檢驗科免疫學(xué)檢查作業(yè)指導(dǎo)書匯編

文件編號LAB-WHSCDQRMYY-SOP.MY-05-001

XX市XX區(qū)人民醫(yī)院檢驗科

頁號第1頁共2頁

作業(yè)指導(dǎo)書

版本/修改次數(shù)第4版第0次修改

審核人王楚明

乙肝兩對半可能出現(xiàn)的模式及其臨

批準(zhǔn)人肖昌國

床意義

發(fā)布日期2016年07月16日

一

序

號HBsAgHBsAbHBeAgHBeAbHBeAb臨床意義

感染，孕婦陽性致嬰兒

————HBV

1+感染率10%

感染，傳染性強，孕婦

——————HBV

2++攜帶可致嬰兒感染率90%

急、慢性肝炎，病毒復(fù)制活躍，

——

3十++傳染性強（大三陽）

急、慢性乙肝，應(yīng)加查HDV

4+—————+以確定是否為合并感染

5+——++急、慢性乙肝，傳染性弱

6————+HBV既往或現(xiàn)癥感染

急性感染恢復(fù)期或有既

———HBV

7++往感染，少數(shù)人有傳染性

乙肝恢復(fù)期，已有免疫力，

——+

8++HBeAb、HBsAb并存數(shù)月/年

接種乙肝疫苗后或HBV感染

9—+———后康復(fù)

10+—+++急、慢性乙肝，趨向恢復(fù)

乙肝早期，量少，建

————HBsAg

11+議加做定量PCR

12+——++HBV急、慢性感染

亞臨床早期，不同亞型

———HBV

13++HBV兩次感染

14——+++急性感染中期

15——+—+非典型急性感染

HBV感染可疑，需做進一步

———+—

16鑒定試驗，如定量PCR

17—++—±非典型亞臨床感染

有HBsAb-Ag復(fù)合物，也可能

184-+—+±二者不同亞類

文件編號LAB-WHSCDQRMYY-SOP.MY-05-001

XX市XX區(qū)人民醫(yī)院檢驗科

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作業(yè)指導(dǎo)書

版本/修改次數(shù)第4版第0次修改

審核人王楚明

乙肝兩對半可能出現(xiàn)的模式

批準(zhǔn)人肖昌國

及其臨床意義

發(fā)布日期2016年07月16日

修改狀態(tài)/日期修改代號修改單號修改人/日期

修

改

記

錄

文件編號LAB-WHSCDQRMYY-SOP.MY-05-002

XX市XX區(qū)人民醫(yī)院檢驗科

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作業(yè)指導(dǎo)書

版本/修改次數(shù)第4版第0次修改

審核人王楚明

乙肝兩對半、檢查

HBV-DNA批準(zhǔn)人肖昌國

結(jié)果與臨床處理一覽表

發(fā)布日期2016年07月16日

乙肝兩對半檢測結(jié)果PCR

序模式

HBCDHBCD臨床意義

號QRMQRMHBeAgHBeAbHBeAb

AgAb

乙肝病毒在復(fù)制，血液中

有活的病毒顆粒，有傳染

性，有條件者可試行抗病

+毒治療，以求病毒停止復(fù)

+—+—4-

193.6%制，消除傳染性，

HBV-DNAC一)約占6.7%,

可判定其抗病毒治療療效

情況。

說明患者體內(nèi)的乙肝病毒

發(fā)生變異并重新復(fù)制，血

中有變異的活病毒顆粒，

有傳染性，處理同1,若

+

2+——++HBV-DNA呈(一)，定期

50%一年左右復(fù)查，若患者持

續(xù)“小三陽”,HBV-DNA

(+)HBV整合到病人肝細(xì)

胞中，誘導(dǎo)癌變。

乙肝病毒感染恢復(fù)期，

HBeAb隨HBeAg消失后

時間的下降而消失，

HBeAb則可長期存在，病

毒復(fù)制不活躍，血中無病

————

3++毒，無傳染性，無需抗病

毒治療，定期一年復(fù)查，

若HBV-DNAC+)約38.7%,

說明血中有活的乙肝病

毒，有傳染性，處理同1

此種情況,HBV-DNA(+)

——————約占27.8%,說明血中有活

4+++的乙肝病毒，病毒在復(fù)制，

臨床處理同1

患者處于乙肝病毒感染早

期，乙肝病毒大量復(fù)制，

血中有活的病毒題粒，傳

————+

5+80.8%染性最強，需要隔離和抗

病毒治療，以求病毒停止

復(fù)制，消除傳染性。

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XX市XX區(qū)人民醫(yī)院檢驗科

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審核人王楚明

乙肝兩對半、檢查

HBV-DNA批準(zhǔn)人肖昌國

結(jié)果與臨床處理一覽表

發(fā)布日期2016年07月16日

乙肝兩對半檢測結(jié)果PCR

序模式

號HBCDHBCD臨床意義

QRMQRMHBeAgHBeAbHBeAb

AgAb

患者血中仍有活的病毒，

病毒復(fù)制，需抗病毒治療，

以求HBV-DNA轉(zhuǎn)(-),

——一—++

6若HBV-DNA呈(一)，可

注射乙肝疫苗，人體仍可

產(chǎn)生免疫性應(yīng)答

既往感染過乙肝病毒，體

內(nèi)通過自身免疫力消滅乙

肝病毒而康復(fù)，血中無病

———++—毒，無傳染性，可注射乙

7肝疫苗，若HBV-DNA(+)

11.1%,說明乙肝病毒發(fā)生

變異并重新復(fù)制，有傳染

性，處理同1

既往感染過乙肝病毒，體

內(nèi)通過自身免疫力消滅乙

肝病毒而康復(fù)，并已產(chǎn)生

————+—保護性HBCDQRMAb,避

8免再次感染，若HBV-DNA

(+)7.7%,則乙肝病毒發(fā)

生變異并重新復(fù)制，有傳

染性，處理同1

表明HBCDQRMAb不一

定能中和病毒，這是由于

—————————+

9HBCDQRMAg發(fā)生變異，

成起免疫逃避

原因：(1)HBV血清標(biāo)志

濃度太低，無法用

ELICDQRMA檢測出；(2)

病毒基因已變異，超量外

+

—————膜蛋白抵制了

1080.8%

HBCDQRMAg產(chǎn)生。因此，

從基因水平上檢測

HBV-DNA的PCR法靈敏

度高，可減少漏檢率

文件編號LAB-WHSCDQRMYY-SOP.MY-05-002

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審核人王楚明

乙肝兩對半、HBV-DNA檢查批準(zhǔn)人肖昌國

結(jié)果與臨床處理一覽表

發(fā)布日期2016年07月16日

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改

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文件編號LAB-WHSCDQRMYY-SOP.MY-05-003

XX市XX區(qū)人民醫(yī)院檢驗科

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審核人王楚明

人類免疫缺陷病毒HIV

批準(zhǔn)人肖昌國

抗體快速檢測

發(fā)布日期2016年07月16日

【測定原理】

本品系用特異性重組HIV1/2抗原gp41和gp36及免疫HIV1/2多克隆抗

體包被硝酸纖維素膜，配以紅色標(biāo)記物標(biāo)記的重組HIV1/2抗原gp41和gp36

及其他試劑制成，應(yīng)用膠體金免疫技術(shù)和層析原理，定性檢測全血/血清/血

漿標(biāo)本中HIV1/2抗體，用于現(xiàn)場篩查。

【試劑組成】

?英科人類免疫缺陷病毒（HIV1/2）抗體診斷試劑

?使用說明書

?一次性吸管

?緩沖液

【樣品要求】

血清/血漿標(biāo)本收集時盡快分離血清或血漿以避免溶血。標(biāo)本若不能及時

送檢，可在2℃~8℃冷藏3天。長期保存需冷凍于一20℃,忌反復(fù)凍融。

全血標(biāo)本采集后盡可能立即使用，抗凝血在24小時內(nèi)使用，以避免溶

血。檢測時盡量使用新鮮的標(biāo)本。

【檢測所需設(shè)備】

?秒表微量加樣器

【質(zhì)控】

在質(zhì)控區(qū)（C）中出現(xiàn)的紅色條帶是作為一種內(nèi)在的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。

標(biāo)準(zhǔn)陽性、陰性對照質(zhì)控物沒有與本試劑一起提供。但是建議作為良好

的實驗室測試手段，陽性、陰性對照應(yīng)在每天檢測樣品前先進行結(jié)果測試，

以確定是否使用了正確的操作步驟和得到正確的測試結(jié)果。

【貯藏】

原包裝應(yīng)儲存于4~30℃干燥處，診斷試劑在效期內(nèi)是穩(wěn)定的，切忌冷凍

或在過有效期后使用（有效期見包裝袋）。

【有效期】24個月

【批準(zhǔn)文號】國藥準(zhǔn)字2008第3401327號

【操作步驟】

在進行任何測試前必須先完整閱讀使用說明書，使用前將試劑和全血/

血小腳/血漿標(biāo)本恢復(fù)至室溫。在1小時內(nèi)應(yīng)盡快地使用，特別是在室溫高

于30℃或是在高度潮濕的環(huán)境中應(yīng)盡快使用。

1、將診斷試劑置于干凈平坦的臺面上，用一次性塑料吸管吸取全血/血清/

血漿標(biāo)本，垂直加入2滴或使用微量加樣器吸取60U1全血/血清/血漿

標(biāo)本于加樣孔（CDQRM）中，然后滴入1滴緩沖液于加樣孔（CDQRM）

中。

2、等待紫色色條帶的出現(xiàn)，在1-30分鐘內(nèi)讀取測試結(jié)果，30分鐘后讀取

的結(jié)果無效。

文件編號LAB-WHSCDQRMYY-SOP.MY-05-003

XX市XX區(qū)人民醫(yī)院檢驗科

頁號第7頁共2頁

作業(yè)指導(dǎo)書

版本/修改次數(shù)第4版第0次修改

審核人王楚明

人類免疫缺陷病毒HIV

批準(zhǔn)人肖昌國

抗體快速檢測

發(fā)布日期2016年07月16日

【結(jié)果判斷】

陽性結(jié)果（+）：兩條紫紅色條帶出現(xiàn)。一條位于測試區(qū)（T）內(nèi)，另一

條位于質(zhì)控區(qū)（C）。

陰性結(jié)果（一）：僅質(zhì)控區(qū)（C）出現(xiàn)一條紅色條帶，在測試區(qū)（T）

內(nèi)無紅色條帶出現(xiàn)。

無效：質(zhì)控區(qū)（C）未出現(xiàn)紫紅色條帶，表明不正確的操作過程或試劑

盒已變質(zhì)損壞。在任何情況下，應(yīng)重新測試。如果問題仍然存在，應(yīng)立即

停止此批號產(chǎn)品，并與當(dāng)?shù)毓?yīng)商聯(lián)系。

注意：由于標(biāo)本中抗HIV1/2抗體滴度的不同，測試區(qū)（T）內(nèi)的紅色

條帶會顯現(xiàn)出不同深淺的顏色，均表示陽性結(jié)果。當(dāng)樣本中含有低滴度的

HIV1/2抗體時，可能會導(dǎo)致出現(xiàn)的T線顏色很淡。測試結(jié)果不能做為判定

樣本中抗體滴度高低的依據(jù)。

【注意事項】

1、必須在1-30分鐘內(nèi)判讀結(jié)果，否則結(jié)果無效。

2,人類免疫缺陷病毒（HIV1/2）抗體診斷試劑適用于無償獻(xiàn)血人員的現(xiàn)

場檢測，并只用于檢測全血/血清/血漿樣本中的HIV1/2抗體。

3、人類免疫缺修病毒（HIV1/2）抗體診斷試劑僅供一次性使用。

4、陽性結(jié)果僅表示樣本中（HIV1/2）抗體的存在的可能，而不能作為機

體感染HIV的標(biāo)準(zhǔn)。對陽性結(jié)果必須用ELICDQRMA或WeCDQRMtern

Blot作進一步分析確證。

如有臨床癥狀存在，應(yīng)用如WeCDQRMternBlot法檢測作出判定。陰性結(jié)果

并不能排除感染HIV的可能性。

修改狀態(tài)/日期修改代號修改單號修改人/日期

修

改

記

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文件編號LAB-WHSCDQRMYY-SOP.MY-05-004

XX市XX區(qū)人民醫(yī)院檢驗科

頁號第8頁共1頁

作業(yè)指導(dǎo)書

版本/修改次數(shù)第4版第0次修改

審核人王楚明

傷寒、副傷寒血清學(xué)檢查標(biāo)準(zhǔn)

批準(zhǔn)人肖昌國

操作作業(yè)指導(dǎo)書

發(fā)布日期2016年07月16日

【操作步驟】

1、取試管1支，加生理鹽水1.9mL待測血清0.1mL使血清作1：20稀釋。

2、在4排X5孔，孔徑1.5ml的“U”型孔反應(yīng)板上分別標(biāo)以0、H、A、B。

3、取1：20稀釋血清分別加入各排的第1孔中，每孔0.2ml,共4孔，舍去0.2ml,

再加1ml生理鹽水，使血清作1：40稀釋。混合后加入第2歹?。菘字?，每孔0.2ml,

共4孔，舍去0.2ml,再加1ml生理鹽水，使血清作1：80稀釋...。以此類推,

稀釋至血清稀釋度為1：160止（第4列的4孔）。第5列設(shè)陰性對照。每孔加生

理鹽水0.2mlo

4、各排分別加相應(yīng)菌液0.1ml,再補加生理鹽水0.1ml,液體總量為0.4ml。1~4

孔血清最終稀釋度為1：40、1：80、1：160、1：320o

5、充分混勻2~3分鐘，反應(yīng)板上加蓋玻片或其他板。37c水浴過夜，次日觀察

;結(jié)■判斷】

陽性結(jié)果表現(xiàn)為液體澄清。菌液細(xì)顆粒均勻平攤于整個孔底。陰性表現(xiàn)為菌液

集中于一點，沉積于孔底。與菌液對照相同。以出現(xiàn)50%（2+）凝集的血清最

大稀釋倍數(shù)的倒數(shù)為待檢血清滴度。

【正常參考值】

傷寒（O）凝集效價VI：80；

傷寒（H）凝集效價＜1：160；

副傷寒甲、乙、丙（H）凝集效價VI：80。

【臨床意義】

。和H凝集效價均增高者，多見于傷寒??；H凝集效價低于正常，可能是非

特異性回憶反應(yīng)；O凝集效價高而H凝集效價低于正常，可能是早期感染或其

他沙門氏菌感染的交叉反應(yīng)；若。凝集效價高可能是微莢膜（Vi）抗原對?？?/p>

原的遮蔽作用。

【注意事項】

1、應(yīng)在光亮處先觀察管底凝集狀態(tài)，然后輕輕搖動判定結(jié)果，不能激烈振蕩。

2、菌液稀釋后應(yīng)及時使用且應(yīng)在標(biāo)簽載明的有效期內(nèi)使用。

3、菌液有搖不散的凝塊時，不能使用。

【保存條件】保存于2~8℃暗處。

修改狀態(tài)/日期修改代號修改單號修改人/日期

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文件編號LAB-WHSCDQRMYY-SOP.MY-05-005

XX市XX區(qū)人民醫(yī)院檢驗科

頁號第9頁共2頁

作業(yè)指導(dǎo)書

版本/修改次數(shù)第4版第0次修改

審核人王楚明

甲型肝炎病毒IgM（HAvIgM）批準(zhǔn)人肖昌國

發(fā)布日期2016年07月16日

［前言］

這種抗體是感染甲肝病毒（HAV）后病人血中最早出現(xiàn)的一種抗體，屬于

HAV衣殼抗體。

［原理］

本試劑盒采用捕獲法檢測人血清或血漿中的甲肝IgM抗體。具有簡便、快

速、準(zhǔn)確、樣本不需稀釋等優(yōu)點，適用于甲型肝炎的早期診斷。

［試劑組成］

1、包被板條6、底物液A

2、陰性對照血清7,底物液B

3、陽性對照血清8、終止液

4、酶標(biāo)記物溶液9、濃縮洗滌液

5,HA.Ag（用蒸儲水1：20稀釋后使用）

［試劑廠家］

北京現(xiàn)代高達(dá)生物技術(shù)有限公司

［試劑的穩(wěn)定性與貯存］

試劑自生產(chǎn)日起避光貯存于2-8°C,有效期內(nèi)穩(wěn)定。

［標(biāo)本的收集與處理］

標(biāo)本為無溶血血清。

［操作步驟］

1、加樣：將包被板預(yù)先編號。設(shè)空白對照1孔，陰、陽性對照各2孔。加

陰、陽性對照血清各50ul于相應(yīng)孔內(nèi)，其余各孔分別加入50ul待測樣本（不能

稀釋），輕輕振蕩后封板。

2、溫育：置37c水浴箱溫育30分鐘。

3、洗滌：扣去孔內(nèi)液體，用洗滌液注滿各孔，靜置2分鐘，扣去洗滌液，

重復(fù)4次，最后一次在吸水紙上拍干。

4、加酶:除空白對照孔外，每孔加入HA.Ag50ul,酶標(biāo)記物溶液50ul,

輕輕振蕩后封板。5、溫育：置37c水浴箱溫育30分鐘。

5、洗滌：同步驟3洗滌

6、顯色：每孔加底物液A1滴（50ul）、底物液Bl滴（50ul）,輕拍混勻

后，置37℃水浴15分鐘，目測結(jié)果或加入終止液1滴（50ul）用酶標(biāo)儀判讀

［結(jié)果判定］

1、目測法：在白色背景下觀察各孔顏色，無色或極淡蘭色判為陰性，呈明

顯蘭色判為陽性。

2、酶標(biāo)儀檢測法（選擇波長450nm）：用空白孔校零，測定各孔吸光度值。

樣本與陰性對照比較P/N值22.1時，為抗-HAV-IgM陽性；否則為陰性。

注：陰性對照孔0D值小于0.05時，按0.05計算；大于0.05時，按實際

值計算。

文件編號LAB-WHSCDQRMYY-SOP.MY-05-005

XX市XX區(qū)人民醫(yī)院檢驗科

頁號第10頁共2頁

作業(yè)指導(dǎo)書

版本/修改次數(shù)第4版第0次修改

審核人王楚明

甲型肝炎病毒IgM(HAvIgM)批準(zhǔn)人肖昌國

發(fā)布日期2016年07月16日

［質(zhì)量控制］

每批檢測同步進行質(zhì)控品測定，繪制室內(nèi)質(zhì)控圖。其它按室內(nèi)質(zhì)量控制管

理規(guī)定進行。

［參考值］

陰性

［臨床意義］:

(1)感染后的甲型肝炎病人血中很快就可出現(xiàn)此種抗體，并在血中能夠維持

3—6個月的時間。

(2)有少部分病人測不出這一抗體，這種結(jié)果臨床上稱作HAVAb-IgM應(yīng)答

“缺失”。這類患者可借助于檢測HAAg或甲型肝炎總抗體來明確診斷。

［注意事項］

1、試劑盒2-8℃貯存，有效期6個月。

2、試劑盒用前先平衡至室溫。

3、盡快完成加樣過程，嚴(yán)格控制反應(yīng)溫度和反應(yīng)時間。

4、滴加試劑前，應(yīng)將滴瓶翻轉(zhuǎn)數(shù)次混勻。滴加時瓶身應(yīng)保持垂直。

5、洗滌必須充分，洗滌時各孔均須加滿，防止孔口內(nèi)含有游離酶不能洗凈。

6、若洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶時，可于37c放置至溶解。

文件編號LAB-WHSCDQRMYY-SOP.MY-05-006

XX市XX區(qū)人民醫(yī)院檢驗科

頁號第11頁共2頁

作業(yè)指導(dǎo)書

版本/修改次數(shù)第4版第0次修改

審核人王楚明

丙型肝炎病毒抗體IgG

批準(zhǔn)人肖昌國

（抗-HCV?IgG）

發(fā)布日期2016年07月16日

［原理］

本試劑盒用間接法檢測人血清或血漿中的抗-HCV?IgG抗體。具有簡便、

快速、準(zhǔn)確及可多次使用等優(yōu)點。

［試劑盒組成］

1、包被板條6、底物液A

2、陰性對照血清7、底物液B

3、陽性對照血清8、終止液

4、酶標(biāo)記物溶液9、濃縮洗滌液

5、樣本稀釋液（用蒸儲水1：20稀釋后使用）

［試劑廠家］

北京現(xiàn)代高達(dá)生物技術(shù)有限公司

［試劑的穩(wěn)定性與貯存］

試劑自生產(chǎn)日起避光貯存于2-8C,有效期內(nèi)穩(wěn)定。

［標(biāo)本的收集與處理］

標(biāo)本為無溶血血清。

［操作步驟］

1、加對照：設(shè)空白對照1孔，陰、陽性對照各2孔，并直接加入100ul

陰、陽性對照血清。

2、加樣：（1:11）稀釋：在板孔底部，加入2滴（100ul）樣本稀釋液，再

分別加入10ul樣本，輕輕振蕩封板后，置37℃水浴20分鐘。

3、洗滌：扣去孔內(nèi)液體，用洗滌液注滿各孔，靜置20秒，扣去洗滌液，

重復(fù)4次，最后一次在吸水紙上拍干。

4、加酶：除空白對照孔外，每孔加入2滴酶標(biāo)記物，輕輕振蕩封板后，

置37℃水浴15分鐘。

5、洗滌：同步驟3。

6、顯色：每孔加底物液A、B各1滴，輕拍混勻后，置37℃水浴15分鐘。

7、每孔加終止液50ul.

［結(jié)果判定］

1、目測：在白色背景下觀察各孔顏色，呈明顯蘭色或顯色深于陰性對照者

判為陽性；顯色與陰性對照相近或稍深于陰性對照者判為陰性。

2、酶標(biāo)儀檢測（選擇波長450nm）：每孔加終止液1滴，用空白孔校零，測定各

孔0D值。

臨界值（C.0.）=0.140+陰性對照平均0D值；

樣本0D值,臨界值,為抗-HCV-IgG陽性;否則為陰性。

注：陰性對照孔0D值小于0.05時，按0.05計算；大于0.05時，按實際值計算。

［質(zhì)量控制］

每批檢測同步進行質(zhì)控品測定，繪制室內(nèi)質(zhì)控圖。其它按室內(nèi)質(zhì)量控制管

進行測定。

文件編號LAB-WHSCDQRMYY-SOP.MY-05-006

XX市XX區(qū)人民醫(yī)院檢驗科

頁號第12頁共2頁

作業(yè)指導(dǎo)書

版本/修改次數(shù)第4版第0次修改

審核人王楚明

丙型肝炎病毒抗體IgG(抗

批準(zhǔn)人肖昌國

-HCV?IgG)

發(fā)布日期2016年07月16日

［參考范圍］

酶聯(lián)免疫吸附試驗：陰性

［臨床意義］:

(1)在輸血后患肝炎有80—90%的病人是丙型肝炎，其中大部分為陽性。

(2)在乙型肝炎患者中，特別是經(jīng)常使用血制品(血漿、全血)的病人可以

引起丙肝病毒的合并感染，使疾病轉(zhuǎn)為慢性化、肝硬化或者肝癌。所以對乙型肝

炎的復(fù)發(fā)病人或是慢性肝炎病人要進行HCV-Ab的檢測。

［注意事項］

1、不同批號的試劑不可混用。

2、試劑用前先平衡至室溫。含血球的標(biāo)本易出現(xiàn)假陽性，應(yīng)避免使用。

3、未用完的板條應(yīng)及時封存于易封袋中。

4、滴加試劑前，應(yīng)將滴瓶翻轉(zhuǎn)數(shù)次混勻。滴加時瓶身應(yīng)保持垂直。

5、若濃縮洗滌出現(xiàn)結(jié)晶，可于37℃放置至溶解。洗滌要充分，各孔均須

加滿，防止孔口內(nèi)游離酶不能洗凈。

6、本試劑盒應(yīng)視為為有傳染性物質(zhì)，請按傳染病實驗室規(guī)程操作

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文件編號LAB-WHSCDQRMYY-SOP.MY-05-007

XX市XX區(qū)人民醫(yī)院檢驗科

頁號第13頁共2頁

作業(yè)指導(dǎo)書

版本/修改次數(shù)第4版第0次修改

審核人王楚明

戊型肝炎病毒抗體IgG

批準(zhǔn)人肖昌國

（抗-HEV?IgG）

發(fā)布日期2016年07月16日

［前言］

戊型肝炎。原來稱作腸道傳染性非甲非乙型肝炎，在同一個地區(qū)可以同甲

型肝炎相伴發(fā)生，散在流行。HEAb包括HEAb.IgG和HEAb.IgM兩類抗體。

［原理］

本試劑盒采用間接法檢測人血清或血漿中的抗-HEV-IgG抗體。具有簡便

快速、準(zhǔn)確及可多次使用等優(yōu)點。

［試劑廠家］

北京現(xiàn)代高達(dá)生物技術(shù)有限公司

［試劑盒組成］

1、包被板條6、底物液A

2、陰性對照血清7、底物液B

3、陽性對照血清8、終止液

4、酶標(biāo)記物溶液9、濃縮洗滌液

5、樣本稀釋液（用蒸儲水1：25稀釋后使用）

［試劑的穩(wěn)定性與貯存］

試劑自生產(chǎn)日起避光貯存于2-8°C,有效期內(nèi)穩(wěn)定。

［標(biāo)本的收集與處理］

標(biāo)本為無溶血血清。

［操作步驟］

1、加對照血清：設(shè)空白對照1孔，陰、陽性對照各2孔，并在陰、陽對照

孔內(nèi)直接加入相應(yīng)血清各lOOulo

2、加樣（1：21稀釋）：在板孔底部，加入2滴（lOOul）樣本稀釋液，再

加入5ul樣本，輕拍混勻封板后，置37c水浴25分鐘。

3、洗滌：扣去孔內(nèi)液體，用洗滌液注滿各孔，靜置20秒，扣去洗滌液，

重復(fù)4次后在吸水紙上拍干。

4、加酶：除空白對照孔外，每孔加2滴酶標(biāo)記物，輕輕振蕩封板后，置

37℃水浴25分鐘。

5、洗滌：同步驟3。

6、顯色：每孔加底物液A、B各1滴，輕拍混勻后，置37℃水浴10分鐘。

7、每孔加終止液50ul,450nm比色。

［結(jié)果判定］

1、目測：在白色背景下觀察各孔顏色，呈明顯蘭色或顯色明顯深于陰性對

照者判為陽性；顯色與陰性對照相近或稍深于陰性對照者判為陰性。

2,酶標(biāo)儀檢測（選擇波長450nm）：每孔終止液1滴后，用空白孔校零，

測定各孔吸光度0D值。

CutoffValue=陰性對照平均0D值+0.22

文件編號LAB-WHSCDQRMYY-SOP.MY-05-007

XX市XX區(qū)人民醫(yī)院檢驗科

頁號第14頁共2頁

作業(yè)指導(dǎo)書

版本/修改次數(shù)第4版第0次修改

審核人王楚明

戊型肝炎病毒抗體IgG

批準(zhǔn)人肖昌國

(抗-HEV?IgG)

發(fā)布日期2016年07月16日

樣本0D值〉CutoffValue為抗-HEV-IgG陽性；

樣本OD值VCutoffValue為抗-HEV-IgG陰性。

質(zhì)量控制］

每批檢測同步進行質(zhì)控品測定，繪制室內(nèi)質(zhì)控圖。其它按室內(nèi)質(zhì)量控制管

理規(guī)定進行。

［參考范圍］

酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELICDQRMA)：陰性

［臨床意義］：

(1)HEAb.IgM陽性，表示近期感染戊肝炎病毒。

(2)凡急性期與恢復(fù)期雙份血清的HEVAb.IgG效價)=4倍增高，可判為

HEVAb.IgG陽性，表明新近感染戊型肝炎病毒，有臨床確診價值。

［注意事項］

1、不同批號的試劑不可混用。

2、試劑盒用前先平衡至室溫。含血球的標(biāo)本易出現(xiàn)假陽性，應(yīng)避免使用。

3、未用完的板條應(yīng)及時封存于易封袋中。

4、滴加試劑前，應(yīng)將滴瓶翻轉(zhuǎn)數(shù)次混勻，滴加時瓶身應(yīng)保持垂直。

5、若濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶，可于37℃放置至溶解。洗滌要充分，各孔均

需加滿，防止孔口內(nèi)游離酶不能洗凈。

6、試劑盒置于2-8℃貯存，效期6個月。

7、本試劑盒應(yīng)視為有傳染性物質(zhì)，請按傳染病實驗室規(guī)程操作。

文件編號LAB-WHSCDQRMYY-SOP.MY-05-008

XX市XX區(qū)人民醫(yī)院檢驗科

頁號第15頁共1頁

作業(yè)指導(dǎo)書

版本/修改次數(shù)第4版第0次修改

審核人王楚明

快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗

批準(zhǔn)人肖昌國

(RPR)

發(fā)布日期2016年07月16日

［原理］

用VDRL抗原重懸至含有特制炭末的溶液中制成，供在白色卡片或磁板上

進行凝集試驗以檢測血清或血漿反應(yīng)素之用。此試驗可做為梅毒血清學(xué)快速檢查

及臨床療效之參考。

［試劑組成］

1,RPR抗原懸液

2,梅毒陽性血清對照

3,滴加抗原用專用滴管及針頭

4,試驗專用卡片

［試劑的穩(wěn)定性與貯存］

試劑自生產(chǎn)日起避光貯存于2-8C,有效期內(nèi)穩(wěn)定。

［標(biāo)本的收集與處理］

標(biāo)本為無溶血血清。

［操作步驟］

1,待檢血清及RPR抗原于用前置室溫(23—29C)o

2,取待檢血清或血獎(不需滅活)1滴約50ul,均勻涂滿1個卡圈內(nèi)。

3,輕輕搖動抗原使之均勻，以專用滴管針頭垂直滴加抗原1滴于血清圈內(nèi)。

4,置卡片于震搖器上lOOrpm8分鐘，如用手搖，需保持相應(yīng)速度及時間。

5,三分鐘內(nèi)肉眼判斷結(jié)果，參考圖片標(biāo)準(zhǔn)以強陽性，弱陽性及陰性記錄結(jié)果。

6,如做定量試驗，可將待檢血清做2倍系列稀釋，再按上述定性方法進行

試驗。

［結(jié)果判斷］

1.陽性反應(yīng)(+++?++++)：可見中等或較大的紅色凝聚物。

2.弱陽性反應(yīng)(+?++)：可見較小的紅色凝聚物。

3.陰性反應(yīng)(-)：可見均勻的抗原顆粒而無凝聚物。

［質(zhì)量控制］

為確保測試結(jié)果準(zhǔn)確可靠，每批測試均應(yīng)放置陽性質(zhì)控血清與被檢樣品同

時測試，用以檢查試劑性能。

［臨床意義］

梅毒的非特異性篩選實驗。也可用于梅毒治療效果的評價。

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