干細(xì)胞微生物學(xué)檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

GMP質(zhì)量管理文件編號(hào)：SOP/ZK/002PAGE第1頁(yè)共5頁(yè)英平藥業(yè)GMP文件BZ/SMP/WJ/00100第1頁(yè)共5頁(yè)干細(xì)胞微生物學(xué)檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOP）北京賽托森生物科技發(fā)展有限公司質(zhì)量管理干細(xì)胞微生物學(xué)檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程文件名：干細(xì)胞微生物學(xué)檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程文件編號(hào)：制定人：日期：年月日文件類型：工作標(biāo)準(zhǔn)審核人：日期：年月日版次：第一版批準(zhǔn)人：日期：年月日印數(shù)：共5份生效日期：年月日頒發(fā)部門(mén)：質(zhì)量管理分發(fā)至：質(zhì)量副總經(jīng)理、質(zhì)量管理部、QC檢驗(yàn)室、綜合辦公室變更記載修訂號(hào)修訂人批準(zhǔn)日期生效日期原因及目的一、總則1.目的：建立針對(duì)實(shí)驗(yàn)室干細(xì)胞微生物學(xué)標(biāo)準(zhǔn)操作程序，用以規(guī)范員工的檢測(cè)操作。2.范圍：適用于公司內(nèi)部生產(chǎn)干細(xì)胞的微生物學(xué)檢測(cè)工作3.責(zé)任：生產(chǎn)部、生產(chǎn)車(chē)間、質(zhì)量管理部、QC檢驗(yàn)室主任、檢驗(yàn)員對(duì)本規(guī)程的執(zhí)行負(fù)責(zé)。4.檢測(cè)依據(jù)：YY/T0188.6－1995藥品檢驗(yàn)操作規(guī)程，第6部分，微生物測(cè)定法。細(xì)菌檢測(cè)1.所用檢測(cè)試劑耗材及儀器1.1液體培養(yǎng)基：硫乙醇培養(yǎng)基、離心管、一次性巴斯德管1.2瓊脂培養(yǎng)基：胰酪胨大豆瓊脂培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)1.3電熱恒溫恒濕培養(yǎng)箱（溫度可調(diào)25℃-37℃）、超凈工作臺(tái)2.操作方法檢測(cè)過(guò)程全程需在超凈工作臺(tái)內(nèi)完成，注意無(wú)菌操作。培養(yǎng)基具體配制方法詳見(jiàn)SOP/ZK/006液體培養(yǎng)基：①取培養(yǎng)液待恢復(fù)室溫①編號(hào)：將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)，每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照2孔、陽(yáng)性對(duì)照2孔、空白對(duì)照1孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）②加樣：分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照50μl。然后在待測(cè)樣品孔先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻③溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘④配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用⑤洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干⑥加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外⑦溫育：操作同3⑧洗滌：操作同5⑨顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘⑩終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）