中草藥栽培技術(shù) 課件 項(xiàng)目1-3 中草藥的有性繁殖、中草藥的無(wú)性繁殖、根及根莖類藥材的栽培

有性繁殖種子繁殖目錄

1.藥用植物種子的采收4.種子的休眠2.種子壽命5.播種前種子的處理方法3.種子的貯藏6.播種

教學(xué)要求

通過(guò)本任務(wù)的學(xué)習(xí)，能熟練掌握常見(jiàn)藥用植物有性繁殖的主要技術(shù)流程，能獨(dú)立完成中草藥有性繁殖的工作。

有性繁殖：用種子進(jìn)行繁殖的過(guò)程稱為有性繁殖。

有性繁殖具有簡(jiǎn)便、快速、數(shù)量大、苗株根系完整、生長(zhǎng)健壯、奪命長(zhǎng)等優(yōu)點(diǎn)，也是用于新品種培育的常規(guī)方法。種子的選1.應(yīng)該從切實(shí)可靠的科研單位和種子公司購(gòu)買種子2.購(gòu)買有商標(biāo)及信譽(yù)較好的包裝種子3.從種子的質(zhì)量上看，質(zhì)量高的種子一般凈度較高，沒(méi)有梗子、雜質(zhì)及其他種子顏色、粒型均勻一致，種子表皮富有光澤、新鮮，有些種子還具有特殊的味道，如芹菜、胡蘿卜等的新種子比陳種子味道濃。購(gòu)

一、藥用植物種子的采收

藥用植物種類繁多，其種子的形狀、大小、顏色、壽命和發(fā)芽特性都不一樣。藥用植物種子的成熟期隨植物種類、生態(tài)環(huán)境、花的著生部位等不同而差異較大。

1.種子的采收

（1）采收時(shí)間：種子成熟后及時(shí)采收。

生理成熟：生理成熟就是種子發(fā)育到一定大小，種胚具有發(fā)芽能力。

生理成熟：形態(tài)成熟就是種子中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)停止了積累，含水量減少，種皮堅(jiān)硬致密，充實(shí)飽滿，具有成熟時(shí)的顏色。

一般情況下，種子的成熟過(guò)程是經(jīng)過(guò)生理成熟再到形態(tài)成熟。有些種子是先完成形態(tài)成熟，后完成生理成熟，如刺五加、人參、西洋參等。

種子成熟程度的確定，是根據(jù)種子形態(tài)成熟時(shí)的特征判斷的。（2）采收后及時(shí)處理漿果類種子:如五味子，將果實(shí)浸入水中，使果肉與種子分離，然后用清水淘洗，漂選，風(fēng)干。蒴果、莢果類：如桔梗、黃芪等，采收果實(shí)后在陽(yáng)光下曬干，果皮開(kāi)裂后取出種子。

采收的種子需要通過(guò)粒選、篩選、風(fēng)選和液體比重選等方法進(jìn)行精選。無(wú)論選用何種方法都要選取大小整齊、飽滿、無(wú)病蟲(chóng)害的種子留種。有些種子需要帶果皮貯藏，直至播種前脫粒。二、種子壽命

種子壽命：藥用植物種子發(fā)芽能力(生活力)能夠保持的年限稱為種子的壽命。

（1）短命種子，如天麻、白頭翁、遼細(xì)辛等（2）中命種子，如黃芪、甘草等（3）長(zhǎng)命種子，如野決明種子天麻故事相傳遠(yuǎn)古時(shí)代，在烏蒙山的密林深處，居住著一個(gè)彝族原始部落，部落首領(lǐng)得了一種頭暈眼花、四肢無(wú)力的怪病。山民們祈求上天賜藥。上天見(jiàn)這個(gè)部落勤勞勇敢，便派一匹天馬送靈藥下凡，播撒在這片原始叢林之中。人們?yōu)榱烁卸?，就把這種靈藥叫做“天馬”，久而久之，彝語(yǔ)就衍化成了“天麻”。(2)影響種子壽命的因素：

內(nèi)在因素:種子結(jié)構(gòu)、種子貯藏物、種子含水量、種子成熟度

種皮(或果皮)堅(jiān)硬致密、不易透氣透水的壽命長(zhǎng)。一般含脂肪、蛋白質(zhì)多的種子比含淀粉多的種子壽命長(zhǎng)。干燥種子的含水量低，有利于延長(zhǎng)種子生活力。通常種子含水量在5％～14％之間，其含水量每降低1％，種子壽命可增加1倍。當(dāng)種子含水量為18％～30％時(shí)，種子容易迅速死亡。但是種子的含水量也不是越低越好，過(guò)分干燥或脫水過(guò)急，也會(huì)降低某些種子的生活力。大部分藥用植物種子適宜干藏，最理想的貯藏條件是將充分干燥的種子密封于低溫及相對(duì)濕度低的環(huán)境中。含水量低于10％時(shí)，溫度在2～4℃條件保存較好。此外，有少部分藥用植物種子適宜貯藏在濕度較高的條件下，如細(xì)辛等。種子成熟度也影響種子的壽命。不成熟的種子壽命短于成熟種子。外在因素:溫度、濕度和通風(fēng)條件

高溫和高濕降低種子的壽命。溫度在0～50％范圍內(nèi)，每降低5℃，壽命可延長(zhǎng)1倍。大多數(shù)藥用植物的種子需貯存在濕度5～15％、溫度為10～20℃的低溫干燥條件，而有些藥用植物種子應(yīng)貯存在濕度15～17％、溫度-1～-5℃的條件下，如細(xì)辛、延胡索、棉團(tuán)鐵絲蓮等，低溫條件下能保持其生活力，以利于種子的后熟過(guò)程。

種子貯藏的目的是保持藥用植物種子的生活力。不同植物種子所需的適宜貯藏條件不同，因而貯藏方法也有差異。常采用的貯藏方法有以下幾種：（1）干燥貯藏法（2）濕潤(rùn)貯藏法（3）懸掛貯藏法三、種子的貯藏干燥貯藏將采回的種子干燥后裝入麻袋、布袋或開(kāi)放的容器中，存放于倉(cāng)庫(kù)或干燥涼爽通風(fēng)的室內(nèi)。在氣候較濕潤(rùn)的地方，數(shù)量較少的種子可儲(chǔ)存于罐、壇、瓶中，底部放些石灰或干燥木炭吸潮；如需長(zhǎng)期保存，應(yīng)將種子干燥至安全含水量，裝入密封容器內(nèi)，在低溫條件下儲(chǔ)存，如冰箱、冷藏庫(kù)等。干燥、低溫、缺氧等可降低種子的代謝和微生物繁衍，延長(zhǎng)種子壽命。法濕潤(rùn)貯藏對(duì)于一些在干燥條件下喪失生活力的種子，如黃連、三七、肉桂、細(xì)辛等種子，宜將種子與濕潤(rùn)基質(zhì)混合貯藏。濕潤(rùn)基質(zhì)一般都是就地取材，有腐殖土、沙、泥、蛭石、苔蘚等。種子細(xì)小的多與腐殖土、濕沙混合儲(chǔ)存；種子顆粒大的多與濕沙、濕土層積貯藏，即一層沙、土，再鋪一層種子，每層3～5cm，層積2～3層。所用的腐殖土、沙等不宜過(guò)濕或過(guò)干，一般以含水量2％左右為宜(如用手捏沙不會(huì)成團(tuán))。過(guò)濕易發(fā)生爛種，或者在貯藏期萌發(fā)；過(guò)干易使種子脫水干燥，喪失生活力。此類種子常有低溫休眠特性，可在室外挖坑貯藏，上面蓋土蓋草，嚴(yán)防積水。貯藏期間要定期翻動(dòng)檢查，保持濕度適當(dāng)。法懸掛貯藏（3）懸掛貯藏法對(duì)不宜脫?；蛐柽B果殼儲(chǔ)存的種子，如澤瀉、白芥、栝樓、決明、絲瓜、川牛膝等，一般將果穗綁扎成小把懸掛于陰涼通風(fēng)的室內(nèi)、房檐下，讓其自然干燥，儲(chǔ)存至播種前脫粒。川牛膝果有鉤刺，采收后將它們捏成團(tuán)穿上竹篾懸掛貯藏，貯藏期忌煙熏火燎。法四、種子的休眠

具有生活力的種子處于適宜的發(fā)芽條件下，仍不正常發(fā)芽的現(xiàn)象稱為種子的休眠。休眠是植物抵御不良環(huán)境的自我保護(hù)方式之一，通常分為自發(fā)休眠和強(qiáng)制休眠兩種類型。

自發(fā)休眠：種子自身原因引起的休眠稱為自發(fā)休眠。

強(qiáng)制休眠：由于環(huán)境條件不適宜而引起的種子休眠稱為強(qiáng)制休眠。

引起種子休眠的原因有以下幾點(diǎn)：

——種皮不透水、不透氣和機(jī)械障礙引起的

——種皮或果皮阻礙抑制劑

——種子萌發(fā)抑制物質(zhì)的存在

——種胚未形成（一）種皮不透水、不透氣和機(jī)械障礙引起的休眠

有些植物種子種皮堅(jiān)硬致密，或具有蠟質(zhì)層不易透水透氣，或產(chǎn)生機(jī)械的約束作用，阻礙種子吸水或種胚的生長(zhǎng)。如果將胚單獨(dú)取出，在適宜的環(huán)境條件下即可萌發(fā)。例如，黃芪、甘草等一些豆科植物的種子具有堅(jiān)硬致密的種皮。這些種子可通過(guò)擦破種皮，極端高、低溫，濃硫酸處理，高水壓和高頻發(fā)生器等物理、化學(xué)方法破除休眠。（二）種皮(或果皮)阻礙抑制劑

從胚中排出或種皮本身存在抑制劑并供給種胚。有相當(dāng)多的藥用植物種子的種皮中存在活性比較高的抑制物質(zhì)，如山葵種子種皮有抑制物質(zhì)，去除種皮可使其發(fā)芽率提高到98%。（三）種子萌發(fā)抑制物質(zhì)的存在

存在于胚乳、胚、子葉或果汁中的種子萌發(fā)抑制物質(zhì)，抑制種子的萌發(fā)。（四）種胚未成熟

有些藥用植物種子的胚形態(tài)發(fā)育不健全或種胚生理發(fā)育不健全，都會(huì)引起種子的自發(fā)休眠。這些種子需要通過(guò)后熟才能萌發(fā)。所謂后熟，是指種子經(jīng)過(guò)一系列的生理生化變化才能萌發(fā)的過(guò)程。

1.種胚形態(tài)發(fā)育不健全。自然成熟的種子，種胚在形態(tài)上發(fā)育不健全，如種胚的大小，這類種子的胚還需要吸收胚乳營(yíng)養(yǎng)繼續(xù)生長(zhǎng)發(fā)育。

2.種胚生理發(fā)育不健全。這類種子形態(tài)發(fā)育完全，但生理上未成熟，需要經(jīng)歷一段時(shí)間的低溫才能萌發(fā)。五味子種子長(zhǎng)期休眠的根本原因是胚的生理未完成后熟作用，經(jīng)過(guò)一段時(shí)間的低溫處理或GA處理，能使五味子在正常的室溫下裂口、發(fā)芽。

3.種胚形態(tài)和生理發(fā)育不健全。這類種子的胚不僅在形態(tài)上發(fā)育不完全，生理上也未達(dá)到萌發(fā)的條件。胚后熟需要在較高的溫度下完成形態(tài)上發(fā)育，然后在一定時(shí)期的低溫下完成生理上的發(fā)育，如人參、西洋參、刺五加等。人參種子剛收獲時(shí)胚呈原胚狀態(tài)，而西洋參果實(shí)收獲時(shí)其種胚僅長(zhǎng)0.4～0.5mm。

為了提高中藥材種子品質(zhì)，打破種子休眠，促進(jìn)種子出苗整齊和幼苗健壯成長(zhǎng)，中藥材種子在播種前需要進(jìn)行處理，防治種子病蟲(chóng)害，常用主要的處理方法有：

五、播種前種子的處理方法

（一）選種

：

選取顆粒飽滿、發(fā)育完善、不攜帶病蟲(chóng)卵細(xì)菌、生活力強(qiáng)的種子。數(shù)量少可選擇手工選種，數(shù)量大時(shí)可用風(fēng)選。種子精選的方法有風(fēng)選、篩選、鹽水選等，通過(guò)精選，可以提高種子的純度，將種子進(jìn)行分級(jí)。

（二）曬種：播種前曬種能促進(jìn)某些藥材種子的生理后熟，使種子內(nèi)部新陳代謝，提高種子成活率、發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽率，并起到防止病蟲(chóng)害的作用。曬種一般選晴朗天氣曬2～3d。在水泥地上曬種時(shí)，注意不能攤得太薄，以防燙傷種子，一般以5～10cm為宜。每隔2～3h翻動(dòng)一次，使種子受熱均勻。(三)種子消毒：種子消毒可預(yù)防通過(guò)種子傳播的病蟲(chóng)害，主要有藥劑消毒處理、溫湯浸種處理和熱水燙種等方法。

（1）藥劑消毒處理

用藥劑消毒種子可采用藥劑拌種或藥水浸種兩種方法。前者是將種子在浸種后與藥劑充分混勻，也可與干種子混合拌勻。一般取種子重量的0.3％殺蟲(chóng)劑和殺菌劑。常用的殺菌劑有70％敵克松、50％福美鋅等，殺蟲(chóng)劑有90％敵百蟲(chóng)粉等。后者是把種子在清水中浸泡5～6h，然后浸入藥水中，按規(guī)定時(shí)間消毒。撈出后，立即用清水沖洗種子。常用藥劑有福爾馬林、1％硫酸銅水溶液、10％磷酸鈉或2％氫氧化鈉的水溶液。采用藥劑浸種消毒時(shí)，必須嚴(yán)格掌握藥液濃度和浸種時(shí)間，以防藥害。

（2）溫湯浸種

種子用冷水或40℃左右溫水直接浸種，可使種皮老化、透性增強(qiáng)，并能殺死種子內(nèi)外所含病菌，防止病害傳播，促使種子快速、整齊地萌發(fā)。浸種時(shí)間長(zhǎng)短應(yīng)根據(jù)種子大小、種皮厚薄而定。例如，傘形科柴胡及茄科、葫蘆科等植物的種子用30℃左右水浸水泡1晝夜即可。薏苡種子冷熱水交替浸種，直到流出的水沒(méi)有黑色為止，此法對(duì)防治黑粉病的發(fā)生有良好的效果。

（3）熱水燙種

對(duì)一些種皮堅(jiān)硬的種子可用70～75℃的熱水，或開(kāi)水燙種促進(jìn)種子萌發(fā)，如黃芪、甘草等，先用冷水浸沒(méi)種子，再用80～90℃的熱水邊倒邊攪拌，使水溫達(dá)到70～75℃后并保持1～2min．然后加冷水逐漸降溫至20～30℃，再繼續(xù)浸種。

（4）機(jī)械處理：有些藥材種子堅(jiān)硬，富含蠟質(zhì)，不透水，影響種子的萌發(fā)，可采用人工破殼或粗砂、玻璃、磨米機(jī)等機(jī)械方法劃破種皮增強(qiáng)透性，促進(jìn)種子萌發(fā)。如杜仲可采用破翅果，取出種仁直接播種；黃芪、穿心蓮的種子種皮有蠟質(zhì)，可先用細(xì)砂磨擦，再用溫水浸種，可顯著提高發(fā)芽率。

（5）化學(xué)藥劑處理：用化學(xué)藥劑處理藥用植物種子能提高種子的發(fā)芽率和整齊度，但不同植物所使用藥劑濃度和處理時(shí)間不同，必須根據(jù)種子的特性，選擇適宜的藥劑和濃度，嚴(yán)格掌握處理時(shí)間，才能收到良好的效果。具有蠟質(zhì)層的種皮，可用60％硫酸浸種30min，撈出后，用清水沖洗數(shù)次并浸泡10h再播種，如甘草種子用硫酸處理可打破種皮障礙，提高發(fā)芽率。桔梗用0.3％～0.5％高錳酸鉀浸種可提早發(fā)芽8～10d左右。黨參、當(dāng)歸用0.5％小蘇打浸種半小時(shí)可提早發(fā)芽10d左右，提高發(fā)芽率10％。

（6）層積處理：層積處理是打破種子休眠的常用方法。尤其適用于具有種胚形態(tài)后熟、生理后熟、堅(jiān)硬的核果類種子或多因素引起休眠的種子。有些藥用植物的種子在貯藏期，用一層濕沙一層種子進(jìn)行堆積可打破種子休眠，有利于種子后熟和提高發(fā)芽率。例如，牡丹、芍藥、防風(fēng)、黃柏、黃連、銀杏、人參等種子常用層積處理來(lái)來(lái)促進(jìn)發(fā)芽。

（7）激素處理：激素能顯著提高種子發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽率，促進(jìn)生長(zhǎng)，提高產(chǎn)量。常用的生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑有吲哚乙酸、α-萘乙酸、赤霉素、ABT生根粉等。在藥用植物種子處理上應(yīng)用較多的是赤霉素，適宜濃度的赤霉素有代替低溫打破種子休眠的作用。如赤霉素10～20ml/L處理桔梗、細(xì)辛的種子可提早發(fā)芽3～4d。六、播種（一）土地準(zhǔn)備：土地準(zhǔn)備包括翻耕、整地、做畦等。翻地時(shí)要施基肥，施基肥對(duì)根類藥用植物尤為重要；翻地后敲碎土塊，以防種子不能正常發(fā)芽。根據(jù)植物特性和當(dāng)?shù)貧夂蛱攸c(diǎn)做畦，如在南方種植根類藥材多采用高畦，畦的寬度以便于操作管理為準(zhǔn)。（二）播種期：藥用植物特性各異，播種期很不一致，但通常以春、秋兩季播種為多。一般耐寒性差、生長(zhǎng)期較短的一年生草本植物及沒(méi)有休眠特性的木本植物宜春播，如薏苡、紫蘇、荊芥、川黃柏等。耐寒性強(qiáng)、生長(zhǎng)期長(zhǎng)或種子需休眠的植物宜秋播，如北沙參、白芷、厚樸等。由于我國(guó)各地氣候差異較大，同一種藥用植物在不同地區(qū)的播種期也不一樣，如紅花在南方宜秋播，而在北方則多春播。每一種藥用植物都有適宜的播種期，如當(dāng)歸、白芷在秋季播種過(guò)早，第二年植物易發(fā)生抽薹現(xiàn)象，造成其根部不能作藥用，而播種過(guò)遲，則影響藥用植物的產(chǎn)量甚至使其發(fā)生凍害。藥用植物在生產(chǎn)過(guò)程中應(yīng)注意確定適宜的播種期。（三）播種方法：1.直播有穴播、條播、撒播三種方法，在播種過(guò)程中要注意播種密度、覆土深度等，如大粒種子宜深播，小粒種子宜淺播；黏土宜淺播，沙土宜深播。

2.育苗移栽。杜仲、黃柏、厚樸、菊花、白術(shù)、黨參、黃連、射干等藥用植物的培育，宜采用先在苗床育苗然后將苗移栽于大田的方法。育苗移栽能提高土地利用率，方便管理，便于培育壯苗。任務(wù)實(shí)施

一、材料準(zhǔn)備

將種子、處理種子的藥劑和容器、鐵鍬、鐵鈀、盆子、灑壺等材料和工具準(zhǔn)備好。

二、實(shí)施步驟1.種子篩選和處理2.整地3.播種

4.苗期管理1.種子篩選和處理：根據(jù)具體種植中藥材的種子，選擇適宜的處理方法。

2.整地：大多數(shù)中藥材植物適宜在土壤結(jié)構(gòu)良好、疏松肥沃、酸堿度呈中性、排水良好的壤土中生長(zhǎng)。但人參、黃連等喜歡在含腐殖質(zhì)豐富的森林土中生長(zhǎng)；白術(shù)、貝母、肉桂、梔子等喜酸性或微酸性土壤中生長(zhǎng)；枸杞、甘草等喜在堿性土中生長(zhǎng)；蔓荊子、北沙參等喜在沙土中生長(zhǎng)。因此，要根據(jù)植物自身的生長(zhǎng)習(xí)性和生物學(xué)特性，選擇適宜的土壤來(lái)栽培。

播種前深翻土壤，將土壤耙細(xì)、整平，進(jìn)行做畦或做壟。深耕土壤對(duì)深根性中草藥如黨參、白芷、牛膝等能增加產(chǎn)量。深耕結(jié)合施肥，尤其是施足有機(jī)肥，不僅能改善土壤的物理性狀，而且也可以促進(jìn)土壤的熟化，提高土壤肥力。3.播種：根據(jù)所選種子大小確定播種方式。一般來(lái)說(shuō)，播種方式有條播、點(diǎn)播、撒播和精量播種。大粒種子適宜深播，覆土深度為種子厚度的3倍。小粒種子適宜淺播，覆土以不見(jiàn)種子為宜。

播種量主要根據(jù)播種方法、密度、種子千粒重、種子凈重、發(fā)芽率等條件來(lái)確定。計(jì)算公式如下：

播種量（g/畝）=（每畝需要苗株數(shù)×種子千粒重）/（種子凈度×種子發(fā)芽率×1000）4.苗期管理

苗期管理是從播種后幼苗出土，對(duì)中藥材苗及土壤進(jìn)行的管理，如遮蔭、間苗、灌溉、施肥、中耕、除草等工作。根據(jù)各時(shí)期中藥材苗生長(zhǎng)的特點(diǎn)，采用相應(yīng)的技術(shù)措施，以便使其達(dá)到速生豐產(chǎn)的目的。（1）遮蔭遮蔭可使日光不直接照射地面，能有效降低育苗地地表溫度以免幼苗受日灼傷害。遮蔭的方法：一般采用葦簾、竹簾或黑色的編織布等做材料設(shè)活動(dòng)蔭棚，透光反以50％～80％為宜。蔭棚高40～50cm，每天上午9:00至下午4:00左右進(jìn)行放簾遮蔭，其他時(shí)間或陰天可把簾子卷起。也可以采用在苗床上插松枝或間種等辦法進(jìn)行遮蔭。

（2）間苗幼苗過(guò)密，導(dǎo)致通風(fēng)、透光不好，且每株的營(yíng)養(yǎng)面積小，長(zhǎng)勢(shì)弱，質(zhì)量下降，易發(fā)生病蟲(chóng)害。因此，為了調(diào)整幼苗的疏密度，使其保持一定的距離，對(duì)幼苗進(jìn)行間苗。間苗次數(shù)應(yīng)依幼苗生長(zhǎng)速度確定，一般間苗1～2次為好，間苗的時(shí)間宜早不宜遲。

第一次間苗在苗高5cm時(shí)進(jìn)行，將受病蟲(chóng)危害的、受機(jī)械損傷的、生長(zhǎng)不正常的、密集在一起影響生長(zhǎng)的幼苗去掉一部分，使幼苗間保持一定距離。第二次間苗與第一次間苗相隔10～20d，第二次間苗即為定苗。間苗的數(shù)量應(yīng)按單位面積產(chǎn)苗量的指標(biāo)進(jìn)行留苗，其留苗數(shù)可比計(jì)劃產(chǎn)苗量增加5％～15％，作為損耗系數(shù)，以保證產(chǎn)苗計(jì)劃的完成，但留苗數(shù)不宜過(guò)多，以免降低幼苗質(zhì)量。間苗后要立即澆水，淤塞苗根孔隙。

（3）補(bǔ)苗補(bǔ)苗工作是補(bǔ)救缺苗斷壟的一種措施。補(bǔ)苗時(shí)間越早越好，以減少對(duì)根系的損傷，早補(bǔ)不但成活率高，而且后期生長(zhǎng)與原來(lái)苗木無(wú)顯著差別。補(bǔ)苗工作可和間苗工作同時(shí)進(jìn)行，最好選擇陰天或傍晚進(jìn)行，以減少日光的照射，防止萎蔫。必要時(shí)要進(jìn)行遮蔭，以保證成活。

（4）移栽

移植一般用于幼苗生長(zhǎng)快的樹(shù)種，移植應(yīng)掌握適當(dāng)?shù)臅r(shí)期，一般在幼苗長(zhǎng)出2～3片真葉后，結(jié)合間苗、移植應(yīng)選在陰天進(jìn)行，移植后要及時(shí)灌水并進(jìn)行適當(dāng)?shù)恼谑a。

（5）中耕與除草中耕是在中藥材生長(zhǎng)期間對(duì)土壤進(jìn)行曲淺層耕作。中耕可以疏松表土層，減少土壤水分蒸發(fā)，促進(jìn)土壤空氣流通，有利于微生物的活動(dòng)，提高土壤中有效養(yǎng)分的利用率，促進(jìn)中藥材生長(zhǎng)。中耕和除草往往結(jié)合進(jìn)行，這樣可以取得雙重的效果。中耕在苗期宜淺并要及時(shí)，每當(dāng)灌溉或降雨后，當(dāng)土壤表土稍干后就可以進(jìn)行，以減少土壤水分的蒸發(fā)及避免土壤發(fā)生板結(jié)和龜裂。當(dāng)中藥材逐漸長(zhǎng)大后，要根據(jù)苗木根系生長(zhǎng)情況來(lái)確定中耕深度。

除草是為了消滅雜草，減少與目標(biāo)植物爭(zhēng)奪水肥，防止病蟲(chóng)的滋生和蔓延。

除草一般也結(jié)合中耕、間苗等進(jìn)行，以節(jié)省勞力。防除雜草的方法很多，如精選種子、輪作換茬、水旱輪作、合理耕作、人工除草、機(jī)械中耕除草、化學(xué)除草等。（6）灌溉與排水

灌溉與排水是控制土壤水分，滿足藥材正常生長(zhǎng)發(fā)育對(duì)水分要求的措施。妝自然降水不能滿足中藥材植物生長(zhǎng)時(shí)，需要進(jìn)行人工灌溉。莖枝急速生長(zhǎng)時(shí)期是植物最需要水分?；ü愃幱弥参镌陂_(kāi)花期和果熟期不宜灌水，否則容易引起落花落果。當(dāng)雨水過(guò)多時(shí)要及時(shí)排水，特別是根類及地下莖類藥用植物注意排水，否則容易引起爛根。對(duì)于多年生藥用植物，為了使其安全越冬，不造成冬季的凍害，應(yīng)在土地結(jié)凍前灌一次“封凍水”。（7）施肥

藥用植物栽培定苗后，依植株生長(zhǎng)發(fā)育狀況及時(shí)施肥。肥料分為有機(jī)肥和無(wú)機(jī)肥。有機(jī)肥一般都作基肥使用，供應(yīng)植物整個(gè)生育期的需求。栽培根及地下莖類中藥材時(shí)多施有機(jī)肥。無(wú)機(jī)肥分解快，極易被植物吸收，為速效性肥料，一般多在植物生長(zhǎng)期間作追肥。種植一年生或二年生的全草類中藥材時(shí)在苗期要多追肥氮肥，促進(jìn)植物莖葉生長(zhǎng)，生長(zhǎng)后期可配合施用磷肥、鉀肥。對(duì)于多年生和根及地下莖類中藥材，追肥次數(shù)要少，一般在春季開(kāi)始生長(zhǎng)后進(jìn)行第一次追肥，開(kāi)花前第二次，開(kāi)花后第三次，冬季要重施肥。對(duì)于木本花、果、種子類中藥材，應(yīng)在秋季植物進(jìn)入休眠期前有機(jī)肥與無(wú)機(jī)肥一起施入，效果較好。謝謝欣賞扦插繁殖教學(xué)要求

通過(guò)本任務(wù)的學(xué)習(xí)，能熟練掌握常見(jiàn)藥用植物扦插繁殖的主要技術(shù)流程，并能獨(dú)立完成扦插繁殖的工作。目錄

一.扦插的種類及方法

二.扦插時(shí)間

三.影響插條成活的因素

四.促進(jìn)插條生根的方法

藥用植物的扦插繁殖是利用藥用植物營(yíng)養(yǎng)器官具有的再生能力，切取其莖、葉或根的一部分，適宜條件下插入基質(zhì)中，使其生根、萌芽、抽枝，長(zhǎng)成為新植株的繁殖方法。如杜仲、枸杞、金銀花等可用此法進(jìn)行繁殖。一、扦插的種類及方法

扦插方法主要有枝插法和根插法兩種，其中以枝插法最為普遍。

（一）枝插法

枝插法是利用植物的枝條，剪成長(zhǎng)短適宜的插穗插入基質(zhì)中，進(jìn)行繁殖的方法，分為嫩枝扦插、短枝扦插和硬枝扦插。一般插穗的上切口剪成平口，離最上面一個(gè)芽1～2cm為宜，下切口剪成45°，利于后期生根。枝插法又分為嫩枝扦插、短枝扦插和硬枝扦插。

1.嫩枝扦插法

又稱綠枝扦插，插條為尚未木質(zhì)化或半木質(zhì)化的當(dāng)年生的枝條或新梢，以開(kāi)始木質(zhì)化的嫩枝為最好，因?yàn)槠鋬?nèi)含的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)豐富，生命活動(dòng)力強(qiáng)，容易愈合生根，過(guò)嫩或已完全木質(zhì)化的枝條則不宜采用。草本植物一般用當(dāng)年生嫩枝或芽扦插，如菊花、藿香等，一般在5～7月扦插，每一插條有2～3個(gè)芽，其長(zhǎng)度為10～20cm，上部保留葉片1～2枚，大葉片可剪去部分，以減少水分蒸發(fā)。嫩枝扦插多在高溫季節(jié)，所以插后尤其要注意遮陰和保持土壤與空氣濕潤(rùn)。

在溫度較高和陽(yáng)光充足的季節(jié)進(jìn)行綠枝扦插，有條件的地區(qū)可采取“全光照間歇噴霧扦插法”，用自動(dòng)控制裝置間歇噴霧，使插穗葉片披一層薄水膜，以此達(dá)到抑制蒸騰作用，減少呼吸作用消耗，增強(qiáng)光合作用，有利于生根。但土壤透氣排水力差時(shí)不宜使用此方法，插床的基質(zhì)以排水良好的蛭石、石英砂、粗砂混入泥炭等為宜。

2.短枝扦插法

:利用傘形科藁本屬植物川芎、藁本莖節(jié)膨大，觸地即生根萌發(fā)的特性，剪取只具一個(gè)節(jié)的莖干作插條，橫埋土中，即可生長(zhǎng)成為新個(gè)體。這種扦插方法是我國(guó)傳統(tǒng)的短枝扦插。3.硬枝扦插法

:插條為已木質(zhì)化的枝條，多用于木本植物。如桑、金銀忍冬、蔓荊、木槿、木瓜等。多選一二年生、發(fā)育健壯、表皮光滑的枝條，從母株割下，剪成10～20cm的小段，每段應(yīng)有2～3個(gè)芽，在其下端貼近節(jié)位處削成斜面有利于生根，上端平截或微斜，常綠木本植物要保留部分葉片，在準(zhǔn)備好的插床上，先開(kāi)橫溝，將插條按一定株距斜倚溝壁，上端露出土面約為1/4～1/3，覆土壓緊，使插條與土壤緊貼，插好后澆水，注意保持土壤濕潤(rùn)，以有利于插條生根，也可覆蓋薄膜或草稈等增溫保濕。（二）根插法

根插法是剪取植物的根插人或埋人土中，使之成為新個(gè)體的繁殖方法，如草本植物丹參、防風(fēng)等、木本植物杜仲、山楂等可采用此法。一般應(yīng)選擇健壯的幼齡樹(shù)或生長(zhǎng)健壯的1～2年生苗作為采根母樹(shù)，根穗的年齡以一年生為好。根穗可從母樹(shù)周圍挖取，采根時(shí)勿傷根皮，隨采隨插。根穗直徑應(yīng)在0.5cm以上，長(zhǎng)度一般可剪成8～12cm。根的上端可剪成平口，下端為斜口。在整好的苗床上開(kāi)橫溝，將根插條按7～10cm株距，其上端朝一個(gè)方向稍低于土面斜倚溝壁，扦插時(shí)注意不能倒插，最后覆土稍壓緊，使根條與土壤緊貼，澆水，并保持濕度，插條成活后移栽。二、扦插時(shí)間

露地扦插時(shí)間因植物種類、特性和氣候特點(diǎn)而異。一般4月下旬至10月下旬均可進(jìn)行。草本植物適應(yīng)性較強(qiáng)，對(duì)扦插時(shí)間要求不嚴(yán)，除嚴(yán)寒、酷暑外，其他時(shí)間均可進(jìn)行；木本植物一般以在植物休眠期扦插為宜；常綠植物則適宜在溫度較高、濕度較大的夏季扦插。若有保溫設(shè)施，一年四季均可扦插育苗。三、影響插條成活的因素

影響扦插生根成活的因素有植物種類、插條的年齡及部位、枝條的發(fā)育狀況、扦插基質(zhì)及溫度、水分、氧氣、光照等環(huán)境條件。天麻故事相傳遠(yuǎn)古時(shí)代，在烏蒙山的密林深處，居住著一個(gè)彝族原始部落，部落首領(lǐng)得了一種頭暈眼花、四肢無(wú)力的怪病。山民們祈求上天賜藥。上天見(jiàn)這個(gè)部落勤勞勇敢，便派一匹天馬送靈藥下凡，播撒在這片原始叢林之中。人們?yōu)榱烁卸?，就把這種靈藥叫做“天馬”，久而久之，彝語(yǔ)就衍化成了“天麻”。

1.植物的扦插生根能力主要取決于藥用植物的種類和品種，以及插條所取的部位。枝條年齡較小，皮層幼嫩，其分生組織生活力旺盛，再生能力也強(qiáng)，易生根成活。插條中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)淀粉和可溶性糖類含量高時(shí)發(fā)根力強(qiáng)。此外，激素能加強(qiáng)淀粉和脂肪的水解，提高過(guò)氧化氨酶等的活性，促進(jìn)新陳代謝，從而加速細(xì)胞分裂和愈傷組織的形成，有利于提高插條的生根能力。

2.在插條生根期間，大氣中應(yīng)保持較大濕度，避免插條水分過(guò)多散失而枯萎。插床土壤的水分含量一般不能低于田間持水量的50％～60％，尤其在溫度較高、光照較強(qiáng)的情況下，若水分不足，則影響插條的成活。其次，各種植物插條生根對(duì)溫度與空氣有一定的要求。一般插條生根最適土溫為15～20℃。土壤通氣良好則有利于插條發(fā)根，故苗床以選擇土質(zhì)疏松、通氣和保水狀況良好的砂質(zhì)壤土為宜。四、促進(jìn)插條生根的方法

為促進(jìn)插穗生根，對(duì)于扦插不易成活的藥用植物，可在母株上剪取插穗前，對(duì)選定的枝條采用環(huán)剝、刻傷、縊傷等方法進(jìn)行處理，使?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)聚積在傷口附近，然后剪取枝條扦插，可促進(jìn)其生根。法

不易成活的藥用植物可采用萘乙酸、ABT生根粉、2,4-D、吲哚乙酸、吲哚丁酸等生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑進(jìn)行處理，可顯著縮短插條發(fā)根的時(shí)間，誘導(dǎo)生根困難的植物插條生根，提高插條成活率。法法

先用少量酒精將生長(zhǎng)素溶解，然后配置成不同濃度的藥液進(jìn)行浸蘸。具體處理時(shí)間與溶液的濃度隨樹(shù)種和插條種類的不同而異。一般生根較難的濃度要高些，生根較易的濃度要低些。硬枝濃度高些，嫩枝濃度低些。如以0.1%2，4-D粉劑處理酸橙的插條，發(fā)根率達(dá)100%。此外，也可用高錳酸鉀、醋酸、二氧化碳、氧化錳、硫酸鎂、硫酸處理插條。如丁香、石竹等植物的插條下端用5%～10%的蔗糖溶液浸漬24h后扦插，生根效果顯著。法【任務(wù)實(shí)施】一、材料準(zhǔn)備將生根粉、乙醇（95%）、扦插材料、鐵鍬、鐵鈀、枝剪、盆子、灑壺等材料和工具準(zhǔn)備好。二、實(shí)施步驟1.選取枝條。一般選取生長(zhǎng)健壯、表皮光滑的枝條。2.根據(jù)所提供的材料，正確剪取插穗。一般剪成10～20cm的小段，每段應(yīng)有2～3個(gè)芽，在其下端貼近節(jié)位處削成斜面有利于生根，上端平截或微斜，常綠木本植物要保留部分葉片，葉片過(guò)大的要剪成半葉，以便減少水分的蒸發(fā)。3.插穗處理。掌握插穗處理藥劑的濃度及處理時(shí)間。4.扦插。插床的整平、正確扦插。5.插后管理。扦插后將水澆透，光照適宜，保持一定的空氣濕度法【思考與練習(xí)】1.藥用植物扦插的原理是什么？2.以藥用玫瑰為例，寫(xiě)出其扦插繁殖的主要步驟。3.中藥材扦插育苗的主要技術(shù)要領(lǐng)是什么？謝謝欣賞嫁接繁殖教學(xué)要求

通過(guò)本任務(wù)的學(xué)習(xí)，能熟練掌握常見(jiàn)藥用植物嫁接繁殖的主要技術(shù)流程，并能獨(dú)立完成嫁接育苗的工作。目錄一、影響嫁接成活的因素二、嫁接的種類及方法

藥用植物的嫁接繁殖是將一種藥用植物體的枝或芽嫁接到另一藥用植物體上，使其愈合生長(zhǎng)在一起形成一新植株的繁殖方法。通常把嫁接用的枝條或芽叫接穗，承接接穗帶根系的植株叫砧木。嫁接繁殖能夠提高繁殖系數(shù)，保持植物品種優(yōu)良性狀，也能引起遺傳物質(zhì)的改變，創(chuàng)造新品種，改進(jìn)品質(zhì)和提高產(chǎn)量，同時(shí)。嫁接繁殖還可大大縮短生產(chǎn)年限，如山茱萸實(shí)生苗需要8～10年才開(kāi)花結(jié)果，而嫁接苗只需2～3年即可結(jié)果。以花果類入藥的木本藥用植物應(yīng)用較多，但藥用植物的嫁接要注意有效成分的變化。藥用植物中采用嫁接繁殖的有訶子、金雞納、木瓜、山楂、辛夷等。一、影響嫁接成活的因素

嫁接成活的關(guān)鍵是接穗和砧木兩者形成層的緊密結(jié)合，產(chǎn)生愈傷組織。所以接穗的削面一定要平，接入時(shí)才能與砧木緊密結(jié)合，兩者的形成層對(duì)準(zhǔn)，有利于愈合。動(dòng)作要準(zhǔn)確快捷，捆扎松緊適度，并要防止接口感染和水分蒸發(fā)。影響嫁接成活的因素有內(nèi)因和外因兩個(gè)方面。（一）內(nèi)在因素

內(nèi)在因素包括砧木和接穗之間的親緣關(guān)系、兩者生長(zhǎng)發(fā)育狀態(tài)及其他內(nèi)含物狀況等。1.砧木與接穗的親緣關(guān)系

親緣關(guān)系是砧木和接穗在內(nèi)部組織結(jié)構(gòu)上、生理上和遺傳上彼此相同或相近的程度，表示砧木和接穗經(jīng)嫁接而能愈合生長(zhǎng)的能力。親緣關(guān)系越近的植株間嫁接容易成活，生長(zhǎng)發(fā)育正常。反之，親緣關(guān)系越遠(yuǎn)的植物間嫁接不易成活，即使成活但生長(zhǎng)發(fā)育不良，容易從接口處劈斷或過(guò)早衰亡。一般說(shuō)來(lái)，嫁接時(shí)接穗和砧木的配置要選擇近緣植物。2.砧木與接穗的生長(zhǎng)發(fā)育狀態(tài)

一般植物生長(zhǎng)健壯，接穗和砧木貯有較多養(yǎng)分，就比較容易成活。在形成層活躍生長(zhǎng)期間，砧木與接穗兩者木質(zhì)化程度越高，嫁接越易成活。接穗的含水量也會(huì)影響形成層細(xì)胞的活動(dòng)，通常接穗含水量在50％左右時(shí)為好。砧木和接穗的樹(shù)液流動(dòng)期和發(fā)芽期越是相近或相同，成活率也就越高，反之成活率就低。一般于砧木已開(kāi)始萌動(dòng)，接穗將要萌動(dòng)時(shí)進(jìn)行嫁接為宜。否則，接穗已萌發(fā)，抽枝發(fā)葉，而砧木供應(yīng)不上養(yǎng)分，就會(huì)影響嫁接成活。3.植物內(nèi)含物

核桃等植物含有較多的酚類物質(zhì)（如單寧），嫁接時(shí)，傷口的單寧物質(zhì)在多酚氧化酶的作用下，形成高分子的黑色濃縮物，使愈傷組織難以形成，造成接口的霉?fàn)€。同時(shí)單寧物質(zhì)也直接與構(gòu)成原生質(zhì)的蛋白質(zhì)結(jié)合發(fā)生沉淀作用，使細(xì)胞原生質(zhì)顆?；?，從而在結(jié)合之間形成隔離層，阻礙砧木和接穗的物質(zhì)交接愈合，導(dǎo)致嫁接失敗。

（二）環(huán)境條件

環(huán)境條件主要指溫度和濕度。形成層薄壁細(xì)胞的分生組織活動(dòng)產(chǎn)生愈傷組織，要求一定的溫度和濕度，并且是在一定的養(yǎng)分和水分條件之下進(jìn)行的。溫度過(guò)高，蒸發(fā)量大，切口水分消失快，不能在愈傷組織表面保持一層水膜，不易成活。春季雨天，氣溫低、濕度大，形成層分生組織活動(dòng)力弱，愈合時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，往往造成接口腐爛。不同植物形成層活動(dòng)要求的溫度不同，一般以20～25℃為宜。二、嫁接的種類及方法

目前藥用植物嫁接常用的方法主要有枝接和芽接兩種方法。（一）枝接法

枝接法是用帶有2～3個(gè)芽的1～2年生枝條作接穗，基部削成與砧木切口易于密接的削面，然后插入砧木的切口中，注意砧木和接穗形成層對(duì)體吻合，并綁縛覆土，使之結(jié)合成活為新植株。枝條宜隨采隨用，不宜用水浸泡。此法的優(yōu)點(diǎn)是接后苗木生長(zhǎng)快，健壯整齊，當(dāng)年即可成苗，但需要接穗數(shù)量大，可供嫁接時(shí)間較短。根據(jù)嫁接的形式枝接法又可分為劈接、切接、舌接、皮下接等，其中應(yīng)用最普遍的是切接和劈接；芽接包括“T”形芽接、嵌芽接等。1.切接

多在早春樹(shù)木開(kāi)始萌動(dòng)而尚未發(fā)芽前進(jìn)行。砧木選用直徑為2～3cm的幼苗，先將砧木距地面5cm左右處剪斷、削平，選擇較平滑的一面，用切接刀在砧木一側(cè)(略帶木質(zhì)部)垂直向下切，深約2～3cm。再選取具有2～3個(gè)完整飽滿芽、長(zhǎng)為5～10cm的接穗，頂端剪去梢部，將接穗從距下切口最近的芽位背面，用切接刀向內(nèi)切達(dá)木質(zhì)部（不要超過(guò)髓心），隨即向下平行切削到底，切面長(zhǎng)2～3cm，再于背面末端削成0.8～1cm的小斜面。斜面均需平滑，以利于和砧木接合。將削好的接穗長(zhǎng)削面直插入砧木切口中，使雙方形成層相互密接。接穗插入的深度以接穗削面上端露出0.2～0.3cm為宜，俗稱“露白”，有利愈合成活。接好后，用塑料條或麻皮等捆扎物由下向上捆緊，必要時(shí)可在接口處涂上石蠟或用疏松濕潤(rùn)的土壤埋蓋，以減少水分蒸發(fā)，利于成活。2.劈接

劈接適用于砧木較粗大的嫁接。方法是選取砧木，在離地面5～10cm處橫切，在斷面中心垂直劈開(kāi)，深約5cm，然后選取長(zhǎng)約10cm、帶3～4個(gè)芽的接穗，在接穗下端頂芽的兩側(cè)削成平滑的楔形切面，輕輕插入砧木劈口，使接穗與砧木的形成層相互對(duì)準(zhǔn)并緊密相接，砧木粗壯的可在兩側(cè)各插一條接穗，再用塑料帶捆扎緊，用接蠟或黃泥漿封好接口，或套塑料袋等以保濕，防止干燥。

枝接后20～30d檢查成活率。成活接穗上的芽新鮮、飽滿，甚至已經(jīng)萌動(dòng)，接口處產(chǎn)生愈傷組織。未成活的接穗則干枯，或變黑發(fā)霉。已成活的植株，解除或放松綁扎物。待接穗長(zhǎng)出土面時(shí)，去掉覆土。當(dāng)嫁接苗長(zhǎng)出新梢時(shí)，應(yīng)及時(shí)立支柱，防止其被風(fēng)吹斷。（二）芽接法

芽接法是在接穗枝條上切取一個(gè)芽（略帶或不帶木質(zhì)部），插入到砧木上的切口中，并綁扎，使之密接愈合，成活后萌發(fā)形成新植株。。它具有接合牢固、易成活、操作簡(jiǎn)便、應(yīng)用廣泛等優(yōu)點(diǎn)。一般在早春或夏末秋初（7～9月）進(jìn)行。秋季嫁接時(shí)間太晚，氣溫低會(huì)影響接芽成活或凍死接芽抽生的嫩枝。在生產(chǎn)上應(yīng)用最多的芽接法是“T”形芽接。

砧木一般選用1～2年生，莖粗0.5cm的實(shí)生苗。方法是：在距離地面5厘米左右處選光滑無(wú)節(jié)部位，橫切一刀，深度以切斷皮層為準(zhǔn)，然后從橫切口中央切一垂直口，長(zhǎng)約2cm左右，切口呈“T”字型，深度以切穿皮層而不傷或微傷木質(zhì)部為度，將皮層向兩側(cè)撕開(kāi)。

從當(dāng)年生枝條剪取留有葉柄的芽作接穗，削芽片時(shí)先從芽上方0.5cm左右橫切一刀，刀口長(zhǎng)約0.8～1cm，深達(dá)木質(zhì)部，

再?gòu)难科路?cm左右連同木質(zhì)部向上切削到橫切口處

取下芽，芽片要削成盾形。芽居芽片正中或稍偏上一點(diǎn)，長(zhǎng)2～3cm，寬1cm左右，稍帶木質(zhì)部。最后把芽片放入切口

由上而下將芽片插入砧木切口內(nèi)，使芽片和砧木皮層緊貼

用麻皮或塑料條綁扎。注意將芽和葉柄留在外面，以便檢查成活。天麻故事

芽接后7～10d檢查成活率。成活的芽下的葉柄一觸即掉，芽片皮色鮮綠。未成活則芽片干枯變黑。嫁接未成活應(yīng)在其上或其下錯(cuò)位及時(shí)進(jìn)行補(bǔ)接。在檢查時(shí)如發(fā)現(xiàn)綁縛物太緊，要松綁或解除綁縛物，以免影響接穗的發(fā)育和生長(zhǎng)。一般當(dāng)新芽長(zhǎng)至2～3cm時(shí)，即可全部解除綁縛物，但不宜松綁過(guò)早，避免接穗從接口處碰落或被風(fēng)吹折。松綁時(shí)以不影響砧木和接穗的生長(zhǎng)分化，不形成縊痕為好。芽接的嫁接苗當(dāng)接穗成活后要及時(shí)斷砧，即剪去接口上部的砧木，以免影響接穗的生長(zhǎng)；及時(shí)抹除嫁接苗砧木上經(jīng)常長(zhǎng)出的萌條和根蘗，減少與接穗爭(zhēng)奪養(yǎng)分，保證接穗的正常生長(zhǎng)，抹芽除蘗最好從萌條或蘗的基部剪除?！救蝿?wù)實(shí)施】一、材料準(zhǔn)備將砧木、接穗、嫁接刀、枝剪、麻皮或塑料綁扎帶等材料和工具準(zhǔn)備好。二、實(shí)施步驟1.接穗選取。一般選取生長(zhǎng)健壯、表皮光滑的枝條作為接穗。2.根據(jù)所提供的砧木材料，正確剪取。一般離地面5～10cm處橫切，采用不同的嫁接方法在砧木上進(jìn)行削切，然后選取帶有2～3個(gè)芽的1～2年生枝條作接穗，基部削成與砧木切口易于密接的削面，然后插入砧木的切口中，注意砧木和接穗形成層對(duì)體吻合，并綁縛扎緊，用接蠟或黃泥漿封好接口，或套塑料袋等以保濕，防止干燥。3.接穗嫁接成活后要將砧木上的萌蘗及時(shí)去除，以免與其爭(zhēng)奪養(yǎng)分，影響新植株體正常生長(zhǎng)。法【思考與練習(xí)】1.藥用植物嫁接的原理是什么？2.中藥材嫁接育苗的主要技術(shù)要領(lǐng)是什么？

謝謝欣賞分株繁殖教學(xué)要求

通過(guò)本任務(wù)的學(xué)習(xí)，能熟練掌握常見(jiàn)藥用植物的分離繁殖的主要技術(shù)流程，并能獨(dú)立完成分離育苗的工作。目錄一、分離繁殖時(shí)間二、分離繁殖的類型

分離繁殖指人為地將植物體分生出來(lái)的幼植株（吸芽、株芽、根蘗等）或者植物營(yíng)養(yǎng)器官的一部分（變態(tài)莖等）進(jìn)行分離或分割，脫離母體而形成獨(dú)立植株的繁殖方法。該方法簡(jiǎn)便，成活率高。宿根性多年生藥用植物多采用此法進(jìn)行繁殖。一、分離繁殖時(shí)間

因藥用植物種類和氣候差異，分離繁殖的時(shí)期一般在春季發(fā)芽前的休眠期、秋季落葉后進(jìn)行，具體時(shí)間依據(jù)各地氣候條件而定。

繁殖材料選擇具有完整根系或芽飽滿、無(wú)病蟲(chóng)害的球莖、鱗莖、塊莖、根莖。脫離母體后，先晾1～2d，使傷口稍干，或拌草木灰，促進(jìn)傷口愈合，減少腐爛。栽種時(shí)，球莖和鱗莖類材料的芽朝上擺放，分株和根莖類材料根系要舒展，覆土深淺應(yīng)適度。二、分離繁殖的類型

分離繁殖主要有以下幾種類型：

1.分萌蘗又稱分株繁殖，指將株叢分割成單株或挖取母株的萌蘗進(jìn)行栽種。如五味子、砂仁、沿階草、木瓜、吳茱萸、菊花、薄荷、玉蘭等均可采用此法，多般在早春進(jìn)行。為了獲得較多萌蘗，可將植株地上部分剪除，堆土覆蓋，抽枝后再進(jìn)行分株移栽。2.分球莖

將地下小球莖用來(lái)培育成新植株，如番紅花、慈姑等球莖類藥材用此方法繁殖。3.分鱗莖

將地下小鱗莖分離或大鱗莖分瓣、切瓣進(jìn)行繁殖，成為新個(gè)體，如百合、平貝母等鱗莖類藥材用此方法繁殖。4.分塊莖

將地下新生的小塊莖用來(lái)繁殖成新植株，如天南星、掌葉半夏、延胡索、地黃、山藥、白芨等塊根塊莖類藥材用此方法繁殖。5.分根莖

在早春選取帶芽的根莖，分割下來(lái)另行栽植，如射干、紫菀、馬兜鈴、丹參、芍藥、牡丹等根莖類藥材可用此方法繁殖。6.分珠芽

如半夏、黃獨(dú)、山藥、卷丹等的葉腋部長(zhǎng)有珠芽，取下葉繁殖成新個(gè)體法【思考與練習(xí)】1.藥用植物分離繁殖的最佳時(shí)間是？2.中藥材分離育苗的主要技術(shù)要領(lǐng)是什么？

謝謝欣賞壓條繁殖教學(xué)要求

通過(guò)本任務(wù)的學(xué)習(xí)，能熟練掌握常見(jiàn)藥用植物的壓條繁殖的主要技術(shù)流程，并能獨(dú)立完成壓條育苗的工作。目錄

1.堆土壓條2.屈枝壓條3.空中壓條

壓條繁殖是將母株上的一部分枝條或莖蔓埋壓土中或用泥土、青苔等濕潤(rùn)材料包裹促使枝條的被壓部分生根，然后與母株分離，成為獨(dú)立的新植株。由于在生長(zhǎng)過(guò)程中持續(xù)得到母株的營(yíng)養(yǎng)，壓條繁殖比扦插、嫁接容易生根，但繁殖速度較慢。馬兜鈴、玫瑰、何首烏、蔓荊子、連翹、枸杞、金銀花等都可以用此法繁殖。

壓條時(shí)期視植物種類和當(dāng)?shù)貧夂驐l件而定，一般在春季和秋季都可進(jìn)行，次年秋季即可分離母體。在夏季生長(zhǎng)期間壓條，應(yīng)將枝梢頂端剪去，使養(yǎng)分向下方集中，有利于生根。壓條繁殖可分為堆土壓條、曲枝壓條、空中壓條三種方法。

1.堆土壓條

凡枝條較硬的藥用植物可采用此法。方法是：早春發(fā)芽前堆土于母株周圍，使大部分枝條埋于土中。堆土前在枝條的基部刻傷或進(jìn)行環(huán)狀剝皮，促進(jìn)愈合生根。生根后分離每一枝條均可成為一新植株。注意灌水、施肥等，促進(jìn)生根。

2．曲枝壓條

凡枝條離地面近且容易彎曲的藥用植物可采用此法。方法是：將植株基部枝條彎曲至地面，將彎曲部分埋入土中，再將土壓實(shí)，并彎曲處分別插人木棍固定。露出地面的枝條用支柱扶直。埋人土中的部分要刻傷或進(jìn)行環(huán)狀剝皮，生根后與母體分離栽植。枝條長(zhǎng)而柔軟或?yàn)樘俦局参?，如連翹、忍冬、蔓荊子等可采用此方法進(jìn)行繁殖。

3．空中壓條

凡是枝條不易彎曲到地面、樹(shù)冠高大和基部枝條缺乏、不易發(fā)生根蘗的樹(shù)種，均可用此法繁殖，如木瓜、玉蘭、佛手、梅樹(shù)等。具體方法是：發(fā)芽前選擇健壯的1～2年生枝條，做刻傷或環(huán)狀剝皮。將松彰細(xì)土和苔蘚混合后裹上，外用塑料薄膜包扎，上下兩頭捆緊。壓條之后應(yīng)保持土壤的濕度，調(diào)節(jié)土壤通氣和適宜的溫度，適時(shí)灌水，及時(shí)中耕除草。同時(shí)要注意檢查埋入土中的壓條是否露出地面，若露出則需重壓，留在地上的枝條如果太長(zhǎng)，可適當(dāng)剪去部分頂梢。待長(zhǎng)出新株后，便與母株分離栽植。

【任務(wù)實(shí)施】一、材料準(zhǔn)備

準(zhǔn)備好鐵鍬、小鍬、枝剪、釘齒鈀等工具。二、實(shí)施步驟

壓條最好在春季進(jìn)行，有時(shí)也可在秋季進(jìn)行。一般常綠植物多在梅雨季節(jié)進(jìn)行，此時(shí)溫度高、濕度大，常綠植物易生根成活；落葉植物多在秋季或早春萌發(fā)前進(jìn)行，此時(shí)養(yǎng)分積累豐富，也有利于壓條生根。通常將枝條壓彎，置入挖好的溝中，放入枝條后，用土封埋，枝梢豎起捆在支柱上。枝條長(zhǎng)的可連壓數(shù)段。為促進(jìn)生根，可在壓土的部位用刀切一傷口。連翹、金銀花、枸杞等可采用此法。

【思考與練習(xí)】1.藥用植物分離繁殖的最佳時(shí)間是？2.中藥材分離育苗的主要技術(shù)要領(lǐng)是什么？

謝謝欣賞組織繁殖教學(xué)要求

通過(guò)本任務(wù)的學(xué)習(xí)，能熟練掌握常見(jiàn)藥用植物組培快繁的主要技術(shù)流程，能獨(dú)立完成中草藥組織培養(yǎng)的工作，并對(duì)期間發(fā)生的異常狀況作出相應(yīng)處理，如污染、褐化、黃化、玻璃化、性狀變異等。目錄一、植物組培快繁技術(shù)的概念

二、植物組織培養(yǎng)的相關(guān)術(shù)語(yǔ)三、植物組培快繁的類型

四、植物組織培養(yǎng)的基本原理五、植物組織培養(yǎng)所需的培養(yǎng)條件

六、選擇外植體要考慮的因素七、無(wú)菌操作技術(shù)

八、離體快繁中存在的問(wèn)題及解決途徑

一、植物組培快繁技術(shù)的概念植物組培快繁就是利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，快速繁殖“名、優(yōu)、特、新、稀”等植物品種，使其在短時(shí)間內(nèi)繁衍大量植株的一套技術(shù)與方法，又叫植物離體快繁技術(shù)或試管快繁技術(shù)。而植物組織培養(yǎng)是指在無(wú)菌條件下，將植物的任何器官、組織、細(xì)胞或原生質(zhì)體，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，并給予適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)條件，使其生長(zhǎng)分化形成完整植株的過(guò)程。二、植物組織培養(yǎng)的相關(guān)術(shù)語(yǔ)

外植體：泛指第一次接種所用的植物組織、器官等一切材料，包括頂芽、腋芽、莖段、莖尖、形成層、皮層、花序、花瓣、胚珠、葉片、葉柄、花粉、根、表皮組織、胚、胚軸、子葉、胚根、塊莖、原生質(zhì)體等。

培養(yǎng)基：是供植物組織生長(zhǎng)的人工配制的養(yǎng)料，一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無(wú)機(jī)鹽（包括微量元素）以及維生素和水等。不同培養(yǎng)基可根據(jù)實(shí)際需要，添加一些自身無(wú)法合成的化合物，即生長(zhǎng)因子。

植物生長(zhǎng)物質(zhì)：是指具有調(diào)節(jié)植物生長(zhǎng)發(fā)育作用的微量有機(jī)化學(xué)物質(zhì)，可分為植物激素和植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑兩大類。

植物激素：是指植物體內(nèi)合成的，并能從產(chǎn)生之處運(yùn)送到他處，對(duì)植物生長(zhǎng)發(fā)育產(chǎn)生顯著作用的微量有機(jī)化學(xué)物質(zhì)。

植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑：人工合成的、生理效應(yīng)與植物激素類似的，具有調(diào)節(jié)植物生長(zhǎng)發(fā)育的物質(zhì)，為了與內(nèi)源激素相區(qū)別，被稱為外源激素，有時(shí)也稱植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑。

愈傷組織：原指植物在受傷之后于傷口表面形成的一團(tuán)薄壁細(xì)胞，在組培中則指在人工培養(yǎng)基上由外植體長(zhǎng)出來(lái)的一團(tuán)無(wú)序生長(zhǎng)的薄壁細(xì)胞。

脫分化：在組織培養(yǎng)中，不分裂的靜止細(xì)胞，放在一定的培養(yǎng)基上后，細(xì)胞重新進(jìn)入分裂狀態(tài)，由一個(gè)成熟的細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)榉稚鸂顟B(tài)的過(guò)程叫脫分化。

再分化：一個(gè)成熟的植物細(xì)胞經(jīng)歷了脫分化后，能再分化而形成完整植株的過(guò)程。

體細(xì)胞胚：又稱胚狀體，指在組織培養(yǎng)中，由一個(gè)非合子細(xì)胞（體細(xì)胞），經(jīng)過(guò)胚胎發(fā)生和胚胎發(fā)育過(guò)程（經(jīng)過(guò)原胚、球形胚、心形胚、魚(yú)雷胚和子葉胚5個(gè)時(shí)期），形成的具有雙極性的胚狀結(jié)構(gòu)。

原球莖：種子萌發(fā)時(shí)先是胚的膨大，種皮破裂，40d時(shí)肉眼可見(jiàn)淺黃色的原胚呈球狀,稱為原球莖。蘭科植物莖尖等外植體在組培中也可誘導(dǎo)產(chǎn)生原球莖，并且原球莖還可以切割成若干小塊，分別形成新的若干原球莖叢。

初代培養(yǎng)：是指在組培過(guò)程中，最初建立的外植體無(wú)菌培養(yǎng)階段，即無(wú)菌接種完成后，外植體在適宜的光照、溫度、氣體等條件下被誘導(dǎo)成莖梢、不定芽或叢生芽、胚狀體或原球莖的過(guò)程，因此也稱為誘導(dǎo)培養(yǎng)。

繼代培養(yǎng)：將培養(yǎng)的細(xì)胞、組織或器官乃至小植株從原來(lái)的培養(yǎng)基上轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)的過(guò)程。

煉苗：為了使試管苗適應(yīng)移栽后的環(huán)境并進(jìn)行自養(yǎng)，必須有一個(gè)逐步鍛煉和適應(yīng)的過(guò)程，這個(gè)過(guò)程叫馴化或煉苗。煉苗的目的在于加強(qiáng)對(duì)外界環(huán)境條件的適應(yīng)，提高其光合作用能力，促使其健壯生長(zhǎng)，最終達(dá)到提高其移栽成活率的目的。三、植物組培快繁的類型

植物組織培養(yǎng)中從一個(gè)單細(xì)胞、一塊愈傷組織、一個(gè)芽或其他器官都可以獲得無(wú)性系。無(wú)性系就是用植物體細(xì)胞繁殖所獲得的后代，用植物組織培養(yǎng)技術(shù)快速繁殖的無(wú)性系可概括為以下幾個(gè)類型：

1.器官直接轉(zhuǎn)變型

器官直接轉(zhuǎn)變型是由離體的莖尖、莖鱗片、葉片、腋芽等組織、器官上直接產(chǎn)生再生植株。雖然選材受一定的限制，但是這種方式發(fā)生的組培苗卻具有很強(qiáng)的遺傳穩(wěn)定性。黃山藥的帶芽莖段、菊花葉片均可誘導(dǎo)出不定芽進(jìn)行快繁。

由于莖尖分生能力強(qiáng)、生長(zhǎng)速度快、無(wú)病毒或帶病毒少，所以基于莖尖脫毒技術(shù)生產(chǎn)脫毒優(yōu)良種苗以及種質(zhì)優(yōu)化，在中藥材規(guī)模種植中已產(chǎn)生巨大的經(jīng)濟(jì)效益。如懷地黃可通過(guò)莖尖快繁技術(shù)獲得脫病毒組培苗。

2.間接器官發(fā)生型

這種方式與器官直接轉(zhuǎn)變型的最大不同之處就是有明顯的愈傷組織階段。雖然此類型的外植體材料選擇范圍廣泛，而且繁殖效率很高，但由于在整個(gè)過(guò)程中有較高的產(chǎn)生多倍體或非整倍變異細(xì)胞的概率，因此存在著可能破壞種質(zhì)的可能。很多藥用植物都可以通過(guò)誘導(dǎo)愈傷組織培養(yǎng)分化獲得再生植株，如西洋參的根、甘草、黃芪、桔梗、白芷、玄參、丹參等。3.胚狀體發(fā)生型

從細(xì)胞或愈傷組織通過(guò)胚狀體途徑，即由球形期、魚(yú)雷期、心形期、子葉期經(jīng)成熟胚發(fā)育成植株。如三七、珊瑚菜、人參都可通過(guò)胚狀體途徑形成植株。

4.原球莖型

蘭科植物的種子往往含有一些發(fā)育不完全的球形胚，自然狀態(tài)下萌發(fā)較難，但運(yùn)用快繁技術(shù)可以解決這一難題。鐵皮石斛等蘭科植物通過(guò)原球莖階段，可成功培育出組培苗，且遺傳性狀穩(wěn)定。5.無(wú)菌短枝扦插

選取已發(fā)育成熟的腋芽，連同短枝經(jīng)表面滅菌后，在無(wú)菌條件下培養(yǎng)，使其生根。腋芽可用生長(zhǎng)激素處理，促使其萌發(fā)，這一方法在較短時(shí)間內(nèi)即可獲得一個(gè)植株，對(duì)保存珍貴的優(yōu)良品種是簡(jiǎn)易而有效的方法。6.頂端分生組織伸長(zhǎng)型

即莖尖培養(yǎng)，培養(yǎng)材料為0.2mm～0.5mm的頂端分生組織，頂端分生組織生長(zhǎng)，莖段也隨之伸長(zhǎng)，再生成植株。莖尖伸長(zhǎng)后，如不能生根，可采用試管內(nèi)嫁接技術(shù)獲得完整植株，或直接將伸長(zhǎng)的莖尖嫁接到室外砧木上（試管外嫁接）。此種方式獲得的植株有限，一個(gè)頂端分生組織只能產(chǎn)生一個(gè)芽。四、植物組織培養(yǎng)的基本原理

在一個(gè)完整的植株上各部分的體細(xì)胞只能表現(xiàn)一定的形態(tài)，承擔(dān)一定的功能，這是由于受具體器官或組織所在環(huán)境影響的緣故，但是植物體的一部分，一旦脫離原來(lái)所在的器官或組織成為離體狀態(tài)時(shí)，在一定的營(yíng)養(yǎng)、激素等條件下，植物細(xì)胞就會(huì)脫分化、再分化，進(jìn)而表現(xiàn)出全能性。天麻故事相傳遠(yuǎn)古時(shí)代，在烏蒙山的密林深處，居住著一個(gè)彝族原始部落，部落首領(lǐng)得了一種頭暈眼花、四肢無(wú)力的怪病。山民們祈求上天賜藥。上天見(jiàn)這個(gè)部落勤勞勇敢，便派一匹天馬送靈藥下凡，播撒在這片原始叢林之中。人們?yōu)榱烁卸?，就把這種靈藥叫做“天馬”，久而久之，彝語(yǔ)就衍化成了“天麻”。

植物細(xì)胞全能性是指任何具有完整細(xì)胞核的植物細(xì)胞（不管性細(xì)胞還是體細(xì)胞），都擁有形成一個(gè)完整植株所必須的全部遺傳信息，在特定的環(huán)境下能夠進(jìn)行表達(dá)，產(chǎn)生一個(gè)獨(dú)立完整的個(gè)體。換句話說(shuō)，植物細(xì)胞只要有一個(gè)完整的膜系統(tǒng)和一個(gè)有生命力的核，即使已經(jīng)高度成熟和分化的細(xì)胞，也還保持著恢復(fù)到分生狀態(tài)的能力。其恢復(fù)過(guò)程取決于該細(xì)胞原來(lái)所處的自然部位及生理狀態(tài)。

實(shí)際上，全能性只是一種可能性，要把這種可能性變?yōu)楝F(xiàn)實(shí)必須滿足以下兩個(gè)條件：一是要把某些細(xì)胞從植物體其余部分的抑制性影響下解脫出來(lái)，即必須使這部分細(xì)胞處于離體的條件下。處于整體植株中的細(xì)胞接受其周圍細(xì)胞所產(chǎn)生的種種影響，會(huì)妨礙其全能性的表達(dá)，而一旦割斷胞間連絲，就為全能性的表達(dá)創(chuàng)造了條件。這是因?yàn)樵谡w植物中，某些細(xì)胞的發(fā)育取決于其周圍組織發(fā)出的一組信號(hào)，如果終止這些信號(hào)，例如孤立，而給予其他某種信號(hào)，就可能會(huì)轉(zhuǎn)變其發(fā)育方向乃至表達(dá)全能性；二是要給予他們適當(dāng)?shù)拇碳?，即給予一定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，并使他們受到一定激素的作用，一個(gè)已分化的細(xì)胞要表現(xiàn)它的全能性，必須經(jīng)歷脫分化和再分化兩個(gè)過(guò)程。在大多數(shù)情況下，脫分化是細(xì)胞全能性表達(dá)的前提，再分化是細(xì)胞全能性表達(dá)的最終體現(xiàn)。植物組織和細(xì)胞培養(yǎng)的目的就是人為設(shè)計(jì)培養(yǎng)基和創(chuàng)造培養(yǎng)條件來(lái)促使植物組織和細(xì)胞完成脫分化和再分化，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)全能性的表達(dá)。

根據(jù)細(xì)胞類型不同，其全能性表現(xiàn)從強(qiáng)到弱依次為：營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)中心＞形成層＞薄壁細(xì)胞＞厚壁細(xì)胞（木質(zhì)化細(xì)胞）＞特化細(xì)胞（篩管、導(dǎo)管細(xì)胞）。根據(jù)細(xì)胞所處組織的不同，其全能性表現(xiàn)從強(qiáng)到弱依次為：頂端分生組織＞居間分生組織＞側(cè)生分生組織＞薄壁組織（基本組織）＞厚角組織＞輸導(dǎo)組織＞厚壁組織。法五、植物組織培養(yǎng)所需的培養(yǎng)條件

1.溫度

溫度是影響外植體生長(zhǎng)和分化的重要條件，大多數(shù)情況下，由于一個(gè)培養(yǎng)室內(nèi)要同時(shí)培養(yǎng)許多種類的植物，為了照顧不同植物的溫度需求，將培養(yǎng)室內(nèi)的溫度一般設(shè)定為25℃左右，最高不高于35℃，最低不低于15℃。然而，由于植物長(zhǎng)期進(jìn)化的結(jié)果，不同起源的植物對(duì)環(huán)境溫度的要求各異，生長(zhǎng)在高寒地區(qū)的植物其最適生長(zhǎng)溫度較低，而生長(zhǎng)在熱帶地區(qū)的植物則要求較高的環(huán)境溫度。因此，在條件允許的情況下，可以根據(jù)不同植物對(duì)環(huán)境溫度的要求來(lái)設(shè)定培養(yǎng)室溫度，如果利用智能型光照培養(yǎng)箱，還可采用變溫培養(yǎng)。法2.光照

植物組織培養(yǎng)是在含糖的培養(yǎng)基上進(jìn)行的，因此光照的主要作用在于形態(tài)建成的誘導(dǎo)，它對(duì)細(xì)胞、組織、器官的生長(zhǎng)及分化發(fā)生作用。在植物組織培養(yǎng)中，使用的光照度范圍為1000lx～6000lx，而常用的光照度為3000lx～4000lx。大多數(shù)植物在有光的情況下生長(zhǎng)和分化較好，對(duì)于有些植物，由于光的存在會(huì)抑制根的形成，可以在培養(yǎng)基中加入活性炭，提高根的形成率。

光質(zhì)對(duì)細(xì)胞分裂和器官分化也有很大影響，對(duì)愈傷組織的誘導(dǎo)增殖及器官分化都有顯著影響。綠光可促進(jìn)菊花試管苗的生長(zhǎng)，紅光有利于花瓣愈傷組織的形成。菊花在組織培養(yǎng)過(guò)程中的光質(zhì)效應(yīng)，尚與品種有關(guān)，表明品種間存在光質(zhì)敏感性的差異。紅藍(lán)組合光不僅有利于冬青移栽苗的物質(zhì)積累，提高其成活率，也有利于提高其根系活力和色素的形成，同時(shí)提高其凈光合速率和氣孔導(dǎo)度。

光周期是影響外植體分化的條件之一，大多數(shù)植物對(duì)光周期是敏感的，因此組織培養(yǎng)也應(yīng)按一定的光周期進(jìn)行。在進(jìn)行葡萄莖段培養(yǎng)時(shí)，對(duì)日照長(zhǎng)度敏感的品種，只有在短日照條件下才可能形成根，而對(duì)日照長(zhǎng)度不敏感的品種，在任何條件下培養(yǎng)均可以形成根。光周期對(duì)形態(tài)建成也有顯著影響，對(duì)天竺葵愈傷組織中芽的誘導(dǎo)以15～16h光照下出芽最多，連續(xù)光照會(huì)使愈傷組織變綠，芽也不能形成。光周期對(duì)大蒜鱗莖等變態(tài)器官的形成也有顯著作用，組織培養(yǎng)中常用的光周期是光照16h、黑暗8h。法3.氣體

在進(jìn)行固體培養(yǎng)時(shí)，不要把培養(yǎng)物全部埋入培養(yǎng)基中，以避免氧氣不足。在使用液體培養(yǎng)時(shí)，最好采用振蕩等方法，以確保氧氣的供應(yīng)。剛剛切割后的外植體，會(huì)產(chǎn)生乙烯引起材料的衰老，從而影響生長(zhǎng)和分化。此外，培養(yǎng)物呼吸產(chǎn)生二氧化碳，當(dāng)濃度過(guò)高時(shí)也會(huì)阻礙培養(yǎng)物的生長(zhǎng)和分化。但對(duì)于有綠葉的試管植物，充足的二氧化碳對(duì)于植株健壯是有益的。無(wú)糖培養(yǎng)技術(shù)就是基于這一原理開(kāi)發(fā)成功的，并獲得了良好效果。4.濕度

組培苗移栽前生長(zhǎng)在容器內(nèi)，培養(yǎng)容器內(nèi)的濕度主要受培養(yǎng)基的影響，相對(duì)濕度接近100%。但培養(yǎng)室環(huán)境濕度可以影響培養(yǎng)基的水分蒸發(fā)，從而影響容器內(nèi)的濕度。因此，環(huán)境濕度不易過(guò)低，一般要求70%～80%，否則培養(yǎng)基喪失大量水分從而改變了培養(yǎng)基各組份的濃度，提高了滲透壓，會(huì)影響組織的正常生長(zhǎng)。濕度過(guò)高還會(huì)引起霉菌生長(zhǎng)，造成污染。法5.培養(yǎng)基的滲透壓

培養(yǎng)基中添加的鹽類、蔗糖等均影響到滲透壓的變化，而滲透壓又影響植物細(xì)胞脫分化、再分化及器官形成。培養(yǎng)物是通過(guò)培養(yǎng)基的滲透壓來(lái)吸取營(yíng)養(yǎng)的，只有植物細(xì)胞和培養(yǎng)基之間處于等滲或略低于培養(yǎng)基的滲透壓時(shí)，它才有可能從培養(yǎng)基中吸取養(yǎng)分和水分。6.培養(yǎng)基pH值

由于pH值直接影響培養(yǎng)材料對(duì)營(yíng)養(yǎng)的吸收，因此它會(huì)影響芽的生長(zhǎng)和增殖。每種植物對(duì)環(huán)境pH值都有一個(gè)適應(yīng)范圍，因此配制培養(yǎng)基時(shí)調(diào)解培養(yǎng)基pH值是必要的。

不同的植物對(duì)培養(yǎng)基pH值的要求是不同的，大多數(shù)在5.0～6.5范圍。培養(yǎng)基的pH值常調(diào)整到5.6～5.8，這樣基本上能適應(yīng)大多數(shù)植物培養(yǎng)的需要。對(duì)于要求酸性土壤的植物，培養(yǎng)基pH值可適當(dāng)偏酸。當(dāng)培養(yǎng)基中大量的金屬離子被吸收時(shí)，pH值會(huì)隨之降低，甚至?xí)绊懪囵B(yǎng)物的生長(zhǎng)發(fā)育。為解決這一問(wèn)題，最好定期適時(shí)更新培養(yǎng)基，也可以在培養(yǎng)容器容量允許的情況下，增加培養(yǎng)基的數(shù)量，并盡量選用營(yíng)養(yǎng)元素能被平衡吸收的培養(yǎng)基。法六、選擇外植體要考慮的因素在植物組織培養(yǎng)中，選擇合適的植物材料是進(jìn)行組織培養(yǎng)關(guān)鍵的一步，因?yàn)橛糜谂囵B(yǎng)的材料和培養(yǎng)的目的是多種多樣的，因此所采用的操作方法不一。1.外植體部位

對(duì)于大多數(shù)植物來(lái)說(shuō)，莖尖無(wú)疑是較好的取材部位，因?yàn)槠湫螒B(tài)已基本建成，生長(zhǎng)速度快，莖段側(cè)芽或頂芽容易萌發(fā)，遺傳性狀穩(wěn)定，同時(shí)也是獲得無(wú)病毒植株的重要途徑。但是莖尖常常受到新材料來(lái)源的限制，因此，莖段成為廣泛應(yīng)用的外植體材料，如菊花、絲石竹等均取莖段建立無(wú)性繁殖體系，解決了因培養(yǎng)材料不足而帶來(lái)的困難。一些草本植物，由于本身矮小，或者缺乏顯著的莖，可以采用葉片、葉柄、花瓣等做外植體。很多植物的葉具有較強(qiáng)的再生能力，可直接誘導(dǎo)形成芽、根等器官，或經(jīng)脫分化增殖形成愈傷組織，分化出莖、葉、根；而且葉片作為外植體材料來(lái)源最為豐富，其培養(yǎng)利用更為普遍，如苦參、長(zhǎng)壽花等。一些培養(yǎng)較困難的植物，可選取子葉或下胚軸作為外植體進(jìn)行培養(yǎng)?；ㄋ幒突ǚ叟囵B(yǎng)是育種和獲得無(wú)病毒苗的重要途徑之一，此外，還可根據(jù)需要進(jìn)行根、花瓣、鱗莖等部位的培養(yǎng)。法2.取材季節(jié)

在離體快速繁殖時(shí)，選擇外植體的季節(jié)顯得非常重要。一般按照植物生長(zhǎng)的最適時(shí)期取材，即春夏季節(jié)取材，材料幼嫩，生理機(jī)能旺盛，滅菌也容易，且易培養(yǎng)；而秋冬季節(jié)取材，植物已進(jìn)入生長(zhǎng)末期或休眠期，對(duì)誘導(dǎo)反應(yīng)遲鈍，或無(wú)反應(yīng)，培養(yǎng)很難成功；雨季、濕熱季節(jié)取材，因滅菌困難而不易成功。

3.器官的生理狀態(tài)和發(fā)育年齡

外植體器官的生理狀態(tài)及發(fā)育年齡會(huì)直接影響形態(tài)發(fā)生。植物生理學(xué)觀點(diǎn)認(rèn)為，同一植株上的器官具有不同的生理年齡，同一器官的不同部位也具有不同的生理年齡。在木本植物的組織培養(yǎng)中，取幼齡樹(shù)的春梢嫩枝段或基部的萌孽條較好。下胚軸與具有3~4對(duì)針葉的幼嫩莖段，生長(zhǎng)效果也較好?？傮w來(lái)說(shuō)，樹(shù)齡小的要比樹(shù)齡大的容易獲得成功。一般情況下，幼年組織比老年組織有較高的形態(tài)發(fā)生能力。法4.外植體大小在許多植物材料的組培中發(fā)現(xiàn)，外植體材料太大，滅菌工作很難徹底，容易產(chǎn)生污染，而且浪費(fèi)植物材料；外植體材料太小，多形成愈傷組織，成活率較低。除非用于去除病毒，否則外植體不易過(guò)小。一般，莖尖培養(yǎng)存活的臨界大小應(yīng)為一個(gè)莖尖分生組織帶1~2個(gè)葉原基，大小約為0.1~0.5mm，葉片、花瓣等均為0.5cm2~1.0cm2，莖段長(zhǎng)約0.5~1.0cm。法七、無(wú)菌操作技術(shù)

無(wú)菌操作技術(shù)水平的高低，直接影響到組織培養(yǎng)能否成功，整個(gè)無(wú)菌操作過(guò)程可以分為3部分：操作前的準(zhǔn)備工作、操作中的技術(shù)以及操作后的整理工作。法（一）培養(yǎng)室和接種室的滅菌

培養(yǎng)室和接種室的滅菌包括空氣、墻壁和地面的滅菌，對(duì)于室內(nèi)空氣的滅菌可以通過(guò)紫外線照射、藥物熏蒸等；對(duì)于室內(nèi)墻壁和地面的滅菌可以利用酒精、來(lái)蘇兒、新潔爾滅等藥液。

1.紫外線滅菌

紫外線滅菌是指用紫外線照射殺滅微生物的方法。紫外線不僅能使核酸、蛋白質(zhì)變性，而且能使空氣中的氧氣產(chǎn)生微量臭氧，從而達(dá)到共同殺菌的作用。

紫外線的波長(zhǎng)為200～300nm，其中以260nm的殺菌能力最強(qiáng)，但是紫外線的穿透能力很弱，只適于空氣和物體表面的消毒，且要求距照射物以不超過(guò)1.2m為宜。紫外線照射時(shí)間一般為20～30min。法2.熏蒸滅菌

熏蒸滅菌是指用加熱焚燒、氧化等方法，使化學(xué)藥劑變?yōu)闅怏w狀態(tài)擴(kuò)散到空氣中，以殺死空氣和物體表面的微生物。培養(yǎng)室和接種室多采用甲醛和高錳酸鉀進(jìn)行熏蒸，配方為每立方米空間用甲醛10mL加高錳酸鉀5g，方法是在房子中央放一只大燒杯，將稱好的高錳酸鉀放入缸內(nèi)，再緩慢倒入甲醛，然后人立即離開(kāi)，關(guān)好門窗，密閉24h。

桌面、墻面、地面等可用一些藥劑涂擦、噴霧滅菌。如可用75%酒精反復(fù)涂擦滅菌，2%～3%來(lái)蘇兒溶液和0.25%～1%新潔爾滅也可用于滅菌。法1.外植體的消毒

植物組織培養(yǎng)所用的材料大部分取自田間或溫室，有的是地上部分，而有的是地下部分，帶有大量的細(xì)菌和真菌。為此，通過(guò)化學(xué)藥劑除去植物材料上的各種雜菌是植物組織培養(yǎng)的一個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié)。在選擇植物材料時(shí)，應(yīng)盡量選擇帶雜菌少的器官或組織，以降低試驗(yàn)過(guò)程中材料的污染率。（1）常用的化學(xué)消毒劑

在對(duì)試驗(yàn)材料消毒時(shí)，要根據(jù)材料的大小、幼嫩程度、質(zhì)地等，選擇適宜的消毒劑種類、濃度和消毒時(shí)間。通常在正式試驗(yàn)之前，需要做預(yù)備試驗(yàn)，找出既可以最大限度地殺死材料上的雜菌，又對(duì)材料損傷最小的消毒劑和消毒時(shí)間。常用化學(xué)消毒劑的使用方法見(jiàn)表1-2-1。（二）外植體和器具的消毒與滅菌法法（2）幾種典型試驗(yàn)材料的消毒方法

①莖段和葉片消毒：植物的莖、葉多暴露于空氣中，易受泥土中的雜菌污染，消毒前須經(jīng)自來(lái)水較長(zhǎng)時(shí)間的沖洗，特別是一些多年生的木本植物材料，沖洗后還要用沾有肥皂粉或洗潔精的軟毛刷進(jìn)行刷洗。消毒時(shí)先用75%酒精浸泡10～30s，無(wú)菌水沖洗2～3次。根據(jù)材料的不同，分別采用2%次氯酸鈉溶液浸泡10～15min或0.1%升汞浸泡6～10min。若材料表面有絨毛或凸凹不平，最好在消毒液中加入幾滴吐溫，作用是使藥劑更易于展布，更容易浸潤(rùn)到滅菌材料的表面，最后再用無(wú)菌水沖洗4～5次。

法根及地下部分器官的消毒與莖段、葉片的消毒類似。

②果實(shí)和種子的消毒：視果實(shí)和種子的清潔程度，先用自來(lái)水沖洗10～20min或更長(zhǎng)，再用75%酒精迅速漂洗一次。果實(shí)用2%次氯酸鈉溶液浸泡10min，然后用無(wú)菌水沖洗2～3次，就可取出果實(shí)內(nèi)的種子或組織進(jìn)行培養(yǎng)。種子先用10%次氯酸鈉溶液浸泡20～30min，對(duì)難以消毒的還可用0.1%升汞浸泡5～10min。

③花藥的消毒：用于組織培養(yǎng)的花藥，事實(shí)上多未成熟，由于其表面有花萼、花瓣或穎片保護(hù)，基本上處于無(wú)菌狀態(tài)，故只需將整個(gè)花蕾或幼穗消毒即可。一般用75%酒精浸泡數(shù)秒，然后用無(wú)菌水沖洗2～3次，再用0.1%升汞消毒5～10min，經(jīng)無(wú)菌水沖洗2～3次即可接種。法法

2.器具的滅菌

（1）玻璃器皿的滅菌

可以采用干熱滅菌，也可采用濕熱滅菌。

①干熱滅菌：指用高溫干熱空氣滅菌的方法。具體做法是將洗凈晾干后的培養(yǎng)皿、培養(yǎng)瓶、三角瓶、吸管等玻璃器皿用錫箔紙包好放進(jìn)電熱烘箱內(nèi)，在160～170℃條件下，持續(xù)1h～2h，便可達(dá)到滅菌目的。需要注意的是，待滅菌的物品不應(yīng)在烘箱內(nèi)擺得太滿，避免妨礙空氣流通，造成烘箱內(nèi)溫度不均勻，影響滅菌效果。滅菌結(jié)束后不要立即把烘箱門打開(kāi)，應(yīng)待溫度降至50℃左右時(shí)再開(kāi)門，或直接將玻璃器皿存放在烘箱中待用。

②濕熱滅菌：又稱蒸汽滅菌法。具體做法是將玻璃器皿用紙包裹好，放入高壓蒸汽滅菌鍋中，在121℃、0.1MPa條件下，持續(xù)20～30min，即能達(dá)到完全滅菌的目的。法法

（2）金屬器械的滅菌

用于無(wú)菌操作的鑷子、解剖刀、解剖針等用具除采用高壓蒸汽滅菌外，在接種過(guò)程中還常采用灼燒滅菌。具體做法是將鑷子、解剖刀等從浸入的95%酒精中取出，置于酒精燈火焰上灼燒，借助酒精瞬間燃燒產(chǎn)生的高熱來(lái)達(dá)到殺菌的目的。

（3）其他器具的滅菌

工作人員穿戴的工作服、口罩等布質(zhì)品可以采用濕熱滅菌，在壓力為0.1MPa、溫度為121℃的條件下，滅菌20～30min。乳膠手套可用75%酒精反復(fù)涂擦表面滅菌。注意布質(zhì)制品絕對(duì)不能干熱滅菌。法（三）無(wú)菌操作要求

1.接種室要嚴(yán)格進(jìn)行空間消毒，保持定期用1%～3%的高錳酸鉀溶液對(duì)設(shè)備、墻壁、地板等進(jìn)行擦洗。

2.工作人員進(jìn)入接種室前雙手必須進(jìn)行消毒，先用水和肥皂洗滌，操作前再用75%酒精擦拭，操作時(shí)雙手不能隨便接觸未經(jīng)消毒的物品。

3.操作人員穿著的工作服、帽子、口罩等，在經(jīng)過(guò)清洗和晾曬后，用紙包好經(jīng)高壓蒸汽滅菌后方可使用。

4.在進(jìn)行無(wú)菌操作過(guò)程中，工作人員嚴(yán)禁不必要的談話和咳嗽，同時(shí)還要盡量減少相關(guān)人員在接種室內(nèi)的走動(dòng)。法5.操作期間盡量把所用的器皿蓋子蓋好，另外接種用到的刀、剪、鑷子等用具，一般在使用前應(yīng)插入接種器具殺菌器或浸泡在75%酒精中，用時(shí)再在火焰上反復(fù)灼燒，待冷卻后使用，以免燙傷植物材料。使用過(guò)后的接種器具仍然插入接種器具殺菌器或浸泡在75%酒精中，等待下一次使用。6.工作結(jié)束后應(yīng)及時(shí)取出接種材料，然后清理臺(tái)面，再用75%酒精擦拭超凈工作臺(tái)或打開(kāi)紫外燈照射半小時(shí)?？傊屑?xì)理解并牢固樹(shù)立“無(wú)菌”的概念，時(shí)時(shí)處處嚴(yán)格執(zhí)行無(wú)菌操作技術(shù)要領(lǐng)，方能降低材料的污染率，獲得理想的接種效果。法八、離體快繁中存在的問(wèn)題及解決途徑

離體快繁中常常會(huì)出現(xiàn)培養(yǎng)物污染、外植體褐化、試管苗玻璃化、黃化以及再生植株變異等問(wèn)題，有效的解決這些問(wèn)題是加快繁殖系數(shù)提高快繁苗質(zhì)量的關(guān)鍵。法1.污染

培養(yǎng)物污染常出現(xiàn)在外植體表面、外植體附近的培養(yǎng)基以及培養(yǎng)基的其他部位。表現(xiàn)為霉變渾濁、云霧狀、粘液狀、發(fā)酵泡沫狀等形狀，污染物的顏色有黑色、藍(lán)色、乳白等。植物組織培養(yǎng)中的污染，可能是由真菌引起的，也可能是由細(xì)菌引起的；污染有可能是由外植體帶菌引起的，也有可能是由接種或培養(yǎng)過(guò)程中染菌引起的；污染出現(xiàn)的時(shí)間，既有初代培養(yǎng)期間就表現(xiàn)出來(lái)的，也有在材料培養(yǎng)到一定代數(shù)才表現(xiàn)出來(lái)的。在離體快繁中，外植體一旦發(fā)生污染，多數(shù)情況下只能將培養(yǎng)物遺棄，造成的損失很大，因此污染控制十分重要。法

法

對(duì)于由接種或培養(yǎng)過(guò)程中造成的污染，一般通過(guò)嚴(yán)格的操作訓(xùn)練和嚴(yán)格控制接種室、培養(yǎng)室環(huán)境衛(wèi)生來(lái)解決。對(duì)于外植體帶菌，尤其是較難消毒的外植體可通過(guò)兩次消毒或多次消毒等措施來(lái)解決。需要注意的是，消毒過(guò)程是一把雙刃劍，既可以殺死微生物也可以損傷甚至殺死整個(gè)外植體，使外植體在初代培養(yǎng)中啟動(dòng)生長(zhǎng)緩慢，甚至不能啟動(dòng)生長(zhǎng)。為了解決這一問(wèn)題，在外植體消毒前可對(duì)植物材料進(jìn)行預(yù)消毒、預(yù)培養(yǎng)試驗(yàn)已達(dá)到雙贏的效果。

在一些熱帶植物的離體快繁過(guò)程中，容易在繼代培養(yǎng)幾代之后出現(xiàn)內(nèi)生菌污染問(wèn)題。有效的解決方法是使用抗生素，使用時(shí)應(yīng)注意以下3點(diǎn)：①必須弄清楚要抑制菌的種類。②使用的抗生素是否對(duì)培養(yǎng)的植物組織有不良影響。③確立抗生素的使用濃度、處理時(shí)間的長(zhǎng)短。因?yàn)闆](méi)有一種抗生素能對(duì)所有引起污染的微生物都有效，所以抗生素也不能完全代替滅菌技術(shù)，只能作為防止污染的一種輔助措施。法2.褐化

在離體快繁的