅蛋白測(cè)定法

試齊U

文齊血紅蛋白轉(zhuǎn)化液

氟化鉀提供CN離子

高鐵氟化鉀氧化劑

無水磷酸二氫鉀調(diào)節(jié)pH

TritonX-100

（非離子表面活性劑）加速溶血、防止渾濁

蒸儲(chǔ)水

一、氟化高鐵血紅蛋白測(cè)定法

配成后用濾紙過濾，絡(luò)棕色玻瓶中（不能用塑料瓶?。?，塞緊后保存于

冷暗處，勿使結(jié)冰，可保存數(shù)月。

此液應(yīng)呈透明、淡黃色，pH在7.0?7.4之間，以蒸儲(chǔ)水作空白,

用540nm比色，吸光度應(yīng)＜0.001。若變渾、變綠或發(fā)生混濁則應(yīng)廢棄。

一、氟化高鐵血紅蛋白測(cè)定法

操作

1.取指血20口1,加入5ml轉(zhuǎn)化液中，充分混勻，靜絡(luò)5min。

2.用分光光度計(jì)（帶寬應(yīng)小于8um）比色。波長540nm,光徑（比

色杯內(nèi)徑）1.000cm,以轉(zhuǎn)化液或蒸儲(chǔ)水為空白，測(cè)定其吸光度“A”。

一、氟化高鐵血紅蛋白測(cè)定法

操作

加轉(zhuǎn)化液:5ml

I

采血：20UI

I

靜貉：混勻后放輅5min

I

比色：X=540nm,比色杯1.000cm,轉(zhuǎn)化液

（蒸儲(chǔ)水）為空白，測(cè)A值

一、氟化高鐵血紅蛋白測(cè)定法

【操作】

計(jì)算：分光光度計(jì)符合國際標(biāo)準(zhǔn)

一、氟化高鐵血紅蛋白測(cè)定法

【操作】

分光光度計(jì)不符合國際標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，結(jié)果不能直接計(jì)算得出，可采用的方

法為：

一、氟化高鐵血紅蛋白測(cè)定法

【操作】

⑴HiCN標(biāo)準(zhǔn)曲線制備

用HICN標(biāo)準(zhǔn)液在所用的分光光度計(jì)或光電比色計(jì)上，分別測(cè)定其吸

光度

（A）,以A為縱坐標(biāo)，血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液的參考值為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)

準(zhǔn)曲線，或求出K值，以后根據(jù)測(cè)定管吸光度即可在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出Hb

濃度值。

一、氟化高鐵血紅蛋白測(cè)定法

【操作】⑴標(biāo)準(zhǔn)曲線法

一、氟化高鐵血紅蛋白測(cè)定法

【操作】（2）K值法

一、氟化高鐵血紅蛋白測(cè)定法

專用血紅蛋白儀測(cè)定法

依據(jù)氟化高鐵血紅蛋白比色法的專用血紅蛋白儀，采用交流蠕動(dòng)泵自

動(dòng)進(jìn)液排液，流動(dòng)比色池微量比色，半導(dǎo)體冷光源及光電轉(zhuǎn)換器件，電子

線路采用模擬橋式光電轉(zhuǎn)換。信號(hào)經(jīng)處理放大，送至模/數(shù)轉(zhuǎn)換液晶顯示器,

直接顯示出所測(cè)血紅蛋白濃度值（g/L）。測(cè)試速度快，操作簡便，更適

合于臨床。

專用血紅蛋白儀測(cè)定法

操作

按說明調(diào)試好儀器。取全血20ul,加入5mlHICN轉(zhuǎn)換液中，混勻,

靜

貉5min,吸入儀器測(cè)定，待顯示屏上的數(shù)字穩(wěn)定不跳動(dòng)時(shí)，此讀數(shù)即

為該血樣的Hb值。

方法學(xué)評(píng)價(jià)

主要優(yōu)點(diǎn)：

1.操作簡便。

2.試劑較穩(wěn)定，易保存，測(cè)定結(jié)果穩(wěn)定。

3.血標(biāo)本中的血紅蛋白(除SHb外)在轉(zhuǎn)化液的作用下能迅速被轉(zhuǎn)

化為HiCN,且HiCN

穩(wěn)定便于測(cè)定。

4.HiCN參考品可長期保存，便于質(zhì)控。

方法學(xué)評(píng)價(jià)

缺點(diǎn)與不足：

1.試劑含劇毒品氧化鉀，使用、處理不當(dāng)可能污染環(huán)境，引起公害。

2.對(duì)碳氧血紅蛋白(HbCO)轉(zhuǎn)化太慢。

3.不能轉(zhuǎn)化硫化血紅蛋白(SHb)。

4.遇高白細(xì)胞和高球蛋白血癥的血標(biāo)本會(huì)出現(xiàn)渾濁，標(biāo)本或試劑應(yīng)

經(jīng)處理后才能

比色。

注意事項(xiàng)

1.可由指血直接測(cè)定，耳血結(jié)果偏高。靜脈血可按每毫升血

1.5mgEDTA二鈉的比例抗凝，不可用肝素抗凝（可致混濁）。

注意事項(xiàng)

2.有條件的單位應(yīng)校正分光光度計(jì)的波長準(zhǔn)確性、波長重復(fù)性、譜

帶半寬度（狹縫）。雜散光、光度線性和比色杯光徑。

注意事項(xiàng)

3.專用血紅蛋白儀、標(biāo)準(zhǔn)曲線或K值應(yīng)定期檢查、校正。專用血紅

蛋白儀零點(diǎn)漂移絕對(duì)值超過2g/L,需重新調(diào)零。分光光度計(jì)必須有良好

的線性才可用K值法。

注意事項(xiàng)

4.轉(zhuǎn)化液（文齊氏液）pH應(yīng)穩(wěn)定7.2十0.2,放絡(luò)在棕色硼硅有塞玻

璃瓶中，20℃室溫保存，冰箱保存穩(wěn)定時(shí)間更長，但勿使結(jié)冰，不然會(huì)使

K3Fe（CN）6失效。

-放白色瓶、塑料瓶和強(qiáng)光照射會(huì)使CN下降，結(jié)果偏低。

注意事項(xiàng)

5.轉(zhuǎn)化液中KCN是劇毒藥品，極不安全，也污染環(huán)境。這是HiCN

法的缺點(diǎn)。KCN必須按劇毒藥品管理規(guī)定保存，在配制和保存過程中應(yīng)提

高警惕，防止污染。用后廢液應(yīng)分散稀釋處理，或按每升加次氯酸鈉液35

m1混勻后敞開過夜，使CN一氧化成C02和N2。揮發(fā)后，再排入下水道。

注意事項(xiàng)

6.高丙種球蛋白血癥、變性血紅蛋白血癥和白細(xì)胞特高的病例都可

出現(xiàn)混濁，可于每升試劑中加氯化鈉15g甚至50g防止混濁。

但高濃度有核紅細(xì)胞所致混濁尚不能防止。

質(zhì)量控制

1.氟化高鐵血紅蛋白參考液的純度檢查：

1)波峰540nm,

波谷504nm；

2)A540/A504：1.59?1.63；

3)A710-800<0.002；

質(zhì)量控制

2、室內(nèi)質(zhì)量控制

將三種已知不同濃度的血紅蛋白參考液每日用HiCN法測(cè)定一次，連

續(xù)

20天；將結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理后，作質(zhì)控圖。

質(zhì)量控制

3.室間質(zhì)量控制

由臨檢中心發(fā)放質(zhì)控血紅蛋白液，各實(shí)驗(yàn)室分別測(cè)定其結(jié)果，經(jīng)統(tǒng)計(jì)

計(jì)算偏離指數(shù)、變異值后進(jìn)行評(píng)價(jià)。

二、其他測(cè)定方法

(―)十二烷基硫酸鈉血紅蛋白(SLS-Hb)測(cè)定法

原理

除SHb外，血液中各種血紅蛋白均可與十二烷基硫酸鈉作用，生成

SLS-Hb棕紅色化合物，SLS-Hb最大吸收峰538nm,波谷在500nm。由于其

摩爾吸光系數(shù)尚未確定，不能直接用吸光度換算Hb濃度。一般先用HiCN

法標(biāo)定新鮮血標(biāo)本，再用來制備本法的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

二、其他測(cè)定方法

（二）堿羥高鐵血紅素（AHD-575）法

原理

AHD試劑為非離子化去垢劑堿性溶液，能使血紅素、血紅蛋白及其衍

生物全部轉(zhuǎn)化為一種穩(wěn)定的堿性高鐵血紅素，在575nm處有一特征性的吸

收峰。

（三）方法學(xué)評(píng)價(jià)

SLS-Hb法操作簡便，呈色穩(wěn)定，試劑中不含KCN,無公害，準(zhǔn)確性和

精確性好，但SLS質(zhì)量差異較大，且試劑成分破壞白細(xì)胞，不能同時(shí)測(cè)定

白細(xì)胞數(shù)。AHD試劑簡單，不含有毒劑，呈色穩(wěn)定，對(duì)光不敏感，室溫中

能長期保存?？捎寐然t素作標(biāo)準(zhǔn)品，準(zhǔn)確度、精密度較高。但該法的

反應(yīng)產(chǎn)物的吸收峰位于575nm波長，自動(dòng)分析儀的選定波長多為540nm,

限制了此法在自動(dòng)分析儀上的應(yīng)用。

總結(jié)

比色分析的依據(jù)是郎伯一比爾定律

Al/A2=C1/C2

NiCN法具有主要優(yōu)點(diǎn)是：操作簡便、結(jié)果穩(wěn)定、試劑易保存、能測(cè)定

除硫化血紅蛋白（SHb）以外的所有血紅蛋白。因而是Hb測(cè)定的參考

方法?？偨Y(jié)

AHD-575法優(yōu)點(diǎn)是AHD試劑對(duì)光不敏感，放室溫中能長期保存，基

本

無毒性。

血液與AHD試劑混合后立即發(fā)生溶血，生成橄欖綠溶液色澤穩(wěn)定。

作業(yè)

1.概括HiCN測(cè)定的注意事項(xiàng)

2.為何HiCN與AHD-575測(cè)定計(jì)算公式不同？

第四節(jié)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)和血紅蛋白測(cè)定的臨床意義

一、參考區(qū)間

二、生理性變化

三、病理性變化

學(xué)習(xí)目標(biāo)

1.說出紅細(xì)胞計(jì)數(shù)和血紅蛋白測(cè)定的參考值

2.簡述紅細(xì)胞計(jì)數(shù)和血紅蛋白測(cè)定的生理變化

3.簡述紅細(xì)胞計(jì)數(shù)和血紅蛋白測(cè)定的病理變化

復(fù)習(xí)舊課

紅細(xì)胞的主要功能有哪些？

答案：

1.運(yùn)輸氣體（02、C02）；

2.維持酸堿平衡；

3.運(yùn)輸類脂、蛋白、激素、維生素、碳水化合物；

4.免疫粘附。

新課學(xué)習(xí)

紅細(xì)胞的主要成分是血紅蛋白，在正常增況下，每個(gè)紅細(xì)胞含有一定

量的血紅蛋白。隨著紅細(xì)胞的增多或減少，血紅蛋白含量也發(fā)生相應(yīng)

的變化，它們的臨床意義基本相同。

在貧血時(shí)，由于病因不同，紅細(xì)胞和血紅蛋白降低的程度并非完全平

行。

一、參考區(qū)間

血紅蛋白(g/L)紅細(xì)胞數(shù)(S1012/L)

成年男性131?1724.09?5.74

成年女性113—1513.68-5.13

新生兒180?1905.2?6.4

嬰兒110?1204.0?4.3

兒童120―1404.0~4.5

二、生理變化

1.年齡與性別的變化

二、生理變化

2.精神因素：紅細(xì)胞及血紅蛋白

3.劇烈的體育運(yùn)動(dòng)和勞動(dòng)：紅細(xì)胞及血紅蛋白

4.氣壓因素：氣壓低則紅細(xì)胞及血紅蛋白

5.妊娠因素：紅細(xì)胞及血紅蛋白

三、病理變化

(-)紅細(xì)胞和血紅蛋白病理性減少

1.造血原料不足或利用障礙：見于缺鐵性貧血；鐵粒幼細(xì)胞性貧血;

巨幼細(xì)胞性貧血等。

2.紅細(xì)胞丟失過多：各種原因?qū)е碌募?、慢性失血?/p>

三、病理變化

3.紅細(xì)胞壽命縮短：見于溶血性貧血。

4.促紅細(xì)胞生成素（EPO）分泌減少：慢性腎疾病所致的貧血。

5.造血功能障礙：見于再生障礙性貧血、白血病

三、病理變化

（二）紅細(xì)胞和血紅蛋白病理性增多

1.相對(duì)性增多血液濃縮，造成紅細(xì)胞和血紅蛋白濃度相對(duì)增高。

三、病理變化

2.絕對(duì)性增多指血漿容量不變，紅細(xì)胞和血紅蛋白的絕對(duì)值增加。

三、病理變化

（1）繼發(fā)性紅細(xì)胞生成增多：機(jī)體因長期缺氧，刺激促紅細(xì)胞生成

分泌增多，使紅細(xì)胞、血紅蛋白代償性增加，

（2）原發(fā)性紅細(xì)胞生成增多：機(jī)體并不缺氧，無促紅細(xì)胞生成素分

增加而紅細(xì)胞數(shù)量持續(xù)增多，見于真性紅細(xì)胞增多癥。

目標(biāo)形成性檢測(cè)與校正

1.細(xì)胞計(jì)數(shù)池結(jié)構(gòu)下列哪項(xiàng)不對(duì)：

A.池內(nèi)分九大格加蓋片后深度為0.1毫米

B.每個(gè)大方格長寬為1毫米

C.每個(gè)白細(xì)胞計(jì)數(shù)大格分為16個(gè)中方格

D.中央大格分25個(gè)中方格蓋片后每格體積0.04

E.中央大格分為400個(gè)小格

目標(biāo)形成性檢測(cè)與校正

2.縮小血細(xì)胞計(jì)數(shù)固有誤差唯一的方法是:

A.充液前充分混勻

B.提高操作熟練程度

C.提高鏡下識(shí)別能力

D.多進(jìn)行此項(xiàng)練習(xí)

E.擴(kuò)大計(jì)數(shù)范圍

目標(biāo)形成性檢測(cè)與校正

3.HiCN轉(zhuǎn)化液中KCN的作用：

A.溶血

B.氧化Hb為Hi

C.防腐

D.與Hi結(jié)合成HiCN

E.以上都不對(duì)

目標(biāo)形成性檢測(cè)與校正

4.指出與紅細(xì)胞不符合的：

A.平均直徑7.2um

B.主要成分磷脂，水

C.成熟后無細(xì)胞核

D.壽命3-4月

E.具有免疫粘附性

目標(biāo)形成性檢測(cè)與校正

5.除哪項(xiàng)外，均可引起RBC,Hb相對(duì)增高：

A.反復(fù)腹瀉

B.排汗過多

C.連續(xù)嘔吐

D.骨髓功能亢進(jìn)

E.大面積燒傷

目標(biāo)形成性檢測(cè)與校正

6.一種Hb衍生物是棕紅色，在540nm波長處有較寬的吸光帶,它是:

A.Hi

B.Hbred

C.HbCO

D.HbO2

E.HiCN

目標(biāo)形成性檢測(cè)與校正

7.引起RBC和Hb代償性增高的疾?。?/p>

A.肺氣腫

B.反復(fù)腹瀉

C.大面積燒傷

D.真紅

E.妊娠期

目標(biāo)形成性檢測(cè)與校正

8.某人細(xì)胞內(nèi)鐵含量為48.58mg/dL,其Hb含量應(yīng)為:

A.140g/L

B.130g/L

C.120g/L

D.110g/L

E.100g/L

目標(biāo)形成性檢測(cè)與校正

9.Hb屬于：

A.白蛋白

B.球蛋白

C.結(jié)合蛋白

D.纖維蛋白

E.酸性蛋白

目標(biāo)形成性檢測(cè)與校正

10.不符合正常成熟紅細(xì)胞形態(tài)特征是：

A.瑞特染色后呈粉紅色

B.兩面微凹的圓盤形

C.平均直徑7.2U

D.平均厚度2U

E.以上都不是

目標(biāo)形成性檢測(cè)與校正

11.不能轉(zhuǎn)化為HiCN的Hb的衍生物是:

A.HbO2

B.硫化血紅蛋白

C.Hbred

D.Hi

E.HbCO

目標(biāo)形成性檢測(cè)與校正

12.HICN測(cè)定，下述哪項(xiàng)有錯(cuò)：

A.波長為540千111171

B.轉(zhuǎn)化液透明淡黃色

C.將外血稀釋251倍

D.氟化鉀將Fe++>Fe+++

E.HbO2可轉(zhuǎn)化為HiCN

目標(biāo)形成性檢測(cè)與校正

13.對(duì)于HiCN的描述，有錯(cuò)的是：

A.為Hb衍生物

B.呈棕紅色

C.吸收峰在540nm

D.穩(wěn)定性較差

E.只有一較寬的吸收光帶

目標(biāo)形成性檢測(cè)與校正

14.下列哪種試劑可用于紅細(xì)胞稀釋液:

A.碳酸錢

B.碳酸氫鈉

C.氯化汞

D.鐵氟化鉀

E.以上都不行

目標(biāo)形成性檢測(cè)與校正

15.采用HiCN參考標(biāo)準(zhǔn)液是因?yàn)椋?/p>

A.儀器的差異

B.技術(shù)誤差

C.操作方便

D.快速

E.以上均不對(duì)

目標(biāo)形成性檢測(cè)與校正

16.對(duì)Hb的描述，除哪一條件，均正確:

A.由4條多肽鏈組成

B.為結(jié)合蛋白質(zhì)

C.含有4個(gè)Fe+++原子

D.每克含鐵3.47mg

E.每克結(jié)合氧1.39ml

目標(biāo)形成性檢測(cè)與校正

17.對(duì)于轉(zhuǎn)化液的要求，有錯(cuò)的是：

A.淡黃透明

B.貯存于棕色瓶

C.不能偏堿

D.不宜用塑料瓶裝

E.變深后不宜再用

目標(biāo)形成性檢測(cè)與校正

18.下述哪種試劑不能用于HiCN轉(zhuǎn)化液：

A.亞鐵氟化鉀

B.氟化鉀

C.磷酸二氫鉀

D.TritonX-100

E.O-P乳化劑

目標(biāo)形成性檢測(cè)與校正

19.關(guān)于RBC正確的是：

A.只需將血液稀釋

B.通常稀釋20倍

C.在鏡下計(jì)數(shù)四角大格

12D.報(bào)告：△.△△=10/L

E.計(jì)數(shù)域誤差較WBC大

目標(biāo)形成性檢測(cè)與校正

20.血細(xì)胞計(jì)數(shù)池充液后，數(shù)RBC用的中方格體積是:

A.0.4|11

B.0.1|11

C.0.04|11

D.0.01。

E.0.004pl

目標(biāo)形成性檢測(cè)與校正

21.RBC液（顯微鏡計(jì)數(shù)法）中最主要成分：

A.氯化鈉

B.硫酸鈉

C.氯化汞

D.氯化低汞

E.碳酸鈉

目標(biāo)形成性檢測(cè)與校正

22.除哪一條件，均可使RBC的結(jié)果偏高：

A.混入酵母菌

B.白細(xì)胞過高

C.管尖外血液未擦凈

D.稀釋液蒸發(fā)

E.血液凝固

目標(biāo)形成性檢測(cè)與校正

23.HiCN正確的是：

A.高濃度有核紅細(xì)胞混濁可加NaCl防止

B.OP乳化劑可代替TritonX-100

C.轉(zhuǎn)化液不能偏磴

D.轉(zhuǎn)化液用棕色瓶保存

再見！

第五節(jié)網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)

一、網(wǎng)織紅細(xì)胞概述

二、網(wǎng)織紅細(xì)胞顯微鏡計(jì)數(shù)

學(xué)習(xí)目標(biāo)

1.描述網(wǎng)織紅細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)

2.敘述網(wǎng)織紅細(xì)胞的計(jì)數(shù)方法和注意事項(xiàng)

3.闡述網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的臨床意義

一、網(wǎng)織紅細(xì)胞概述

（一）概念

網(wǎng)織紅細(xì)胞：是介于晚幼紅細(xì)胞和成熟紅細(xì)胞之間尚未完全成熟的紅

細(xì)胞，因其胞質(zhì)中殘存的核糖核酸經(jīng)堿性染料活體染色后呈現(xiàn)藍(lán)色點(diǎn)狀或

網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)?；铙w染色：是指細(xì)胞未經(jīng)固定，在保持細(xì)胞生物活性的

情況下加染料進(jìn)行染色的方法。

（二）分型及形態(tài)特征

I型：絲球型，無核紅細(xì)胞中央的嗜堿性物質(zhì)交織成密集的絲團(tuán)狀。

（-）分型及形態(tài)特征

II型：網(wǎng)型，無核紅細(xì)胞中央的絲團(tuán)狀結(jié)構(gòu)開始松散，呈疏松網(wǎng)眼狀

結(jié)構(gòu)排列。

（二）分型及形態(tài)特征

in型：破網(wǎng)型，網(wǎng)織狀結(jié)構(gòu)開始減少，形成殘破不全的網(wǎng)狀。

（二）分型及形態(tài)特征

IV型：點(diǎn)粒型，只有少數(shù)藍(lán)色點(diǎn)狀顆粒（兩個(gè)以上），或極小的網(wǎng)狀

殘余，散布于胞質(zhì)一側(cè)。

網(wǎng)織紅細(xì)胞

?|型絲球型

n型網(wǎng)型

m型破網(wǎng)型??

?iv型顆粒型

經(jīng)瑞特染色復(fù)染的網(wǎng)織紅細(xì)胞形態(tài)

二、網(wǎng)織紅細(xì)胞顯微鏡計(jì)數(shù)

原理

煌焦油藍(lán)、新亞甲藍(lán)和天青等染料都是雜蔥的衍生物，雖然取代基不

同，但都含有氨基，在水溶液中呈弱堿性，帶陽電荷，可與酸性基團(tuán)發(fā)生

電偶合，特別是與核酸分子中的磷酸基結(jié)合，使RNA膠體的電位發(fā)生變

化，分子間排斥力下降，

膠體分散力降低而凝集成藍(lán)色顆粒。

二、網(wǎng)織紅細(xì)胞顯微鏡計(jì)數(shù)

試齊U

1.10g/L新亞甲藍(lán)（或煌焦油藍(lán)）生理鹽水溶液

2.10g/L新亞甲藍(lán)ACD溶液

3.新亞甲藍(lán)染液

試齊I」

1,煌焦油藍(lán)溶液

煌焦油藍(lán)1.0g

枸椽酸鈉0.4g

氯化鈉0.85g

雙蒸水加至100m1

充分振蕩溶解，過濾后備用。

試齊I」

2.新亞甲藍(lán)溶液

新亞甲藍(lán)1g

枸椽酸鹽生理鹽水（30g/L枸椽酸鈉溶液1份，9g/L氯化鈉溶液4

份，混合

而成）100m1

待染料溶解后過濾備用。

試齊I」

3.天青B溶液

將新亞甲藍(lán)1g改為天青B1g,

其余與新亞甲藍(lán)溶液配制相同。

二、網(wǎng)織紅細(xì)胞顯微鏡計(jì)數(shù)

操作

加試劑：2滴

外周血：2滴

染色：混勻，37℃15-20min

制薄血片：取1滴制片，干燥后鏡檢

操作

1.試管法

（1）于小試管中加煌焦油藍(lán)溶液2滴?3滴，加外周血2滴?3滴，

混勻，塞

緊管口，室溫珞15min。

（2）取上述混勻的細(xì)胞懸液1滴，推制薄血片。

操作

（3）低倍鏡選擇細(xì)胞分布均勻、著色清晰的部位，于目鏡內(nèi)加一圓

形硬紙，中央開一約4mm=4mm方孔，油鏡計(jì)數(shù)1000個(gè)紅細(xì)胞

（包括網(wǎng)織紅細(xì)

胞）中網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)，除以1000,即得網(wǎng)織紅細(xì)胞分?jǐn)?shù)數(shù)（=10—3）。

二、網(wǎng)織紅細(xì)胞顯微鏡計(jì)數(shù)

1.直接計(jì)數(shù)法

油鏡下計(jì)數(shù)1000個(gè)紅細(xì)胞中的網(wǎng)織紅細(xì)胞一計(jì)算：

2.米勒窺盤法

窺盤為一直徑19mm,厚1mm的圓形玻片，玻片上用微細(xì)刻線劃出

大小兩個(gè)

正方形格子，圖中大方格B的面積是小方格A的9倍。

將Miller窺盤貉于目鏡內(nèi)，油鏡計(jì)數(shù)大方格內(nèi)的網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)，同時(shí)

計(jì)數(shù)小方格內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù)。然后移動(dòng)視野進(jìn)行同樣的觀察計(jì)數(shù)。

對(duì)壓線的紅細(xì)胞采取統(tǒng)一的計(jì)數(shù)原則：凡壓小方格下線、右線及右下

角的一律不計(jì)數(shù)；凡壓上線、左線及左上角的一律計(jì)數(shù)。凡壓大方格下線、

右線及右下角的網(wǎng)織紅細(xì)胞一律不計(jì)數(shù)；凡壓上線、左線及左上角的一律

計(jì)數(shù)。

注意

由于本法是用1/9面積推斷整個(gè)大方格內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù)，所以細(xì)胞分布

必

須很均勻，否則會(huì)得出錯(cuò)誤的結(jié)果。判斷方法及標(biāo)準(zhǔn)如下：

2.米勒窺盤法

當(dāng)小方格內(nèi)計(jì)數(shù)的紅細(xì)胞達(dá)到2111時(shí).，即相當(dāng)于至少觀察了1000個(gè)

紅細(xì)

胞，計(jì)錄在此過程中計(jì)數(shù)到的所有網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)。

請(qǐng)您練習(xí)

計(jì)數(shù)10個(gè)視野小方格中紅細(xì)胞數(shù)是120個(gè)，同時(shí)計(jì)數(shù)大方格中網(wǎng)織

紅細(xì)胞

總數(shù)為16個(gè)，如何報(bào)告結(jié)果？

解：

網(wǎng)織紅細(xì)胞％=16/(120Z9)=100

=1.5%

請(qǐng)您練習(xí)

計(jì)數(shù)10個(gè)視野小方格中紅細(xì)胞數(shù)是102個(gè)，同時(shí)計(jì)數(shù)大方格中網(wǎng)織

紅細(xì)

胞總數(shù)為15個(gè)，請(qǐng)報(bào)告網(wǎng)紅結(jié)果？

答案：

網(wǎng)織紅細(xì)胞％=15/（102=9）=100

=1.63%

1.網(wǎng)織紅細(xì)胞相對(duì)值：百分率或分?jǐn)?shù)數(shù)。

2.網(wǎng)織紅細(xì)胞絕對(duì)值：

12紅細(xì)胞濃度數(shù)（10/L）=網(wǎng)織紅細(xì)胞百分?jǐn)?shù)

3.網(wǎng)織紅細(xì)胞生成指數(shù)（RPI）:

網(wǎng)織紅細(xì)胞成熟時(shí)間與紅細(xì)胞比積的關(guān)系

__________________________________紅細(xì)胞比容（L/L）網(wǎng)

紅成熟時(shí)間（天）--------------------------

0.451

0.351.5

0.252

0.152.5

請(qǐng)您練習(xí)

己知一患者網(wǎng)紅分?jǐn)?shù)數(shù)為0.045,紅細(xì)胞比積為0.35,求網(wǎng)紅生成指

數(shù)是多少？解：查表得紅細(xì)胞比積為0.35時(shí)，網(wǎng)紅成熟時(shí)間為1.5

天，代入公式答案：

RPI=0.045/l.5=0.35/0.45

=0.023

注意事項(xiàng)

1.靜脈血標(biāo)本在4小時(shí)內(nèi)完成計(jì)數(shù)。

2.需活體染色。

3.血液與染液的比1：lo

注意事項(xiàng)

4.染色時(shí)間要充足，溫度應(yīng)控制在37℃。

5.涂片應(yīng)薄而均勻。

6.網(wǎng)織紅細(xì)胞偏低時(shí)可增加計(jì)數(shù)至2000?3000個(gè)。

7.瑞特染液復(fù)染或二甲苯擦血膜可使結(jié)果偏低。

臨床意義

1.正常參考值

網(wǎng)織紅細(xì)胞百分?jǐn)?shù)：

成人：0.005-0.015

新生兒:0.03—0.06

兒童：0.005?0.015

網(wǎng)織紅細(xì)胞絕對(duì)值：

成人：（24?84）Z109/L

臨床意義

2.臨床應(yīng)用

（1）判斷骨髓紅細(xì)胞系增生情況

網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)增加：增生性貧血。

網(wǎng)織紅細(xì)胞減少：再障、白血病等。

（2）觀察貧血療效的指標(biāo)

（3）監(jiān)測(cè)骨髓移植術(shù)后造血功能

（4）監(jiān)測(cè)腫瘤放、化療后骨髓抑制及其恢復(fù)情況

網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)增加

表示骨髓紅細(xì)胞系統(tǒng)增生旺盛，多見于各種增生性貧血。急性溶血性

貧血時(shí)，網(wǎng)織紅細(xì)胞顯著升高，其數(shù)值可達(dá)20%或更高。急性失血性貧血

也較明顯增高，缺鐵性貧血和巨幼細(xì)胞性貧血常僅輕度增高。骨髓受白血

病、癌腫等浸潤時(shí)也呈不規(guī)則輕度增加，此系病理刺激所致，并不反映骨

髓造血機(jī)能。

網(wǎng)織紅細(xì)胞減少

表示骨髓造血機(jī)能減退，常見于再生障礙性貧血，某些溶血性貧血發(fā)

生

再生障礙危象時(shí)可一過性明顯減少。

觀察貧血療效

缺鐵性貧血和巨幼細(xì)胞性貧血用鐵劑及維生素B12、葉酸治療后，網(wǎng)

紅

迅速增加，1周左右達(dá)到高峰。由于網(wǎng)紅增加先于紅細(xì)胞和血紅蛋白

增加，可用于療效評(píng)價(jià)。

作為骨髓造血功能恢復(fù)的敏感指標(biāo)

骨髓移植和造血系統(tǒng)惡性腫瘤化療后，血小板、中性粒細(xì)胞、白細(xì)胞

和網(wǎng)紅計(jì)數(shù)4項(xiàng)指標(biāo)在移植后恢復(fù)的天數(shù)以網(wǎng)紅計(jì)數(shù)出現(xiàn)的最早（13.7天）,

可作為造血功能恢復(fù)的早期指標(biāo)。

嗜多色性紅細(xì)胞

紅細(xì)胞中殘存的

嗜堿性物質(zhì)，在瑞特染色血片中，呈均勻分布，染灰藍(lán)、紅藍(lán)等，稱

為嗜多色性紅細(xì)胞。

二、儀器計(jì)數(shù)法

1.流式細(xì)胞儀（FCM）進(jìn)行網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)

FCM是高檔次的血細(xì)胞分析儀，是一種快速的單細(xì)胞定量分析儀器,

FCM同CT一樣，被認(rèn)為是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)中重要的診斷和科研工具。它可以測(cè)

量細(xì)胞的生化成分，如DNA、RNA、蛋白質(zhì)、各種股成分及各種酶活性等。

FCM測(cè)定網(wǎng)織紅細(xì)胞基本原理

某些染料（如Y咤橙）與網(wǎng)織紅細(xì)胞中的RNA結(jié)合，在FCM測(cè)定時(shí)

發(fā)出特定顏色的熒光，進(jìn)行單參數(shù)定量RNA。

不同階段的網(wǎng)織紅細(xì)胞RNA的含量不同，通過FCM可以精確的測(cè)定

網(wǎng)織紅細(xì)胞的百分率。

2.自動(dòng)網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)儀

測(cè)定原理

血液標(biāo)本計(jì)數(shù)前不經(jīng)固定和染色，標(biāo)本直接吸入儀器內(nèi)計(jì)數(shù)，以氫激

光束為光源，堿性槐黃0為染料與網(wǎng)織紅細(xì)胞內(nèi)的RNA結(jié)合，應(yīng)用鞘流原

理使網(wǎng)織紅細(xì)胞呈單行排列通過波長488nm的激光束，測(cè)量散射光強(qiáng)度判

斷細(xì)胞體積的大小，測(cè)量熒光強(qiáng)度顯示細(xì)胞內(nèi)RNA多少。

3.血細(xì)胞分析儀檢測(cè)網(wǎng)織紅細(xì)胞

將儀器轉(zhuǎn)換到網(wǎng)紅計(jì)數(shù)的操作程序，即可得到網(wǎng)紅絕對(duì)值、百分比、

平均體積、體積分布寬度、血紅蛋白濃度、平均血紅蛋白濃度、血紅蛋白

分布寬度及網(wǎng)紅分類等多項(xiàng)參數(shù)。

總結(jié)

網(wǎng)織紅細(xì)胞是尚未完全成熟的紅細(xì)胞，分為四型。正常人外周血中大

多是IV型（點(diǎn)粒型）。

傳統(tǒng)的網(wǎng)紅檢查方法是根據(jù)其胞質(zhì)內(nèi)殘存核糖體、核糖核酸等嗜堿性

物質(zhì)，經(jīng)新亞甲藍(lán)、煌焦油藍(lán)活體染色后而顯示出來。

總結(jié)

檢查網(wǎng)紅的目的是了解骨髓紅細(xì)胞系統(tǒng)的增生情況。以判斷貪血類型,

觀察貧血療效。因其數(shù)量變化十分敏感，可作為骨髓造血功能恢復(fù)的敏感

指標(biāo)。

正常成人參考值為0.005?0.015

想一想

說出HiCN法測(cè)定Hb的優(yōu)點(diǎn)和不足。

說出紅細(xì)胞及血紅蛋白病理性減少的原因。

什么是網(wǎng)織紅細(xì)胞？可分為幾型？

有何臨床應(yīng)用？

第六節(jié)血細(xì)胞比容測(cè)定

一、溫氏管法

二、毛細(xì)管法

三、臨床意義

學(xué)習(xí)目標(biāo)

說出紅細(xì)胞比容的測(cè)定原理、方法和臨床意義。

概括紅細(xì)胞直徑測(cè)定方法和直徑曲線變化的臨床意義。能夠計(jì)算紅

細(xì)胞平均值并分析臨床意義。

定義與方法

一、溫氏管法

原理

?

?

?

?定量抗凝血一溫氏管f離心f觀察壓實(shí)紅細(xì)胞高度f求得紅細(xì)

胞的容積/血液容積：即為Het。器材和試劑操作采血：靜脈血2ml,

EDTA-K2或肝素鈉抗凝I加樣：用細(xì)長毛細(xì)滴管將抗凝血加至比容管

刻度“10”處操作I

離心：RCF為2264g,時(shí)間為30min。

I

讀數(shù)：紅細(xì)胞層高度

操作

再離心：同樣RCF,lOmin

讀數(shù)：紅細(xì)胞層柱高度

計(jì)算：Het值

離心后的血液分五層

血漿層

血小板層

有核細(xì)胞層

還原紅細(xì)胞層

帶氧紅細(xì)胞層

注意事項(xiàng)

1.器材清潔干燥。

2.抗凝劑應(yīng)對(duì)紅細(xì)胞體積無影響且溶解迅速。

3.血漿若有黃疸、溶血現(xiàn)象應(yīng)注明。

4.離心條件必須恒定。

本試驗(yàn)要求的相對(duì)離心力是2264g,離心時(shí)間為30分鐘。

注意事項(xiàng)

相對(duì)離心力(RCF)g

=1.118X10-5=有效離心半徑(cm)

=每分鐘轉(zhuǎn)速的平方(n2)

有效離心半徑是指由離心機(jī)軸心至水平位貉時(shí)管底的距離(cm)。

例：有效離心半徑為22.5cm,要求RCF為2264g時(shí)，每分鐘離心速度

是：練習(xí)

某離心機(jī)有效半徑是15〃9cm,用作比積測(cè)定時(shí)其離心速度每秒

應(yīng)為多少轉(zhuǎn)?解:

亦可由相對(duì)離心力計(jì)算圖查出所需離心速度。

在左側(cè)找出離心半徑，右側(cè)找出每分鐘轉(zhuǎn)速，將兩點(diǎn)連成一條直線,

與中間相交的一點(diǎn)為相對(duì)離心力。

二、毛細(xì)管法

??原理

定量的抗凝血f特制的毛細(xì)管一高速離心機(jī)離心沉淀f觀察壓實(shí)的

紅細(xì)胞層的高度f求得每升血液中紅細(xì)胞與全血的容積比：即為Hcto

二、毛細(xì)管法

器材和試劑

1.專用高速離心機(jī)

2.一次性使用的專用毛細(xì)管

3.毛細(xì)管密封膠

4.刻度讀數(shù)器

5.抗凝劑：肝素或EDTA-K2

二、毛細(xì)管法

操作

準(zhǔn)備：抗凝劑處理毛細(xì)管

?I

?I

混勻吸血：血液吸入毛細(xì)管內(nèi)60?65mm處

?封口

二、毛細(xì)管法

操作

編號(hào)

I

離心：12000r/min,5min。

I

讀數(shù)：用刻度讀數(shù)器測(cè)量紅細(xì)胞比容的讀數(shù)I

計(jì)算

注意事項(xiàng)

1.末梢血采血應(yīng)防止混入組織液。

2.靜脈血標(biāo)本收集后擱絡(luò)時(shí)間不可超過6小時(shí)。

3.同一標(biāo)本的兩次測(cè)量結(jié)果之差不可大于0.015o

4.毛細(xì)管不能用燒熔的方法密封。

5.嚴(yán)格控制離心條件。

6.讀數(shù)應(yīng)盡量避免視差，不能將白細(xì)胞和血小板層的高度算入

三、臨床意義

正常參考值

成年男性0.380?0.508L/L

成年女性0.335?0.450L/L

兒童0.35—0.49L/L

新生兒0.49?0.54L/L

微量法較溫氏法平均低1%?2%

臨床意義

1.紅細(xì)胞比容增高

⑴生理性增高：見于紅細(xì)胞生理性增多的情況。⑵病理性增高：

見于真性紅細(xì)胞增多癥、血液濃縮。臨床意義

2.紅細(xì)胞比容減低見于各種貧血時(shí)。

3.紅細(xì)胞比容可作為計(jì)算靜脈補(bǔ)液量的指標(biāo)。

4.紅細(xì)胞比容可用于紅細(xì)胞平均值中的計(jì)算。

5.紅細(xì)胞比容可作為判斷全血粘度的指標(biāo)。

臨床意義

通過比容測(cè)定可決定是否需要靜脈輸液及輸液量。

例：一男性腹瀉病人測(cè)得HCT為0.62L/L（62%）,問每升血容量應(yīng)補(bǔ)

液多少升？

解：由0.62=0.49（1+X）得

補(bǔ)液量=0.62/0.49-1

=0.26（升）

總結(jié)

1.紅細(xì)胞比容測(cè)定，是將定量的抗凝血貉于比積管中，用一定速度（相

對(duì)離

心力2246g）和時(shí)間（30min）離心沉淀，由此獲得壓實(shí)紅細(xì)胞和上層

血漿體積的比值的測(cè)定方法。

2.所用抗凝劑不能影響和改變紅細(xì)胞體積。

總結(jié)

3.離心條件要恒定。離心半徑不同的離心機(jī)轉(zhuǎn)速應(yīng)測(cè)算確定。

4.讀取紅細(xì)胞層的柱高以還原紅細(xì)胞層表面為準(zhǔn)，其毫米數(shù)乘以0.01,

即為

每升血液中紅細(xì)胞體積的升數(shù)，以L/L為單位報(bào)告結(jié)果。

總結(jié)

5.HCT參考值隨性別和年齡有一定變化幅度。

6.HCT主要用于診斷貧血和判斷貧血類型，了解血液粘度，輸液時(shí)確

定

劑量等。

第七節(jié)紅細(xì)胞直徑測(cè)量

一、測(cè)微計(jì)的校正

二、紅細(xì)胞直徑的測(cè)量方法

三、臨床意義

一、測(cè)微計(jì)的校正

（一）測(cè)微計(jì)的組成

1.目鏡測(cè)微計(jì)

為一個(gè)直徑18?20mm,圓形玻璃片，中央刻有精確等距離的平行線

刻度，一般有50或100等分格。

2.鏡臺(tái)測(cè)微計(jì)

是一種特制的載玻片，正中有一圓形蓋片封有標(biāo)準(zhǔn)尺，總長為1mm,

被

劃分為100等分，每一小格長為10Um。

（二）目鏡測(cè)微計(jì)的校正

1.將目鏡測(cè)微計(jì)有刻度一面向下裝入目鏡筒。

2.將鏡臺(tái)測(cè)微計(jì)有刻度一面朝上放在載物臺(tái)上夾好，使標(biāo)準(zhǔn)尺位于視

野中央。

（二）目鏡測(cè)微計(jì)的校正

3.換用測(cè)量被測(cè)物所用的物鏡頭。

4.使兩種測(cè)微計(jì)的刻度平行，先使左邊的“0”刻度重合，然后由左

向

右找出尋找另一次重合的刻度。

5.記錄兩刻度的讀數(shù)，并根據(jù)比值計(jì)算出在此條件下目鏡測(cè)微計(jì)每小

格

所相當(dāng)?shù)拈L度（um）o

（二）目鏡測(cè)微計(jì)的校正

二、紅細(xì)胞直徑測(cè)量方法

紅細(xì)胞直徑測(cè)量：即在顯微鏡下用專用的測(cè)微計(jì)測(cè)量一定數(shù)量的紅細(xì)

胞直徑。根據(jù)測(cè)得直徑數(shù)據(jù)，可計(jì)算出紅細(xì)胞平均直徑，繪制紅細(xì)胞

直徑分布曲線（Price-Jones曲線），從而了解紅細(xì)胞大小的變化，可判斷紅

細(xì)胞形態(tài)有無改變，從而對(duì)貧血類型的鑒別有一定的意義。

原理

用已經(jīng)校正目鏡測(cè)微計(jì)，在顯微鏡下測(cè)量一定數(shù)量紅細(xì)胞的直徑。求

出紅細(xì)胞的平均直徑（MCD）,并繪制紅細(xì)胞直徑曲線。

【操作】

制備薄血片

選擇合適區(qū)域

I

測(cè)量紅細(xì)胞直徑：200?500個(gè)

I

計(jì)算平均直徑

I

繪制P-J曲線

P-J曲線

注意事項(xiàng)

1.血片要求厚薄均勻，較白細(xì)胞分類血片略薄，紅細(xì)胞無重疊和皺縮

變

形。

2.應(yīng)依次測(cè)量紅細(xì)胞直徑，不可任意取舍，對(duì)異形紅細(xì)胞，應(yīng)測(cè)量其

長.短徑，取其平均值。

3.目鏡測(cè)微計(jì)一經(jīng)校正，就不得更換物鏡。

4.鏡臺(tái)測(cè)微計(jì)的標(biāo)準(zhǔn)尺因油鏡放大而成粗線，目鏡測(cè)微計(jì)放大倍數(shù)較

小而呈細(xì)線，細(xì)線重合在粗線上的位絡(luò)應(yīng)前后一致。

三、臨床意義

1.正常人及正常細(xì)胞性貧血紅細(xì)胞直徑曲線特征紅細(xì)胞直徑范圍在

6.0~9.0Um之間，平均直徑7.2口m左右；曲線頂峰在7?8口m之間,

基底部窄，呈尖峰狀。

三、臨床意義

2.大細(xì)胞性貧血紅細(xì)胞直徑曲線特征紅細(xì)胞直徑增大，MCD7.4-

9.6um,曲線頂峰右移，基底部明顯增寬，多見于巨幼細(xì)胞性貧血等。

三、臨床意義

3.小細(xì)胞素性貧血紅細(xì)胞直徑曲線特征紅細(xì)胞直徑減少，MCD6.2?

6.7

口m,曲線頂峰左移，基底部增寬。見于缺鐵性貧血和單純小細(xì)胞性

貧血等。

第八節(jié)計(jì)算紅細(xì)胞平均值

一、平均紅細(xì)胞體積

二、平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量

三、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度

四、臨床意義

一、平均紅細(xì)胞體積

平均紅細(xì)胞體積（MCV）：

是指每個(gè)紅細(xì)胞的平均體積。以飛升（f|）為單位，lL=1015fl。

二、平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量

平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量（MCH）：

是指每個(gè)紅細(xì)胞內(nèi)所含血紅蛋白的平均量。以皮克（pg）為單位，1g

=1012pg

三、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度

平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度（MCHC）：

是指平均每升紅細(xì)胞中所含血紅蛋白濃度（g/L）o

四、臨床意義

貧血類型MCV(fl)MCH(pg)MCHC(g/L)

正常細(xì)胞性貧血正常正常正常

大細(xì)胞性貧血＞正常＞正常正常

單純小細(xì)胞性

貧血（正?！凑Ｕ?/p>

小細(xì)胞低色素

性貧血（正常（正?！凑?/p>

例題

12紅細(xì)胞3.6=10/L,紅細(xì)胞比積0.393L/L,求MCV并判斷是否

正常。

解：

1512MCV=0.392=10/3.6=10

=109（fL）

答：由于結(jié)果＞92fL,不正常。

例題

紅細(xì)胞3.6=1012/L。血紅蛋白136g/L。求MCH并判斷結(jié)果正

常與否？解：

MCH=136=1012/3.6=1012

=38pg

答:計(jì)算結(jié)果＞31pg,不在正常范圍內(nèi)

例題

血紅蛋白136g/L,紅細(xì)胞比積0.392L/L,求MCHC并判斷結(jié)果是否正

常？解：

MCHC=136/0.392

=347g/L

答：計(jì)算結(jié)果在正常范圍內(nèi)。

綜合練習(xí)

己知一患者的紅細(xì)胞為4.1=1012/L；血紅蛋白為128g/L；紅細(xì)胞比積

為

0.39L/L,求紅細(xì)胞的三個(gè)平均值是多少？

答案：

MCV=0.39Z1015/4.1Z1012

=95fL

1212MCH=128=10/4.1Z10

=31.22pg

MCHC=128/0.39

=328g/L

注意

在正常細(xì)胞性貧血時(shí)，其紅細(xì)胞平均直徑及其曲線圖形與正常相同。

想一想

比較紅細(xì)胞比容測(cè)定的兩種方法?

如何校正目鏡測(cè)微計(jì)?

如何根據(jù)紅細(xì)胞數(shù)、血紅蛋白量和紅細(xì)胞比容計(jì)算紅細(xì)胞平均值?

如何根據(jù)紅細(xì)胞平均值判斷貧血的類型？

目標(biāo)形成性檢測(cè)與校正

1.紅細(xì)胞的三個(gè)平均值（MCV、MCH、MCHC）是依據(jù)RBC、Hb、HCT

數(shù)據(jù)按一定方式計(jì)

算出來的。根據(jù)三個(gè)平均值可將貧血按形態(tài)學(xué)改變分成（

）四種類型。

目標(biāo)形成性檢測(cè)與校正

2.MCV通過（）計(jì)算單位是（）參考值

（），增大示紅細(xì)胞（）o

目標(biāo)形成性檢測(cè)與校正

3.MCH通過（）計(jì)算，單位是

）,

參考值是（）,增加示紅細(xì)胞中

）,

常與平均值中的（）變化相同。

目標(biāo)形成性檢測(cè)與校正

4.MCHC通過（）計(jì)算，單位是（），

參考值為（

)o

）o減小示紅細(xì)胞呈（

目標(biāo)形成性檢測(cè)與校正

5.由紅細(xì)胞直徑測(cè)定數(shù)據(jù)繪制的曲線叫（

）0橫軸是紅細(xì)胞的

（）,縱軸是紅細(xì)胞的百分率。正

常人曲線頂峰在（

）之間。巨幼紅細(xì)胞性貧血時(shí)，曲線頂峰將

（）,基底部明顯（）o

第九節(jié)紅細(xì)胞形態(tài)檢驗(yàn)

一、紅細(xì)胞大小異常

二、紅細(xì)胞形態(tài)異常

三、紅細(xì)胞染色異常

四、紅細(xì)胞結(jié)構(gòu)異常

學(xué)習(xí)目標(biāo)

1.描述異常紅細(xì)胞的形態(tài)特點(diǎn)

2.描述點(diǎn)彩紅細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)

3.概述異常紅細(xì)胞的主要臨床意義

正常成熟紅細(xì)胞為兩面微凹的圓盤形，平均直徑7.2口m,厚約2Rm,

無核，經(jīng)瑞特染色后，紅細(xì)胞呈粉紅色，邊緣較深，中央著色較淡。

各種貧血患者，紅細(xì)胞形態(tài)和著色有不同程度的改變，觀察成熟紅細(xì)

胞形態(tài)，有助于貧血的診斷和鑒別診斷。

成熟紅細(xì)胞的形態(tài)改變，常見以下幾種類型。

、大小異常

1.小紅細(xì)胞

直徑小于611m稱小紅細(xì)胞，正常人偶見。出現(xiàn)較多中央淡染區(qū)擴(kuò)大

的小紅

細(xì)胞，提示血紅蛋白合成減少，多見于缺鐵性貧血。

一、大小異常

2.大紅細(xì)胞

直徑大于10nm稱為大紅細(xì)胞，有時(shí)中央淡染區(qū)不明顯，見于巨幼細(xì)

胞性貧血。

一、大小異常

3.巨紅細(xì)胞

直徑大于15Um者稱巨紅細(xì)胞，常見于巨幼細(xì)胞性貧血。肝臟疾病等。

一、大小異常

4.紅細(xì)胞大小不均

紅細(xì)胞之間直徑相差一倍以上者稱為紅細(xì)胞大小不均，常見于增生性

貧血及巨幼細(xì)胞性貧血。

二、