甘肅天水甘谷一中2025屆高三第五次模擬考試生物試卷含解析

甘肅天水甘谷一中2025屆高三第五次模擬考試生物試卷注意事項1．考生要認真填寫考場號和座位序號。2．試題所有答案必須填涂或書寫在答題卡上，在試卷上作答無效。第一部分必須用2B鉛筆作答；第二部分必須用黑色字跡的簽字筆作答。3．考試結(jié)束后，考生須將試卷和答題卡放在桌面上，待監(jiān)考員收回。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．研究人員將某實驗動物的第5號染色體上的一段DNA敲除，結(jié)果發(fā)現(xiàn)培育出的實驗動物甘油三酯極高，具有動脈硬化的傾向，并可以遺傳給后代。下列有關(guān)敘述錯誤的是()A．敲除的DNA片段具有遺傳效應(yīng)B．動脈硬化的產(chǎn)生與生物變異有關(guān)C．控制甘油三酯合成的基因就位于第5號染色體上D．利用DNA片段的敲除技術(shù)可以研究相關(guān)基因功能2．下列關(guān)于細胞中的元素和化合物的敘述，錯誤的是（）A．磷脂除了含有C、H、O外，還含有P和NB．P是組成細胞膜、細胞核及葉綠素的重要成分C．人體內(nèi)Na+缺乏會引起神經(jīng)、肌肉細胞的興奮性降低D．幾丁質(zhì)是一種多糖，可推測其只含C、H、O三種元素3．PEP是某油料作物細胞中的一種中間代謝產(chǎn)物，在兩對獨立遺傳的基因（A和a、B和b）的控制下，可轉(zhuǎn)化為油脂或蛋白質(zhì)。某科研小組通過RNA干擾的方式獲得了產(chǎn)油率更高的品種，基本原理如下圖所示。下列說法錯誤的是（）A．產(chǎn)油率高植株和產(chǎn)蛋白高植株的基因型分別為AAbb、aaBBB．圖示中過程①與過程②所需要的嘧啶堿基數(shù)量不一定相同C．該研究通過抑制基因B表達過程中的翻譯階段來提高產(chǎn)油率D．圖示表明基因是通過控制酶的合成來控制代謝，進而控制性狀4．某興趣小組為探究不同濃度的生長素類似物對植物插條生根的影響，進行了相關(guān)實驗，結(jié)果見圖。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）A．本實驗中，因變量是生根數(shù)和根長度B．圖中實驗結(jié)果體現(xiàn)了生長素類似物對植物插條生根的作用具有兩重性C．濃度X、Y、Z之間的大小關(guān)系可能為Y＜X＜ZD．將濃度Z溶液稀釋后，重復(fù)上述實驗，其作用效果不可能好于Y5．基因沉默是指生物體中特定基因由于種種原因不表達。某研究小組發(fā)現(xiàn)染色體上抑癌基因鄰近的基因能指導(dǎo)合成反義RNA，反義RNA可以與抑癌基因轉(zhuǎn)錄形成的mRNA形成雜交分子，從而阻斷抑癌基因的表達，使細胞易于癌變，據(jù)圖分析，下列敘述不正確的是（）A．鄰近基因指導(dǎo)合成的反義RNA是通過轉(zhuǎn)錄過程B．與完成過程Ⅱ直接有關(guān)的RNA有三種，即mRNA、rRNA、tRNAC．細胞中若出現(xiàn)了雜交分子，則抑癌基因沉默，此時過程Ⅱ被抑制D．與鄰近基因和抑癌基因相比，組成圖中雜交分子的堿基有A、G、C、T、U五種6．下圖表示某動物一個精原細胞分裂時染色體配對時的一種情況，A~D為染色體上的基因，下列分析錯誤的是A．該變異發(fā)生在同源染色體之間故屬于基因重組B．該細胞減數(shù)分裂能產(chǎn)生3種基因型的精細胞C．C1D2和D1C2轉(zhuǎn)錄翻譯產(chǎn)物可能發(fā)生改變D．C1D2和D1C2可能成為C、D的等位基因二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）圖甲是某生態(tài)農(nóng)業(yè)的結(jié)構(gòu)模式圖，圖乙表示某自然生態(tài)系統(tǒng)能量流經(jīng)第一營養(yǎng)級圖的示意圖，其中a~g表示能量值。據(jù)圖回答下列問題：（1）圖中____和_____（填圖中的名稱）在碳循環(huán)中起關(guān)鍵作用。圖示的農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)的優(yōu)點是__________________________________________________（寫出兩點）。（2）若圖乙中A表示某食物網(wǎng)中第二營養(yǎng)級所攝入的全部能量，第二營養(yǎng)級與第三營養(yǎng)級之間的能量傳遞效率為________________能量逐級遞減，原因是________________________。8．（10分）下圖是菠菜幼苗葉肉細胞內(nèi)部分生理過程示意圖。請回答下列問題：（1）圖中階段A中，葡萄糖氧化分解釋放的能量的去向是__________。（2）物質(zhì)①中的氧來自__________，生成物質(zhì)②需要的[H]來自__________（填場所）。（3）正在生長的菠菜幼苗，生成物質(zhì)②需要的O2來自__________（答出2點）。9．（10分）基因工程為培育抗病毒植物開辟了新途徑，下圖為研究人員培育轉(zhuǎn)花葉病毒外殼蛋白基因（CMV-CP基因，長度為740個堿基對）番茄的主要過程示意圖(Kanr為卡那霉素抗性基因)。請回答：（1）將CMV-CP基因?qū)敕鸭毎螅嘤姆阎仓昃哂锌笴MV感染能力，這種現(xiàn)象屬于植物的特異性免疫，該免疫過程中抗原是____。（2）過程①接種的農(nóng)桿菌細胞中，Kanr及CMV-CP基因應(yīng)整合在Ti質(zhì)粒的T-DNA內(nèi)部，這是由于__。使用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)農(nóng)桿菌的目的是____。（3）為確定用于篩選的Kan適宜濃度，研究人員進行實驗，結(jié)果如右表。最終確定過程③④加入的Kan濃度為35mg·L-1，該濃度既可___，又不至于因Kan濃度過高影響導(dǎo)入重組DNA細胞的生長發(fā)育。Kan濃度/mg．L-1接種外植體數(shù)形成愈傷組織數(shù)外植體狀況05549正常形成愈傷組織25662只膨大、不易形成愈傷組織35660變褐色死亡50640變褐色死亡（4）過程③、④所需的培養(yǎng)基為__（填“固體”或“液體”）培養(yǎng)基。過程⑤再生植株抗性鑒定時，引物序列設(shè)計的主要依據(jù)是_____，引物序列長度及G+C比例直接影響著PCR過程中_______（填“變性”或“退火”或“延伸”）的溫度。（5）過程⑤電泳結(jié)果如圖，其中l(wèi)號為標準參照，2號為重組Ti質(zhì)粒的PCR產(chǎn)物，3-6號為抗性植株DNA的PCR產(chǎn)物，可以確定3—6號再生植株中____號植株基因組中整合了CMV-CP基因。10．（10分）稻瘟病是水稻最重要的病害之一，為達到防治目的，科研人員通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育出了抗稻瘟病水稻品種?；卮鹣铝袉栴}：（1）通過RT-PCR技術(shù)以抗稻瘟病基因的RNA為模板擴增出cDNA。在PCR過程中，兩個引物是_____酶的結(jié)合位點；用cDNA單鏈與該抗性水稻植株的單鏈DNA進行分子雜交，可能出現(xiàn)游離的單鏈區(qū)，其原因是_____。（2）利用RT-PCR技術(shù)擴增基因時，設(shè)計兩種引物的堿基序列的主要依據(jù)是_____，為了便于擴增后的X基因與質(zhì)粒連接，常在兩條引物上設(shè)計加入不同的限制酶酶切位點，主要目的是_____。（3）基因工程中，將重組質(zhì)粒導(dǎo)入植物細胞采用最多的方法是_____，導(dǎo)入動物受精卵采用的方法是_____。（4）若要檢測抗稻瘟病基因是否翻譯出相應(yīng)蛋白質(zhì)，可采用的分子水平的檢測方法是_____。11．（15分）下圖是研究人員為凈化水質(zhì)在湖邊建立的人工濕地，回答下列問題。（1）某人將未經(jīng)檢疫的外來魚類和水草大量引進該湖泊生態(tài)系統(tǒng)后，導(dǎo)致生物多樣性下降。從種間關(guān)系的角度分析，引起這種不良后果的原因是本地原有物種和外來物種之間可能存在著_____________、_____________、_____________的關(guān)系。一般來說，生態(tài)系統(tǒng)的物種組成越豐富，營養(yǎng)結(jié)構(gòu)越復(fù)雜，抵抗力穩(wěn)定性就越_____________。為了提高生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性，對于利用強度大的生態(tài)系統(tǒng)應(yīng)_____________，以保證生態(tài)系統(tǒng)內(nèi)部結(jié)構(gòu)和功能的協(xié)調(diào)。（2）該人工濕地呈現(xiàn)斑塊狀鑲嵌，體現(xiàn)了群落的_____________結(jié)構(gòu)。（3）如圖對湖水的凈化過程體現(xiàn)了人類的活動能夠使群落的演替按照_____________進行。（4）人工濕地能進化水質(zhì)，調(diào)節(jié)氣候，這體現(xiàn)了生物多樣性的_____________價值，但要控制污染湖水的流入量，原因是__________________________。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、C【解析】本題考查基因“敲除”，要求考生能根據(jù)所學(xué)知識解讀題給信息，判斷出敲除的DNA片段具有遺傳效應(yīng)，與甘油三酯代謝有關(guān)。根據(jù)題意，將某實驗動物的第5號染色體上的一段DNA敲除，結(jié)果發(fā)現(xiàn)培育出的實驗動物需要甘油三酯極高，具有動脈硬化的傾向，并可以遺傳給后代，說明該變異是一種可遺傳的變異，敲除的DNA片段具有遺傳效應(yīng)，AB正確；上述信息只能表明敲除的DNA片段與甘油三酯代謝有關(guān)，不能表明控制甘油三酯合成的基因就位于第5號染色體上，C錯誤；由題干信息可知，利用DNA片段的敲除技術(shù)可以研究相關(guān)基因功能，D正確。2、B【解析】

1、糖類的元素組成是C、H、O，蛋白質(zhì)的元素組成是C、H、O、N等，不同類的脂質(zhì)的元素組成不同，脂肪和固醇的元素組成是C、H、O，磷脂的元素組成是C、H、O、N、P，核酸的元素組成是C、H、O、N、P。

2、無機鹽的功能有：a、細胞中某些復(fù)雜化合物的重要組成成分；如Fe2+是血紅蛋白的主要成分；Mg2+是葉綠素的必要成分。b、維持細胞的生命活動，如Ca可調(diào)節(jié)肌肉收縮和血液凝固，血鈣過高會造成肌無力，血鈣過低會引起抽搐。c、維持細胞的酸堿度。【詳解】A、磷脂由膽堿、磷酸、甘油、脂肪酸組成，除了含有C、H、O外，還含有P和N，A正確；

B、細胞膜、核膜等生物膜的基本支架是磷脂，細胞核除核膜外還有染色體等成分，染色體主要由DNA進而蛋白質(zhì)構(gòu)成，P是組成細胞膜、細胞核的重要成分，Mg2+是葉綠素的必要成分，葉綠素是色素，組成元素還有C、H、O、N，不含磷，B錯誤；C、動作電位的形成與Na+內(nèi)流有關(guān)，人體內(nèi)Na+缺乏會引起神經(jīng)、肌肉細胞的興奮性降低，C正確；

D、糖的組成元素只有C、H、O，幾丁質(zhì)屬于多糖，廣泛存在于甲殼動物和昆蟲外骨骼中，可推測其只含C、H、O三種元素，D正確。

故選B。3、A【解析】

分析題意和題圖：基因A控制合成酶a，使PEP轉(zhuǎn)化為油脂?；駼的鏈2正常表達出酶b，可使PEP轉(zhuǎn)化為蛋白質(zhì)。以基因B的鏈1誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄出的RNA可與鏈2正常轉(zhuǎn)錄出的mRNA形成雙鏈RNA，干擾酶b的合成，抑制PEP轉(zhuǎn)化為蛋白質(zhì)，從而提高油脂產(chǎn)量。【詳解】A、根據(jù)題圖可知，產(chǎn)油高植株的基因型為Abb，產(chǎn)蛋白高植株的基因型為aaB，A錯誤；B、由于過程①和過程②的模板鏈不同，所需的嘧啶堿基數(shù)量不一定相同，B正確；C、根據(jù)分析題圖可知，通過抑制基因B表達過程中的翻譯階段可提高產(chǎn)油率，C正確；D、圖示表明基因是通過控制酶的合成來控制代謝，進而控制性狀，D正確。故選A?！军c睛】解答本題需明確幾點：1.基因與性狀的關(guān)系：基因通過控制蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)來控制性狀；通過控制酶的合成控制代謝過程，從而影響生物性狀。2.分析題圖：油菜產(chǎn)油率高的原因是因為基因B中1鏈轉(zhuǎn)錄形成的RNA能與2鏈轉(zhuǎn)錄形成的mRNA結(jié)合形成雙鏈RNA，從而抑制了合成酶b的翻譯過程。4、D【解析】

分析圖解可知，隨著生長素類似物的逐漸升高，平均生根數(shù)逐漸增多，平均根長度也逐漸增多，濃度Y時生根數(shù)和生根長度最多最長，然后生根數(shù)和長度又逐漸下降?！驹斀狻繐?jù)圖分析可知，該實驗的自變量是生長素類似物的濃度，因變量為生根數(shù)和生根長度，A正確；圖示隨著生長素類似物的逐漸升高，平均生根數(shù)逐漸增多，平均根長度也逐漸增多，濃度Z時，生長素類似物對生根數(shù)與生根長度低于對照組，即具有抑制作用，體現(xiàn)了生長素類似物對植物插條生根的作用具有兩重性，B正確；由于生長素類似物具有與生長素相類似的生理作用，故濃度X、Y、Z之間的大小關(guān)系不一定為X＜Y＜Z，也可能為Y＜X＜Z，C正確；濃度為Z的生長素類似物濃度最高，稀釋后，重復(fù)上述實驗，其作用效果可能好于Y，D錯誤。故選：D?！军c睛】考生要能夠通過曲線分析確定實驗的自變量，并且無關(guān)變量包括：側(cè)芽的數(shù)目、溶液處理的時間等，無關(guān)變量會影響實驗的結(jié)果，因此應(yīng)保持相同且適宜。5、D【解析】

根據(jù)題意可知，反義RNA可以與抑癌基因轉(zhuǎn)錄形成的mRNA形成雜交分子，而mRNA是翻譯的模板，因此該反義RNA能夠阻斷抑癌基因的翻譯過程，從而導(dǎo)致細胞發(fā)生癌變?！驹斀狻緼、分析題圖，由鄰近基因指導(dǎo)合成反義RNA的過程是轉(zhuǎn)錄過程，A正確；

B、圖中過程Ⅱ為翻譯過程，有關(guān)的RNA有mRNA（模板）、rRNA（核糖體的組成成分）、tRNA（搬運氨基酸的工具），共三種，B正確；

C、細胞中若出現(xiàn)了雜交分子，mRNA不能翻譯，即抑癌基因不能表達，過程Ⅱ被抑制，C正確；D、從圖中可以看出反義RNA可以與mRNA雜交形成雜交分子，故堿基有A、G、C、U四種，D錯誤。

故選D?！军c睛】本題考查了轉(zhuǎn)錄和翻譯的相關(guān)知識，意在考查考生的識記能力和理解能力，難度適中．考生要能夠轉(zhuǎn)錄、翻譯發(fā)生的場所，明確DNA分子與RNA分子中堿基的區(qū)別，并能夠同時識圖明確治療的機理。6、A【解析】

A、同源染色體中非姐妹染色單體之間的對應(yīng)片段（含等位基因的片段）發(fā)生交叉互換會產(chǎn)生基因重組，分析圖中交換的片段所含的基因不是對應(yīng)的等位基因，而是非等位基因所在的片段，所以不是基因重組，A錯誤；B、該細胞減數(shù)分裂能產(chǎn)生3種基因的細胞，分別是ABCD、ABC1D2、ABC2D1，B正確。C、由于C、D基因的部分片段交換，所以產(chǎn)生的新的C1D2和D1C2基因在轉(zhuǎn)錄和翻譯后，其產(chǎn)物可能發(fā)生改變，C正確；D、根據(jù)圖示分析，C1D2與C在染色體上的位置相同，而D1C2與D在染色體上位置相同，所以它們可能成為染色體上的新等位基因，D正確。故選A。二、綜合題：本大題共4小題7、農(nóng)作物沼氣池中的微生物實現(xiàn)物質(zhì)和能量的多級利用，減少環(huán)境污染，提高農(nóng)產(chǎn)品的產(chǎn)量g/b（或者F/B）能量有一部分被呼吸作用消耗，一部分被分解者分解利用，一部分暫時未被利用【解析】

1.生態(tài)工程建設(shè)目的：遵循自然界物質(zhì)循環(huán)的規(guī)律，充分發(fā)揮資源的生產(chǎn)潛力，防止環(huán)境污染，達到經(jīng)濟效益和生態(tài)效益的同步發(fā)展（少消耗、多效益、可持續(xù)），該生態(tài)系統(tǒng)主要是通過實行“循環(huán)經(jīng)濟”原則，使一個系統(tǒng)產(chǎn)生出的污染物，能夠成為本系統(tǒng)或者另一個系統(tǒng)的生產(chǎn)原料，從而實現(xiàn)廢棄物的資源化，而實現(xiàn)循環(huán)經(jīng)濟最重要的手段之一是生態(tài)工程。2.圖乙中，a表示該營養(yǎng)級的攝入能，b表示該營養(yǎng)級的同化能，c表示該營養(yǎng)級的糞便能，d表示該營養(yǎng)級呼吸作用消耗的能量，e表示用于生長、發(fā)育和繁殖的能量，f表示該營養(yǎng)級流向分解者的能量，g表示流入下一營養(yǎng)級的能量?！驹斀狻浚?）圖中農(nóng)作物屬于生產(chǎn)者，能進行光合作用固定二氧化碳，沼氣池中的微生物屬于分解者，能將動植物體內(nèi)的有機物分解成無機物還回到無機環(huán)境，兩者在碳循環(huán)中起關(guān)鍵作用。圖示的農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)能實現(xiàn)物質(zhì)和能量的多級利用，減少環(huán)境污染，提高農(nóng)產(chǎn)品的產(chǎn)量。（2）若圖乙中A表示某食物網(wǎng)中第二營養(yǎng)級所攝入的全部能量，各營養(yǎng)級之間的能量傳遞效率為同化量的比值，b(B)表示該營養(yǎng)級的同化量，g（F）表示流入下一營養(yǎng)級的能量，故第二營養(yǎng)級與第三營養(yǎng)級之間的能量傳遞效率為g/b（或者F/B）；由于各營養(yǎng)級的能量有一部分被呼吸作用消耗，一部分被分解者分解利用，一部分暫時未被利用，所有能量流動具有逐級遞減的特點?！军c睛】本題結(jié)合圖示主要考查生態(tài)系統(tǒng)的能量流動的相關(guān)知識，解題關(guān)鍵是強化學(xué)生對生態(tài)系統(tǒng)中的能量流動的分析、理解和運用。8、轉(zhuǎn)移到ATP中、以熱能的形式釋放丙酮酸和水細胞質(zhì)基質(zhì)和線粒體基質(zhì)葉綠體、外界環(huán)境（或光合作用，從外界吸收）【解析】

有氧呼吸的過程：①C6H12O62丙酮酸+4[H]+能量（細胞質(zhì)基質(zhì)）；②2丙酮酸+6H2O6CO2+20[H]+能量（線粒體基質(zhì)）；③24[H]+6O212H2O+能量（線粒體內(nèi)膜）。【詳解】（1）階段A表示細胞呼吸的第一階段，葡萄糖氧化分解為丙酮酸，同時釋放少量能量，這些能量一部分以熱能的形式散失，一部分合成ATP暫時儲存。（2）物質(zhì)①是二氧化碳，丙酮酸和水反應(yīng)生成二氧化碳和大量還原氫，并釋放能量，因此二氧化碳中的氧來自丙酮酸和水。物質(zhì)②是水，有氧呼吸的第三階段為第一階段和第二階段產(chǎn)生的還原氫與氧氣反應(yīng)生成水和釋放大量能量，因此生成物質(zhì)②需要的[H]來自細胞質(zhì)基質(zhì)和線粒體基質(zhì)。（3）有氧呼吸的第三階段在線粒體內(nèi)膜進行，需要氧氣，氧氣的來源途徑有葉綠體光反應(yīng)提供和通過氣孔外界環(huán)境中吸收?！军c睛】解答本題的關(guān)鍵是掌握細胞呼吸的詳細過程及其物質(zhì)變化，能夠根據(jù)圖形分析并判斷各個數(shù)字代表的過程和物質(zhì)的名稱。9、CMV-CP（花葉病毒外殼蛋白）Ti質(zhì)粒中僅T-DNA片段可以進入植物細胞并整合到植物細胞染色體DNA中使農(nóng)桿菌大量繁殖，重組Ti質(zhì)粒擴增殺死沒有導(dǎo)入重組DNA的普通番茄細胞固體基因兩端的部分核苷酸序列退火3【解析】

將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法（原理：農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細胞，并且整合到受體細胞染色體的DNA上；根據(jù)農(nóng)桿菌的這一特點，如果將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上，通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，就可以把目的基因整合到植物細胞中染色體的DNA上?！驹斀狻浚?）據(jù)題干信息可知“將CMV-CP基因?qū)敕鸭毎螅嘤姆阎仓昃哂锌笴MV感染能力”，故可推知該過程中抗原是CMV-CP（花葉病毒外殼蛋白）。（2）由以上分析可知：因Ti質(zhì)粒中僅T-DNA片段可以進入植物細胞并整合到植物細胞染色體DNA中，故Kanr及CMV-CP基因應(yīng)整合在Ti質(zhì)粒的T-DNA內(nèi)部；為使農(nóng)桿菌大量繁殖，重組Ti質(zhì)粒擴增，需要使用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)農(nóng)桿菌，液體培養(yǎng)基可使菌體與營養(yǎng)物質(zhì)充分接觸。（3）據(jù)題干信息可知：Kanr為卡那霉素抗性基因，故若番茄細胞中成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒，則能在Kan培養(yǎng)基上存活，若未成功導(dǎo)入，則將被殺死，據(jù)表格數(shù)據(jù)可知，在Kan濃度為35mg·L-1時，既可將未導(dǎo)入重組DNA的普通番茄細胞全部被殺死（愈傷組織為0，外植體變褐色死亡），又不至于因Kan濃度過高影響導(dǎo)入重組DNA細胞的生長發(fā)育，故該濃度為適宜濃度。（4）過程③、④為植物組織培養(yǎng)中的過程，植物組織培養(yǎng)過程所需的培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基；過程⑤再生植株抗性鑒定時，引物應(yīng)根據(jù)基因兩端的部分核苷酸序列設(shè)計；G+C比例越高，引物越容易與模板鏈結(jié)合，其比例直接影響著PCR過程中退火的溫度。（5）據(jù)題干信息知，2號為重組Ti質(zhì)粒的PCR產(chǎn)物，則基因組中整合了CMV-CP基因的植株電泳應(yīng)與2號結(jié)果相似，對應(yīng)3號植株?！军c睛】本題考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的操作步驟，尤其明確PCR技術(shù)擴增的原理、掌握Ti質(zhì)粒的功能，并能對標記基因的作用進行知識的遷移運用。10、熱穩(wěn)定DNA聚合DNA分子含有內(nèi)含子非編碼區(qū)等序列，mRNA分子中沒有相應(yīng)互補的堿基序列X基因兩端的部分脫氧核苷酸序列使X基因能定向插入表達載體，減少自連農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法顯微注射法抗原-抗體雜交【解析】

1、有關(guān)PCR技術(shù)的相關(guān)知識：（1）概念：PCR全稱為聚合酶鏈式反應(yīng)，是一項在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。（2）原理：DNA復(fù)制。（3）前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物。（4）過程：①高溫變性：DNA解旋過程；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。PCR擴增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動解開。2、基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚?）在PCR過程中，兩個引物是熱穩(wěn)定DNA聚合酶的結(jié)合位點；用cDNA單鏈與該抗性水稻植株的單鏈DNA進行分子雜交，由于DNA分子含有內(nèi)含子、非編碼區(qū)等序列，mRNA分子中沒有相應(yīng)互補的堿基序列，因此逆轉(zhuǎn)錄形成的cDNA中缺少該序列，所以出現(xiàn)游離的單鏈區(qū)。（2）用PCR技術(shù)擴增X基因時，設(shè)計兩種引物的堿基序列的主要依據(jù)是X基因兩端的部分脫氧核苷酸序列，為了便于擴增后的X基因與質(zhì)粒連接，常在兩條引物上設(shè)計加入不同的限制酶酶切位點，主要目的是使X基因能定向插入表達載體，減少酶切產(chǎn)物自身環(huán)化。（3）將目的基因?qū)胫参锛毎捎米?/p>