選修1 生物技術(shù)實踐模塊課件

選修實驗復(fù)習(xí)備考選修1生物技術(shù)實踐模塊一、考綱解讀實驗要求選修三基因工程（1）能獨立完成所列的生物實驗，包括理解實驗?zāi)康?、原理、方法和操作步驟，掌握相關(guān)的操作技能，并能將這些實驗涉及的方法和技能進行綜合運用。（2）具備驗證簡單生物學(xué)事實的能力，并對實驗現(xiàn)象和結(jié)果進行解釋、分析和處理。（3）具有對一些生物學(xué)問題進行初步探究的能力，包括運用觀察、實驗與調(diào)查、假說演繹、建立模型與系統(tǒng)分析等科學(xué)研究的方法。（4）能對一些簡單的實驗方案做出恰當(dāng)?shù)脑u價和修訂。DNA的粗提取與鑒定選修一微生物的利用（1）微生物的分離和培養(yǎng)（2）某種微生物數(shù)量的測定（3）培養(yǎng)基對微生物的選擇作用（4）利用微生物發(fā)酵來生產(chǎn)特定的產(chǎn)物以及微生物在其他方面的應(yīng)用酶的應(yīng)用（1）酶活力測定的一般原理和方法（2）酶在食品制造和洗滌等方面的應(yīng)用生物技術(shù)在食品加工及其他方面的應(yīng)用（1）植物的組織培養(yǎng)（2）蛋白質(zhì)的提取和分離（3）PCR技術(shù)的基本操作和應(yīng)用選修1生物技術(shù)實踐模塊選修1生物技術(shù)實踐模塊注意選修實驗與必修內(nèi)容的聯(lián)系選修內(nèi)容必修內(nèi)容選修三基因工程DNA的粗提取與鑒定選修一微生物的利用（1）微生物的分離和培養(yǎng)（2）某種微生物數(shù)量的測定（3）培養(yǎng)基對微生物的選擇作用（4）利用微生物發(fā)酵來生產(chǎn)特定的產(chǎn)物以及微生物在其他方面的應(yīng)用種群密度的增長曲線血球計數(shù)板的應(yīng)用酵母菌、醋酸菌等微生物的代謝特點酵母菌的呼吸類型酶的應(yīng)用（1）酶活力測定的一般原理和方法（2）酶在食品制造和洗滌等方面的應(yīng)用酶的本質(zhì)，影響酶活性的因素細胞壁的成分生物技術(shù)在食品加工及其他方面的應(yīng)用（1）植物的組織培養(yǎng)（2）蛋白質(zhì)的提取和分離（3）PCR技術(shù)的基本操作和應(yīng)用細胞分化，細胞全能性蛋白質(zhì)的特點，血紅蛋白的結(jié)構(gòu)等DNA復(fù)制的條件選修1生物技術(shù)實踐模塊一、微生物的實驗室培養(yǎng)（一）培養(yǎng)基

人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配置出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)稱培養(yǎng)基一般的培養(yǎng)基均需要碳源、氮源、無機鹽和水等培養(yǎng)基的基本成分

液體培養(yǎng)基（一般用錐形瓶盛裝）固體培養(yǎng)基（一般用試管或培養(yǎng)皿盛裝），在液體培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上再添加瓊脂。培養(yǎng)基的種類選修1生物技術(shù)實踐模塊2、理解培養(yǎng)基的種類及應(yīng)用（適當(dāng)補充）按物理狀態(tài)不同劃分固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基按化學(xué)組成不同劃分：合成培養(yǎng)基/天然培養(yǎng)基按用途不同劃分鑒別培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基選修1生物技術(shù)實踐模塊加入青霉素的培養(yǎng)基分離酵母菌、霉菌等真菌加入高濃度食鹽的培養(yǎng)基分離金黃色葡萄球菌只有尿素作為惟一氮源的培養(yǎng)基分離出分解尿素的細菌不加氮源的無氮培養(yǎng)基分離固氮菌只有纖維素作為惟一碳源的培養(yǎng)基

分離分解纖維素的細菌加入青霉素等抗生素的培養(yǎng)基

分離導(dǎo)入了目的基因的受體細胞選擇培養(yǎng)基做一些適當(dāng)?shù)难a充選修1生物技術(shù)實踐模塊（二）無菌技術(shù)

無菌操作泛指在培養(yǎng)微生物的操作中，所有防止雜菌污染的方法技術(shù)。

獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵，無菌技術(shù)就是防止雜菌污染的操作技術(shù)。滅菌方法適用對象所需條件滅菌時間灼燒滅菌接種金屬用具、試管口、瓶口在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒直至燒紅干熱滅菌能耐高溫并需要保持干燥的玻璃器皿、金屬用具等干熱滅菌箱內(nèi)，160～170OC中1～2h高壓蒸汽滅菌培養(yǎng)基、實驗器具等100kPa，121OC15～30min選修1生物技術(shù)實踐模塊消毒無菌技術(shù)的種類滅菌使用較為溫和的方法（酒精、紫外線）來殺死部分對人體有害的微生物。

對實驗操作的空間、操作者的衣著和手進行清潔消毒；將培養(yǎng)皿、接種用具進行滅菌；接種的過程要在酒精燈附近進行。使用較為強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外的所有微生物（包括芽孢和孢子）。選修1生物技術(shù)實踐模塊基本過程：稱量→溶化→滅菌→倒平板分離分解尿素的細菌：培養(yǎng)基中加入尿素為唯一氮源分離分解纖維素的微生物：培養(yǎng)基中加入纖維素為唯一碳源選修1生物技術(shù)實踐模塊選修1生物技術(shù)實踐模塊選修1生物技術(shù)實踐模塊倒平板操作的討論1.培養(yǎng)基滅菌后要冷卻到50OC時倒平板。用什么辦法來估計培養(yǎng)基的溫度？用手觸摸錐形瓶，溫度下降到剛剛不燙手時即可開始倒平板。2.為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？

通過灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。3.平板冷凝后，為什么要將平板倒置？

平板冷凝后，皿蓋上會凝結(jié)水珠.將平板倒置，既可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，又可以避免培養(yǎng)基中的水分過快地?fù)]發(fā)。4.在倒平板的過程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎？為什么？

空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生，因此最好不要用這個平板培養(yǎng)微生物。選修1生物技術(shù)實踐模塊（二）純化大腸桿菌

微生物接種方法常見的有平板劃線法和稀釋涂布平板法。1.平板劃線法

通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面（操作如教材18頁圖示）。在數(shù)次劃線后可以分離到由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體稱菌落。優(yōu)點：可以觀察菌落特征，對混合菌進行分離

缺點：不能計數(shù)

一般用于分離微生物的純種選修1生物技術(shù)實踐模塊

1、為什么在操作的第一步以及劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時，仍然需要灼燒接種環(huán)？

操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物；每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時，接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端，從而通過劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到菌落。劃線結(jié)束后仍然要灼燒接種環(huán)，能及時殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細菌污染環(huán)境和感染操作者。平板劃線法的討論選修1生物技術(shù)實踐模塊

2.在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進行劃線？

以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。

3.在作第二次以及其后的劃線操作時，為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線？

劃線后，線條末端細菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個細菌繁殖而來的菌落。選修1生物技術(shù)實踐模塊2.稀釋涂布平板法

將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進行培養(yǎng)。在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將分散成單個細胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落。稀釋涂布平板法操作過程分兩個步驟，即系列稀釋操作和涂布平板操作。優(yōu)點：可以計數(shù)，可以觀察菌落特征。

缺點：吸收量較少，較麻煩，平板不干燥效果不好，容易蔓延。

一般用于平板培養(yǎng)基的回收率計數(shù)選修1生物技術(shù)實踐模塊系列稀釋操作101102103104105106(1)將分別盛有9mL水的試管滅菌并編號。(2)用移液管吸取1mL培養(yǎng)的菌液，注入第二支試管中，輕壓橡皮頭，吹吸三次使之充分混勻。(3)從101倍稀釋的試管中吸取1mL稀釋液，注入第三支試管中，重復(fù)步驟2，直至到第六支試管。選修1生物技術(shù)實踐模塊涂布平板操作(1)將涂布器浸在盛有70％的酒精的燒杯中。(2)取少量菌液（不超0.1mL），滴加到培養(yǎng)基表面。(3)將沾有酒精的涂布器在火焰上引燃，火熄后冷卻8～10s。(4)用涂布器將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面。涂布平板操作討論

涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進行。結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無菌操作要求，想一想，第2步應(yīng)如何進行無菌操作？

應(yīng)從操作的各個細節(jié)保證“無菌”。例如，酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適、吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰周圍；等等。

將接種后和未接種（作為對照組）的培養(yǎng)基均放到370C的恒溫箱中，培養(yǎng)12～24h后進行觀察并記錄結(jié)果。選修1生物技術(shù)實踐模塊

1.未接種的培養(yǎng)基表面是否有菌落生長？如果有菌落生長，說明了什么？

未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫1～2d后無菌落生長，說明培養(yǎng)基的制備是成功的，否則需要重新制備。

2.在接種大腸桿菌的培養(yǎng)基上，能否觀察到獨立的菌落？它們的大小、形狀、顏色相似？

如果接種成功的話，在培養(yǎng)基的表面可觀察到大小、形狀、顏色相似的菌落。

3.培養(yǎng)12h和24h后，觀察到的實驗結(jié)果相同嗎？如果不同，請分析產(chǎn)生差異的原因？

培養(yǎng)12h與24h后的大腸桿菌菌落的大小會有明顯不同。隨著時間的延長、菌落的不斷生長，使菌落不斷增大。

4.如果在培養(yǎng)基上觀察到不同形態(tài)的菌落，請分析其可能的原因。無菌操作未達到要求：可能是培養(yǎng)基滅菌不徹底；可能是接種時發(fā)生了污染；也可能是在培養(yǎng)的過程中受到了污染。三、結(jié)果分析與評價選修1生物技術(shù)實踐模塊四、課題延伸—菌種的保存

1.試管低溫臨時保存

將菌種接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上，培養(yǎng)成菌落后，置于4OC的冰箱中保存（每隔3～6個月要重新接種培養(yǎng)后再保存）。

2.甘油管長期保存

在3mL的甘油瓶中加入1mL的甘油，高壓滅菌。將1mL培養(yǎng)的菌液轉(zhuǎn)移到甘油瓶中，充分混合后，置于－20OC的冷凍箱中保存。選修1生物技術(shù)實踐模塊土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)（一）篩選菌株原理

人為提供有利于目的菌株的條件（包括營養(yǎng)、溫度、pH等），同時抑制或阻止其他微生物生長。在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱做選擇培養(yǎng)基。選修1生物技術(shù)實踐模塊

1.在培養(yǎng)基的配方中，為微生物的生長提供碳源和氮源的分別是是什么物質(zhì)？

碳源是葡萄糖，氮源是尿素。

2.分析該配方的培養(yǎng)基對微生物是否具有篩選作用？如果有，又是如何進行篩選的？能分解尿素的細菌的篩選

閱讀教材22頁第一大段相關(guān)內(nèi)容，并思考回答下列問題：

有篩選作用，它的氮源只含有尿素，只有能合成分解尿素的脲酶的細菌才能生長。選修1生物技術(shù)實踐模塊（二）統(tǒng)計菌落數(shù)目原理

運用稀釋涂布平板法來統(tǒng)計樣品中的活菌數(shù)。統(tǒng)計菌落數(shù)目的理論依據(jù)是：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。因此，恰當(dāng)?shù)南♂尪仁浅晒Φ亟y(tǒng)計菌落數(shù)目的關(guān)鍵。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，通常將幾個稀釋度下的菌液都涂布在平板上，培養(yǎng)后再選擇菌落數(shù)在30～300的平板進行計數(shù)。選修1生物技術(shù)實踐模塊能分解尿素的細菌的鑒定鑒定的原理：細菌合成的脲酶將尿素分解成氨，會使培養(yǎng)基的pH升高。鑒定方法：在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，利用此培養(yǎng)基進行細菌培養(yǎng)，觀察培養(yǎng)基的顏色變化。剛果紅染色法

剛果紅能與纖維素形成紅色復(fù)合物，而不與水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。（二）纖維素分解菌的篩選

用加入剛果紅的纖維素培養(yǎng)基去培養(yǎng)微生物時，如果培養(yǎng)基中出現(xiàn)以菌落為中心的透明圈時，可說明該菌落是纖維素分解菌，因為它已將被剛果紅染成紅色的纖維素分解了。選修1生物技術(shù)實踐模塊（1）微生物培養(yǎng)與選修三的聯(lián)系特點：結(jié)合種群密度變化曲線考查微生物培養(yǎng)注意：關(guān)注影響微生物繁殖的條件，復(fù)習(xí)“S”型、“J”型曲線選修1生物技術(shù)實踐模塊特點：結(jié)合微生物計數(shù)考查必修三的血球計數(shù)板的使用注意：血球計數(shù)板，掌握基本用法（08廣東，8）取少量酵母菌液放入血球計數(shù)板直接計數(shù)，測得的數(shù)目是

A、活細胞數(shù)

B、死細胞數(shù)

C、菌落數(shù)

D、細胞總數(shù)選修1生物技術(shù)實踐模塊（一）果酒制作的原理知識要點1.酵母菌的兼性厭氧生活方式2.發(fā)酵需要的適宜條件3.傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)所使用的酵母菌的來源酵母菌的代謝類型

酵母菌是種兼性厭氧型微生物，在有氧時進行有氧呼吸，快速繁殖。C6H12O6+6O26CO2+6H2O酶

無氧條件下，酵母菌進行酒精發(fā)酵。C6H12O62C2H5OH+2CO2

酵母菌在20OC、缺氧、呈酸性的條件下能大量繁殖（絕大多數(shù)其他微生物在該環(huán)境條件下則會受到抑制）酵母菌發(fā)酵的條件酶

傳統(tǒng)的發(fā)酵方法、酵母菌的來源閱讀教材第3頁

考點2傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用選修1生物技術(shù)實踐模塊（二）果醋制作的原理酒變醋的原理

在醋酸菌的作用下，酒首先被氧化成乙醛，進而被氧化成乙酸。CH3COOH＋H2OC2H5OH+O2

醋酸菌是種好氧細菌，對氧氣的含量特別的敏感。醋酸菌的最適生長溫度為30～35OC。醋酸菌的代謝類型及生活條件酶

應(yīng)該先沖洗，然后再除去枝梗，以避免除去枝梗時引起葡萄破損，增加被雜菌污染的機會。你認(rèn)為應(yīng)該先沖洗葡萄還是先除去枝梗？你認(rèn)為應(yīng)該從哪些方面防止發(fā)酵液被污染？

需要從發(fā)酵制作的過程進行全面的考慮。例如，榨汁機、發(fā)酵裝置要清洗干凈；每次排氣時只需擰松瓶蓋、不要完全揭開瓶蓋等。選修1生物技術(shù)實踐模塊

制葡萄酒和葡萄醋時，為什么要將溫度分別控制在18~25℃和30～35℃？

20℃左右最適合酵母菌繁殖，因此需要將溫度控制在其最適溫度范圍內(nèi)。而醋酸菌是嗜溫菌，最適生長溫度為30～35℃，因此要將溫度控制在30～35℃。

制葡萄醋時，為什么要適時通過充氣口充氣？

醋酸菌是好氧菌，在將酒精變?yōu)榇姿釙r需要氧的參與，因此要適時向發(fā)酵液中充氣。三、課題延伸用重鉻酸鉀檢測酒精的產(chǎn)生

原理：在酸性條件下，重鉻酸鉀與酒精反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色。

操作：試管發(fā)酵液（2mL）3滴H2SO4（3mol/L）3滴重鉻酸鉀（飽和溶液）振蕩振蕩觀察選修1生物技術(shù)實踐模塊腐乳的制作腐乳制作的原理閱讀教材第6頁，回答下列問題：1.豆腐長白毛是怎么一回事？

豆腐上生長的白毛是毛霉的白色菌絲。嚴(yán)格地說是直立菌絲，此外在豆腐中還有匍匐菌絲。2.材料中的王致和為什么要用鹽將長毛的豆腐腌起來？

鹽能防止雜菌污染，避免豆腐腐敗。

腐乳的制作過程中有多種微生物參與了發(fā)酵（如青霉、曲霉、毛霉、酵母等），其中起主要作用的是毛霉。利用毛霉分泌的蛋白酶等酶類將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成多肽和氨基酸，將脂肪分解成甘油和脂肪酸。選修1生物技術(shù)實踐模塊1.鹽的用量：（三）不同條件對腐乳風(fēng)味和質(zhì)量的影響

鹽可抑制其他雜菌的生長，但鹽過多，太咸，也會影響腐乳的品質(zhì)。2.酒的用量：

酒的含量應(yīng)控制在12％左右，酒的含量過高會使腐乳成熟的時間延長，含量過少不足以抑制微生物生長，可能導(dǎo)致豆腐腐敗。3.發(fā)酵的溫度：

溫度應(yīng)控制在20OC左右，溫度過高，其他微生物生長，可能導(dǎo)致豆腐腐敗，過低，腐乳成熟時間延長。4.發(fā)酵的時間：

時間過長過短都會影響腐乳的品質(zhì)。選修1生物技術(shù)實踐模塊制作泡菜并檢測亞硝酸鹽含量（一）乳酸菌發(fā)酵

乳酸菌（種類很多，常見有乳酸鏈球菌和乳酸桿菌）是種厭氧細菌，在無氧的條件下，將葡萄糖分解成乳酸。

亞硝酸鹽分布廣泛，在食品加工業(yè)中常用作食品添加劑。（二）亞硝酸鹽

膳食中少量的亞硝酸鹽一般不會危害人體健康，但攝入總量達到0.3～0.5g時會引起中毒；當(dāng)攝入總量達到3g時會引起死亡。

通常情況下，人體內(nèi)的亞硝酸鹽將隨尿液排除出體外。在特定的條件下（適宜的pH、溫度和一定的微生物作用）將轉(zhuǎn)變?yōu)閬喯醢罚瑥亩哂兄掳?、致畸變和致突變作用。選修1生物技術(shù)實踐模塊

見教材第10頁“泡菜壇的選擇”

二、具體操作（一）泡菜壇的選擇問題：不合格的泡菜壇為什么會引起蔬菜的腐爛？泡菜壇漏氣，使需氧型微生物大量繁殖，引起蔬菜腐爛。

見教材第11頁“腌制的條件”

（二）腌制的條件問題：為什么溫度過高、食鹽用量不足、腌制時間過短，容易造成細菌大量繁殖？

溫度過高、食鹽用量不足，有利于其他細菌繁殖；腌制一定的時間以后，乳酸菌產(chǎn)生了大量的乳酸，從而抑制了其他微生物的生長，若腌制時間不夠，乳酸含量不高，則不能抑制其他微生物的繁殖。選修1生物技術(shù)實踐模塊（2）微生物發(fā)酵與必修一的聯(lián)系特點：結(jié)合微生物發(fā)酵考查必修一的細胞呼吸注意：微生物的類型（如原核、真核細胞），呼吸類型等(2010廣東理綜，2）（雙選）小李嘗試制作果酒，他將葡萄汁放入已滅菌的發(fā)酵裝置中進行試驗（見圖10），恰當(dāng)?shù)淖龇ㄊ牵ǎ〢．加入適量的酵母菌

B．一直打開閥b通氣C．一直關(guān)緊閥a，偶爾打開閥b幾秒鐘D．把發(fā)酵裝置放到4℃冰箱中進行試驗選修1生物技術(shù)實踐模塊（一）植物組織培養(yǎng)的基本過程植物的組織培養(yǎng)技術(shù)

考點3植物組織培養(yǎng)與酶的研究選修1生物技術(shù)實踐模塊（二）影響植物組織培養(yǎng)的因素不同的植物組織、同一植物的不同材料營養(yǎng)、環(huán)境條件、植物激素使用順序?qū)嶒灲Y(jié)果先使用生長素，后使用細胞分裂素有利于細胞分裂，但細胞不分化先使用細胞分裂素，后使用生長素細胞既分裂也分化同時使用分化頻率提高制備MS固體培養(yǎng)基

1、配制母液

2、配制培養(yǎng)基

3、滅菌（外植體消毒→接種→培養(yǎng)→移栽→栽培實驗操作選修1生物技術(shù)實踐模塊

（一）影響花藥培養(yǎng)的因素1、材料的選擇不同植物同一植物的不同生理狀況（花期早期－初花期）合適的花粉發(fā)育期（單核居中期與靠邊期之間）此外，植株生長條件、材料低溫預(yù)處理、接種密度等2、培養(yǎng)基的組成月季的花藥培養(yǎng)（二）產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑有哪兩種途徑？原因是什么？花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑選修1生物技術(shù)實踐模塊（4）植物組織培養(yǎng)與必修一、三的聯(lián)系特點：結(jié)合植物組織培養(yǎng)過程考查必修一的細胞全能性，必修三的植物激素等內(nèi)容注意：復(fù)習(xí)細胞全能性的概念、細胞分化的概念，細胞分化的本質(zhì)，分化與細胞全能性的比較，植物激素的作用等選修1生物技術(shù)實踐模塊一、菊花組織的培養(yǎng)1、原理：植物細胞的全能性2、步驟：（1）制備MS固體培養(yǎng)基（滅菌）無機鹽、維生素、蔗糖、激素（2）外植體消毒（未開花新生側(cè)枝）（3）接種、培養(yǎng)、移栽脫分化--愈傷組織--再分化--從芽--誘導(dǎo)生根

PH5.8、溫度18-22、每日光照12h專題3植物的組織培養(yǎng)技術(shù)選修1生物技術(shù)實踐模塊二、月季花藥培養(yǎng)1、花藥選?。撼趸ㄆ?、未開放花蕾、單核期2、培養(yǎng)過程：

花粉（脫分化）→愈傷組織

↓（脫分化）

↓（再分化）

胚狀體（分化）→叢芽→→誘導(dǎo)生根3、花粉發(fā)育檢查：（1）醋酸洋紅法（細胞核紅色）（2）焙花青-鉻礬法（細胞核藍黑色）選修1生物技術(shù)實踐模塊接種和培養(yǎng)植物體選取水稻花藥對花蕾消毒實例：就水稻花藥培養(yǎng)的步驟，請回答下列問題：

1.選取的水稻花藥應(yīng)為①期，此時細胞核由中央移向細胞一側(cè)，花藥培養(yǎng)成功率最高．

2.通過花藥培養(yǎng)產(chǎn)生單倍體植株一般有兩種途徑：一種是花粉通過②階段發(fā)育為植株，另一種是在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上先形成③再將其誘導(dǎo)分化成植株．

3.試管苗形成過程中，必須從培養(yǎng)基中獲得無機鹽或礦質(zhì)元素和小分子有機物質(zhì)等營養(yǎng)物質(zhì)．要促進花粉細胞分裂和生長，培養(yǎng)基中應(yīng)有④和⑤兩類激素①單核②胚狀體③愈傷組織④細胞分裂素⑤生長素選修1生物技術(shù)實踐模塊專題6：生物材料中成分的提取選修1生物技術(shù)實踐模塊1、水蒸氣蒸餾法：水蒸氣+芳香油→混合物→油層和水層3、壓榨法：浸泡、漂洗、壓榨、過濾、靜置2、萃取法：芳香油+有機溶劑→溶液→芳香油（去溶劑）玫瑰精油：玫瑰花+清水→乳濁液

NaCl：促進乳化液分層；無水Na2SO4：除水橘皮精油：石灰水浸泡、NaHCO3、Na2SO4促進油水分離胡蘿卜素：橙黃色、易溶石油醚水浴加熱→萃取液→蒸發(fā)溶劑→胡蘿卜素提取方法：選修1生物技術(shù)實踐模塊例：幾個有關(guān)萃取的問題：（1）萃取劑可分為和兩種。

(2)萃取的效率主要取決于。后受等條件的影響。

(3)萃取過程中，第一步需，以提高萃取效率。因為，所以應(yīng)避免明火加熱，而采用水浴加熱的方法。通過加熱處理，β-胡蘿卜素溶解在萃取液中；再經(jīng)得到萃取液；經(jīng)過后，可得到純凈的β-胡蘿卜素。萃取劑的性質(zhì)和使用量原料顆粒的大小、緊密程度、含水量、萃取的溫度和時間將胡蘿卜進行粉碎和干燥有機溶劑都是易燃物過濾蒸餾濃縮水溶性水不溶性選修1生物技術(shù)實踐模塊選修1生物技術(shù)實踐模塊細胞壁的結(jié)構(gòu)及作用：1、作用是什么？2、特點？3、結(jié)構(gòu)組成？保護植物細胞；支撐植物細胞。彈性??；全透性。纖維素、果膠。果膠酶在果汁生產(chǎn)中的作用

植物細胞壁以及胞間層的主要組成成分之一，它是由半乳糖醛酸聚合而成的一種高分子化合物，不溶于水。果膠

在果汁加工中，果膠不僅會影響出汁率，還會使果汁渾濁。果膠酶能夠分解果膠，瓦解植物細胞的細胞壁及胞間層，使榨取果汁更容易，而果膠分解成可溶性的半乳糖醛酸，也使得渾濁的果汁變得澄清。果膠酶選修1生物技術(shù)實踐模塊

指酶催化一定化學(xué)反應(yīng)的能力。酶反應(yīng)速度用單位時間內(nèi)單位體積中反應(yīng)物的減少量或生成物的增加量來表示。(1)酶的活性2、酶的活性與影響酶活性的因素３.果膠酶的用量(2)影響酶活性的因素a.溫度b.pHc.酶的抑制劑選修1生物技術(shù)實踐模塊1、定義：（二）加酶洗衣粉含有酶制劑的洗衣粉。2、成分：

除含有普通洗衣粉的成分外，還含有多種酶制劑：蛋白酶，脂肪酶，淀粉酶，纖維素酶，復(fù)合酶。①蛋白酶應(yīng)用：有助于取出例如汗?jié)n，血漬，青草，粘液，糞便以及各種食品類的蛋白質(zhì)污垢。②脂肪酶應(yīng)用：可以催化水解各類動植物油脂和人體皮脂腺分泌物及化妝品污垢。③淀粉酶應(yīng)用：可以去除例如來自面條、巧克力、肉汁和嬰兒食品中含有淀粉的污垢。選修1生物技術(shù)實踐模塊④纖維素酶應(yīng)用：去除棉紡織品表面的浮毛，使洗滌后的棉紡織品柔軟蓬松，織紋清晰，色澤更加鮮艷，穿著更加舒適。⑤復(fù)合酶

實際污垢組成復(fù)雜，往往蛋白污垢被脂肪污垢或淀粉污垢覆蓋，單一酶的作用一般達不到徹底清除污垢的作用。而復(fù)合酶可以發(fā)揮其獨特的“協(xié)同效應(yīng)”。

試驗測定，單獨使用蛋白酶或淀粉酶，得到的洗滌效果遠不如把每種酶用量減半后放在一起使用的效果。即給定酶的用量，復(fù)合酶的效果遠遠超過單一酶的效果。原因是淀粉酶分解了污漬表面的淀粉污垢，使蛋白酶能以更有效的方式向蛋白質(zhì)污垢進攻。選修1生物技術(shù)實踐模塊類型優(yōu)點不足直接使用酶催化效率高；低能耗；低污染等。易失活；難回收，成本高；酶混合在產(chǎn)物中可能影響產(chǎn)品質(zhì)量。固定化酶既能與反應(yīng)物接觸，又能與反應(yīng)物分離；可重復(fù)利用一種酶只能催化一種或一類反應(yīng)，而生產(chǎn)中很多產(chǎn)物需一系列酶促反應(yīng)才能得到。固定化細胞成本低；操作更容易大分子物質(zhì)難以自由通過細胞膜使應(yīng)用受到某些限制。酵母細胞的固定化選修1生物技術(shù)實踐模塊3、固定化酶和固定化細胞技術(shù)有哪些？各有什么優(yōu)缺點？固定化細胞常用的載體有哪些？

有包埋法、化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法。固定化酶分子小更適合采用化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法，用包埋法卻容易從包埋材料中漏出。固定化細胞因細胞大不易被吸附或結(jié)合適宜采用包埋法。常用載體：明膠、瓊脂糖、海藻酸鈉、醋酸纖維素和聚丙烯酰胺等。4、固定化酶和固定化細胞的原理是什么？

就是將酶固定在不溶于水的載體上，或者將微生物細胞均勻地包埋于不溶于水的多孔性載體上，使酶既能與反應(yīng)物接觸，又能與產(chǎn)物分