GB 15979-2024 一次性使用衛(wèi)生用品衛(wèi)生要求

一次性使用衛(wèi)生用品衛(wèi)生要求國家市場監(jiān)督管理總局國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會前言 12規(guī)范性引用文件 13術(shù)語和定義 14原材料衛(wèi)生要求 25生產(chǎn)過程衛(wèi)生要求 26產(chǎn)品衛(wèi)生要求 37檢測方法 58包裝、運輸和貯存 69標(biāo)識 610標(biāo)準(zhǔn)的實施 6附錄A(規(guī)范性)生產(chǎn)環(huán)境衛(wèi)生要求檢測方法 7附錄B(規(guī)范性)產(chǎn)品微生物檢測方法 9附錄C(規(guī)范性)消毒效果檢測評價方法 附錄D(規(guī)范性)產(chǎn)品環(huán)氧乙烷殘留量檢測方法 附錄E(規(guī)范性)產(chǎn)品殺菌性能、抑菌性能與穩(wěn)定性檢測方法 附錄F(規(guī)范性)產(chǎn)品毒理學(xué)試驗方法 IⅢ本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)——修改了適用范圍(見第1章);——更改了一次性使用衛(wèi)生用品定義(見3.1,2002年版的3.1),增加了衛(wèi)生濕巾、抗菌劑、抑菌——將生產(chǎn)環(huán)境衛(wèi)生指標(biāo)(見2002年版的第5章)、消毒效果生物監(jiān)測評價(見2002年版的第6章)與產(chǎn)品衛(wèi)生指標(biāo)中初始污染菌(見2002年版的4.3)合并調(diào)整為生產(chǎn)過程衛(wèi)生要求(見第5章),——刪除了生產(chǎn)環(huán)境與過程衛(wèi)生要求以及消毒過程要求(見2002年版的第9——增加了產(chǎn)品衛(wèi)生要求中理化指標(biāo)(見6.2);將毒理學(xué)試驗項目和毒理學(xué)指標(biāo)要求(見2002年版的附錄A)從附錄調(diào)整到正文(見6.3);——更改了衛(wèi)生栓(內(nèi)置棉條)、抗菌劑及抑菌劑的微生物學(xué)指標(biāo)(見6.4,2002年版的4.3); 增加了相關(guān)產(chǎn)品理化指標(biāo)的檢測方法(見7.2)——增加了空氣采樣器法(見附錄A);——更改了“產(chǎn)品微生物檢測方法”中真菌檢測方法(見附錄B中B.7、B.8,2002年版的B.7、——更改了“產(chǎn)品殺菌性能、抑菌性能與穩(wěn)定性檢測方法”中樣品采集數(shù)量(見——增加了部分抗(抑)菌試驗方法(見附錄E,2002年版的附錄C); 更改了殺菌和抑菌作用時間(見附錄E,20021件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用GB/T191包裝儲運圖示標(biāo)志GB/T8939衛(wèi)生巾(護墊)GB/T27741紙和紙板可遷移性熒光增白劑的測定GB/T28004.1紙尿褲第1部分：嬰兒紙尿褲GB/T28004.2紙尿褲第2部分：成人紙尿褲消毒產(chǎn)品生產(chǎn)企業(yè)衛(wèi)生規(guī)范[衛(wèi)生部(2009年版)]2[來源：WS575—2017,3.2,有直接接觸人體完整皮膚或黏膜，具有一定殺菌(細菌和酵母菌)作用，但直接接觸人體完整皮膚或黏膜，具有一定抑菌(細菌和酵母菌)作用，但[來源：《消毒產(chǎn)品生產(chǎn)企業(yè)衛(wèi)生規(guī)范》(2009年版),第十二條，有修改]a)抗(抑)菌劑中不應(yīng)添加列入《中華人民共和國藥典》的藥品及其同名原料(消毒防腐藥、中藥和抑菌劑除外，也不包括藥用輔料和純化水);疫苗、血清或毒素及其制品等用于產(chǎn)生主動或被動免疫的制劑，用于診斷免疫狀態(tài)的制劑，蛋白、多肽制劑(溶菌酶、溶葡萄球菌酶除外);列入《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》的禁用化學(xué)物質(zhì)(碘除外);國家衛(wèi)生健康行政部門規(guī)定b)衛(wèi)生濕巾和其他具有抗(抑)菌功能的一次性使用衛(wèi)生用品不應(yīng)添加抗菌藥物、抗真菌藥物、4.4根據(jù)產(chǎn)品工藝規(guī)程選用符合相應(yīng)產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的生產(chǎn)用水。濕巾、衛(wèi)生濕巾和抗(抑)菌劑的生產(chǎn)用水應(yīng)符合《中華人民共和國藥典》中純化水要求，其他一次性使用衛(wèi)生用品的生產(chǎn)用水應(yīng)符合3a)抗(抑)菌劑生產(chǎn)車間空氣應(yīng)符合《消毒產(chǎn)品生產(chǎn)企業(yè)衛(wèi)生規(guī)范》的要求，凈化車間應(yīng)符合GB50073的要求；其他一次性使用衛(wèi)生用品生產(chǎn)車間空氣中菌落總數(shù)應(yīng)小于或等于適用范圍標(biāo)識均值±1以內(nèi)標(biāo)識pH值的衛(wèi)生用品不得檢出含紙的衛(wèi)生用品鉛(以Pb計)≤10mg/kg或mg/L濕巾、衛(wèi)生濕巾、抗(抑)菌劑等衛(wèi)生用品砷(以As計)濕巾、衛(wèi)生濕巾、抗(抑)菌劑等衛(wèi)生用品汞濕巾、衛(wèi)生濕巾、抗(抑)菌劑等衛(wèi)生用品經(jīng)環(huán)氧乙烷消毒的衛(wèi)生用品衛(wèi)生濕巾、抗(抑)菌劑及其他含有抗(抑)菌成分的衛(wèi)生用品6.2.2衛(wèi)生濕巾、抗(抑)菌劑和其他含有抗(抑)菌成分的一次性使用衛(wèi)生用品有效成分含量應(yīng)符合2,4,4’-三氯-2’-羥基二苯醚國家規(guī)定的其他限用物質(zhì)4棉(棒、簽、球等)等應(yīng)進行毒理學(xué)試驗。當(dāng)原材料、生產(chǎn)工藝等發(fā)生變化可6.3.2毒理學(xué)試驗應(yīng)按表3進行，指標(biāo)符合表4的規(guī)定。毒理學(xué)試驗項目眼刺激陰道黏膜婦女經(jīng)期衛(wèi)生用品十十排泄物衛(wèi)生用品十十十士十十十十十十用紙、紙巾、棉柔巾、衛(wèi)生棉(棒、簽、球等)等十十 十 十其他一次性使用衛(wèi)生用品參照執(zhí)行。使用過程中多次接觸皮膚的應(yīng)進行多次完整皮膚刺激試驗；標(biāo)注使用后及時清洗的應(yīng)進行暴露時間2h的急e標(biāo)注用于陰道黏膜偶爾使用或間隔數(shù)日使用的應(yīng)進行一次陰道黏膜刺激試驗用于孕婦、嬰兒的應(yīng)進行皮膚變態(tài)反應(yīng)試驗。眼刺激試驗陰道黏膜刺激試驗未見或極輕度a,b,e適用于嬰兒的一次性使用衛(wèi)生用品皮膚刺激試驗和眼刺激試驗應(yīng)無刺激性，未見皮膚變態(tài)反應(yīng)。5CFU/g或CFU/mL特定微生物*及其他致病CFU/g或CFU/mL婦女經(jīng)期衛(wèi)生用品衛(wèi)生栓(內(nèi)置棉條)其他婦女經(jīng)期衛(wèi)生用品消毒級≤20不得檢出不得檢出不得檢出不得檢出排泄物衛(wèi)生用品消毒級不得檢出不得檢出不得檢出不得檢出不得檢出套或指套、化妝棉(紙、巾)、紙、紙巾、棉柔巾、衛(wèi)生棉(棒、不得檢出特定微生物指大腸菌群、銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌、6懷疑發(fā)生相關(guān)感染時，進行相應(yīng)目標(biāo)致病微生物檢測。6.5衛(wèi)生濕巾及抗(抑)菌衛(wèi)生用品抗(抑)菌性能于90%;如標(biāo)明對致病性酵母菌有殺菌作用，對白色念珠菌的殺菌率應(yīng)大于或等于90%;如標(biāo)明對其菌和金黃色葡萄球菌的殺菌率應(yīng)大于或等于90%(振蕩燒瓶試驗方法殺菌率應(yīng)大于26%);如標(biāo)明對菌和金黃色葡萄球菌的抑菌率應(yīng)大于或等于50%(振蕩燒瓶試驗方法抑菌率應(yīng)大于26%,高吸水材料抑菌率應(yīng)大于或等于99%)或抑菌環(huán)直徑大于7.0mm;如標(biāo)明對致病性酵母菌或其他微生物有抑菌作67.2.2衛(wèi)生巾、衛(wèi)生護墊等吸水產(chǎn)品pH按GB/T8939的方法進行測定，其他產(chǎn)品pH有相應(yīng)測定標(biāo)準(zhǔn)7.2.3可遷移性熒光增白劑：衛(wèi)生巾(護墊)按GB/T8939的方法進行測定；紙尿褲分別按7.2.7葡萄糖酸氯已定、醋酸氯己定按照GB/T26367及國家有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的方法進行測定；的前提下，可以銷售至產(chǎn)品標(biāo)示的有效期(保質(zhì)7(規(guī)范性)于30m2,設(shè)東、西、南、北、中5個采樣點，周圍4個采樣點距墻1.0m。生產(chǎn)企業(yè)也可根據(jù)實際生產(chǎn)在采樣前將準(zhǔn)備好的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基置36℃±1℃培養(yǎng)18h～24h,取出檢查有無污染，將污染培養(yǎng)基剔除。將已采集的培養(yǎng)皿在4h內(nèi)送實驗室，于36℃±1℃培養(yǎng)1000——換算系數(shù)。A.2工作臺表面與工人手表面采樣與測試方法生理鹽水(或相應(yīng)中和劑)的棉簽在其內(nèi)橫豎往返涂抹各5次，然后剪去或拗斷手接觸部分棉棒，以無A.2.1.2工人手(套):被檢人五指并攏，用一支浸濕生理鹽水(或相應(yīng)中和劑)的棉簽在右手指曲水(或相應(yīng)中和劑)的采樣管內(nèi)送檢。8將已采集的樣品在4h內(nèi)送實驗室，每支采樣管充分振蕩混勻(宜使用渦旋振蕩器振蕩)后取48h,計數(shù)平皿上菌落數(shù)。Y?=Yo×10…Y?工人手表面菌落總數(shù)，單位為每只手(套)菌落形成單位[CFU/只手(套)];9(規(guī)范性)于同一批號的3個運輸包裝中至少抽取6件最小銷售包裝樣品(若樣品數(shù)量不能滿足試驗所需，則應(yīng)相應(yīng)增加采樣數(shù)量),其中1/3樣品用于檢測，2/3樣品用于留樣。抽樣的最小銷售包裝不應(yīng)有破在空氣潔凈度5級凈化條件下用無菌方法打開至少2個包裝用于檢測，從每個包裝中取樣，準(zhǔn)確稱的稀釋度進行菌落計數(shù)。共接種2個平皿，每個平皿中加入2.0mL樣液，然后用冷卻至40℃~45℃左右熔化的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基15mL～20mL倒入每個平皿內(nèi)混合均勻。待瓊脂凝固后翻轉(zhuǎn)平皿置36℃±1℃培養(yǎng)48h,計算平皿上的菌落數(shù)。菌落呈片狀生長的平皿不宜采用，確保2塊平皿符合計數(shù)要求并進行菌落計數(shù)，按公式(B.1)計算首先選取平均菌落數(shù)在30CFU～300CFU之間的平皿。當(dāng)菌落數(shù)小于或等于100CFU/g或才能報告結(jié)果。當(dāng)2次復(fù)測結(jié)果都達到本文件的規(guī)定，則判定被檢樣品合格，以2告；其中有任何1次復(fù)測結(jié)果超過本文件規(guī)定，則判定被檢樣品不合格，以所有不合格結(jié)果的均值B.3.1.3染色鏡檢與鑒定：取疑似菌落1個～2個作革蘭染色鏡檢，同時接種乳糖發(fā)酵管，置36℃±B.4.1.2分離培養(yǎng)：從培養(yǎng)液的薄菌膜處挑取培養(yǎng)物，劃線接種十六烷基三甲基溴化銨瓊脂平皿，置36℃±1℃培養(yǎng)18h～24h,觀察菌落特征。銅綠假單胞菌在此培養(yǎng)基上生長良好，菌落扁平無定型，B.4.1.3染色鏡檢：取鑒定培養(yǎng)基上可疑菌落涂片作革蘭染色，鏡檢為革蘭陰性菌者還需進行下列菌落涂在濾紙片上，然后在其上滴加一滴新配制的1%二甲基對苯二胺試液，30s內(nèi)出現(xiàn)粉紅色或紫紅B.4.1.5綠膿菌素試驗：取鑒定培養(yǎng)基上2個～3個可疑菌落，分別接種在綠膿菌素測定用培養(yǎng)基斜面，36℃±1℃培養(yǎng)24h,加入三氯甲烷3mL～5mL,充分振蕩使培養(yǎng)培養(yǎng)24h,取出放于4℃~10℃,如仍呈液態(tài)為陽性，凝固者為陰性。B.4.1.842℃生長試驗：取鑒定培養(yǎng)基上可疑培養(yǎng)物，接種在普通瓊脂斜面培養(yǎng)基上，置42℃培養(yǎng)被檢樣品中檢出銅綠假單胞菌。如綠膿菌素試驗陰性而液化明膠、硝酸鹽還原產(chǎn)B.5.1.1增菌培養(yǎng)：取樣液5.0mL,加入到50mLSCDLP培養(yǎng)液中，充分混勻，置36℃±1℃培養(yǎng)B.5.1.2分離培養(yǎng)：自上述增菌懸液中取1～2接種環(huán)，劃線接種BairdParker培養(yǎng)基(首選)或血瓊脂B.5.1.4甘露醇發(fā)酵試驗：取血瓊脂平皿上典型菌落接種甘露醇培養(yǎng)液，置36℃±1℃培養(yǎng)24h,發(fā)酵B.5.1.5血漿凝固酶試驗(試管法):吸取1:4新鮮血漿或凍干血漿生理鹽水溶液0.5mL,放滅菌小試管中，加入等量待檢菌24h肉湯培養(yǎng)物0.5mL,混勻，放36℃±1℃溫箱或水浴中，每30min觀察一取上清液),加入0.8mL滅菌生理鹽水，混勻后再加入待檢菌24h肉湯培養(yǎng)物0.5mL和0.25%氯化鈣0.25mL,混勻，放36℃±1℃水浴中，2min觀察一次(一般10min內(nèi)可凝固),待血漿凝固后繼續(xù)觀察并記錄熔化時間。如2h內(nèi)不熔化，繼續(xù)放置24h觀察，如凝塊全部熔化為陽性，24h仍不熔化為陰片放在平皿表面上，同時以已知陽性菌株作對照，在36℃±1℃下放置24h～48h,有抑菌帶者為的稀釋度進行真菌菌落計數(shù)。共接種2個平皿，每個平皿中加入2.0mL樣液，然后用冷卻至40℃~凝固后翻轉(zhuǎn)平皿置25℃±1℃(沙堡弱瓊脂培養(yǎng)基)或28℃±1℃(改良沙堡弱瓊脂培養(yǎng)基)培養(yǎng)當(dāng)菌落數(shù)小于或等于100CFUCFU/g或CFU/mL時，按實有數(shù)報告；當(dāng)大于100CFU/g或B.7.3.2如經(jīng)首次檢測，樣品菌落總數(shù)超過本文件的規(guī)才能報告結(jié)果。當(dāng)2次復(fù)測結(jié)果都達到本文件的規(guī)定，則判定被檢樣品合格，以2次合格結(jié)果的均值報告；其中有任何1次復(fù)測結(jié)果超過本文件規(guī)定，則判定被檢樣品不合格，以所有不合格結(jié)果的均值(規(guī)范性)C.2.1電離輻射消毒效果評價用生物指示菌為短小桿菌E601(ATCC27142)芽孢，在菌量為5.0×C.2.2每次測試至少選5箱產(chǎn)品，每箱布放3片生物指示劑，置于最小劑量處。消毒完畢，取出指示菌種，兩者均置36℃±1℃培養(yǎng)。陽性對照應(yīng)在24h內(nèi)有菌生長。定性培養(yǎng)樣品如連續(xù)觀察7d(或按使(規(guī)范性)產(chǎn)品環(huán)氧乙烷殘留量檢測方法D.1樣品采集于環(huán)氧乙烷消毒后，立即從同一消毒批號的3個運輸包裝中隨機抽取一定量最小銷售包裝樣品，采樣量至少應(yīng)滿足試驗所需(平行測試2次)規(guī)定的量，并留一定量樣品在需要復(fù)測時備用。分別于環(huán)氧乙烷消毒后24h及以后每隔數(shù)天進行殘留量測定，直至殘留量降至6.2.1所規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)D.2儀器與試劑D.2.1儀器D.2.1.1氣相色譜儀，配有火焰離子化檢測器(FID)。D.2.1.2分析天平，精確到0.1mg。D.2.1.4冰箱：能使樣品保存在2℃~8℃之間。D.2.1.5氣體調(diào)節(jié)器：用于開、關(guān)環(huán)氧乙烷氣瓶。D.2.1.6氣密性注射器：容量為1.0mL、10.0mL、50mL、100mL,用于標(biāo)準(zhǔn)氣體配制及把標(biāo)準(zhǔn)氣體D.2.1.7微量注射器：容量為10μL,用于向氣相色譜儀中注入浸提溶液。D.2.1.8平底螺蓋瓶：體積能夠容納樣品及浸提溶液，具有聚四氟乙烯(PTFE)襯墊的硅橡膠塞，用D.2.2試劑D.2.2.1環(huán)氧乙烷：裝在適當(dāng)?shù)臍馄恐械挠凶C標(biāo)準(zhǔn)氣體。D.2.2.2水：純度適合于氣相色譜。D.2.2.3載氣和輔助氣體。載氣：高純氮氣(99.999%)。輔助氣體：氫氣、空氣。D.3操作步驟D.3.1標(biāo)準(zhǔn)氣體配制用100mL氣密性注射器抽取環(huán)氧乙烷飽和氣(重復(fù)放空2次，以排除原有空氣),塞上橡皮頭，用10mL氣密性注射器抽取上述100mL氣密性注射器中純環(huán)氧乙烷標(biāo)準(zhǔn)氣10mL,用潔凈空氣稀釋到100mL(可將10mL標(biāo)準(zhǔn)氣注入到已有90mL潔凈空氣的帶橡皮塞頭的氣密性注射器中來完成)。用同樣的方法根據(jù)需要再逐級稀釋，配制4個～5個濃度的標(biāo)準(zhǔn)氣體。根據(jù)環(huán)氧乙烷的純度、稀釋倍數(shù)和室溫，計算出環(huán)氧乙烷標(biāo)準(zhǔn)氣體的配制濃度。稀釋后標(biāo)準(zhǔn)氣體濃度計算見公式(D.1):t——室溫，單位為攝氏度(℃);22.4——氣體常數(shù)，單位為升每摩爾(L/mol)。至少取2個最小包裝產(chǎn)品，將其剪碎，隨機精確稱取0.5g～2.0g,放入適當(dāng)體積的平底螺蓋瓶中，加入2.0mL～5.0mL去離子水，確保樣品完全浸沒于浸提溶液中，加蓋密封后充分搖勻，放置4h或振蕩30min待用。如被檢樣品為吸水樹脂材料產(chǎn)品，可適當(dāng)增加去離子水量，以確保至少可吸出2mL樣品浸提溶液。如果檢測不能馬上進行，則將浸提溶液從樣品中分離出來，密封于有聚四氟乙烯襯墊的瓶中蓋緊。任何盛有標(biāo)準(zhǔn)溶液或浸提液的管瓶，其頂端空間應(yīng)少于總體積的10%,浸提溶液可在5℃±3℃的冰箱中暫時貯存，并于浸提當(dāng)天檢測。D.3.3分析待儀器穩(wěn)定后，在同樣條件下，環(huán)氧乙烷標(biāo)準(zhǔn)氣體各進樣1.0mL,待分析樣品(樣品浸提溶液)各進樣1.0μL,每一樣液平行做2次測定。根據(jù)保留時間定性，根據(jù)峰面積(或峰高)進行定量計算，取平均值。D.3.4儀器操作參考條件D.3.4.1色譜柱：極性石英毛細管色譜柱(固定相為聚乙二醇)或其他等效色譜柱。D.3.4.2柱溫：90℃。D.3.4.3進樣口溫度：220℃。D.3.4.4載氣：高純氮氣。D.3.5計算以所進環(huán)氧乙烷標(biāo)準(zhǔn)氣的微克數(shù)對所得峰面積(或峰高)作環(huán)氧乙烷工作曲線。以樣品中環(huán)氧乙烷對應(yīng)的峰面積(或峰高)在工作曲線上求得環(huán)氧乙烷的量A(μg),并以公式(D.2)求得產(chǎn)品中環(huán)氧乙烷的殘留量。V萃——萃取液體積，單位為毫升(mL);V進——進樣量，單位為毫升(mL)。(規(guī)范性)于同一批號3個運輸包裝中至少抽取6件最小銷售包裝樣品(若樣品數(shù)量不能滿足試驗所需，則應(yīng)相應(yīng)增加采樣數(shù)量),其中1/3樣品用于抑菌、抗菌或殺菌性能測試，2/3樣品用于留樣；如需做穩(wěn)定E.2.2液體抗菌劑選擇抗菌劑殺菌性能試驗；黏稠狀(半固體)抗菌產(chǎn)品選擇載體浸泡定量殺菌試驗；E.2.3液體抑菌劑選擇抑菌劑抑菌性能試驗；黏稠狀(半固體)抑菌產(chǎn)品選擇載體浸泡定量抑菌試驗；取冷凍條件下保存的菌種(凍干管、甘油管或磁珠),在無菌操作下打開，加入適量營養(yǎng)肉湯，輕柔吹吸數(shù)次，使菌種融化分散。取含5.0mL～10.0mL營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基試管，滴入少許菌種懸液，36℃±1℃培養(yǎng)18h～24h。用接種環(huán)取第1代培養(yǎng)的菌懸液，劃線接種于營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基平皿上，36℃±1℃培養(yǎng)18h～24h。挑取上述第2代培養(yǎng)物中典型菌落，接種于營養(yǎng)瓊脂斜面，36℃±1℃培養(yǎng)18h～24h即為第3代培養(yǎng)物。取菌株第3代～第6代的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基(酵母菌為沙堡弱瓊脂培養(yǎng)基)新鮮斜面培養(yǎng)物(18h～24h),用5.0mL0.03mol/L磷酸鹽緩沖液(簡稱PBS)洗下菌苔，使菌懸浮均勻后用PBS稀釋至所需濃度(浸漬抑菌試驗使用肉湯對培養(yǎng)液進行稀釋)。E.3.2.3中和劑(PBS配制)。E.3.2.4載體：32支紗/cm×32支紗/cm脫脂白平紋布片(長×寬=10mm×10mm)(衛(wèi)生濕巾：E.3.2.1137℃、35℃~40℃、40℃~45℃和54℃恒溫箱。用，需增加白色念珠菌；當(dāng)用其他特定微生物進行殺菌試驗時，應(yīng)以該特定微生物進行中和劑鑒定第2組：(樣片+5.0mL中和劑)十染菌對照片→培養(yǎng)；組間菌落數(shù)誤差率應(yīng)不超過15%;取試驗樣片(大小20mm×30mm,厚度應(yīng)確保菌懸液被完全吸收不滲漏，如被測試樣品厚度無法滿足要求，可增加片數(shù))和對照樣片各1片分別置于無菌平皿內(nèi)，用新鮮制備的選擇適宜稀釋度，吸取1.0mL接種平皿，每管接種2個平皿，將冷至40℃~45℃熔化的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基(細菌)或沙堡弱瓊脂培養(yǎng)基(酵母菌),傾注于已加入樣液的平皿中，每平皿15mL～20mL,轉(zhuǎn)動平皿，使其充分混勻，瓊脂凝固后翻轉(zhuǎn)平皿，36℃±1℃培養(yǎng)48h(細菌)或72h(酵母菌),進行E.4.4計算各次殺菌率均大于或等于90%,產(chǎn)品有殺菌作用。作用，需增加白色念珠菌；當(dāng)用其他特定微生物進行殺菌試驗時，應(yīng)以該特第2組：(0.4mL樣液+4.5mL中和劑)+0.1mL菌懸液→培養(yǎng)；其組間菌落數(shù)誤差率[計算見公式(E.2)]應(yīng)不超過15%;10倍系列稀釋，選擇適宜稀釋度，分別吸取1.0mL接種平皿，每管接種2個平皿，將冷至40℃~45℃熔化的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基(細菌)或沙堡弱瓊脂培養(yǎng)基(酵母菌),傾注于已加入樣液的平皿中，每平皿15mL～20mL,轉(zhuǎn)動平皿，使其充分混勻，瓊脂凝固后翻轉(zhuǎn)平皿，36℃±1℃培養(yǎng)48h(細菌)或72h(酵母菌),進行活菌菌落計數(shù)。試驗同時用稀釋液代替試樣，進行平行試驗，作為陽性對照，回E.5.1.4計算說明書規(guī)定時間的各次殺菌率均大于或等于90%,判有抗菌作用；說明書規(guī)定時間的各次殺菌率均大于或等于99%,判有較強抗菌作用。取試驗菌24h新鮮斜面培養(yǎng)物用PBS洗下，用PBS稀釋至約5.0×10?CFU/mL～5.0×10第2組：(含抗菌劑的載體+5.0mL中和劑)十染菌載體→培養(yǎng)。第4組：稀釋液十中和劑十培養(yǎng)基→培養(yǎng)。第1組：取5.0mL中和劑于無菌平皿中，置20℃±1℃水浴5min,加入1片染菌載體，作用第2組：取5.0mL中和劑于無菌平皿內(nèi)，加入1片沾有抗菌樣品的載體，混勻，置20℃±1℃水浴取出染菌載體移入含5.0mL中和產(chǎn)物試管中，作用10m第3組：取5.0mLPBS于無菌平皿中，置20℃±1℃水浴5min,加入1片染菌載體，作用10min,第4組：分別吸取稀釋液(PBS)與中和劑各1.0mL于同一無菌平皿內(nèi)，倒入同批次的培養(yǎng)基第1組、第2組和第3組有相似量試驗菌生長，且菌量在1.0×10?CFU/片～9.0×10?CFU/片。計算組間菌落數(shù)誤差率[計算見公式(E.2)],其組間菌落數(shù)誤差率應(yīng)不超過15%。待染菌載體與抗菌劑相互作用至各預(yù)定時間(以說明書規(guī)定時間為T,時間分別為0.5T、T、活菌數(shù)，每管樣液接種2個平皿。如平板上生長的菌落數(shù)較多時，可用PBS進行系列10倍稀釋后，再取與試驗樣品同質(zhì)材料不含抗菌成分的對照樣品代替抗菌樣品浸泡2片染所有試驗樣品和對照樣品均在36℃±1℃培養(yǎng)48h(細菌)或72h(酵母菌),進行活菌菌落計第2組：(5.0mL中和劑十抗菌樣片)+染菌對照樣片→培養(yǎng)。第4組：稀釋液十中和劑十培養(yǎng)基→培養(yǎng)。入試管內(nèi)，作用10min,振蕩將試驗菌第4組：分別吸取稀釋液與中和劑各1.0mL于同一無菌平皿內(nèi)，傾注同批次的培養(yǎng)基15mL~取無菌平皿，用無菌鑷子取3片試驗樣片，勿重疊，置20℃±1℃水浴5min,在每一樣片上滴加待試驗菌與樣片相互作用至各預(yù)定時間(以說明書規(guī)定時間為T,時間分別為0.5T、T、1.5T),菌數(shù)，每管樣液接種2個平皿。如平板上生長的菌落數(shù)較多時，可10倍系列稀釋后，再進行活菌培養(yǎng)同時用不含殺菌成分，其他成分相同的對照樣片2片代替試驗樣片，進行平行試驗，作為陽性對所有試驗樣本和對照樣本均在36℃±1℃培養(yǎng)48h(細菌)或72h(酵母菌),進行活菌菌落計各次試驗說明書規(guī)定時間的殺菌率大于或等于90%,判有抗菌作用；各次試驗說明書規(guī)定時間的殺菌率大于或等于99%,判有較強抗菌作用。E.5.4浸漬殺菌試驗適用于抗菌毛巾、抗菌棉襪、抗菌棉布等含有溶出性抗菌材料的抗菌織物對微生物抗菌效果的樣分別裝于3個錐形瓶中，蓋好瓶口備用(需用試樣數(shù)量要根據(jù)纖維類別及織物織法而定，以能吸收分別取1.0mL菌懸液加入2份準(zhǔn)備好的錐形瓶內(nèi)試樣和1份對照織物上，確保其均勻分布，且錐形將另一個裝有已接種菌懸液試樣的錐形瓶于36℃±1℃培養(yǎng)20h±2h,加入100mL中和劑，置渦旋陰性對照組：試樣不接種菌懸液，在“0”接觸時間加入100mL中和劑，置渦旋振蕩器上振蕩陽性對照組：另取1個裝有對照織物的錐形燒瓶，接種1.0mL菌懸液后，在36℃±1℃培養(yǎng)20h±2h,加入100mLPBS,置渦旋振蕩器上振蕩1min洗滌細菌，取1.0mL將陰性和陽性對照樣品與試驗組樣品接種的平皿一并于36℃±1℃培養(yǎng)48h,計數(shù)菌落數(shù)。試驗E.5.4.5.3各次試驗的殺菌率均大于或等于90%,即可認定該樣品具有抗菌作用；各次殺菌率均大于或等于99%,判有較強抗菌作用。注1:在進行振蕩燒瓶試驗前，需要鑒定其抗菌成分是否可溶出，如果有溶出性抗菌材料，參照可溶出抗菌材料檢注2:非溶出性抗菌材料的鑒定：將樣品置于無菌蒸餾水浸泡24h(通過預(yù)試驗，吸取的浸泡液需滿足后續(xù)檢測要E.5.5.2.2在上述錐形燒瓶中加入70mLPBS和5.0mL新鮮制備的菌懸液，使菌懸液在PBS中的濃度E.5.5.2.3將錐形燒瓶固定于振蕩搖床上，在20℃~25℃條件下，以300r/min振搖2min,吸取同等大小但不含抗菌成分，且經(jīng)滅菌處理；不加樣片組分別取5.0mL菌懸液和70mLPBS加入E.5.5.2.7重復(fù)試驗3次。殺菌率計算見公式(E.7):數(shù)差值在10%以內(nèi)，試驗有效。E.5.5.4.3各次試驗中，試驗樣片殺菌率與對照樣片殺菌率的差值大于26%,產(chǎn)品具有抗菌作用。種2個平皿，將冷至40℃~45℃熔化的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基(細菌)或沙堡弱瓊脂培養(yǎng)基(酵母菌),傾注于已加入樣液的平皿中，每平皿15m36℃±1℃培養(yǎng)48h(細菌)或72h(酵母菌),進行活菌菌落計數(shù)。試驗同時用稀釋液代替試樣，進各次試驗抑菌率Y均大于或等于50%到小于90%之間，產(chǎn)品有抑菌作用；各次試驗抑菌率均大于或等于90%,產(chǎn)品有較強抑菌作用。適用于黏稠狀(半固體)抑菌產(chǎn)品(如抑菌洗手液等)對微生物抑菌效果的測定。取試驗菌24h新鮮斜面培養(yǎng)物用PBS洗下，用PBS稀釋至約5.0×10?CFU/mL～5.0×107按5.0g/片的量稱取樣品于無菌平皿內(nèi)，置20℃±1℃水浴5min,用無菌鑷子取染菌載體，使載體5.0mLPBS試管中，混勻，振蕩，將試驗菌洗下，活菌數(shù)，每管樣液接種2個平皿。如平板上生長的菌落數(shù)較多時，可用PBS進行10倍系列稀釋后，再進行活菌培養(yǎng)計數(shù)。取10.0g與試驗樣品同質(zhì)材料不含抑菌成分的對照樣品浸泡2片染菌載體進行平行基作陰性對照。所有試驗樣品和對照樣品接種平皿均在36℃±1℃培養(yǎng)48h(細菌)或72h(酵母菌),進行活菌菌落計數(shù)。重復(fù)試驗3次，計算抑菌率。各次試驗抑菌率Y均大于或等于50%到小于90%之間，判有抑菌作用；各次試驗抑菌率均大于或等于90%,判有較強抑菌作用。取試驗菌24h新鮮斜面培養(yǎng)物用PBS洗下，用PBS稀釋至5.0×10?CFU/mL～5.0×10?CFU/mL,用滅菌剪刀在無菌條件下將試驗樣品和對照樣品分別剪成20mm×30mm樣片備用。試驗時滴加100μL菌懸液。對照樣片染菌前需經(jīng)壓力蒸汽滅菌。取無菌平皿，用無菌鑷子取2片試驗樣片，勿重觸作用至說明書的規(guī)定時間，分別夾取染菌樣片加于5同時用與試驗樣品同質(zhì)材料不含抑菌成分的對照所有試驗樣本和對照樣本均在36℃±1℃培養(yǎng)48h(細菌)或72h(酵母菌),進行活菌菌落計抑菌率計算見公式(E.10):各次試驗抑菌率Y大于或等于50%到小于90%之間，判有抑菌作用；各次試驗抑菌率大于或等于90%,判有較強抑菌作用。E.6.4.2.1液體材料試驗載體：5.0mm直徑圓形濾紙片，經(jīng)壓力蒸汽滅菌處理后，置120℃烤干2h,的圓片(塊),每4片(塊)一組。E.6.4.3.4樣片貼放：每次試驗貼放1個染菌平板，每個平板貼放4片試驗樣片，1片陰性對照樣片，共直徑(包括貼片)并記錄。試驗3次(共12個樣片)。E.6.4.4.2重復(fù)試驗3次(共12個樣片)均有抑菌作用結(jié)果者，判為有抑菌作用。E.6.4.5注意事項適用于溶出性抑菌織物(如抑菌毛巾、內(nèi)衣等)抑菌效果的測定。樣分別裝于3個錐形瓶中，蓋好瓶口備用(需用試樣數(shù)量要根據(jù)纖維類別及織物織法而定，以能吸收2份分別裝于2個錐形瓶中，蓋好瓶口，1移種到含肉湯培養(yǎng)基的錐形瓶中，36℃±1℃培養(yǎng)24h,用肉湯對培養(yǎng)液進行系列稀釋，使菌懸液的含分別取1.0mL菌懸液加入2份準(zhǔn)備好的錐形瓶內(nèi)試樣和1份對照織物上，確保其均勻分布，且錐形的錐形瓶中加入100mLPBS,置渦旋振蕩器上振蕩1min洗滌細菌，分別吸取1.0mL樣液或10倍系列將另一個裝有已接種菌懸液試樣的錐形瓶于36℃±1℃培養(yǎng)20h±2h,加入100mLPBS,置渦旋振陰性對照組，試樣不接種菌懸液，在“0”接觸時間加入100mLPBS,置渦旋振蕩器上振蕩陽性對照組，另取1個裝有對照織物的錐形燒瓶，接種1.0mL菌懸液后，在36℃±1℃培養(yǎng)20h±接種2個平皿。將陰性和陽性對照樣品與試驗組樣品接種的平皿一并于36℃±1℃培養(yǎng)48h,計數(shù)菌落E.6.5.4計算抑菌率抑菌率計算見公式(E.11):E.6.5.5.3各次試驗的抑菌率均大于或等于50%,即可判定該樣品具有抑菌作用。Y——抑菌率；數(shù)差值在10%以內(nèi)，試驗有效。E.6.6.4.3各次試驗中，試驗樣片抑菌率與對照樣片抑菌率的差值大于26%,產(chǎn)品具有抑菌作用。將10cm×30cm大小的食品級尼龍布(250目)用封口機做成10cm×15cm的尼龍布袋，作為測定E.6.7.3吸液量的測定稱量時使用稱量紙，避免高吸水材料灑出),分別放入預(yù)制的尼龍布袋中。分別將個吸液量計算見公式(E.13)和公式(E.14):取測試和對照樣品0.2g±0.002g分別放入玻璃試管中，根據(jù)E.6.量進行換算，分別向測試及對照樣品中輕輕地滴入相應(yīng)的菌懸液(1.0×103CFU/mL～1.0×10?CFU/mL)(接種菌懸液不應(yīng)接觸到玻璃試管壁)。靜置15m蓋上試管蓋(請勿