細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座

細胞表面細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第1頁§1細胞表面結(jié)構(gòu)、表面特征和表面活性一.細胞表面結(jié)構(gòu)

生物膜自主裝在很大程度上依賴其組成成份類脂和蛋白質(zhì)表面活性，

尤其是它們所含有表面活性物質(zhì)兩個基本特征：吸附作用和聚集作用細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第2頁

質(zhì)膜與內(nèi)膜系統(tǒng)組成細胞與環(huán)境、區(qū)間之間分隔界面或邊界，同時這些膜含有顯著表面特征和表面活性，在膜功效上發(fā)揮主要作用。

細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第3頁

細胞表面是個復(fù)雜結(jié)構(gòu)體系和多功效體系。從結(jié)構(gòu)上分三個區(qū)：

存在于細胞外空間糖萼脂雙層胞漿面膜骨架復(fù)合物細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第4頁細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第5頁糖萼：(1)細胞包被：質(zhì)膜糖蛋白或糖脂伸向胞外部分糖鏈。雖是質(zhì)膜一部分，但在細胞外側(cè)，并能用糖苷酶等將其移去而不使質(zhì)膜或細胞受到致命性損傷。

（2）細胞外表面粘附物：處于包被外而又與包被緊密粘附胞外基質(zhì)（蛋白多糖、糖蛋白）。細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第6頁

實際上這兩層結(jié)構(gòu)界限不清，用釕紅染色時，染成一片，不易分辨，所以細胞膜外緣兩層復(fù)合物整體上稱為糖萼。細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第7頁二.細胞表面特征和表面活性脂雙層固有特征生物膜所特有表面特征與活性細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第8頁1.脂雙層固有特征和活性

如表面物理化學(xué)特征、表面張力、界面電動力學(xué)活性。

經(jīng)過對人工膜模型研究取得相關(guān)數(shù)據(jù)。細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第9頁

表面張力是最主要表面活性，脂雙層液晶態(tài)結(jié)構(gòu)表面能或表面張力是推進生物膜自我組裝、形態(tài)建成及其運動性基本力量之一。細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第10頁2.生物膜所特有表面特征與活性如:生物膜粘附

生物膜選擇性通透

特異受體反應(yīng)

生物膜中蛋白(載體蛋白、通道蛋白、酶、受體蛋白等）、表面糖萼、胞漿膜骨架復(fù)合物都會對生物膜所特有表面特征與活性產(chǎn)生影響。細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第11頁

在考慮膜表面特征同時還要考慮膜其它特征以及細胞生理和代謝調(diào)整作用。表面電荷、脂雙層厚度、糖萼厚度、壓縮系數(shù)細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第12頁§2細胞電泳1.質(zhì)膜表面帶電原因

細胞表面存在帶電基團，使其帶有電荷（固定表面電荷）。大多數(shù)動物細胞表面帶有靜負電荷，糖蛋白上唾液酸羧基是其負電荷主要起源。細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第13頁

細胞表面凈負電荷會吸引周圍介質(zhì)中正離子靠近細胞表面。而因擴散作用，這些離子又有遠離細胞表面傾向。其結(jié)果是，離膜表面越遠，離子濃度越稀。所以形成一個垂直于細胞表面電位梯度—雙電層總電位。細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第14頁

吸附于細胞表面正離子可分為兩層：（1）一層為吸附層：這部分離子緊密排列在膜表面，厚度約為1nm。這部分離子不易于離開細胞表面，并會隨細胞而運動。

細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第15頁細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第16頁（2）其外側(cè)一層正離子易于離開膜表面擴散，形成擴散層。細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第17頁

兩層離子電荷總和等于細胞表面靜負電荷總和。從另一個角度來看，細胞表面固定電荷與吸附層電荷凈電荷總和與擴散層電荷性質(zhì)相反，數(shù)量相等。細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第18頁

在外加直流電場作用下，吸附層電荷隨細胞一起相對于介質(zhì)而運動，雙電層分離，并產(chǎn)生一個電位差—ζ電位。

ζ電位大小與細胞表面電荷性質(zhì)和數(shù)量相關(guān)，并隨溶液中離子濃度改變而改變。

ζ電位僅在外加電場作用下細胞運動時才能顯現(xiàn)。細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第19頁2.細胞電泳給細胞懸液外加直流電場時,細胞向某一電極移動現(xiàn)象稱為細胞電泳。

（1）顯微鏡法

在光學(xué)顯微鏡下觀察懸浮于溶液中細胞在外加電場作用下移動。依據(jù)有沒有移動判斷細胞表面是否帶有電荷；依據(jù)移動方向判斷其電荷性質(zhì)；依據(jù)移動速率測定ζ電位和表面電荷密度；細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第20頁（2）電泳光散射法當光作用于移動粒子（細胞）時，會發(fā)生散射，散射光頻率對入射光而言有一個小改變，即頻移。只要測出頻移，可計算出電泳遷移率。細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第21頁3.細胞電泳在生物醫(yī)學(xué)中應(yīng)用免疫學(xué)：（1）淋巴細胞電泳行為與表面特征淋巴細胞電泳遷移率有快慢兩個峰，其中快峰細胞含有T細胞表面特征和生物學(xué)特點；而慢峰細胞含有B細胞表面特征和生物學(xué)特點，所以能夠用細胞電泳方法將T、B兩種細胞分開。細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第22頁

造成兩類淋巴細胞電泳遷移率差異原因是，T細胞表面帶有負電荷神經(jīng)氨酸比B細胞表面多，而帶正電和基團則少于B細胞表面。細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第23頁（2）淋巴細胞與抗原識別反應(yīng)研究當淋巴細胞與抗原接觸時，產(chǎn)生淋巴素類物質(zhì)，其中有些物質(zhì)能夠作用于巨噬細胞表面并使其電泳遷移率變慢。所以細胞電泳可作為檢測淋巴細胞免疫反應(yīng)一個簡便工具，在臨床上用本法能夠預(yù)測器官移植效果。細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第24頁病理學(xué)（1）細胞表面電荷與其生物學(xué)性質(zhì)關(guān)系多數(shù)試驗證實，癌細胞表面較正常細胞帶有更多負電荷，而且其負電荷多少與癌細胞惡性程度、轉(zhuǎn)移能力等成正相關(guān)。細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第25頁（2）細胞、血小板表面電荷與血栓形成關(guān)系血栓形成中紅細胞和血小板凝集起主要作用，因而與紅細胞、血小板和血管內(nèi)皮細胞表面電荷改變有親密關(guān)系。試驗表明，這類病人紅細胞和血小板電泳遷移率都比健康人要慢。這種變慢是細胞表面電荷降低結(jié)果。凡能使表面電荷降低，比如飽和脂肪酸，均可減慢其電泳遷移率并促進紅細胞凝集。細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第26頁（3）末梢血細胞電泳圖與血液病

健康人末梢血細胞電泳圖可看到三個峰，低速-S峰、中速-F峰、高速-R峰。分別相當于白細胞、淋巴細胞、紅細胞所在位置。在各種病理條件下，尤其是白細胞異常各種疾病，電泳圖發(fā)生對應(yīng)改變。比如：淋巴細胞增多時，F(xiàn)峰顯著高于S峰，并向左右擴展。細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第27頁

噬中性粒細胞增多時，S峰顯著高于F峰，而慢性粒細胞白血病時電泳遷移率會出現(xiàn)一個新高峰，主要由幼稚細胞所組成。細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第28頁§3細胞粘附一.當細胞靠近于另外細胞或一個固體基質(zhì),在適宜條件下,借助物化作用,它們之間可發(fā)生粘附。細胞粘附在多細胞生物發(fā)育與組織修復(fù)過程中形態(tài)建成和功效維持上起著非常主要作用。細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第29頁

依據(jù)粘附對象不一樣，細胞粘附可分為兩類：細胞與非細胞表面粘附細胞間粘附粘附過程包括:非特異性相互作用特異性相互作用。細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第30頁非特異性相互作用：

靜電、立體空間、VanderWaale等性質(zhì)相互作用特異性相互作用：

各種粘附因子作用

細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第31頁

細胞粘附能力差異很大，它不但取決粘附細胞本身，還取決于被粘附細胞或基質(zhì)，影響相互作用原因：細胞或基質(zhì)類型它們表面特征細胞生理狀態(tài)和環(huán)境條件細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第32頁二.細胞粘附中作用力靜電斥力因立體結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性而產(chǎn)生斥力VanderWaale力

細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第33頁

細胞間非特異VanderWaale相互吸引力總是遠小于靜電斥力和立體穩(wěn)定性所產(chǎn)生斥力。所以沒有某種原因使細胞間斥力減小或使其克服，單靠VanderWaale力不足以發(fā)生細胞粘附。細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第34頁

細胞重力、運動、細胞表面一些特化結(jié)構(gòu)以及細胞粘附一些步驟都可成為克服細胞斥力原因。細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第35頁三.細胞粘附過程

細胞粘附是一個復(fù)雜生命現(xiàn)象。細胞間粘附或細胞與固體基質(zhì)間粘附包括各種不一樣作用力。在多數(shù)情況下，這一過程還包含了粘附因子之間特異性相互作用。盡管它們粘附過程有許多差異，但它們都包括以下幾個共同或相同步驟。細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第36頁（1）細胞之間相互靠近

細胞之間欲發(fā)生粘附，必先彼此靠近。細胞之間靠近可能在兩種情況下發(fā)生:一是受液流驅(qū)動。血液、淋巴液內(nèi)細胞均可在液流驅(qū)動下彼此靠近。二是細胞主動運動。粘附于基質(zhì)上細胞可伸出片足，進行阿米巴式運動，從而彼此靠近。電化學(xué)梯度常可誘發(fā)這種主動運動。細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第37頁（2）克服細胞初始排斥作用當細胞靠近到一定距離，細胞之間將會產(chǎn)生斥力。這種斥力起源于靜電相互作用和表面糖鏈立體穩(wěn)定性。另外細胞之間液膜也可阻止細胞間接觸。克服這些斥力是細胞形成粘附前提。細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第38頁（3）在接觸區(qū)第一個健形成細胞最初接觸部位是斥力最小或者該部位能夠產(chǎn)生一個力足以克服細胞之間排斥作用。這個部位可能在微絨毛尖端或片足邊緣。一旦細胞在這么一些特殊部位之間發(fā)生接觸，并形成第一個健，就會對細胞接觸起穩(wěn)定作用。細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第39頁（4）接觸區(qū)結(jié)構(gòu)改變及其擴展這是細胞粘附中最復(fù)雜一步。由第一個健形成，將會觸發(fā)膜下細胞骨架，從而引發(fā)膜分子側(cè)向移動。其結(jié)果將造成特異相互作用粘附分子向接觸區(qū)移動，使接觸區(qū)擴大。與此同時，那些相互排斥分子將會被擠出接觸區(qū)。細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第40頁

這兩個過程都會使細胞粘附深入加強。上述步驟與細胞骨架運動親密相關(guān)，因而依賴于細胞代謝。特異分子之間相互作用主要借助于VanderWaale力，這種力僅在分子靠得很近時才能起作用。細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第41頁四.細胞粘附影響原因:細胞代謝細胞間接觸時間疏水性細胞表面電荷膜分子側(cè)向運動與細胞表面柔韌性細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第42頁五.細胞表面粘附因子（CAMs）

細胞主要經(jīng)過其表面CAMs與其它細胞或固體基質(zhì)粘著。不一樣CAMs介導(dǎo)不一樣類型細胞粘附。細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第43頁1.整合素：

一類主要細胞粘因子。它是由兩條非共價鍵結(jié)合透膜肽鏈α、β組成二聚體，α、β有長胞外部分，都能與細胞外基質(zhì)（ECM）等配體結(jié)合，其中β鏈有與RGD（精氨酸-甘氨酸-天門冬氨酸）三肽序列結(jié)合部位，α胞外有Ca2+結(jié)合位點。細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第44頁

兩條肽鏈胞內(nèi)部分較短，含有與細胞骨架結(jié)合位點。這么整合素能結(jié)合膜兩側(cè)配體分子，因而能在膜兩側(cè)之間傳遞信息。細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第45頁2.鈣粘著蛋白家族

這個家族糖蛋白是嚴格鈣依賴性一次跨膜蛋白,這個家族組員超出30個。不一樣鈣粘著蛋白有50%-60%同源序列，主要是每種鈣粘著蛋白有特征性組織分布。了解較多鈣粘著蛋白有E-cadherin、N-cadherin和P-cadherin。細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第46頁

鈣粘著蛋白由單一跨膜片段，單一胞漿結(jié)構(gòu)區(qū)和由四個結(jié)構(gòu)域組成大胞外部分組成。鈣粘著蛋白把相同類型細胞緊密粘著在一起。細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第47頁3.選擇素家族存在于白細胞、血小板和血管內(nèi)皮細胞，分別稱為L-、P-、E-selectin。這些分子是單一跨膜蛋白。胞外部分含有各種結(jié)構(gòu)域，他們能識別其它細胞表面特殊糖鏈結(jié)構(gòu)，而且發(fā)生Ca依賴結(jié)合。選擇粘集素介導(dǎo)血循環(huán)中炎癥和凝血部位白細胞與血管壁暫時性相互作用。細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第48頁4.免疫球蛋白（lg）超家族（lgSF）共同特點是含有數(shù)個lg樣結(jié)構(gòu)域，這個家族不一樣組員含有不一樣數(shù)目標lg樣結(jié)構(gòu)域。大多數(shù)lgSF組員存在于淋巴細胞表面，介導(dǎo)淋巴細胞與巨噬細胞、其它淋巴細胞以及靶細胞等參加免疫反應(yīng)細胞之間特異相互作用，包括免疫反應(yīng)許多方面。細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第49頁細胞黏附是黏附與去黏附動態(tài)改變過程。細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第50頁六.細胞粘著意義細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第51頁(1)心血管疾病

血栓患者紅細胞和血小板粘附性顯著高于正常人。細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第52頁(2)腫瘤

腫瘤細胞特點之一是侵潤和轉(zhuǎn)移。腫瘤細胞轉(zhuǎn)移包含一系列步驟。比如：黑色素瘤向肺轉(zhuǎn)移過程中，細胞首先要脫離原發(fā)部位，穿過基膜，進入間質(zhì)，隨即再穿過毛細血管基膜和細胞間隙進入血循環(huán)。在血流中，一些瘤細胞可能發(fā)生聚集，這些聚集細胞較分散細胞在遠隔部位定居可能性大多。細胞表面醫(yī)學(xué)宣教專家講座第53頁

另首先，隨血流轉(zhuǎn)運細胞并非在任何組織和器官都能定居并增殖。黑色素瘤在肺