《Beacon®兔單抗技術(shù)如何加速抗體開發(fā)》

Beacon@兔單抗技術(shù)如何加速抗體開發(fā)任為抗體研發(fā)總監(jiān)北京義翹神州科技股份有限公司義翹神州CONTENTB細(xì)胞抗體開發(fā)技術(shù)平臺概述1義翹神州Beacon@光導(dǎo)平臺相關(guān)介紹2兔抗的優(yōu)勢及篩選技術(shù)路線3Beacon@兔單抗開發(fā)應(yīng)用案例分享4B細(xì)胞抗體開發(fā)技術(shù)平臺概述01義翹神州單B細(xì)胞技術(shù)平臺種屬適用范圍廣天然抗體對抗體多樣性高開發(fā)周期短抗體親和力高操作復(fù)雜

依賴大型設(shè)備LaserbeamVHDJHCY1VKJKCK義翹神州Beacon@光導(dǎo)平臺相關(guān)介紹02義翹神州義翹神州①Beacon設(shè)備②芯片③微流控Beacon簡介

01細(xì)胞分離02細(xì)胞導(dǎo)入03驗證實驗04導(dǎo)出05ImmunizationandASCEnrichmentNanopenLoadOEPGravityIn-ChannelFluorescent”Bloom”AssayOEPNanopenExportVH/VLrecovery,cloning,expression30-60minutes30-60minutes3-4minutesperNanopenImportExport義翹神州Beacon操作流程細(xì)胞分離細(xì)胞導(dǎo)入驗證實驗導(dǎo)出樣本細(xì)胞孵育抗體磁性微粒目的細(xì)胞免疫磁性捕獲義翹神州漿細(xì)胞分離細(xì)胞分離細(xì)胞導(dǎo)入驗證實驗導(dǎo)出義翹神州細(xì)胞導(dǎo)入細(xì)胞分離細(xì)胞導(dǎo)入驗證實驗導(dǎo)出antigenantibodySecondaryantibodyAvidinbeadscell義翹神州驗證實驗義翹神州YYYY磁珠親和素生物素抗原配體YYY磁珠親和素生物素抗原熒光配體B熒光二抗細(xì)胞分離細(xì)胞導(dǎo)入驗證實驗導(dǎo)出驗證實驗義翹神州細(xì)胞分離細(xì)胞導(dǎo)入驗證實驗導(dǎo)出細(xì)胞導(dǎo)出兔抗的優(yōu)勢及篩選技術(shù)路線03義翹神州義翹神州D.K.Lanning?K.L.Knight，Springer2015,DOI10.1007/978-3-319-20819-0_12兔抗多樣化機制義翹神州JustusWeber,etal,Experimental&MolecularMedicine(2017)49,e305;DOI:10.1038/emm.2017.23

B細(xì)胞數(shù)量更多：與小鼠比，脾臟是小鼠50倍

免疫反應(yīng)更強：非近交品系繁殖

抗體結(jié)構(gòu)更穩(wěn)定：

輕鏈存在鏈內(nèi)二硫鍵

多樣化的分子機制：

基因轉(zhuǎn)換（SGC）和體細(xì)胞突變（SHM）兔單抗的特點和優(yōu)勢義翹神州更多陽性抗體更好的多樣性識別更多表位開發(fā)人鼠蛋白抗體結(jié)構(gòu)更穩(wěn)定親和力更高特異性更好靈敏度更高兔單抗的特點和優(yōu)勢義翹神州PBMC免疫Beacon篩選兔單B細(xì)胞磁珠富集IgG陽性記憶B細(xì)胞IgG+B漿細(xì)胞Beacon培養(yǎng)單細(xì)胞裂解表達(dá)評價RT-PCR構(gòu)建6天義翹神州優(yōu)勢：周期短、天然配對、可介入、多樣性好局限：抗原需要標(biāo)記、培養(yǎng)效率應(yīng)用：小分子、功能基團(tuán)的特殊表位抗體開發(fā)優(yōu)勢：種屬多樣、可介入、篩選方式靈活局限：周期長、非天然配對、特異性一般應(yīng)用：大分子抗原、納米抗體、突變改造噬菌體流式分選Beacon優(yōu)勢：周期短、效率高、天然配對局限：成本高應(yīng)用：成藥性抗體開發(fā)兔單抗篩選平臺比較Beacon@兔單抗開發(fā)應(yīng)用案例分享04義翹神州義翹神州富集培養(yǎng)增殖上機IgG+Ag+導(dǎo)出配對序列特異ELISA（OD>1.0）106IgG+記憶B細(xì)胞6*1053*1041.4*10470%~1.0*104400180174；97%155；89%72；~50%Beacon上機前后數(shù)據(jù)義翹神州ELISA陽性抗體序列多樣性分析VHVLVH-CDR3VL-CDR3CDR3氨基酸長度CDR3氨基酸長度陽性抗體數(shù)陽性抗體數(shù)

義翹神州

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mockrabbit-FITC.fcs

Daudi-R0098-0.5ug.fcs

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Daudi-R0124-0.5ug.fcs

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Daudi-R0142-0.5ug.fcs

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NCI-929-R0098-0.5ug.fcs

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R0145-0.5ug.fcs陽性抗體流式結(jié)果

義翹神州IDkon(1/Ms)kdis(1/s)KD(M)FullR^2R00985.05E+052.58E-045.11E-100.9995R01145.06E+054.61E-049.11E-100.9991R01243.55E+051.19E-033.37E-090.9985R01302.45E+055.88E-042.40E-090.9995R01421.43E+051.05E-037.36E-090.998R01455.05E+057.34E-041.46E-090.999R0098R0114R0124R0130R0142R0145親和力檢測最多

萬個漿細(xì)胞導(dǎo)入

義翹神州

天完成Beacon上機篩選

種B細(xì)胞的組織來源：血、脾

種常規(guī)檢測：結(jié)合、交叉、競爭不超過

塊板的B細(xì)胞導(dǎo)出最多

次檢測反應(yīng)

天篩出兔陽性B細(xì)胞不低于

0%PCR配對率123456718功能活性的抗體Beacon開發(fā)兔單抗總結(jié)12345678關(guān)于“北京義翹神州”堅持自主研發(fā)生產(chǎn)打造中國生命科學(xué)研究“一站式”試劑與服務(wù)支撐平臺人才與設(shè)施榮譽資質(zhì)設(shè)施：---25,000+平米研發(fā)中心

---7,000平米潔凈車間

團(tuán)隊：900+---碩士以上學(xué)歷占1/3---10+歐美深造經(jīng)歷14,000+

精品抗體6,500+

重組蛋白47,000+基因