SARS診斷試劑生產(chǎn)研制技術(shù)要求

SARS診斷試劑生產(chǎn)研制技術(shù)要求由于對引發(fā)嚴(yán)重急性呼吸道綜合癥（簡稱SARS）的病原－新型冠狀病毒的研究尚有待進(jìn)一步深入，診斷試劑的研究仍存在很多不確定因素。為規(guī)范SARS診斷試劑的研究，特制訂本技術(shù)要求。一、基本要求

（一）從事SARS體外生物診斷試劑研發(fā)的機(jī)構(gòu)應(yīng)當(dāng)具有與試驗(yàn)研究項(xiàng)目相適應(yīng)的人員、場地及設(shè)施等條件。

（二）SARS病毒的分離、管理、使用及其保藏、運(yùn)輸、處理等必須按照國家有關(guān)規(guī)定執(zhí)行。

（三）臨床研究必須符合GCP的原則及相關(guān)的技術(shù)要求。二、原材料

（一）抗體檢測試劑

1．抗原：由于對新型冠狀病毒的基礎(chǔ)研究尚有待深入，為此所用抗原應(yīng)盡可能選擇檢測譜廣的抗原，如純化的全病毒抗原。

2．抗原來源明確，質(zhì)量指標(biāo)必須達(dá)到診斷試劑研制用的

要求。

3．病毒株須經(jīng)鑒定并確證。

4．其他輔助材料必須符合相關(guān)的技術(shù)要求。

5．包被用全病毒抗原或陽性質(zhì)控血清須進(jìn)行滅活驗(yàn)證研究。

6．陽性質(zhì)控血清須進(jìn)行中和試驗(yàn)驗(yàn)證研究。（二）核酸檢測試劑

1．引物的設(shè)計須符合核酸檢測設(shè)計的要求。

2．靶序列需進(jìn)行與其他病毒同源性的分析對比研究。

3．檢測試劑須設(shè)定合理的內(nèi)標(biāo)和外標(biāo)。

4．試劑須設(shè)置抗污染的特定措施。

5．?dāng)U增產(chǎn)物須進(jìn)行確證研究。（三）抗原檢測試劑

1．可采用單克隆或者多克隆抗體的雙抗體檢測法。

2．抗體須經(jīng)特異性交叉反應(yīng)測定。三、工藝與生產(chǎn)

（一）工藝過程須進(jìn)行優(yōu)化試驗(yàn)研究。

（二）生產(chǎn)人員須經(jīng)專業(yè)知識培訓(xùn)，了解有關(guān)SARS的基本知識。

（三）生產(chǎn)車間須符合《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》的要求。四、質(zhì)量控制

（一）應(yīng)制定嚴(yán)格的原材料質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求，保證批與批間的一致性。

（二）應(yīng)研究制定企業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及參考品，用于對試劑的質(zhì)量控制。

（三）試劑盒須進(jìn)行成品性能的評價。五、臨床研究

（一）研究用樣品必須有明確、詳細(xì)的臨床資料，包括病程等；樣品中須有一定數(shù)量的陽轉(zhuǎn)系列標(biāo)本。

（二）須經(jīng)過至少兩家臨床研究單位進(jìn)行臨床考核，出具臨床考核報告并加蓋臨床考核單位有效公章。

（三）研究用試劑須經(jīng)中國藥品生物制品檢定所檢定合格后方可用于臨床研究。

（四）檢測時應(yīng)采用雙盲或者單盲，陰性樣品和陽性樣品須在符合相關(guān)規(guī)定的檢測實(shí)驗(yàn)室的實(shí)際評價條件下同時進(jìn)行測定。

（五）核酸檢測試劑標(biāo)本如血清或者唾液等，陽性數(shù)量分別不少于200份，同一類型陰性樣品不少于400份。

（六）對酶聯(lián)免疫診斷試劑，不同類型的陽性、陰性樣品均不少于400份。

（七）其他方法的SARS診斷試劑，不同類型的陽性、陰性樣品的數(shù)量均不得少于300份。

（八）檢測數(shù)據(jù)的統(tǒng)計學(xué)分析，以病程10天劃分，不同病程的病例（樣本）數(shù)應(yīng)具有統(tǒng)計學(xué)意義。六、其他

（一）SARS診斷試劑的生產(chǎn)研制必須符合《中華人民共和國傳染病防治法》的相關(guān)要求。

（二）產(chǎn)品使用說明書需明確標(biāo)注試劑檢測的局限性。

（三）本技術(shù)要求將根據(jù)對SARS研究的進(jìn)展情況適時進(jìn)行修訂。

附件4：

SARS病毒毒株資料登記表一、病毒株名稱：

二、宿主情況：

-病人姓名

-病人年齡

-病人性別

-病人民族

-病人家庭住址

-發(fā)病地點(diǎn)

-發(fā)病日期

-收住入院日期

-臨床確診日期

-實(shí)驗(yàn)室確診日期

-病人病程

-病人轉(zhuǎn)歸死亡痊愈是否有后遺癥

-病人密切接觸者病人數(shù)

-毒株分離原樣本：

咽試子漱口液痰液血液糞便尸解標(biāo)本的組織名稱

-取樣日期

-取樣時病人的病期

-取樣地點(diǎn)

-病人是否留有恢復(fù)期血清

如有：采血日期

血清量ml支

三、毒株分離過程

分離用細(xì)胞

細(xì)胞名稱

細(xì)胞代次

細(xì)胞來源

培養(yǎng)基名稱

分離用動物

動物名稱

動物品系

動物年齡

飼養(yǎng)條件

病毒分離傳代

樣品處理方法

首次盲傳確證病毒陽性代次

病毒確證檢定方法

每代培養(yǎng)天數(shù)

細(xì)胞是否產(chǎn)生病變

病變模式（如有請?zhí)峁┱掌?/p>

病毒滴度

滴定方法

四、毒種建立和保存

毒種存儲條件-20℃-40℃-60℃-80℃

原始毒種代次

分裝毒種用容器名稱

分裝毒種用容器材料

分裝毒種用容器體積

毒種病毒滴度

毒種添加的保護(hù)劑

人白蛋白%

牛血清%

其他保護(hù)劑

原始毒種批數(shù)量ml支

該株毒種的其他代次

數(shù)量ml支

如已凍干

寫明凍干條件

五、毒種的檢定

毒種的鑒別實(shí)驗(yàn)

檢定方法

檢定日期

檢定結(jié)果

毒種的無菌試驗(yàn)

檢定方法

檢定日期

檢定結(jié)果

毒種的序列測定

測定方案

測定方法

測定日期

實(shí)驗(yàn)室名稱

測定結(jié)果附：核酸序列圖