DB54T-黑斑原鮡人工繁殖技術(shù)規(guī)范

ICS?FORMTEXT點擊此處添加ICS號FORMTEXT點擊此處添加中國標(biāo)準(zhǔn)文獻(xiàn)分類號FORMTEXT?????DBFORMTEXT??DBFORMTEXTXX/FORMTEXTXXXXX—FORMTEXTXXXXFORMTEXT?????FORMTEXT黑斑原鮡人工繁殖技術(shù)規(guī)范FORMTEXT?????FORMTEXT?????FORMDROPDOWNFORMTEXT?????FORMTEXTXXXX-FORMTEXTXX-FORMTEXTXX發(fā)布FORMTEXTXXXX-FORMTEXTXX-FORMTEXTXX實施FORMTEXT西藏自治區(qū)市場監(jiān)督管理局???發(fā)布DBXX/XXXXX—XXXX7492前??言 II155131范圍 15882規(guī)范性引用文件 1223493術(shù)語 1292974繁殖季節(jié) 1279665繁育環(huán)境條件 120716親魚選擇 115367人工催產(chǎn) 241838受精卵孵化 322224附錄A（資料性附錄）受精卵孵化裝置結(jié)構(gòu)圖 4前??言本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利，本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別這些專利的責(zé)任。本文件由西藏自治區(qū)農(nóng)業(yè)農(nóng)村標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會提出并歸口。本文件起草單位：西藏自治區(qū)農(nóng)牧科學(xué)院水產(chǎn)科學(xué)研究所。本文件主要起草人：王萬良、周建設(shè)、王壯壯、曾本和、王且魯、張馳、潘瑛子、陳美群、扎西拉姆、佟廣香。本標(biāo)準(zhǔn)為首次制定。黑斑原鮡人工繁殖技術(shù)規(guī)范范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了黑斑原鮡（Glyptosternummaculatum）人工繁殖的季節(jié)、繁殖環(huán)境條件、親魚選擇、人工催產(chǎn)、受精卵孵化的技術(shù)要求。本標(biāo)準(zhǔn)適用于黑斑原鮡的人工繁殖。規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB11607-1989漁業(yè)水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)NY5071無公害食品漁用藥物使用標(biāo)準(zhǔn)術(shù)語下列術(shù)語和定義適用于本規(guī)范。種魚：是指形態(tài)特征符合分類學(xué)上黑斑原鮡的有關(guān)規(guī)定，具有繁殖能力的雌魚和雄魚親本。人工繁殖：是指在人為控制條件下，通過生態(tài)、生理的方法促使親魚的性產(chǎn)物達(dá)到成熟、排放和產(chǎn)出，進(jìn)而使受精卵在適宜的條件下發(fā)育成為苗種的過程。繁殖季節(jié)5月～6月上旬。繁育環(huán)境條件5.1繁殖水溫8℃～15℃。5.2繁殖用水水質(zhì)應(yīng)符合GB11607的規(guī)定。親魚選擇6.1親魚來源親魚來自野生捕撈的，或者人工馴養(yǎng)的，符合繁殖要求的群體。6.2親魚的捕撈與運(yùn)輸親魚用圍網(wǎng)捕撈后，用活魚運(yùn)輸設(shè)備充氧運(yùn)輸?shù)椒敝郴亍Ｒ话氵\(yùn)輸密度不高于20kg/m3，運(yùn)輸時間控制在≤10h。6.3親魚暫養(yǎng)6.3.1暫養(yǎng)條件暫養(yǎng)池水溫8℃～15℃，暫養(yǎng)密度不高于10kg/m3，暫養(yǎng)期間應(yīng)保持良好水質(zhì)，流量1.0~1.2m3/h，溶解氧保證在6mg/L以上。6.3.2親魚檢查在暫養(yǎng)期間，每天檢查親魚性成熟情況，并依據(jù)雌、雄魚性成熟程度適時分池飼養(yǎng)。6.4親魚選擇6.4.1親魚質(zhì)量體質(zhì)健壯、無病無傷、無畸形，體色深，斑紋明顯，各鰭完整，雌雄魚性腺發(fā)育至4期末為宜。6.4.2親魚體重雌魚100g以上；雄魚200g以上。6.4.3雌親魚選擇6.4.3.1外觀選擇：性成熟的雌魚后腹部膨大、柔軟，有明顯的卵巢輪廓；泄殖孔粗大、發(fā)紅；輕壓后腹部靠近泄殖孔處，有卵粒流出。6.4.3.2取卵檢查：輕壓雌魚后腹部取出少許卵粒，觀察卵粒外觀，若呈晶瑩的金黃色，且顏色均勻，規(guī)格整齊，形狀飽滿，則卵粒成熟度較好。6.4.4雄親魚選擇游動有力，體型勻稱，大小適中，手摸身體背側(cè)有粗糙感，泄殖孔呈明顯的尖細(xì)形狀。人工催產(chǎn)7.1催產(chǎn)催產(chǎn)前，將雌、雄魚分開飼養(yǎng)在孵化車間的流水池中備用。催產(chǎn)第1d，雌魚注射促黃體素釋放激素（A2（LRH-A2）），注射劑量為A2（LRH-A2）10μg/kg體重，24h后檢查催產(chǎn)效應(yīng)；若尚未成熟則注射同樣劑量促黃體素釋放激素（A2（LRH-A2））第二針；此時，多數(shù)親魚均會產(chǎn)生效應(yīng)。注射部位為魚胸鰭基部的柔軟凹陷處，注射時針頭與魚體保持45°，深度≤0.5cm。雄魚不注射催產(chǎn)激素。7.2采卵采卵前，對所用工具進(jìn)行消毒，漁藥使用應(yīng)符合NY5071的規(guī)定。先用MS-222將雌魚麻醉，濃度為15~20mg/L，再用毛巾擦干魚體及生殖孔；擠卵時一只手抓住魚體頭部，使頭部斜向上方，尾部斜搭在白瓷碗邊上，另一只手捏住魚體腹部由前向后推擠，使卵粒流入白瓷碗。若出現(xiàn)卵粒顏色渾濁、帶血絲、混雜破裂卵膜或卵巢膜、卵不游離呈團(tuán)狀、卵粒流出不順暢等情況時，應(yīng)停止采卵。每尾親魚采卵時間≤1min。7.3采精黑斑原鮡雄魚的精巢呈樹枝狀，通常采取解剖剪取精巢的方式。采精前，先用MS-222麻醉雄魚，再用剪刀破壞鰓部結(jié)構(gòu)放干血液，用毛巾擦凈魚體水分和血漬后，剖開魚體腹腔取精。檢測精子活力：剪取少量精巢組織，放到載玻片上，稍剪碎后滴加一滴生理鹽水，蓋上蓋玻片，鏡檢若見≥60%精子迅速游動則精子活力正常，可進(jìn)行下一步人工授精。取精：剪取部分精巢組織放入干凈的研缽中，用杵迅速研碎，然后用生理鹽水沖洗，經(jīng)4層醫(yī)用紗布濾入擠好的黑斑原鮡卵粒中，研缽和紗布上殘余的精液可用生理鹽水反復(fù)沖洗2～3次，提高利用率。7.4授精混合生理鹽水的精液加入卵中后，用柔軟的羽毛迅速攪勻，然后加入相當(dāng)于卵粒體積2～3倍的清水，再次攪勻后靜置3～5min。7.5清水沖洗授精完成后，用清水反復(fù)漂洗受精卵，洗去受精卵中多余的精液及雜物，至碗中水清澈無雜質(zhì)為止。7.6計數(shù)7.6.1抽樣稱重法：用天平稱取3g受精卵，數(shù)出全部卵粒數(shù)，然后計算出1g受精卵的卵粒數(shù)。重復(fù)取樣3次，取平均值；將所有受精卵用電子天平稱量總重，受精卵總克數(shù)乘以1g受精卵的粒數(shù)，即為受精卵總數(shù)量。改法工作量較小。7.6.2直接計數(shù)法：均勻布卵（見8.3.1）后，拍攝清晰的受精卵全景照片，然后在照片上逐一描點計數(shù)，既可在電腦上用圖片處理工具進(jìn)行，也可打印成紙質(zhì)版進(jìn)行。改法計數(shù)準(zhǔn)確，但工作量大。受精卵孵化8.1孵化裝置使用特制孵化框在平列槽中進(jìn)行微流水孵化。參見附錄1。其中孵化框為四根木條釘成的方框，底部繃紗網(wǎng)，紗網(wǎng)網(wǎng)眼為3mm，該規(guī)格既可兜住受精卵，又可使初孵仔魚鉆出。隔離紗網(wǎng)結(jié)構(gòu)與孵化框類似，所用紗網(wǎng)網(wǎng)眼應(yīng)≤2mm，以防止魚苗鉆出。8.2孵化條件8.2.1工具消毒高錳酸鉀濃度1ppm~2ppm，浸泡時間≥1h。8.2.2水質(zhì)應(yīng)符合GB11607的規(guī)定。8.2.3水溫孵化水溫8℃～15℃，以11℃～14℃為宜。8.2.4溶解氧溶解氧≥6mg/L。8.2.5水流量水流量0.3~0.5m3/h。8.2.6光照孵化車間應(yīng)無陽光直射，孵化裝置平時用遮光材料遮擋。8.2.7孵化時間在平均水溫14℃的情況下，黑斑原鮡從魚卵受精到開始破膜約需要8d左右，即孵化積溫（孵化積溫=天數(shù)×日平均水溫）112度·日左右。8.3孵化8.3.1布卵黑斑原鮡受精卵為有微粘性的沉性卵。要將清洗完畢的受精卵盡量緩慢而均勻地倒入浮于平列槽水面的孵化框，然后用柔軟的羽毛等撥動受精卵使其單層平鋪，不能堆疊。8.3.2孵化管理孵化過程中應(yīng)每天檢查受精卵死亡情況，受精卵孵化3d后，每天用吸管吸出死卵并記錄，同