新教材2025版高中生物第1章發(fā)酵工程第2節(jié)微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用第1課時微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)學(xué)生用書新人教版選擇性必修3

第1課時微生物的基本培育技術(shù)課堂互動探究案課程標(biāo)準(zhǔn)1.闡明在發(fā)酵工程中滅菌是獲得純凈的微生物培育物的前提。2．闡明無菌技術(shù)是在操作過程中保持無菌物品與無菌區(qū)域不被微生物污染的技術(shù)。3．概述平板劃線法和稀釋涂布平板法是試驗室進(jìn)行微生物分別和純化的常用方法。素養(yǎng)達(dá)成1.依據(jù)微生物的代謝類型分析培育基的組成。(科學(xué)思維)2．探討并駕馭無菌技術(shù)的試驗操作方法；探討并駕馭微生物的純培育的方法。(科學(xué)探究)設(shè)疑激趣同學(xué)們，右圖中正在進(jìn)行科學(xué)探討的老人是誰？他是法國微生物學(xué)家和化學(xué)家巴斯德！19世紀(jì)中期的法國，葡萄酒釀成后的變酸問題，始終困擾著釀酒業(yè)主。巴斯德探討證明，酒質(zhì)變酸是發(fā)酵液體中的細(xì)菌在搗鬼。他經(jīng)過一次又一次試驗，最終發(fā)覺把葡萄酒加溫到55攝氏度，既殲滅了細(xì)菌，又保持了酒的美味不變，一個困擾釀酒業(yè)的難題最終解決了。由此人們相識到保持培育物純凈的重要性。防止雜菌入侵，獲得純凈的培育物，是探討和應(yīng)用微生物的前提。在試驗室培育微生物，一方面須要為培育的微生物供應(yīng)合適的養(yǎng)分和環(huán)境條件，另一方面須要確保其他微生物無法混入。本節(jié)課我們將通過酵母菌的純培育試驗，學(xué)習(xí)微生物培育的基本技術(shù)。夯基提能·分層突破——互動·探究·智涂學(xué)習(xí)主題一培育基的配制活動1下表是培育兩種細(xì)菌的培育基的配方，據(jù)此回答問題。表一培育基A成分KH2PO4Na2HPO4MgSO4·7H2O葡萄糖尿素瓊脂含量/g1.42.10.210.01.015.0將上述物質(zhì)溶解后，加蒸餾水定容至1000mL表二培育基B(牛肉膏蛋白胨固體培育基)成分牛肉膏蛋白胨NaCl含量/g5.010.05.0將上述物質(zhì)溶解后，添加蒸餾水，定容至1000mL，調(diào)整pH為7.0～7.2，并加入15～20g瓊脂1.表一中的碳源是________，氮源是________。表二中的氮源是__________________，瓊脂________(填“供應(yīng)”或“不供應(yīng)”)養(yǎng)分成分，其作用是作為________。2．由上表可以看出，雖然培育不同微生物的詳細(xì)配方不同，但一般都要有________、________、________、________這四類物質(zhì)。3．不同培育基還要滿意不同微生物生長對________、______________以及________的要求。4．牛肉膏蛋白胨培育基是一種常見的細(xì)菌培育基，其中牛肉膏、蛋白胨能夠供應(yīng)哪些養(yǎng)分成分？活動2閱讀教材P9－10，思索回答下列問題：1．能夠利用無機(jī)碳源的微生物的同化作用類型是什么？2．為什么各種培育基的詳細(xì)配方不同，但一般都有水、無機(jī)鹽、碳源和氮源？[易錯提示]有關(guān)培育基養(yǎng)分物質(zhì)的四點提示(1)培育不同的微生物所須要的養(yǎng)分物質(zhì)可能不同。①自養(yǎng)型微生物的培育基中可不添加有機(jī)碳源，因其可利用CO2等無機(jī)碳源。②異養(yǎng)型微生物的培育基中必需添加有機(jī)碳源。(2)對異養(yǎng)微生物來說，含C、H、O、N的化合物既是碳源，又是氮源、能源。(3)微生物須要補(bǔ)充生長因子，是由于缺乏合成生長因子所須要的酶或合成實力有限。(4)微生物須要量最大的養(yǎng)分物質(zhì)是碳源。能合成含碳有機(jī)物的是自養(yǎng)型，反之則為異養(yǎng)型。1.培育基的配制原則(1)目的要明確：不同的微生物需求不同，依據(jù)培育目的進(jìn)行配制。(2)養(yǎng)分要協(xié)調(diào)：養(yǎng)分物質(zhì)的濃度和比例要相宜。(3)pH要相宜：為維持pH的相對恒定，可在培育基中加入緩沖劑，常用K2HPO4－KH2PO4。2．培育基的成分及功能養(yǎng)分物質(zhì)作用功能主要來源碳源能為微生物的代謝供應(yīng)碳元素構(gòu)成生物體的細(xì)胞物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物，有些是異養(yǎng)生物的能源物質(zhì)無機(jī)碳源：CO2、NaHCO3等；有機(jī)碳源：糖類、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、有機(jī)酸等氮源能為微生物的代謝供應(yīng)氮元素合成蛋白質(zhì)、核酸以及含氮的代謝產(chǎn)物無機(jī)化合物：N2、NH3、銨鹽、硝酸鹽等；有機(jī)氮源：尿素、牛肉膏、蛋白胨等水是生命活動所必需的不僅是優(yōu)良的溶劑，而且可維持生物大分子結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定外界攝入無機(jī)鹽為微生物供應(yīng)除碳、氮以外的各種重要元素，包括大量元素細(xì)胞內(nèi)的組成成分；生理調(diào)整物質(zhì)；某些化能自養(yǎng)菌的能源；酶的激活劑無機(jī)化合物3.幾種微生物的養(yǎng)分和能量來源微生物碳源氮源能源藍(lán)細(xì)菌CO2NHeq\o\al(\s\up1(＋),\s\do1(4))、NOeq\o\al(\s\up1(－),\s\do1(3))等光能硝化細(xì)菌CO2NH3NH3的氧化根瘤菌糖類等有機(jī)物N2有機(jī)物大腸桿菌糖類、蛋白質(zhì)等有機(jī)物蛋白質(zhì)等有機(jī)物4.培育基的類型分類標(biāo)準(zhǔn)培育基種類培育基特點作用物理性質(zhì)固體培養(yǎng)基加凝固劑，如瓊脂微生物的分別與鑒定、活菌計數(shù)、保藏菌種半固體培育基視察微生物的運動、分類、鑒定液體培養(yǎng)基不加凝固劑工業(yè)生產(chǎn)化學(xué)成分自然培育基含化學(xué)成分不明確的自然物質(zhì)工業(yè)生產(chǎn)合成培育基培育基成分明確分類、鑒定1．(學(xué)業(yè)水平一、二)下列關(guān)于微生物養(yǎng)分物的敘述中，正確的是()A.凡是碳源都能供應(yīng)能量B.碳源物質(zhì)不行能同時是氮源C.無機(jī)氮源也能供應(yīng)能量D.除水以外的無機(jī)物只供應(yīng)無機(jī)鹽2．(學(xué)業(yè)水平一、二)關(guān)于培育基的配制，說法不正確的是()A.配制培育基時要留意各種養(yǎng)分物質(zhì)的濃度和比例B.合適的培育基可實現(xiàn)分別、鑒定微生物等不同目的C.不同微生物培育基的pH相同，都在7.0左右D.不同培育基的配方不同，但一般含有碳源、氮源、水和無機(jī)鹽3．(學(xué)業(yè)水平三)有關(guān)培育基配制原則的表述正確的是()A.任何培育基都必需含有碳源、氮源、礦質(zhì)元素、水以及無機(jī)鹽B.碳源和氮源必需具有肯定比例，碳元素的含量最多，其次為氮元素C.有的培育基還須要滿意微生物生長對pH、特別養(yǎng)分物質(zhì)以及O2的需求D.養(yǎng)分物質(zhì)的濃度越高越好4．(學(xué)業(yè)水平三，不定項選擇)下列關(guān)于制備牛肉膏蛋白胨固體培育基的敘述，正確的是()A.操作依次為計算、稱量、溶化、倒平板、滅菌B.將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯C.待培育基冷卻至50℃左右時倒平板D.待培育基冷卻凝固后將平板倒過來放置學(xué)習(xí)主題二無菌技術(shù)活動1閱讀教材P10內(nèi)容，思索回答下列問題：1．無菌技術(shù)除了用來防止試驗室的培育物被其他外來微生物污染外，還有什么目的？2．用于生物消毒的微生物具有什么特點？活動2閱讀教材P10－11內(nèi)容，思索回答下列問題：1．消毒和滅菌的原理是什么？2．消毒和滅菌都能殺死全部的微生物嗎？3．消毒和滅菌是否適用于全部的生物和物品？4．選擇以下材料或用具所需的無菌技術(shù)。①吸管②培育細(xì)菌用的培育基③培育皿④試驗操作者的雙手⑤燒瓶⑥接種針⑦試管⑧接種環(huán)⑨玻璃棒消毒：____________________________________________________________灼燒滅菌：_________________________________________________________干熱滅菌：_________________________________________________________濕熱滅菌：_________________________________________________________5.注射藥液前，常用酒精擦拭注射部位，這是消毒還是滅菌？體積分?jǐn)?shù)為70%和95%的酒精，哪種效果更好？為什么？[名師提示]有關(guān)消毒和滅菌的幾點提示1．酒精消毒液中酒精濃度對殺菌效果的影響：70%的酒精殺菌效果最好。緣由是濃度過高，菌體表面蛋白質(zhì)變性過快而凝固成一層愛護(hù)膜，酒精不能滲入其中；濃度過低，殺菌實力減弱。2．無菌技術(shù)措施的選擇原則。(1)考慮效果：滅菌的效果比消毒要好。(2)考慮操作對象的承受實力：接種環(huán)或接種針等金屬用具一般用灼燒滅菌；培育皿等玻璃器皿用干熱滅菌；培育基用濕熱菌。操作者雙手一般用酒精擦拭，即化學(xué)消毒。牛奶用巴氏消毒法。1.無菌技術(shù)的重要性防止雜菌污染是獲得純凈培育物的關(guān)鍵。防止外來雜菌污染培育物，離不開無菌技術(shù)；要防止培育物污染人體和環(huán)境，也離不開無菌技術(shù)。2．常用滅菌與消毒方法的比較滅菌和消毒的種類主要方法應(yīng)用范圍滅菌濕熱滅菌100kPa、121℃維持15～30min培育基及多種器材、物品干熱滅菌干熱滅菌箱160～170℃加熱1～2h玻璃器皿(如吸管、培育皿等)、金屬用具等凡不相宜用其他方法滅菌而又能耐高溫的物品灼燒滅菌酒精燈火焰灼燒微生物接種工具，如接種環(huán)、接種針或其他金屬用具等，接種過程中的試管口或瓶口等消毒煮沸消毒法100℃煮沸5～6min家庭餐具等生活用品巴氏消毒法63～65℃消毒30min或72～76℃處理15s或80～85℃處理10～15s牛奶、啤酒、果酒和醬油等不宜進(jìn)行高溫滅菌的液體紫外線消毒30W紫外燈照耀30min接種室空氣化學(xué)藥物消毒用體積分?jǐn)?shù)為70%～75%的乙醇、碘酒涂抹，來蘇爾噴灑等皮膚、傷口、動植物組織表面和空氣、手術(shù)器械、塑料或玻璃器皿等1．(學(xué)業(yè)水平一、二)獲得純凈培育物的關(guān)鍵是()A．將用于微生物培育的器皿、接種用具和培育基等器具進(jìn)行滅菌B．接種純種細(xì)菌C．相宜環(huán)境條件下培育D．防止外來雜菌的入侵2．(學(xué)業(yè)水平一、二)高溫滅菌的原理是()A．每種微生物生長的最適溫度是肯定的B．微生物對于高溫環(huán)境不適應(yīng)C．高溫破壞了微生物的蛋白質(zhì)等生物大分子，影響其生命活動D．高溫降低了環(huán)境中氧的濃度3．(學(xué)業(yè)水平三)關(guān)于滅菌和消毒的不正確的理解是()A．滅菌是指殺死環(huán)境中的一切微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子B.消毒和滅菌實質(zhì)上是相同的C．接種環(huán)用灼燒的方法滅菌D．常用滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌等4．(學(xué)業(yè)水平三，不定項選擇)微生物的試驗室培育要進(jìn)行嚴(yán)格滅菌和消毒。下列關(guān)于滅菌和消毒的敘述，正確的是()A．滅菌和消毒均可以殺死環(huán)境中的一切微生物，包括芽孢和孢子B．無菌操作時，對試驗操作的空間、操作者的衣物和手進(jìn)行滅菌C．灼燒法滅菌的對象是金屬器具，也可以是玻璃器具D．消毒和滅菌的原理都是使微生物的核酸或蛋白質(zhì)變性學(xué)習(xí)主題三微生物的純培育活動1閱讀教材P11～13內(nèi)容，結(jié)合下圖，回答問題。1．為什么須要使錐形瓶的瓶口通過火焰？2．從防止雜菌污染的角度思索，培育基冷卻凝固后將培育皿倒置的緣由是什么？3．采納平板劃線法接種菌種時，哪些操作可防止雜菌污染？4．在做其次次劃線以及其后的操作時，為什么總是從上一次劃線的末端起先劃線？5．接種操作時每次劃線接種前與接種后都要灼燒接種環(huán)或接種針，其目的分別是什么？活動2思索回答下列問題：1．培育基滅菌后，須要冷卻到50℃左右時，才能用來倒平板。你用什么方法來估計培育基的溫度？2．在倒平板的過程中，假如不當(dāng)心將培育基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個平板還能用來培育微生物嗎？為什么？3．接種結(jié)束后，為什么要將一個未接種的培育基和一個接種的培育基放在一起培育？未接種的培育基表面是否有菌落生長很關(guān)鍵。假如有菌落生長，說明白什么？[方法技巧]單細(xì)胞菌落的獲得(1)利用平板劃線法接種時，單細(xì)胞菌落從后劃線的區(qū)域挑取。(2)利用稀釋涂布平板法接種時，只有合適的稀釋度才能得到單細(xì)胞菌落。[歸納提升]倒平板操作的留意事項(1)培育基滅菌后須要冷卻至50℃左右時才能倒平板。溫度過高，培育基凝固后皿蓋上冷凝水過多，落入培育基，造成污染；溫度過低，培育基又會凝固。(2)將培育皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，不要完全打開，以免雜菌污染培育基。(3)在倒平板的過程中，假如不當(dāng)心將培育基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個平板應(yīng)棄用，因為空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培育基上滋生。(4)整個操作過程要在酒精燈火焰旁進(jìn)行，避開雜菌污染。1.平板劃線法平板劃線操作及培育結(jié)果：接種環(huán)在固體培育基表面連續(xù)劃線，將聚集的菌種逐步分散到培育基的表面。平板劃線示意圖(A)及培育后菌落分布示意圖(B)如下圖所示。2．稀釋涂布平板法(1)主要操作環(huán)節(jié)：系列稀釋和涂布平板。(2)系列稀釋和涂布平板后培育結(jié)果如圖所示：3．平板劃線法與稀釋涂布平板法的留意事項(1)平板劃線法：①接種環(huán)的灼燒：a．第一次劃線前：殺死接種環(huán)上的微生物，避開污染培育物。b．每次劃線前：殺死殘留菌種，保證每次劃線菌種來自上次劃線末端。c．劃線結(jié)束后：殺死殘留菌種，避開污染環(huán)境和感染操作者。②灼燒接種環(huán)之后，要冷卻后再進(jìn)行操作，以免溫度太高殺死菌種。③劃線時最終一區(qū)域不要與第一區(qū)域相連。④劃線用力要大小適當(dāng)，防止用力過大劃破培育基。(2)稀釋涂布平板法：①稀釋操作時：每支試管及其中的9mL水、移液管等均需滅菌；操作時，試管口和移液管應(yīng)在離火焰1～2cm處。②涂布平板時：a．涂布器浸在體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精中，取出時，讓多余酒精在燒杯中滴盡，然后將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃。b．不要將過熱的涂布器放在盛放酒精的燒杯中，以免引燃其中的酒精。c．酒精燈與培育皿距離要合適，移液管管頭不接觸任何物體。4．兩種純化細(xì)菌方法的比較項目優(yōu)點缺點平板劃線法可以視察菌落特征，對混合菌進(jìn)行分別不能計數(shù)稀釋涂布平板法可以計數(shù)，可以視察菌落特征汲取量較小，較麻煩，平板不干燥效果不好，簡潔擴(kuò)散1．(學(xué)業(yè)水平一、二)如圖是微生物平板劃線示意圖，劃線的依次為1→2→3→4→5，下列說法不正確的是()A．操作前要將接種環(huán)在酒精燈火焰上灼燒B．劃線操作須在酒精燈火焰旁邊進(jìn)行C．只有在5區(qū)才可以得到所需菌落D．在1、2、3、4、5區(qū)域中劃線前后都要對接種環(huán)滅菌2．(學(xué)業(yè)水平二)某同學(xué)運用劃線法純化酵母菌。下列敘述正確的是()A．滅菌時，高壓蒸汽滅菌鍋壓力達(dá)到1kg/cm2后，需持續(xù)15minB．制平板時，需將培育基勻稱地倒在培育皿的整個底部C．接種時，每次劃線前，接種環(huán)均需蘸一次菌液D．培育時，需將培育皿倒置于4℃的冰箱中3．(學(xué)業(yè)水平三、四)下圖為試驗室培育和純化大腸桿菌過程中的部分操作步驟，下列說法錯誤的是()A．①②③步驟操作時須要在酒精燈火焰旁進(jìn)行B．步驟①中待倒入的培育基冷卻后蓋上培育皿的皿蓋C．步驟③中，每次劃線前后都需對接種環(huán)進(jìn)行滅菌處理D．劃線接種結(jié)束后，將圖④平板倒置后放入培育箱中培育4．(學(xué)業(yè)水平三、四，不定項選擇)將沒有吃完的西瓜，蓋上保鮮膜后放入冰箱，是許多人日常保存西瓜的方法。有這樣一種說法：蓋上保鮮膜保存的西瓜中細(xì)菌種類和數(shù)目反而比沒用保鮮膜的多。某生物探討小組針對上述說法進(jìn)行探究，他們用蓋上保鮮膜保存了兩天的西瓜表面的瓜瓤制備浸出液，探討細(xì)菌的種類和數(shù)量。下列說法正確的是()A．應(yīng)當(dāng)采納稀釋涂布平板法進(jìn)行接種B．瓜瓤浸出液是液體，因此培育時平板不用倒置C．僅須要設(shè)置盛有培育基的空白平板作比照D．可通過平板上菌落的特征初步推斷細(xì)菌的種類強(qiáng)化落實·學(xué)業(yè)達(dá)標(biāo)——歸納·提升·素養(yǎng)網(wǎng)絡(luò)建構(gòu)主干落實1.各種培育基都含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽等養(yǎng)分物質(zhì)。2．獲得純凈微生物培育物的關(guān)鍵是防止雜菌污染。3．消毒是指運用較為溫柔的物理、化學(xué)或生物等方法殺死物體表面或內(nèi)部一部分微生物。4．滅菌是指運用劇烈的理化方法殺死物體內(nèi)外全部的微生物，包括芽孢和孢子。5．由單一個體繁殖所獲得的微生物群體稱為純培育物，獲得純培育物的過程就是純培育。6．菌落是分散的微生物在相宜的固體培育基表面或內(nèi)部可以繁殖形成肉眼可見的、有肯定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體。高效課堂·實踐運用——隨堂·鞏固·達(dá)標(biāo)1.不同培育基的詳細(xì)配方不同，但一般都含()A．碳源、磷酸鹽和維生素B．氮源和維生素C．水、碳源、氮源和無機(jī)鹽D．碳元素、氧元素、氫元素、氮元素2．采納干熱滅菌、灼燒滅菌、濕熱滅菌、紫外線照耀等幾種方法，可分別殺死哪些部位的雜菌()A．接種環(huán)、吸管、培育基、接種室B．吸管、接種環(huán)、培育基、接種箱C．培育基、吸管、接種環(huán)、接種箱D．培育皿、吸管、培育基、雙手3．下列有關(guān)平板劃線操作的描述，錯誤的是()A．將接種環(huán)放在酒精燈火焰上灼燒，直到接種環(huán)燒紅B．接種環(huán)在平板上劃線的位置是隨機(jī)的C．在挑取菌種前和接種完畢后均要將試管口通過酒精燈火焰D．最終一區(qū)的劃線不能與第一區(qū)相連4．下列關(guān)于微生物試驗操作的敘述，錯誤的是()A．培育微生物的試劑和器具都要進(jìn)行濕熱滅菌B．接種前后，接種環(huán)都要在酒精燈火焰上進(jìn)行灼燒C．接種后的培育皿要倒置，以防培育基被污染D．菌種分別和菌落計數(shù)都可以運用固體培育基5．廣泛用于牛奶、奶酪、啤酒等產(chǎn)品的消毒方法是()A．濕熱滅菌B．巴氏消毒法C．酒精消毒D．火焰灼燒6．下表是培育某微生物的培育基的配方，請回答下列問題：組分牛肉膏蛋白胨NaCl瓊脂水用量5g10g5g20g1000mL(1)培育基的類型許多，但培育基中一般都含有水、碳源、________和無機(jī)鹽。上述培育基配方中能充當(dāng)碳源的成分是______________。培育基配制完成以后，一般還要調(diào)整pH并對培育基進(jìn)行________處理。(2)在配制培育基時，除考慮養(yǎng)分條件外，還要考慮________、________和滲透壓等條件。(3)在微生物培育操作過程中，為防止雜菌污染，需對培育基和培育器皿進(jìn)行________(填“消毒”或“滅菌”)；操作者的雙手需進(jìn)行清洗和________；空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅，其緣由是紫外線能使蛋白質(zhì)________，還能損傷DNA的結(jié)構(gòu)。(4)分別純化微生物最常運用的接種方法是____________和____________。(5)在接種前須要檢測培育基是否被污染。對于固體培育基應(yīng)采納的檢測方法是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。疑難解答·名師指津——釋疑·解惑·教材第1小節(jié)(一)從社會中來提示：應(yīng)當(dāng)先對制作用具和原料進(jìn)行滅菌處理，再接種純的菌種，并限制發(fā)酵條件，避開雜菌進(jìn)入。(二)旁欄思索題1．培育基中的氮元素是微生物合成蛋白質(zhì)、核酸等物質(zhì)所必需的。2．無菌技術(shù)還能有效避開操作者自身被微生物感染。(三)探究·實踐1．在未接種的培育基表面應(yīng)當(dāng)沒有菌落生長，假如有，說明培育基被雜菌污染。2．提示：能視察到單一菌落，這些菌落的顏色、形態(tài)和大小一樣。假如視察到了不同形態(tài)的菌落，可能是接種的菌種不純或者無菌操作不規(guī)范等緣由引起的。3．依據(jù)實際狀況回答。(四)思維訓(xùn)練提示：所謂“酵素”，就是“酶”的另一種說法。“酵素”制作的原理就是利用微生物進(jìn)行無氧呼吸，進(jìn)行像制作泡菜一樣的發(fā)酵。這樣制作的“酵素”中可能有糖類(包括一些簡潔的糖和膳食纖維等)、蛋白質(zhì)(包括多種酶)、有機(jī)酸等成分，不存在它獨有的、特別的養(yǎng)分物質(zhì)，其中甚至可能含有微生物發(fā)酵產(chǎn)生的有毒物質(zhì)，食用后可能會危害人體健康。因此，“吃水果‘酵素’可以美容、減肥、促進(jìn)消化和提高免疫力”的論點值得懷疑。可以通過查閱專業(yè)學(xué)術(shù)期刊上發(fā)表的有關(guān)探探討文，或親自檢測水果“酵素”中的成分，獲得科學(xué)牢靠的證據(jù)進(jìn)行全面論證。(五)練習(xí)與應(yīng)用概念檢測1．(1)×(2)√(3)×2．提示：日常生活中保存食品的方法有干制、腌制、低溫儲存等。干制可以降低食品的水分含量；腌制可以通過食鹽、糖等制造高滲環(huán)境，從而抑制微生物的生長和繁殖；低溫則是通過降低微生物的代謝速率來抑制微生物的生長和繁殖。拓展應(yīng)用1．(1)培育皿和培育基(2)提示：接種。(3)提示：通過試驗結(jié)果可以看到，洗手后手上還有一些微生物，不能干脆進(jìn)行無菌操作?？梢酝ㄟ^用酒精棉球擦拭雙手，或戴消過毒的手套等方法來避開手上微生物的污染。2．(1)意味著培育液中O2含量不同。(2)在肯定轉(zhuǎn)速范圍內(nèi)，搖床的轉(zhuǎn)速越高酵母菌的種群密度越大。其緣由是搖床轉(zhuǎn)速越高，培育基中O2越足夠。(3)提示：培育基中養(yǎng)分物質(zhì)和溶氧量是有限的，此時，酵母菌種群數(shù)量已經(jīng)達(dá)到了環(huán)境容納量，種群密度達(dá)到穩(wěn)定。第1課時微生物的基本培育技術(shù)夯基提能·分層突破學(xué)習(xí)主題一【師問導(dǎo)學(xué)】活動11．提示：葡萄糖尿素牛肉膏、蛋白胨不供應(yīng)凝固劑2．提示：水碳源氮源無機(jī)鹽3．提示：pH特別養(yǎng)分物質(zhì)O24．提示：牛肉膏、蛋白胨能夠供應(yīng)碳源、氮源、維生素(生長因子)和無機(jī)鹽?；顒?1．提示：能利用無機(jī)碳源的微生物的同化作用類型是自養(yǎng)型。2．提示：培育的微生物不同，對養(yǎng)分物質(zhì)的需求不同，養(yǎng)分基質(zhì)的詳細(xì)配方就不同。而水、碳源、氮源、無機(jī)鹽是微生物生命活動的主要養(yǎng)分物質(zhì)，因此培育基中一般都有?！具^程評價】1．解析：無機(jī)物碳源不供應(yīng)能量，A錯誤；同一種物質(zhì)可以既作碳源又作氮源，如牛肉膏，B錯誤；自然界中一些微生物如硝化細(xì)菌，可以以無機(jī)氮源合成細(xì)胞物質(zhì)，同時通過氧化外界無機(jī)氮源獲得生長所需能量，叫做化能合成作用，C正確；無機(jī)物也可供應(yīng)碳源和氮源，如碳酸鹽和硝酸鹽，D錯誤。答案：C2．解析：配制培育基時，養(yǎng)分要協(xié)調(diào)，留意各種養(yǎng)分物質(zhì)的濃度及比例，A正確；培育基通過調(diào)整各種養(yǎng)分物質(zhì)的組成等可實現(xiàn)分別、鑒定微生物等不同目的，B正確；不同微生物生長所須要的最適pH不同，如細(xì)菌為7.0～8.0，酵母菌為3.8～6.0，C錯誤；雖然各種培育基的配方不同，但一般都含有碳源、氮源、水和無機(jī)鹽等養(yǎng)分物質(zhì)，D正確。答案：C3．解析：培育基一般都含有碳源、氮源、無機(jī)鹽和水等養(yǎng)分物質(zhì)，而分別自生固氮菌的培育基中，不須要加入氮源，A錯誤；碳源和氮源必需具有肯定比例，但碳元素的含量不肯定最多，如自養(yǎng)型微生物的培育基不須要加入碳源，B錯誤；養(yǎng)分物質(zhì)的濃度過高可能會造成微生物滲透失水死亡，D錯誤。答案：C4．解析：制備牛肉膏蛋白胨固體培育基的步驟是計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板，其依次不能顛倒，A錯誤；牛肉膏比較黏稠，所以稱好后需將稱量紙一同放入燒杯中加熱，當(dāng)牛肉膏溶化并與稱量紙分別后，用玻璃棒取出稱量紙，B正確；待培育基冷卻至50℃左右，起先倒平板，C正確；培育基冷卻凝固后需將平板倒置，D正確。答案：BCD學(xué)習(xí)主題二【師問導(dǎo)學(xué)】活動11．提示：無菌技術(shù)還能有效避開操作者被微生物感染。2．提示：用于生物消毒的微生物能產(chǎn)生殺死其他微生物的代謝產(chǎn)物或是寄生性的微生物?；顒?1．提示：都是使微生物的蛋白質(zhì)變性，借此殺死微生物。2．提示：滅菌可殺死處理材料中的全部微生物(包括芽孢和孢子)，而消毒僅殺死部分微生物(一般不包括芽孢和孢子)。3．提示：不是，無菌技術(shù)既要考慮效果，又要考慮操作對象的承受實力。例如，活體生物材料、操作者的手等只能消毒，而不能滅菌。4．提示：④⑥⑧①③⑤⑦⑨②5．提示：酒精擦拭屬于消毒。酒精消毒時，70%的酒精殺菌效果最好。濃度過高，使菌體表面蛋白質(zhì)凝固成一層愛護(hù)膜，酒精分子不能滲入其中；濃度過低，殺菌實力減弱。【過程評價】1．解析：將用于微生物培育的器皿、接種用具和培育基等器具進(jìn)行滅菌只是無菌技術(shù)的一個方面，不是無菌技術(shù)的全部；接種純種細(xì)菌是獲得純凈培育物的前提；相宜條件下培育只能供應(yīng)微生物生長的條件，不能防止雜菌污染；防止外來雜菌的入侵是獲得純凈培育物的關(guān)鍵。答案：D2．解析：高溫滅菌主要是使微生物的蛋白質(zhì)等生物大分子發(fā)生不行逆轉(zhuǎn)的變性。答案：C3．解析：消毒是指用溫柔的理化方法殺死體表或內(nèi)部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)，滅菌則是用劇烈的理化因素殺死體內(nèi)外全部的微生物，包括芽孢和孢子。答案：B4．解析：滅菌是指運用劇烈的理化方法殺死物體內(nèi)外全部的微生物，包括芽孢和孢子，消毒只能殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物，不能殺死芽孢和孢子，A錯誤；無菌操作時，對試驗操作的空間、操作者的衣物和手進(jìn)行消毒，B錯誤；灼燒法滅菌的對象可以是金屬器具和玻璃器具，C正確；消毒和滅菌的原理相同，都是使微生物的核酸或蛋白質(zhì)變性，D正確。答案：CD學(xué)習(xí)主題三【師問導(dǎo)學(xué)】活動11．提示：對瓶口進(jìn)行灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培育基。2．提示：培育基冷卻凝固后，培育皿的皿蓋上會凝聚水珠，將培育皿倒置，可以防止皿蓋上的水珠落入培育基造成污染。3．提示：(1)接種前將接種環(huán)放在酒精燈火焰上灼燒。(2)接種環(huán)蘸取菌液前后，要將試管口通過火焰。(3)劃線時將培育皿的皿蓋打開一條縫隙，將蘸有菌種的接種環(huán)快速伸入平板內(nèi)，劃線后剛好蓋上皿蓋。(4)每次劃線結(jié)束后，灼燒接種環(huán)，冷卻后再進(jìn)行下一次劃線。(5)整個接種過程要在酒精燈火焰旁進(jìn)行。4．提示：劃線末端含有的菌體數(shù)目較少，每次從上一次劃線的末端起先劃線能夠使菌體的數(shù)目隨劃線次數(shù)的增加而漸漸削減，最終分散成單個的菌體。5．提示：劃線前灼燒是為了殺死上次劃線結(jié)束后殘留的菌種。劃線結(jié)束后灼燒，能剛好殺死接種環(huán)或接種針上殘留的菌種，避開污染環(huán)境和感染操作者。活動21．提示：可以用手觸摸盛有培育基的錐形瓶，感覺溫度下降到剛剛不燙手即可。2．提示：不能用這個平板培育微生物。因為空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培育基上滋生而導(dǎo)致污染。3．提示：作比照培育基被雜菌污染【過程評價】1．解析：在每次劃線前后都要對接種環(huán)進(jìn)行滅菌，接種環(huán)的滅菌方法是在酒精燈火焰上灼燒；接種時劃線操作是在酒精燈火焰旁邊進(jìn)行；在5個區(qū)域中，只要有單個活細(xì)菌，通過培育即可獲得所需菌落；每次劃線前都要灼燒接種環(huán)，目的是殺死接種環(huán)上原有的微生物(第一次劃線前)和上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種，使每次劃線的菌種都來自上一次劃線的末端，劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán)以防止污染環(huán)境和感染操作者。答案：C2．解析：滅菌時，高壓蒸汽滅菌鍋壓力達(dá)到1kg/cm2后，需持續(xù)15min，A正確；制平板時，將培育基倒在培育皿中，并輕輕搖勻即可，B錯誤；接種時，每次劃線前，接種環(huán)均需灼燒滅菌，C錯誤；培育時，需將培育皿倒置于恒溫培育箱中，D錯誤。答案：A3．解析：由圖可知，①是倒平板，②是用接種環(huán)蘸取菌液，③是進(jìn)行平板劃線，④是培育。①②③步驟操作時須要在酒精燈火焰旁進(jìn)行，防止被雜菌污染，A正確；倒完平板后應(yīng)馬上蓋上培育皿，冷卻后將平板倒過來放置，B錯誤；每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時，接種環(huán)上的菌種干脆來源于上次劃線的末端，從而通過劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時菌種的數(shù)目漸漸削減，以便得到單菌落，C正確；劃線接種結(jié)束后，將平板倒置后放入培育箱中培育，可以避開培育基中的水分過快地?fù)]發(fā)和防止皿蓋上的水珠落入培育基造成污染，D正確。答案：B4．解析：為了達(dá)到探討細(xì)菌的種類和數(shù)量，須要采納稀釋涂布平板法進(jìn)行接種才能計數(shù)，A正確；接種時須要將瓜瓤浸出液接種在固體培育基上，培育時平板須要倒置，這樣可以防止培育皿蓋上凝聚的水珠落入培育皿造成污染，還可防止培育基表面的水分揮發(fā)，B錯誤；該試驗是比較兩種不同處理方式下西瓜上菌體的種類和數(shù)量，所以除須要設(shè)置盛有培育基的空白平板作比照，還須要設(shè)置不蓋保鮮膜同樣條件保存兩天的西瓜表面的瓜瓤制