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湖南省湖湘教育三新探索協(xié)作體2025屆高三第三次模擬考試生物試卷注意事項(xiàng):1.答題前,考生先將自己的姓名、準(zhǔn)考證號(hào)填寫清楚,將條形碼準(zhǔn)確粘貼在考生信息條形碼粘貼區(qū)。2.選擇題必須使用2B鉛筆填涂;非選擇題必須使用0.5毫米黑色字跡的簽字筆書寫,字體工整、筆跡清楚。3.請(qǐng)按照題號(hào)順序在各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答,超出答題區(qū)域書寫的答案無(wú)效;在草稿紙、試題卷上答題無(wú)效。4.保持卡面清潔,不要折疊,不要弄破、弄皺,不準(zhǔn)使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求)1.下圖是葉肉細(xì)胞光合作用和細(xì)胞呼吸過程中CO2和[H]的變化,相關(guān)敘述正確的是A.過程⑦發(fā)生在線粒體中B.過程④發(fā)生在線粒體的內(nèi)膜C.過程⑤、⑥均需要ATP提供能量D.過程①、③產(chǎn)生的[H]的作用相同2.下列有關(guān)酶的敘述正確的是()A.酶構(gòu)成細(xì)胞成分,對(duì)細(xì)胞代謝起調(diào)節(jié)作用B.酶的合成一定需要模板C.人體細(xì)胞內(nèi)某些酶可以從食物中獲得D.由于細(xì)胞分化,不同細(xì)胞內(nèi)的酶都不同3.下列敘述與事實(shí)不相符的是A.基因的表達(dá)產(chǎn)物中,有一些需要進(jìn)一步加工和修飾后才能發(fā)揮作用B.轉(zhuǎn)錄過程形成的三種RNA均不存在雙鏈結(jié)構(gòu)C.核糖體在翻譯時(shí)與mRNA的結(jié)合部位形成兩個(gè)tRNA結(jié)合位點(diǎn),每次沿mRNA移動(dòng)時(shí)新讀取一個(gè)密碼子D.某些RNA病毒內(nèi)存在RNA復(fù)制酶,可在宿主細(xì)胞內(nèi)完成自身RNA的復(fù)制4.用含32P的培養(yǎng)基培養(yǎng)醋酸桿菌一段時(shí)間,能在醋酸桿菌中檢測(cè)出放射性的化合物是()A.油脂 B.腺苷 C.核苷酸 D.丙酮酸5.下列與植物激素有關(guān)的敘述,正確的是()A.植物的生長(zhǎng)素由谷氨酸經(jīng)一系列反應(yīng)轉(zhuǎn)變而來B.赤霉菌產(chǎn)生的赤霉素會(huì)使水稻得惡苗病,體現(xiàn)了植物激素有促進(jìn)細(xì)胞伸長(zhǎng)的作用C.單側(cè)光刺激不會(huì)影響植物體內(nèi)生長(zhǎng)素的極性運(yùn)輸D.脫落酸和赤霉素在促進(jìn)植物莖的生長(zhǎng)上表現(xiàn)為協(xié)同作用6.在細(xì)菌培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí),應(yīng)計(jì)數(shù)的是()A.各個(gè)稀釋度樣品的培養(yǎng)基上的細(xì)菌數(shù)B.合理稀釋度樣品的培養(yǎng)基上的細(xì)菌數(shù)C.各個(gè)稀釋度樣品的培養(yǎng)基上的菌落數(shù)D.合理稀釋度樣品的培養(yǎng)基上的菌落數(shù)二、綜合題:本大題共4小題7.(9分)某種病毒是一種具包膜的正鏈RNA(+RNA)病毒,人體在感染病毒后可引發(fā)“細(xì)胞因子風(fēng)暴”(機(jī)體感染病原體后,體液中多種細(xì)胞因子迅速大量產(chǎn)生的現(xiàn)象),進(jìn)而傷害正常的宿主細(xì)胞,從而造成免疫攻擊行為。正鏈RNA(+RNA)能與核糖體結(jié)合,具有mRNA功能。日前,科研工作者研發(fā)的有效藥物作用機(jī)理主要是阻止病毒侵染宿主細(xì)胞的過程;也有人提出用病毒基因片段來研制“RNA疫苗”。請(qǐng)據(jù)此回答:(1)“細(xì)胞因子風(fēng)暴”引發(fā)的免疫功能異常稱為________________________。(2)RNA病毒容易發(fā)生變異,主要原因是______________________________。(3)根據(jù)題意,該病毒在宿主細(xì)胞內(nèi)的遺傳信息傳遞過程可概括為:________________________(用文字和箭頭表示)。(4)科研工作者研發(fā)出的有效藥物主要是阻止病毒侵染宿主細(xì)胞過程,根據(jù)侵染過程的不同階段進(jìn)行藥物的研發(fā),更加具有針對(duì)性,其治療機(jī)理可能是:________________________。(5)“RNA疫苗”在人體內(nèi)表達(dá)出的蛋白質(zhì)是____________(填“抗體”或“抗原”),請(qǐng)簡(jiǎn)要說明理由:_____________________________。8.(10分)2019年底爆發(fā)的新型冠狀病毒肺炎(COVID-19)是由SARS-CoV-2病毒引起的,能否快速、準(zhǔn)確地檢測(cè)出病原體成為疾病防控的關(guān)鍵。請(qǐng)回答:(1)下圖表示SARS-CoV-2病毒檢測(cè)的部分流程。科學(xué)家以病毒的RNA為模板通過①____________過程合成cDNA,再對(duì)cDNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增,這項(xiàng)技術(shù)稱為RT-PCR。(2)進(jìn)行RT-PCR需要加入的酶是____________和___________。要從cDNA中擴(kuò)增出新冠病毒特有的基因序列ORF1ab和核殼蛋白基因N關(guān)鍵在于要加入__________、dNTP及所需的酶一起構(gòu)成反應(yīng)體系。(3)RT-PCR加入Taqman熒光探針可以通過測(cè)定熒光強(qiáng)度來檢測(cè)產(chǎn)物濃度,原理如下:Taqman熒光探針為一段與_____________互補(bǔ)的核苷酸單鏈,兩端分別連接一個(gè)熒光基團(tuán)R和一個(gè)淬滅基團(tuán)Q。探針結(jié)構(gòu)完整時(shí),R發(fā)射的熒光被Q吸收;而PCR擴(kuò)增時(shí)結(jié)合在模板鏈上的探針被切斷,使R和Q分離,R基團(tuán)發(fā)射的熒光不被淬滅,這樣通過對(duì)熒光信號(hào)強(qiáng)弱的監(jiān)測(cè)就可實(shí)現(xiàn)對(duì)產(chǎn)物的檢測(cè)。熒光信號(hào)達(dá)到設(shè)定的閾值時(shí),經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)越少,說明含有病毒的概率越____________。(4)一次核酸檢測(cè)歷時(shí)需16小時(shí),為快速檢測(cè)可采用抗原-抗體雜交技術(shù),這一技術(shù)的關(guān)鍵是要生產(chǎn)出能與新冠病毒結(jié)合的特異性抗體.請(qǐng)寫出生產(chǎn)這種抗體的思路:__________________。9.(10分)人參是一種名貴藥材,具有良好的滋補(bǔ)作用??诜?干擾素在慢性乙肝、丙肝及部分腫瘤的治療中有一定療效。下圖為科研人員制備能合成干擾素的人參愈傷組織細(xì)胞的流程,①~④表示相關(guān)的操作,EcoRⅠ、BamHⅠ為限制酶,它們的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)如表所示。請(qǐng)回答下列問題:(1)步驟①中,利用PCR技術(shù)擴(kuò)增干擾素基因時(shí),設(shè)計(jì)引物序列的主要依據(jù)是____________??蒲腥藛T還在兩種引物的一端分別加上了________和________序列,以便于后續(xù)的剪切和連接。
(2)過程②所構(gòu)建的基因表達(dá)載體中未標(biāo)注出的必需元件還有_______,過程③中需先用____處理根瘤農(nóng)桿菌以便將基因表達(dá)載體導(dǎo)入細(xì)胞。
(3)過程④中,科研人員提取愈傷組織細(xì)胞的RNA后,先通過____過程獲得DNA,再進(jìn)行PCR擴(kuò)增,若最終未能檢測(cè)出干擾素基因,其可能原因是________________________。
(4)科研人員認(rèn)為,將轉(zhuǎn)干擾素基因的人參愈傷組織加工成的藥物比單純干擾素的療效要好,其依據(jù)是__。10.(10分)心肌細(xì)胞不能增殖,基因ARC在心肌細(xì)胞中特異性表達(dá),抑制其凋亡,以維持正常數(shù)量。細(xì)胞中某些基因轉(zhuǎn)錄形成的前體RNA經(jīng)過加工過程中會(huì)產(chǎn)生許多非編碼RNA,如miR﹣223(鏈狀),HRCR(環(huán)狀)。請(qǐng)結(jié)合下圖分析回答有關(guān)問題:(1)啟動(dòng)過程①時(shí),__________酶需識(shí)別并與基因上的啟動(dòng)子結(jié)合。過程②中核糖體移動(dòng)方向是__________,該過程最終合成的T1、T2、T3三條多肽鏈的氨基酸順序__________(填“相同”或“不同”)。(2)前體RNA“加工”時(shí)將核糖和磷酸之間的__________斷開,產(chǎn)生非編碼RNA。當(dāng)心肌缺血、缺氧時(shí),基因miR﹣223過度表達(dá),所產(chǎn)生的miR﹣223可與ARC的mRNA特定序列通過_________原則結(jié)合形成核酸雜交分子1,使過程②被抑制,ARC無(wú)法合成,最終導(dǎo)致心力衰竭。(3)HRCR可以吸附miR﹣223等鏈狀的miRNA,以達(dá)到清除它們的目的,使__________基因的表達(dá)增加,抑制心肌細(xì)胞的凋亡,HRCR有望成為減緩心力衰竭的新藥物。鏈狀的miRNA越短越容易與HRCR結(jié)合,這是因?yàn)開_________。(4)根據(jù)所學(xué)的知識(shí)及題中信息,判斷下列關(guān)于RNA功能的說法,正確的是__________。(填寫字母序號(hào))。a.有的RNA可作為遺傳物質(zhì)b.有的RNA是構(gòu)成某些細(xì)胞器的成分c.有的RNA具有催化功能d.有的RNA可調(diào)控基因表達(dá)e.有的RNA可運(yùn)輸氨基酸f.有的RNA可作為翻譯的直接模板11.(15分)某興趣小組進(jìn)行酵母菌無(wú)氧呼吸的探究實(shí)驗(yàn),裝置如圖1;圖2為酵母菌細(xì)胞內(nèi)可發(fā)生的呼吸過程示意圖,其中字符Ⅰ~Ⅵ表示化學(xué)物質(zhì),序號(hào)①~④代表反應(yīng)過程,請(qǐng)回答:(1)在設(shè)置圖1裝置前需先將葡萄糖溶液煮沸,其目的是_______,試管中加水的作用是_______,滴管中冒出氣泡,這是因?yàn)榻湍妇鸁o(wú)氧呼吸產(chǎn)生了_______。此時(shí)酵母菌細(xì)胞中所進(jìn)行的反應(yīng)可用圖2中的_______過程表示。(2)為了探究酵母菌無(wú)氧呼吸的場(chǎng)所,另取酵母菌培養(yǎng)液進(jìn)行離心處理,把酵母菌破碎后,再次離心酵理母菌,獲得只含有酵母菌細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)的上清液和只含有細(xì)胞器的沉淀物兩部分。將兩部分分別與煮沸冷卻后的葡萄糖溶液混合,組裝成如圖1的裝置A和B,裝置A有氣泡產(chǎn)生,培養(yǎng)液中能檢測(cè)到酒精,裝置B無(wú)上述現(xiàn)象。由此得出的結(jié)論是_______。(3)圖2中的_______過程發(fā)生在線粒體中,生成物質(zhì)_______(填字符)的過程中釋放的能量最多。
參考答案一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求)1、B【解析】
分析題圖:過程①是光反應(yīng),水的光解,發(fā)生在葉綠體內(nèi)的類囊體薄膜上;過程②的[H]為暗反應(yīng)的C3還原供還原劑,發(fā)生在葉綠體基質(zhì)中;③為有氧呼吸的第一、第二階段,發(fā)生在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)和線粒體中;④為有氧呼吸第三階段,發(fā)生在線粒體內(nèi)膜中;⑤為CO2的固定發(fā)生在葉綠體的基質(zhì)中;⑥為C3還原,需要光反應(yīng)為它提供能量和[H;⑦為呼吸作用(有氧呼吸或無(wú)氧呼吸)的第一階段;⑧為有氧呼吸(發(fā)生在線粒體中)第二階段或無(wú)氧呼吸第二階段(發(fā)生在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中)。然后據(jù)此答題。【詳解】⑦把葡萄糖分解成丙酮酸,為呼吸作用(有氧呼吸或無(wú)氧呼吸)的第一階段,發(fā)生在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中,A錯(cuò)誤;
過程④表示氧氣與[H]結(jié)合生成水,為有氧呼吸第三階段,發(fā)生在線粒體的內(nèi)膜,B正確;
過程⑤為CO2的固定,不需要ATP。過程⑥為C3還原,需要消耗能量和ATP和NADPH,C錯(cuò)誤;
過程①是光反應(yīng),產(chǎn)生的[H]用于暗反應(yīng)中C3的還原,過程③是有氧呼吸第一、二階段,產(chǎn)生的[H]用于有氧呼吸第三階段與氧氣結(jié)合生成水,D錯(cuò)誤。
故選B。【點(diǎn)睛】解題的關(guān)鍵是理解和掌握課本中的相關(guān)知識(shí),并結(jié)合這些知識(shí)正確識(shí)圖。2、B【解析】
1、酶是活細(xì)胞產(chǎn)生的具有生物催化能力的有機(jī)物,大多數(shù)是蛋白質(zhì),少數(shù)是RNA;2、酶的催化具有高效性、專一性、需要適宜的溫度和pH值;3、細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)。【詳解】A、酶是由活細(xì)胞產(chǎn)生的,對(duì)細(xì)胞代謝起催化作用,A錯(cuò)誤;B、絕大多數(shù)酶是蛋白質(zhì)、少量是RNA,因此酶的合成需要模板mRNA或DNA,B正確;C、酶是生物大分子物質(zhì),在消化道中會(huì)被分解,所以不能從食物中獲得,只能在活細(xì)胞中合成,C錯(cuò)誤;D、分化后的不同組織細(xì)胞有一些酶是相同的,如呼吸酶、ATP合成酶等,D錯(cuò)誤。故選B?!军c(diǎn)睛】本題考查酶的相關(guān)知識(shí),識(shí)記酶的本質(zhì)和特性、明確酶催化的特點(diǎn)和酶促反應(yīng)的原理是解題的關(guān)鍵。3、B【解析】分析:本題考查了基因的表達(dá)方面的相關(guān)知識(shí),意在考查學(xué)生的識(shí)記能力、理解能力、運(yùn)用所學(xué)知識(shí)解決相關(guān)的生物學(xué)問題的能力。詳解:基因的表達(dá)產(chǎn)物中,有一些物質(zhì)如分泌蛋白、mRNA形成后需要進(jìn)一步加工和修飾后才能發(fā)揮作用,A正確;tRNA雖然是單鏈,但也存在局部雙鏈結(jié)構(gòu),B錯(cuò)誤;mRNA在細(xì)胞核內(nèi)通過轉(zhuǎn)錄過程形成,由核孔進(jìn)入細(xì)胞質(zhì),與核糖體結(jié)合,進(jìn)行翻譯過程。與核糖體結(jié)合的部位有2個(gè)密碼子,tRNA上有反密碼子,與密碼子互補(bǔ)配對(duì),因此核糖體與mRNA的結(jié)合部位會(huì)形成兩個(gè)tRNA的結(jié)合位點(diǎn),每次沿mRNA移動(dòng)時(shí)新讀取一個(gè)密碼子,C正確;RNA復(fù)制是以RNA為模板合成RNA,有些生物,如某些病毒的遺傳信息貯存在RNA分子中,當(dāng)它們進(jìn)入宿主細(xì)胞后,靠復(fù)制而傳代,在RNA復(fù)制酶作用下,可在宿主細(xì)胞內(nèi)完成自身RNA的復(fù)制,D正確。點(diǎn)睛:解答本題的關(guān)鍵是需要學(xué)生能夠正確分析與提取題干所提供的信息,同時(shí)能夠聯(lián)系所學(xué)知識(shí)答題。4、C【解析】
32P具有放射性,細(xì)胞吸收的磷酸鹽可用于合成含有P的物質(zhì)或結(jié)構(gòu),若用含32P的磷酸鹽的營(yíng)養(yǎng)液培養(yǎng)醋酸桿菌,一段時(shí)間后,含有P的物質(zhì)或結(jié)構(gòu)都可能出現(xiàn)放射性。【詳解】A、油脂的元素組成是C、H、O,不含P,A錯(cuò)誤;B、腺苷由腺嘌呤和核糖構(gòu)成,不含P,B錯(cuò)誤;C、核苷酸是構(gòu)成核酸的基本單位、含有P,C正確;D、丙酮酸的結(jié)構(gòu)式是CH3COCOOH、不含P,D錯(cuò)誤。故選C。【點(diǎn)睛】本題考查細(xì)胞中的元素和化合物的知識(shí),考生識(shí)記細(xì)胞中常見幾種化合物的元素組成是解題的關(guān)鍵。5、C【解析】
1.生長(zhǎng)素類具有促進(jìn)植物生長(zhǎng)的作用,在生產(chǎn)上的應(yīng)用主要有:(1)促進(jìn)扦插的枝條生根;(2)促進(jìn)果實(shí)發(fā)育;(3)防止落花落果。2.赤霉素的生理作用是促進(jìn)細(xì)胞伸長(zhǎng),從而引起莖稈伸長(zhǎng)和植物增高。此外,它還有促進(jìn)麥芽糖化,促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng),防止器官脫落和解除種子、塊莖休眠促進(jìn)萌發(fā)等作用。3.細(xì)胞分裂素類細(xì)胞分裂素在根尖合成,在進(jìn)行細(xì)胞分裂的器官中含量較高,細(xì)胞分裂素的主要作用是促進(jìn)細(xì)胞分裂和擴(kuò)大,此外還有誘導(dǎo)芽的分化,延緩葉片衰老的作用。4.脫落酸在根冠和萎蔫的葉片中合成較多,在將要脫落和進(jìn)入休眠期的器官和組織中含量較多。脫落酸是植物生長(zhǎng)抑制劑,它能夠抑制細(xì)胞的分裂和種子的萌發(fā),還有促進(jìn)葉和果實(shí)的衰老和脫落,促進(jìn)休眠和提高抗逆能力等作用。5.乙烯主要作用是促進(jìn)果實(shí)成熟,此外,還有促進(jìn)老葉等器官脫落的作用?!驹斀狻緼、植物的生長(zhǎng)素由色氨酸經(jīng)一系列反應(yīng)轉(zhuǎn)變而來,A錯(cuò)誤;B、赤霉菌產(chǎn)生的赤霉素不屬于植物激素,B錯(cuò)誤;C、植物體內(nèi)生長(zhǎng)素的極性運(yùn)輸不受單側(cè)光的影響,C正確;D、脫落酸和赤霉素在促進(jìn)植物莖的生長(zhǎng)上表現(xiàn)為拮抗作用,D錯(cuò)誤。故選C。6、D【解析】
微生物的研究通常包含微生物的獲得、分離純化、培養(yǎng)以及保存等。單菌落分離法包含劃線分離法和涂布分離法,常用于分離獲得單菌落。稀釋平板計(jì)數(shù)是根據(jù)微生物在固體培養(yǎng)基上所形成的單個(gè)菌落,即是由一個(gè)單細(xì)胞繁殖而成這一培養(yǎng)特征設(shè)計(jì)的計(jì)數(shù)方法,即一個(gè)菌落代表一個(gè)單細(xì)胞。計(jì)數(shù)時(shí),首先將待測(cè)樣品制成均勻的系列稀釋液,盡量使樣品中的微生物細(xì)胞分散開,使成單個(gè)細(xì)胞存在(否則一個(gè)菌落就不只是代表一個(gè)細(xì)胞),再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中,使其均勻分布于平板中的培養(yǎng)基內(nèi)。經(jīng)培養(yǎng)后,由單個(gè)細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖形成菌落,統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目,即可計(jì)算出樣品中的含菌數(shù)。此法所計(jì)算的菌數(shù)是培養(yǎng)基上長(zhǎng)出來的菌落數(shù),故又稱活菌計(jì)數(shù)?!驹斀狻吭诩?xì)菌培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行不同程度的稀釋,計(jì)算培養(yǎng)基上的菌落數(shù),太多菌落可能堆集成一個(gè),太少不利于統(tǒng)計(jì),因此選擇合理稀釋度樣品的培養(yǎng)基上的菌落數(shù)進(jìn)行計(jì)數(shù)。故選D。二、綜合題:本大題共4小題7、自身免疫病病毒的遺傳物質(zhì)是RNA,單鏈RNA不穩(wěn)定,易變異,因此有許多變異類型+RNA→蛋白質(zhì)、+RNA→-RNA→+RNA藥物阻止了病毒對(duì)宿主細(xì)胞的吸附過程;藥物阻止了病毒核酸的復(fù)制過程;藥物阻止了病毒的裝配過程;藥物阻止了病毒顆粒的釋放過程抗原RNA疫苗上的基因來自于病毒基因片段,對(duì)人體來說是外源基因,其合成的蛋白質(zhì)是外源蛋白質(zhì),因此屬于抗原【解析】
根據(jù)題意可知,該病毒的遺傳物質(zhì)是正鏈RNA(+RNA),且該正鏈RNA(+RNA)能與核糖體結(jié)合,具有mRNA功能,說明該正鏈RNA能控制蛋白質(zhì)的合成?!驹斀狻浚?)“細(xì)胞因子風(fēng)暴”會(huì)引起免疫系統(tǒng)過度反應(yīng),免疫系統(tǒng)的無(wú)差別攻擊會(huì)使得正常細(xì)胞大量受損,這屬于免疫異常中的自身免疫病。(2)RNA病毒的基因載體為單鏈RNA,而單鏈RNA沒有DNA那樣穩(wěn)定的雙螺旋結(jié)構(gòu),容易斷裂,并且單鏈RNA的堿基裸露、不配對(duì),因此容易發(fā)生變異。(3)該病毒為正鏈RNA病毒,正鏈RNA具備mRNA功能,可以直接與核糖體結(jié)合,因此該病毒在體內(nèi)遺傳信息傳遞方向存在:+RNA→蛋白質(zhì),該病毒遺傳物質(zhì)增殖的過程應(yīng)為+RNA→-RNA→+RNA。(4)科研工作者研發(fā)出的有效藥物主要是阻止病毒侵染宿主細(xì)胞過程,其治療機(jī)理可能是:藥物阻止了病毒對(duì)宿主細(xì)胞的吸附過程,使其不能進(jìn)入宿主細(xì)胞增殖;或藥物阻止了病毒核酸的復(fù)制過程,使子代病毒不能合成;或藥物阻止了病毒的裝配過程,使子代病毒不能合成;或藥物阻止了病毒顆粒的釋放過程,使子代病毒不能感染新的宿主細(xì)胞。(5)RNA疫苗上的基因來自于病毒基因片段,對(duì)人體來說是外源基因,其合成的蛋白質(zhì)是外源蛋白質(zhì),因此屬于抗原,即“RNA疫苗”在人體內(nèi)表達(dá)出的蛋白質(zhì)是抗原?!军c(diǎn)睛】本題考查病毒的遺傳信息流動(dòng)、阻止病毒侵染宿主細(xì)胞的機(jī)理等相關(guān)知識(shí),意在考查考生對(duì)所學(xué)知識(shí)的識(shí)記和理解能力。8、逆轉(zhuǎn)錄(或:反轉(zhuǎn)錄)逆轉(zhuǎn)錄酶Taq酶(ORF1ab和核殼蛋自基因N)的特異性引物目的基因大①向小鼠體內(nèi)注射新冠病毒的抗原蛋白(或滅活的新冠病毒):②提取免疫小鼠的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,經(jīng)多次篩選獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞;③將雜交瘤細(xì)胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)、或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖,從培養(yǎng)液或小鼠腹水中就提取大量的單克隆抗體【解析】
1.將標(biāo)記有熒光素的Taqman探針與模板DNA混合后,完成高溫變性、低溫復(fù)性、適溫延伸的熱循環(huán),并遵守聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)規(guī)律,與模板DNA互補(bǔ)配對(duì)的Taqman探針被切斷,熒光素游離于反應(yīng)體系中,在特定光激發(fā)下發(fā)出熒光,隨著循環(huán)次數(shù)的增加,被擴(kuò)增的目的基因片段呈指數(shù)規(guī)律增長(zhǎng),通過實(shí)時(shí)檢測(cè)與之對(duì)應(yīng)的隨擴(kuò)增而變化熒光信號(hào)強(qiáng)度,求得Ct值,同時(shí)利用數(shù)個(gè)已知模板濃度的標(biāo)準(zhǔn)品作對(duì)照,即可得出待測(cè)標(biāo)本目的基因的拷貝數(shù)。2.單克隆抗體是由單一B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的高度均一、僅針對(duì)某一特定抗原的抗體。通常采用單克隆抗體技術(shù)來制備,單克隆抗體技術(shù)是在細(xì)胞融合技術(shù)的基礎(chǔ)上,將具有分泌特異性抗體能力的效應(yīng)B細(xì)胞和具有無(wú)限繁殖能力的骨髓瘤細(xì)胞融合為雜交瘤細(xì)胞,雜交瘤細(xì)胞既能產(chǎn)生抗體,又能無(wú)限增殖。用具備這種特性的單個(gè)雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)成細(xì)胞群,可制備針對(duì)一種抗原的特異性抗體即單克隆抗體?!驹斀狻浚?)以RNA為模板合成DNA的過程為逆轉(zhuǎn)錄或反轉(zhuǎn)錄,故題圖中以病毒的RNA為模板合成cDNA的過程為①逆轉(zhuǎn)錄,再對(duì)cDNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增,這項(xiàng)技術(shù)稱為RT-PCR。(2)RT-PCR是擴(kuò)增DNA的過程,因?yàn)榧尤氲哪0迨荝NA,故需要加入的酶是逆轉(zhuǎn)錄酶和Taq酶。要從cDNA中擴(kuò)增出新冠病毒特有的基因序列ORF1ab和核殼蛋白基因N關(guān)鍵在于要加入(ORF1ab和核殼蛋自基因N)的特異性引物、dNTP及所需的酶一起構(gòu)成反應(yīng)體系,從而實(shí)現(xiàn)了相關(guān)基因的擴(kuò)增。(3)RT-PCR加入Taqman熒光探針可以通過測(cè)定熒光強(qiáng)度來檢測(cè)產(chǎn)物濃度,原理如下:Taqman熒光探針為一段與目的基因互補(bǔ)的核苷酸單鏈,兩端分別連接一個(gè)熒光基團(tuán)R和一個(gè)淬滅基團(tuán)Q。探針結(jié)構(gòu)完整時(shí),R發(fā)射的熒光被Q吸收;而PCR擴(kuò)增時(shí)結(jié)合在模板鏈上的探針被切斷,使R和Q分離,R基團(tuán)發(fā)射的熒光不被淬滅,這樣通過對(duì)熒光信號(hào)強(qiáng)弱的監(jiān)測(cè)就可實(shí)現(xiàn)對(duì)產(chǎn)物的檢測(cè)。若熒光信號(hào)達(dá)到設(shè)定的閾值時(shí),經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)越少,說明擴(kuò)增次數(shù)少,說明更多的熒光探針與目的基因進(jìn)行了堿基互補(bǔ)配對(duì),可推測(cè)獲得的核酸產(chǎn)物中含有病毒的概率越大。(4)若采用抗原-抗體雜交技術(shù)進(jìn)行病毒檢測(cè),需要制備能與新冠病毒結(jié)合的特異性抗體,單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高且能夠大量制備的優(yōu)勢(shì),故設(shè)計(jì)的思路是設(shè)法獲得能產(chǎn)生該特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞,步驟如下:①向小鼠體內(nèi)注射新冠病毒的抗原蛋白(或滅活的新冠病毒),目的是要獲得能能產(chǎn)生特異性抗體的效應(yīng)B細(xì)胞;②提取免疫小鼠的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,經(jīng)多次篩選獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞;③將雜交瘤細(xì)胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)、或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖,從培養(yǎng)液或小鼠腹水中可以提取大量的單克隆抗體。【點(diǎn)睛】熟知逆轉(zhuǎn)錄、PCR擴(kuò)增和單克隆抗體的相關(guān)知識(shí)是解答本題的關(guān)鍵!能夠理解題目中關(guān)于熒光檢測(cè)的關(guān)鍵信息是解答本題的難點(diǎn),獲取信息能力是本題考查的重要能力。9、干擾素基因兩端的部分核苷酸序列GAATTCGGATCC復(fù)制原點(diǎn)Ca2+逆轉(zhuǎn)錄干擾素基因未能導(dǎo)入人參愈傷組織細(xì)胞(或?qū)肴藚⒂鷤M織細(xì)胞的干擾素基因未能轉(zhuǎn)錄)將干擾素的治療作用與人參的滋補(bǔ)作用相結(jié)合,能在抗病毒、抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)等方面發(fā)揮協(xié)同作用【解析】試題分析:分析圖圖中過程①表示利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因,過程②表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建,過程③表示將重組質(zhì)粒導(dǎo)入根瘤農(nóng)桿菌,過程④表示目的基因的檢測(cè)和鑒定。(1)步驟①中,利用PCR技術(shù)擴(kuò)增干擾素基因時(shí),設(shè)計(jì)引物序列的主要依據(jù)是干擾素基因兩端的部分核苷酸序列。由于需要用EcoRⅠ、BamHⅠ兩種限制酶切割目的基因和質(zhì)粒,因此科研人員還在兩種引物的一端分別加上了GAATTC和GGATCC序列,以便于后續(xù)的剪切和連接。(2)基因表達(dá)載體的組成包括目的基因、標(biāo)記基因、啟動(dòng)子、終止子和復(fù)制原點(diǎn),因此過程②所構(gòu)建的基因表達(dá)載體中未標(biāo)注出的必需元件還有復(fù)制原點(diǎn);微生物細(xì)胞作為受體細(xì)胞時(shí),需要鈣離子處理使其變?yōu)楦惺軕B(tài)細(xì)胞,即過程③中需先用Ca2+處理根瘤農(nóng)桿菌以便將基因表達(dá)載體導(dǎo)入細(xì)胞。(3)在利用反轉(zhuǎn)錄法合成目的基因時(shí),科研人員提取愈傷組織細(xì)胞的RNA后,先通過逆轉(zhuǎn)錄過程獲得DNA,再進(jìn)行PCR擴(kuò)增。干擾素基因未能導(dǎo)入人參愈傷組織細(xì)胞或?qū)肴藚⒂鷤M織細(xì)胞的干擾素基因未能轉(zhuǎn)錄,這會(huì)導(dǎo)致通過該方法不能檢測(cè)出干擾素基因。(4)科研人員認(rèn)為,藥物既有干擾素的治療作用,又有人參的滋補(bǔ)作用,因此將轉(zhuǎn)干擾素基因的人參愈傷組織加工成的藥物比單純干擾素的療效要好?!军c(diǎn)睛】答本題的關(guān)鍵是掌握基因工程的一般步驟,分析并確定圖中四個(gè)數(shù)字代表的過程的名稱,同時(shí)能夠根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則和限制酶的識(shí)別序列確定引物兩端需要加入的序列。10、RNA聚合從左向右相同磷酸二酯鍵堿基互補(bǔ)配對(duì)ARC堿基數(shù)目少,特異性弱abcdef【解析】
分析題圖:圖中①為轉(zhuǎn)錄過程,②為翻譯過程,其中mRNA可與miR-233結(jié)合形成核酸雜交分子1,miR-233可與HRCR結(jié)合形成核酸雜交分子2?!驹斀狻浚?)①是轉(zhuǎn)錄過程,催化該過程的酶是RNA聚合酶,所以啟動(dòng)過程①時(shí),RNA聚合酶需識(shí)別并與基因上的啟動(dòng)子結(jié)合。②是翻譯過程,其場(chǎng)所是核糖體,根據(jù)多肽鏈的長(zhǎng)短可判斷核糖體的移動(dòng)方向是從左向右。由于控制合成的三條多肽鏈?zhǔn)峭粋€(gè)模板mRNA,所以最終合成的T1、T2、T3三條多肽鏈的氨基酸順序相同。(2)前體RNA“加工”時(shí)將核糖和磷酸之間的磷酸二酯鍵斷開,產(chǎn)生非編碼RNA。當(dāng)心肌缺血、缺氧時(shí),基因miR﹣223過度表達(dá),所產(chǎn)生的miR﹣223可與ARC的mRNA特定序列通過堿基互補(bǔ)配對(duì)原則結(jié)合形成核酸雜交分子1,使過程②被抑制,ARC無(wú)法合成,最終導(dǎo)致心力衰竭。(3)HRCR可以吸附miR﹣223等鏈狀的miRNA,以達(dá)到清除它們的目的,使AR
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