DB15T 3439-2024 規(guī)?；驁?chǎng)綿羊支原體肺炎診斷及免疫技術(shù)規(guī)程

15I本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定本文件由內(nèi)蒙古自治區(qū)畜牧業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)（SAM/TC1技有限責(zé)任公司，內(nèi)蒙古金草原生態(tài)科技集團(tuán)有限公司，內(nèi)蒙古杜美牧業(yè)生物科技有限公1規(guī)?；驁?chǎng)綿羊支原體肺炎診斷及免疫技術(shù)規(guī)程本文件規(guī)定了規(guī)?；驁?chǎng)綿羊支原體肺炎診斷及免NY/T2835奶山羊飼養(yǎng)管理技術(shù)規(guī)范NY/T3052舍飼肉羊飼養(yǎng)管理技術(shù)規(guī)范綿羊肺炎支原體mycoplasmaovi約125nm～500nm，無(wú)細(xì)胞壁。Mo合成能力差，聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)polymerasechain一種級(jí)聯(lián)反復(fù)循環(huán)的DNA合成反應(yīng)過(guò)程。一般由三個(gè)步驟組成：模板的熱變性，寡核苷酸引物復(fù)性23無(wú)菌條件下取樣，在肺組織病變與正常組織交界處，取3cm3～5cm3大小的組織樣本，冷藏條在表層消毒后，在病變和正常組織交界處取米粒至綠豆大小深層肺組織置于玻璃勻漿器中，加入3），體變?yōu)槌燃t色，取1mL培養(yǎng)產(chǎn)物轉(zhuǎn)入10mL培養(yǎng)基中，傳代培養(yǎng)，盲傳三代后，取3mL培養(yǎng)液提取基因4PCR儀，電爐，離心機(jī)，混勻器，微量可調(diào)移液器，1.5mL離心管，PCR反應(yīng)管，核酸電泳儀，凝5對(duì)照設(shè)置：對(duì)照模板為綿羊肺炎支原體Y98標(biāo)準(zhǔn)株基因體，1M硫酸溶液。除另有規(guī)定，所用試劑均為分析純，水為符合GB/T6682分離鑒定并經(jīng)測(cè)序確定為綿羊肺炎支原體的菌液制備全菌滅活抗原，并用其免疫3月齡羔羊制備標(biāo)綿羊肺炎支原體菌液100mL，4℃12000rpm離心30min，棄上清，取沉淀。將菌體沉淀用0.1MpH7.4的PBS緩沖液洗滌3次，用5mLPBS重懸。菌體重懸液超聲裂解，4℃集上清，即為綿羊肺炎支原體全菌抗原。用BCA法測(cè)定蛋白質(zhì)濃度，將抗原凍存于-20℃?zhèn)溆??？准尤胫撩嘎?lián)反應(yīng)板，置4℃冰箱過(guò)夜，次日棄6DB15/T3439—20247A.3TAE電泳緩沖液：Tris4.84g/L,冰乙酸1.142入容器中；未溶解的酚紅繼續(xù)加1MNaOH溶液2mL，重復(fù)上述步驟（NaOH溶液總量不8B.1綿羊肺炎支原體菌落形態(tài)(10×40)見(jiàn)圖B.1。B.2綿羊肺炎支原體瑞士染色(10×100)見(jiàn)圖B.2。9標(biāo)引序號(hào)說(shuō)明：1——鼻拭子樣本；2——?dú)夤芊蛛x培養(yǎng)MO;3——肺組織分離培養(yǎng)MO;4——Y98陽(yáng)性對(duì)照； 管分泌物樣