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階段檢測練選擇性必修3生物技術(shù)與工程時間:45min一、選擇題(每題只有一個選項符合題意)1.(2021湖北,3,2分)中國的許多傳統(tǒng)美食制作過程蘊含了生物發(fā)酵技術(shù)。下列敘述正確的是()A.泡菜制作過程中,酵母菌將葡萄糖分解成乳酸B.饅頭制作過程中,酵母菌進(jìn)行呼吸作用產(chǎn)生CO2C.米酒制作過程中,將容器密封可以促進(jìn)酵母菌生長D.酸奶制作過程中,后期低溫處理可產(chǎn)生大量乳酸桿菌答案B2.(2021浙江6月選考,20,2分)采用CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)可將增強型綠色熒光蛋白(EGFP)基因定點插入受精卵的Y染色體上,獲得轉(zhuǎn)基因雄性小鼠。該轉(zhuǎn)基因小鼠與野生型雌性小鼠交配,通過觀察熒光可確定早期胚胎的性別。下列操作錯誤的是()A.基因編輯處理的受精卵在體外培養(yǎng)時,不同發(fā)育階段的胚胎需用不同成分的培養(yǎng)液B.基因編輯處理的受精卵經(jīng)體外培養(yǎng)至2細(xì)胞期,須將其植入同期發(fā)情小鼠的子宮,才可獲得表達(dá)EGFP的小鼠C.分離能表達(dá)EGFP的胚胎干細(xì)胞,通過核移植等技術(shù)可獲得大量的轉(zhuǎn)基因小鼠D.通過觀察早期胚胎的熒光,能表達(dá)EGFP的即為雄性小鼠胚胎答案B3.(2023福建廈門二模,8)野生型大腸桿菌菌株能在基本培養(yǎng)基上生長,賴氨酸營養(yǎng)缺陷型突變菌由于發(fā)生基因突變只能在添加了賴氨酸的培養(yǎng)基上生長。如圖為以野生型菌株為材料,誘變、純化賴氨酸營養(yǎng)缺陷突變株的部分流程圖,數(shù)字代表培養(yǎng)基,A、B、C表示操作步驟。下列有關(guān)說法正確的是()A.野生型大腸桿菌能夠合成所需的全部氨基酸,因此培養(yǎng)基中無需提供氮源B.①②④培養(yǎng)基中需添加賴氨酸,而③培養(yǎng)基中不能添加賴氨酸C.需將①中的菌液適當(dāng)稀釋后,用接種環(huán)蘸取菌液在②上進(jìn)行劃線接種D.從④培養(yǎng)基中挑取乙菌落進(jìn)行純化培養(yǎng)即可獲得所需突變株答案B4.(2024屆江蘇南通海安中學(xué)階段檢測,13)某學(xué)校生物研究小組以蝴蝶蘭為材料開展了植物組織培養(yǎng)實驗,過程如圖。相關(guān)敘述錯誤的是()A.取帶芽花梗作外植體,是因為芽可產(chǎn)生生長素而更易成活B.過程c、d和e使用的培養(yǎng)基中所含的物質(zhì)種類及比例存在差異C.花梗插入培養(yǎng)基前要用無水酒精和次氯酸鈉進(jìn)行消毒處理D.過程f“煉苗”是由于試管苗長得弱小,光合能力弱,適應(yīng)性差答案C5.(2024屆濰坊聯(lián)考,10)“神舟十五”飛船帶回了在太空微重力環(huán)境下進(jìn)行的多能干細(xì)胞向早期造血干細(xì)胞分化的研究樣品,首次實現(xiàn)了人類干細(xì)胞“太空造血”。在太空培養(yǎng)的干細(xì)胞呈現(xiàn)出優(yōu)于地面的生長方式,在微重力環(huán)境中干細(xì)胞的體外培養(yǎng)更接近于胚胎內(nèi)干細(xì)胞的增殖與分化。下列有關(guān)干細(xì)胞的說法錯誤的是()A.隨著干細(xì)胞傳代次數(shù)的增加,細(xì)胞全能性逐漸升高B.多能干細(xì)胞分化的實質(zhì)是基因的選擇性表達(dá),使細(xì)胞種類增多C.自體細(xì)胞誘導(dǎo)的干細(xì)胞在器官移植和再生上可有效避免免疫排斥反應(yīng)D.太空的微重力環(huán)境能為增強干細(xì)胞誘導(dǎo)分化效率提供新途徑答案A6.(2023湖北武漢華中師大附中適應(yīng)性考試,14)DC-CIK免疫療法是利用樹突狀細(xì)胞(DC)和殺傷細(xì)胞(CIK)治療腫瘤的免疫治療技術(shù),其中DC和CIK均由患者外周血單個核細(xì)胞(PBMC)在體外誘導(dǎo)培養(yǎng)產(chǎn)生,流程如圖。下列敘述錯誤的是()A.DC和CIK的DNA相同,mRNA不同B.培養(yǎng)DC時,會發(fā)生接觸抑制C.用于誘導(dǎo)的細(xì)胞因子是免疫活性物質(zhì),只能從免疫細(xì)胞中獲取D.DC和CIK混合培養(yǎng)的目的是利用DC促進(jìn)CIK成熟答案C二、選擇題(每題有一個或多個選項符合題意)7.【新情境】(2023菏澤三模,20)PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針,該探針兩端分別標(biāo)記一個報告熒光基團(tuán)(Q蛋白質(zhì))和一個淬滅熒光基團(tuán)(R蛋白質(zhì))。開始時,探針完整地結(jié)合在DNA任意一條單鏈上,報告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號被淬滅基團(tuán)吸收,檢測不到熒光信號;當(dāng)TaqDNA聚合酶催化子鏈延伸至探針R處,會水解淬滅熒光基團(tuán),熒光監(jiān)測系統(tǒng)從而可接收到熒光信號,即每擴增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物形成的完全同步。下列相關(guān)敘述正確的是()A.引物、探針和模板三者之間通過堿基互補配對相互結(jié)合B.TaqDNA聚合酶催化DNA的合成方向總是從子鏈的5'端向3'端延伸C.PCR產(chǎn)物的量與熒光信號的累積呈正相關(guān)D.報告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)的組成單位是脫氧核苷酸答案BC三、非選擇題8.(2020江蘇,31,8分)產(chǎn)脂肪酶酵母可用于含油廢水處理。為篩選產(chǎn)脂肪酶酵母菌株,科研人員開展了相關(guān)研究。請回答下列問題:(1)常規(guī)微生物實驗中,下列物品及其滅菌方法錯誤的是(填編號)。
編號①②③④物品培養(yǎng)基接種環(huán)培養(yǎng)皿涂布器滅菌方法高壓蒸汽火焰灼燒干熱臭氧(2)稱取1.0g某土壤樣品,轉(zhuǎn)入99mL無菌水中,制備成菌懸液,經(jīng)后,獲得細(xì)胞密度不同的菌懸液。分別取0.1mL菌懸液涂布在固體培養(yǎng)基上,其中10倍稀釋的菌懸液培養(yǎng)后平均長出了46個酵母菌落,則該樣本中每克土壤約含酵母菌個。
(3)為了進(jìn)一步提高酵母菌產(chǎn)酶能力,對分離所得的菌株,采用射線輻照進(jìn)行育種。將輻照處理后的酵母菌涂布在以為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上,培養(yǎng)一段時間后,按照菌落直徑大小進(jìn)行初篩,選擇直徑的菌落,純化后獲得A、B兩突變菌株。
(4)在處理含油廢水的同時,可獲得單細(xì)胞蛋白,實現(xiàn)污染物資源化。為評價A、B兩菌株的相關(guān)性能,進(jìn)行了培養(yǎng)研究,結(jié)果如圖。據(jù)圖分析,應(yīng)選擇菌株進(jìn)行后續(xù)相關(guān)研究,理由是。
答案(1)④(2)梯度稀釋4.6×105(或460000)(3)誘變脂肪(或油脂)較大(4)B該菌株增殖速度快,單細(xì)胞蛋白產(chǎn)量高;降解脂肪能力強,凈化效果好9.(2021天津,16,12分)乳酸菌是乳酸的傳統(tǒng)生產(chǎn)菌,但耐酸能力較差,影響產(chǎn)量。釀酒酵母耐酸能力較強,但不產(chǎn)生乳酸。研究者將乳酸菌的乳酸脫氫酶基因(LDH)導(dǎo)入釀酒酵母,獲得能產(chǎn)生乳酸的工程菌株。圖1為乳酸和乙醇發(fā)酵途徑示意圖,圖2為構(gòu)建表達(dá)載體時所需的關(guān)鍵條件。圖1圖2(1)乳酸脫氫酶在轉(zhuǎn)基因釀酒酵母中參與厭氧發(fā)酵的場所應(yīng)為。
(2)獲得轉(zhuǎn)基因釀酒酵母菌株的過程如下:①設(shè)計引物擴增乳酸脫氫酶編碼序列。為使擴增出的序列中編碼起始密碼子的序列由原核生物偏好的GTG轉(zhuǎn)變?yōu)檎婧松锲玫腁TG,且能通過雙酶切以正確方向插入質(zhì)粒,需設(shè)計引物1和2。其中引物1的5'端序列應(yīng)考慮和。
②將上述PCR產(chǎn)物和質(zhì)粒重組后,導(dǎo)入大腸桿菌,篩選、鑒定,擴增重組質(zhì)粒。重組質(zhì)粒上有,所以能在大腸桿菌中擴增。啟動子存在物種特異性,易被本物種的轉(zhuǎn)錄系統(tǒng)識別并啟動轉(zhuǎn)錄,因此重組質(zhì)粒上的乳酸脫氫酶編碼序列(能/不能)在大腸桿菌中高效表達(dá)。
③提取重組質(zhì)粒并轉(zhuǎn)入不能合成尿嘧啶的釀酒酵母菌株,在的固體培養(yǎng)基上篩選出轉(zhuǎn)基因釀酒酵母,并進(jìn)行鑒定。
(3)以葡萄糖為碳源,利用該轉(zhuǎn)基因釀酒酵母進(jìn)行厭氧發(fā)酵,結(jié)果既產(chǎn)生乳酸,也產(chǎn)生乙醇。若想進(jìn)一步提高其乳酸產(chǎn)量,下列措施中不合理的是(單選)。
A.進(jìn)一步優(yōu)化發(fā)酵條件B.使用乳酸菌LDH基因自身的啟動子C.敲除釀酒酵母的丙酮酸脫羧酶基因D.對轉(zhuǎn)基因釀酒酵母進(jìn)行誘變育種答案(1)細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)(2)①包含BamHⅠ的識別序列將GTG改為ATG②原核生物復(fù)制原點不能③缺失尿嘧啶(3)B10.(2021遼寧,24,10分)PHB2蛋白具有抑制細(xì)胞增殖的作用。為初步探究某動物PHB2蛋白抑制人宮頸癌細(xì)胞增殖的原因,研究者從基因數(shù)據(jù)庫中獲取了該蛋白的基因編碼序列(簡稱phb2基因),大小為0.9kb(1kb=1000堿基對),利用大腸桿菌表達(dá)該蛋白。回答下列問題:(1)為獲取phb2基因,提取該動物肝臟組織的總RNA,再經(jīng)過程得到cDNA,將其作為PCR反應(yīng)的模板,并設(shè)計一對特異性引物來擴增目的基因。
(2)圖1為所用載體圖譜示意圖,圖中限制酶的識別序列及切割位點見表。為使phb2基因(該基因序列不含圖1中限制酶的識別序列)與載體正確連接,在擴增的phb2基因兩端分別引入和兩種不同限制酶的識別序列。經(jīng)過這兩種酶酶切的phb2基因和載體進(jìn)行連接時,可選用(填“E.coliDNA連接酶”或“T4DNA連接酶”)。
相關(guān)限制酶的識別序列及切割位點注:箭頭表示切割位點(3)轉(zhuǎn)化前需用CaCl2處理大腸桿菌細(xì)胞,使其處于的生理狀態(tài),以提高轉(zhuǎn)化效率。
(4)將轉(zhuǎn)化后的大腸桿菌接種在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng),隨機挑取單菌落(分別編號為1、2、3、4)培養(yǎng)并提取質(zhì)粒,用(2)中選用的兩種限制酶進(jìn)行酶切,酶切產(chǎn)物經(jīng)電泳分離,結(jié)果如圖2,號菌落的質(zhì)粒很可能是含目的基因的重組質(zhì)粒。
注:M為指示分子大小的標(biāo)準(zhǔn)參照物;小于0.2kb的DNA分子條帶未出現(xiàn)在圖中(5)將純化得到
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