2024年P(guān)CR上崗證考試題及答案

PCR上崗證考試題及答案（全）選擇題（共20題，每題2分）1在核酸提取時(shí),常需使用氯化鈉、醋酸鈉等鹽溶液,其目的是:(A)A中和核酸的負(fù)離子,使其易于沉淀B調(diào)整PH值C保證核酸的完整性D無特定目的2臨床上使用核酸擴(kuò)增措施診斷沙眼衣原體感染,在標(biāo)本搜集上最為關(guān)鍵的是(B)A標(biāo)本的采用方式B標(biāo)本的保留方式C標(biāo)本的運(yùn)送方式D標(biāo)本采用的時(shí)間3→之因此要將基因擴(kuò)增檢查試驗(yàn)室的產(chǎn)物分析區(qū)設(shè)置為負(fù)壓狀態(tài),目的是:(B)A防止生物傳染危險(xiǎn)物的逸出B防止擴(kuò)增產(chǎn)物從該區(qū)進(jìn)入上游區(qū)域C防止該區(qū)灰塵的逸出D無特殊目的4核酸探針的標(biāo)志性特性是:(DA一小段已知序列的單鏈核酸B一小段未知序列的單鏈核有同位素或非同位素標(biāo)識(shí)物5核酸提取純化中,Rnase最重要的潛在污染源是:(D)A試驗(yàn)室環(huán)境B試驗(yàn)用品如吸頭、離心管等C試驗(yàn)人員的手D以上A和B6PCR措施檢測(cè)病原微生物所擴(kuò)增的區(qū)段,一般為:(B)A整個(gè)病原體基因組B病原體基因組內(nèi)的保守區(qū)域C病原體基因組內(nèi)的任一區(qū)域D以上都不是7無創(chuàng)產(chǎn)前基因診斷為胎兒做出基因檢測(cè),需從孕婦外周血中分離獲取及少許的:(B)A孕婦有核紅細(xì)胞B胎兒有核紅細(xì)胞C白細(xì)胞D以上均可8.臨床PCR測(cè)定的反復(fù)性不好的原因如下,但除外:(BA試劑盒核酸提取措施對(duì)擴(kuò)增克制物清除不潔凈B原則品濃度不準(zhǔn)C核酸擴(kuò)增儀空間溫度不均D加樣反復(fù)性差9有有關(guān)動(dòng)力學(xué)定量PCR措施中對(duì)擴(kuò)增效率的測(cè)定,下述哪一條是錯(cuò)誤的:(BA必須在擴(kuò)增的指數(shù)期內(nèi)測(cè)定B可在擴(kuò)增的任何階段進(jìn)行C與擴(kuò)增產(chǎn)物的測(cè)定有關(guān)D盡量多選幾種測(cè)定點(diǎn)10.臨床基因擴(kuò)增檢查的室內(nèi)質(zhì)量控制與一般的臨床定性免疫測(cè)定IQC的最大不同在于:(D)A弱陽(yáng)性質(zhì)控血清的設(shè)置B強(qiáng)陽(yáng)性質(zhì)控血清的設(shè)置C陰性質(zhì)控血清的設(shè)置D以上均是11、PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA,需要的條件是(A)①目的基因②引物③四種脫氧核苷酸④DNA聚合酶等⑤mRNA⑥核糖體①②③④B、②③④⑤C、①③④⑤D、①②③⑥12、鎂離子在DNA或RNA體外擴(kuò)增反應(yīng)的濃度一般為（D）A、0.3-1mmol/LB、0.5-1mmol/LC、0.3-2mmol/LD、0.5-2mmol/L13、多重PCR需要的引物對(duì)為（D）A、一對(duì)引物B、半對(duì)引物C、兩對(duì)引物D、多對(duì)引物14、PCR是在引物、模板和4種脫氧核糖核苷酸存在的條件下依賴于DNA聚合酶的酶促合成反應(yīng)，其特異性決定原由于（B）A、模板B、引物C、dNTPD、鎂離子15、在PCR反應(yīng)中，下列哪項(xiàng)可以引起非靶序列的擴(kuò)增的擴(kuò)增(C)A、TaqDNA聚合酶加量過多B、引物加量過多C、A、B都可D、緩沖液中鎂離子含量過高16、PCR技術(shù)的發(fā)明人是（A）MullisB、史蒂文.沙夫C、蘭德爾.才木17、PCR產(chǎn)物短期寄存可在（A）保留。A、4℃B、常溫C、-80℃D、高溫18、PCR產(chǎn)物長(zhǎng)期儲(chǔ)存最佳置于（D）。A、4℃B、常溫C、16℃D、-20℃19、PCR的基本反應(yīng)過程包括（A）變性、退火、延伸B、變性、延伸C、變性、退火20、在實(shí)際工作中，基因擴(kuò)增試驗(yàn)室污染類型包括(D)擴(kuò)增產(chǎn)物的污染B、天然基因組DNA的污染C、試劑污染和標(biāo)本間交叉污染D、A、B、C都也許21、PCR技術(shù)于哪一年發(fā)明（A）A、1983B、1971C、1987D、199322、TaqDNA聚合酶酶促反應(yīng)最快最適溫度為（C）A、37℃B、50-55℃C、70-75℃D、80-85℃23、如下哪種物質(zhì)在PCR反應(yīng)中不需要（D）TaqDNA聚合酶B、dNTPsC、鎂離子D、RNA酶24、PCR檢測(cè)中，通過n個(gè)循環(huán)的擴(kuò)增，拷貝數(shù)將增長(zhǎng)（C）nB、2nC、2nD、n225、PCR基因擴(kuò)增儀最關(guān)鍵的部分是（A）溫度控制系統(tǒng)B、熒光檢測(cè)系統(tǒng)C、軟件系統(tǒng)D、熱蓋26、如下哪項(xiàng)不是臨床PCR試驗(yàn)室設(shè)計(jì)的一般原則（A）各區(qū)合并B、注意風(fēng)向C、因地制宜D、以便工作27、PCR試驗(yàn)室一般包括(D)試劑準(zhǔn)備區(qū)B、標(biāo)本制備區(qū)C、擴(kuò)增區(qū)和產(chǎn)物分析區(qū)D、A、B、C都含28、PCR技術(shù)不僅為遺傳病的診斷帶來了便利，并且改善了檢測(cè)細(xì)菌和病毒的措施。若要檢測(cè)一種人與否感染了艾滋病病毒，你認(rèn)為可以用PCR擴(kuò)增血液中的（D）。白細(xì)胞DNAB、病毒蛋白質(zhì)C、血漿抗體D、病毒核酸29、假如反應(yīng)體系中加入模板DNA分子100個(gè)，則通過30個(gè)循環(huán)後，DNA分子的數(shù)量將到達(dá)（D）個(gè)。A、100×30B、100×30×2C、100×302D、100×23030、PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的分析措施重要有（D）A、凝膠電泳分析法B、點(diǎn)雜交法C、熒光探針定量PCR法D、A、B、C都是二、判斷題（共20題，每題2分）1、PCR引物設(shè)計(jì)的目的是在擴(kuò)增特異性和擴(kuò)增效率間間獲得平衡。（√）2、在PCR反應(yīng)中，dATP在DNA擴(kuò)增中可以提供能量，同步作為DNA合成的原料。（√）3、DNA擴(kuò)增過程未加解旋酶，可以通過先合適加溫的措施破壞氫鍵，使模板DNA解旋。（√）4、PCR反應(yīng)中，復(fù)性過程中引物與DNA模板鏈的結(jié)合是依托堿基互補(bǔ)配對(duì)原則完畢。（√）5、PCR與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制相比所需要酶的最適溫度較高。（√）6、PCR技術(shù)可用于基因診斷，判斷親緣關(guān)系等。（√）7、PCR技術(shù)需在體內(nèi)進(jìn)行。（×）8、PCR反應(yīng)體系中的緩沖液相稱于細(xì)胞中的體液。（√）9、核酸的復(fù)制是由5＇——→3＇方向進(jìn)行的。（√）10、配對(duì)的堿基總是A與T和G與C。（√）11、HBsAg轉(zhuǎn)陰性後一段時(shí)間才出現(xiàn)可檢測(cè)的HBsAb，此段間隔期稱之為“窗口期”。（√）12、市面上多數(shù)試劑用淬滅基團(tuán)Q基團(tuán)和匯報(bào)基團(tuán)R基團(tuán)來標(biāo)識(shí)熒光定量PCR的探針。（√）13、PCR反應(yīng)體系中Mg2+的作用是增進(jìn)TaqDNA聚合酶活性。（√）14、若標(biāo)本中具有蛋白變性劑（如甲醛），PH、離子強(qiáng)度、Mg2+等有較大變化都會(huì)影響Taq酶活性。（√）每個(gè)子代DNA分子中均保留一條親代DNA鏈和一條新合成的DNA鏈，這種復(fù)制方式稱之為半保留復(fù)制。（√）發(fā)生溶血的標(biāo)本對(duì)PCR成果沒影響。（×）“平臺(tái)效應(yīng)”是描述PCR後期循環(huán)產(chǎn)物對(duì)數(shù)累積趨于飽和。（√）逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（reversetranscription-PCR，RT-PCR）就是在應(yīng)用PCR措施檢測(cè)RNA病毒時(shí)，以RNA為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下形成cDNA鏈，然後以cDNA為模板進(jìn)行正常的PCR循環(huán)擴(kuò)增。（√）在定量PCR中，72℃這一步對(duì)熒光探針的結(jié)合有影響，故清除，實(shí)際上55℃仍可充足延伸，完畢擴(kuò)增復(fù)制。（√）PCR可應(yīng)用于遺傳病、腫瘤及病原體檢測(cè)三大方面（√）簡(jiǎn)答(共兩題，每題10分)PCR技術(shù)答：PCR技術(shù)是用一對(duì)寡聚核苷酸作為引物（要點(diǎn)1：2分），通過高溫變性、低溫退火、中溫延伸（要點(diǎn)2：5分）這一周期的多次循環(huán)，使特異的DNA片段數(shù)量指數(shù)倍數(shù)增長(zhǎng)（要點(diǎn)3：3分）。2、簡(jiǎn)述定量PCR檢測(cè)操作的全過程。答：標(biāo)本的采集，保留（2分）——→樣品前處理（2分）——→待樣品充足裂解後點(diǎn)樣上機(jī)反應(yīng)（2分）——→反應(yīng)結(jié)束後觀測(cè)成果（2分）——→發(fā)匯報(bào)（2分）歷年考試高頻題目一.填空（每空0.5分，共15分）1.為加強(qiáng)醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增試驗(yàn)室規(guī)范化管理，衛(wèi)生部于公布《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增試驗(yàn)室管理措施》，北京市衛(wèi)生局為做好試驗(yàn)室立案工作，于公布了《北京市醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢查試驗(yàn)室技術(shù)審核暫行規(guī)定》。（）2.北京市衛(wèi)生局及各區(qū)縣衛(wèi)生局負(fù)責(zé)所轄行政區(qū)域內(nèi)地方醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢查試驗(yàn)室的立案和監(jiān)督管理工作。其中立案的技術(shù)審核工作流程重要包括：申報(bào)、資料審核、現(xiàn)場(chǎng)驗(yàn)收、整改、告知試驗(yàn)室資料審核成果。醫(yī)療機(jī)構(gòu)的醫(yī)學(xué)檢查科應(yīng)當(dāng)設(shè)有臨床細(xì)胞分子遺傳學(xué)專業(yè)診斷科目。立案的臨床基因擴(kuò)增檢查試驗(yàn)室參與醫(yī)療機(jī)構(gòu)的年度校驗(yàn)。（）3.臨床基因擴(kuò)增檢測(cè)的分析中質(zhì)量保證關(guān)鍵內(nèi)容包括：室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)評(píng)。其中前者監(jiān)測(cè)和控制的是試驗(yàn)室測(cè)定的反復(fù)性，而後者則通過對(duì)不一樣的試驗(yàn)室測(cè)定成果的比對(duì)而評(píng)價(jià)試驗(yàn)室測(cè)定的精確度。（）4.DNA雙螺旋構(gòu)造的特點(diǎn)是：螺旋中的兩條鏈為反向平行，其中一條鏈的方向?yàn)?’-3’，另一條鏈的方向?yàn)?’-5’。（）5.核酸包括兩種類型：脫氧核糖核酸和核糖核酸，兩者的重要區(qū)別為：前者由ATCG四種堿基構(gòu)成，而後者由AUCG四種堿基構(gòu)成。（）6.根據(jù)遺傳中心法則，遺傳信息的流動(dòng)方向?yàn)镈NA?RNA?蛋白質(zhì)。（）7.一般臨床基因擴(kuò)增檢查試驗(yàn)室一般包括下面四個(gè)分區(qū)：試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。（）8.提純的核酸樣品可根據(jù)OD260波長(zhǎng)的光吸取值算出其含量，通過計(jì)算260/280的比值計(jì)算出其純度。（）9.臨床基因擴(kuò)增試驗(yàn)室檢測(cè)用的試劑應(yīng)當(dāng)經(jīng)國(guó)家藥監(jiān)局同意。（）10.cfDNA的和中文名稱是細(xì)胞游離DNA，ctDNA的中文名稱是循環(huán)腫瘤DNA。（）11.在PCR前，為保護(hù)操作者和樣本，手工處理樣本應(yīng)當(dāng)在樣本制備區(qū)的生物安全柜中進(jìn)行，并使用帶濾芯的移液吸頭進(jìn)行樣本操作。（）12.醫(yī)療廢物垃圾袋結(jié)扎采用“鵝口頸”套扎結(jié)扎形式。（）13.銳器盒容積到達(dá)總體積的3/4時(shí)需要更換。（）14.核酸檢測(cè)中，全血樣本采集一般使用EDTA或枸櫞酸鹽抗凝，不使用肝素抗凝。（）15.熒光定量PCR使用的Taqman探針兩端標(biāo)識(shí)有匯報(bào)熒光R5’基團(tuán)和熒光粹滅Q3’基團(tuán)。（）16.新冠病毒核酸檢測(cè)應(yīng)當(dāng)在生物安全Ⅱ級(jí)試驗(yàn)室開展，同步采用生物安全Ⅲ級(jí)試驗(yàn)室的個(gè)人防護(hù)。（）17.PCR的基本反應(yīng)過程包括變性、退火、延伸。（）18.DNA/RNA的紫外吸取在260nm附近有最大吸取值。（）19.核酸的基本構(gòu)造單位是：核苷酸，其構(gòu)成包括堿基、核糖或脫氧核糖和磷酸。（）二．是非題（在你認(rèn)為對(duì)的的句子背面打√，錯(cuò)誤的背面打×，每題1分，共15分）1.DNA雙鏈中，堿基A-T之間以三個(gè)氫鍵相連，G-C以兩個(gè)氫鍵相連。（×）（）2.與細(xì)胞學(xué)初篩相比較，HPV核酸檢測(cè)初篩具有更高的敏感性。（√）（）3.使用有防“污染”作用的尿苷糖基酶（UNG）的PCR試劑盒，該酶可以降解具有UTP的擴(kuò)增產(chǎn)物。（√）（）4.DNA變性是指在物理或化學(xué)原因的作用下，導(dǎo)致兩條DNA鏈之間的氫鍵斷裂，而核酸分子中的所有共價(jià)鍵同步也受影響。（×）（）5.自制室內(nèi)質(zhì)控品時(shí)，應(yīng)對(duì)質(zhì)控品的均勻性和穩(wěn)定性進(jìn)行評(píng)價(jià)。（√）（）6.定量PCR與定性PCR測(cè)定原理的最重要的區(qū)別點(diǎn)在于前者的測(cè)定點(diǎn)在PCR的指數(shù)擴(kuò)增期，而後者多為擴(kuò)增平臺(tái)期。（×）（）7.處理PCR標(biāo)本時(shí)，在沒有生物安全柜的狀況下，可用超凈臺(tái)操作。（×）（）8.臨床檢查中的系統(tǒng)誤差一般體現(xiàn)為質(zhì)控物測(cè)定成果的SD增大。（×）（）9.擴(kuò)增管沒有蓋好會(huì)導(dǎo)致PCR反應(yīng)液熱蒸發(fā)，直接影響成果，但不會(huì)成為一種污染源。（×）（）10.核酸是極性化合物，溶于水，不溶于乙醇等有機(jī)溶劑。（√）（）11.核酸的解鏈溫度（Tm）與G+C含量有關(guān)，G+C含量愈大，Tm愈低。（×）（）12.無法參與室間質(zhì)量評(píng)價(jià)計(jì)劃時(shí)，可以用室內(nèi)質(zhì)控替代。（×）（）13.一般進(jìn)行HCV-RNA檢測(cè)時(shí)宜采用EDTA抗凝血，不適宜采用肝素抗凝。（√）（）14.以次氯酸為重要成分的清潔劑在配制後可以長(zhǎng)期使用。（×）（）15.質(zhì)量管理體系的要素包括質(zhì)量方針、質(zhì)量目的和質(zhì)量指標(biāo)。（√）（）16.核酸的復(fù)制是由3’-5’方向進(jìn)行。5---3（×）（）17.核酸的解鏈溫度（Tm）與G+C含量有關(guān)，G+C含量愈大，Tm愈高。（√）（）18.標(biāo)本差錯(cuò)率和試驗(yàn)室布局的合理性均為試驗(yàn)室質(zhì)量體系監(jiān)控指標(biāo)。（√）（）19.試驗(yàn)室質(zhì)量體系文獻(xiàn)無統(tǒng)一格式，無原則文獻(xiàn)，應(yīng)切合實(shí)際，怎么做怎么寫。（×）（）有原則文獻(xiàn)20.進(jìn)行新冠病毒核酸檢測(cè)時(shí)，采集鼻咽拭子標(biāo)本可使用棉簽。（×）（）植絨拭子21.在常規(guī)應(yīng)用前，可由制造商對(duì)試驗(yàn)室未加修改而使用的已確認(rèn)的檢查程序進(jìn)行獨(dú)立驗(yàn)證。（×）（）22.DNA在中性或弱堿性溶液中易水解，但在酸性溶液中較穩(wěn)定，RNA在堿性溶液中穩(wěn)定。（×）（）答案：在酸性溶液中，DNA、RNA易水解，在中性或弱堿性溶液中較穩(wěn)定，DNA在堿中變性，但不水解，RNA水解。23.DNA變性的本質(zhì)是雙鏈間氫鍵的斷裂。（√）（）24.DNA微溶于水，可溶于有機(jī)溶劑。（×）（）溶于水，不溶于乙醇、氯仿等有機(jī)溶劑三．單項(xiàng)選擇題（請(qǐng)將所選答案填寫在題後的括號(hào)中，每題1分，共25分）1.PCR技術(shù)的發(fā)明人是：（C）（）A.WatsonJ.D.;B.CrickF.H.C.;C.KaryMullis;D.RosalindFranklin.2.二級(jí)生物安全柜能對(duì)如下哪些進(jìn)行防護(hù)：（D）（）A.人員B.試驗(yàn)品C.環(huán)境D.以上都是3.在生物界尚無充足證據(jù)的信息流動(dòng)過程的是（A）（）A．蛋白質(zhì)→RNAB．RNA→DNAC．DNA→DNAD．DNA→RNA4.核酸提取純化中，RNase潛在污染源是：（D）（）A.試驗(yàn)室環(huán)境；B.試驗(yàn)用品如吸頭、離心管等；C.試驗(yàn)人員的手；D.以上都是5.生物安全水平的級(jí)別共分為幾種等級(jí)（D）（）A．1個(gè)B．2個(gè)C．3個(gè)D．4個(gè)6.有有關(guān)熒光定量PCR措施，下述哪一條是錯(cuò)誤的？（A）（）A.在擴(kuò)增的指數(shù)期定量；B.采用內(nèi)標(biāo)和外標(biāo)措施均可；C.可采用Taqman探針；D.在擴(kuò)增的終點(diǎn)測(cè)定定量7.在選擇開展臨床檢查項(xiàng)目時(shí)，應(yīng)首先考慮：（B）（）A.臨床有效性和分析有效性；B.檢測(cè)精密度和檢測(cè)精確度；C.臨床有效性和檢測(cè)精密度；D.分析有效性和檢測(cè)精確度8如下哪項(xiàng)有助于DNA的保留：（A）（）A.加入EDTA螯合鈣離子，清除核酸酶的活性；B.加入少許DNase；C.溶于pH3.0溶液；D.加入少許RNase9.試驗(yàn)室的清潔工作應(yīng)在如下狀況下進(jìn)行：（A）（）A.每次試驗(yàn)後B.文獻(xiàn)規(guī)定清潔時(shí)間C.試驗(yàn)室發(fā)生污染時(shí)D.以上都是10.熒光定量PCR檢測(cè)過程中，基線漂移的也許原因有：（D）（）A.蒸發(fā)；B.探針?biāo)釩.相鄰熒光通道干擾D.以上都是11.將基因擴(kuò)增檢查試驗(yàn)室的產(chǎn)物分析區(qū)設(shè)置為負(fù)壓狀態(tài)，目的是：（B）（）A.防止有生物傳染危險(xiǎn)的樣本逸出；B.防止擴(kuò)增產(chǎn)物從該區(qū)逸出；C.防止該區(qū)灰塵的逸出；D.為了生物安全的目的12.常用RNase克制劑是（B）（）A.乙醇；B.DEPC；C.異丙醇;D.精胺13.真核生物染色體DNA重要如下列哪種形式存在（D）（）A.環(huán)狀單鏈分子B.線性單鏈分子C.環(huán)狀雙鏈分子D.線性雙鏈分子14.TaqMan探針采用的是（A）（）A．熒光標(biāo)識(shí)的探針B．生物素標(biāo)識(shí)的探針C．同位素標(biāo)識(shí)的探針D．SYBRGreen熒光染料15.最大量程為200ul的微量移液器，顯示讀數(shù)為020，實(shí)際的吸液容量值為：(C）（）A．0.2ulB．2ulC．20ulD．200ul16.有關(guān)核小體的錯(cuò)誤論述是：（D）（）A．核小體是染色體的基本單位B．DNA和組蛋白共同構(gòu)成核小體C．DNA和組蛋白H1構(gòu)成核小體連接區(qū)D．RNA和組蛋白共同構(gòu)成核小體17.基因突變的實(shí)質(zhì)是：（A）（）A．染色體上的DNA序列變化了B．染色體上的DNA變成了RNAC．染色體上的DNA變成了蛋白質(zhì)D．染色體上的DNA高級(jí)構(gòu)造發(fā)生了局部變化18.假如一種PCR反應(yīng)體系中加入模板200個(gè)，通過30個(gè)循環(huán)後擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量將到達(dá)（C）（）A.200×30×2B.200×30C.200×230D.200×30219.Sanger測(cè)序體系與PCR反應(yīng)體系的重要區(qū)別是前者具有：（B）（）A.模板B.ddNTPC.DNA聚合酶D.引物Sanger測(cè)序體系與PCR相似點(diǎn)：都是基于堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，在DNA聚合酶作用下的聚合反應(yīng)。不一樣點(diǎn)：1反應(yīng)過成不一樣：PCR是引物對(duì)擴(kuò)增，測(cè)序則是單引物擴(kuò)增。2反應(yīng)成分不一樣：PCR是需要4種脫氧堿基，測(cè)序則有ddNTP20.分子雜交試驗(yàn)不能用于：（C）（）A.單鏈DNA分子之間的雜交B.單鏈DNA與RNA分子之間的雜交C.抗原與抗體分子之間的結(jié)合D.雙鏈DNA與RNA分子之間的雜交21.在Sanger基因測(cè)序技術(shù)中所使用的酶是:（A）（）A.DNA聚合酶B.RNA聚合酶C.DNA連接酶D.DNA拓?fù)涿?2.雙鏈DNA中的堿基對(duì)有：（D）（）A．A-UB．G-TC．C-AD．T-A23.下列四個(gè)DNA片段中具有回文構(gòu)造的是（D）（）A.GAAGAAB.TGGAAAC.GAAAAGD.GAATTC24.核酸分子中儲(chǔ)存遺傳信息的關(guān)鍵部分是：（D）（）A.mRNAB.tRNAC.rRNAD.DNA25.核酸檢測(cè)探針的標(biāo)志性特性是：（A）（）A．一小段已知序列的單鏈核酸；B.一小段未知序列的單鏈核酸；C.一小段已知序列的雙鏈核酸；D.有同位素或非同位素標(biāo)識(shí)物。作為探針的核酸序列至少必須具有如下兩個(gè)條件：①應(yīng)是單鏈，若為雙鏈，必須先行變性處理。②應(yīng)帶有輕易被檢測(cè)的標(biāo)識(shí)。它可以包括整個(gè)基因，也可以僅僅是基因的一部分；可以是DNA自身，也可以是由之轉(zhuǎn)錄而來的RNA。26.核酸分離純化的目的是：（D）（）A.除去PCR克制物B.增長(zhǎng)靶核酸濃度，使之到達(dá)PCR測(cè)定范圍C.增長(zhǎng)樣本均一性，保證測(cè)定精密度和反復(fù)性D.以上都是27.mRNA約占總RNA的百分?jǐn)?shù)為：（A）（）A.5％B.10％C.15％D.20％28.分子檢測(cè)對(duì)標(biāo)本采集容器的規(guī)定是：（E）（）A.密閉B.一次性C.無DNase和RNaseD.無菌E.以上均是29.有關(guān)基因擴(kuò)增檢測(cè)試驗(yàn)室分區(qū)，如下說法不對(duì)的的是：（D）（）A.外周血游離DNA標(biāo)本制備可與細(xì)胞/組織標(biāo)本制備區(qū)共用；B.須注意試驗(yàn)室空氣流向；C.試驗(yàn)室應(yīng)有充足的通風(fēng)換氣；D.緩沖間不是必需的；E.傳遞窗不是必需的30.“無基因”或“無核酸”概念是指：（E）（）A.在基因擴(kuò)增檢測(cè)操作時(shí)，要注意防止由于擴(kuò)增產(chǎn)物污染所致檢測(cè)假陽(yáng)性；B.在基因擴(kuò)增檢測(cè)操作時(shí)，要注意防止由于標(biāo)本間交叉污染所致檢測(cè)假陽(yáng)性；C.每次檢測(cè)後試驗(yàn)室內(nèi)的充足通風(fēng)及清潔；D.試驗(yàn)室各區(qū)物品的專用；E.以上均是31.商品試劑的性能驗(yàn)證的合格判斷原則是：（D）（）A.衛(wèi)生行業(yè)原則；B.國(guó)際原則；C.滿足臨床疾病的診斷規(guī)定；D.試劑盒闡明書上所宣稱的檢測(cè)性能E.以上均是32.L-J指控圖的失控規(guī)則制定的根據(jù)是：（B）（）A.各試驗(yàn)室根據(jù)自身的狀況詳細(xì)確定；B.記錄學(xué)的“小概率事件”原理；C.超過均值±3SD；D.超過均值±2SD；E.陰性質(zhì)控品檢測(cè)為陽(yáng)性33.下列哪一種病毒遺傳物質(zhì)為RNA（D）（）A.乙肝病毒B.人乳頭瘤病毒C.巨細(xì)胞病毒D.新型冠狀病毒COVID-1934.如下在PCR反應(yīng)中，對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物的特異性起決定性作用的是：（B）（）A.模板B.引物C.dNTPD.鎂離子35.有有關(guān)熒光定量PCR措施，下述哪一條是錯(cuò)誤的？（A）（）A.在指數(shù)擴(kuò)增初期定量；B.在擴(kuò)增的終點(diǎn)定量；C.可采用Taqman探針；D.采用內(nèi)標(biāo)和外標(biāo)措施均可36.在選擇開展臨床檢查項(xiàng)目時(shí)，應(yīng)首先考慮：（B）（）A.臨床預(yù)期用途；B.檢測(cè)精密度和檢測(cè)精確度；C.檢測(cè)精密度；D.檢測(cè)精確度37.一種PCR反應(yīng)體系中起始模板量為500，通過30個(gè)循環(huán)後擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量將到達(dá)（C）（）A.500×30×2B.5002×30C.500×230D.500×30238.對(duì)COVID-19疑似患者采樣，需要（C）級(jí)生物安全個(gè)人防護(hù)裝備（）A.ⅠB.ⅡC.ⅢD.Ⅳ39.手衛(wèi)生分為（D）步（）D.740.除（A）外均可有效滅活新型冠狀病毒（）A.氯已定B.56℃30分鐘C.75%乙醇D.含氯消毒劑41.在基因擴(kuò)增檢測(cè)中，全血或骨髓標(biāo)本不能用肝素抗凝，原因是（D）（）A.肝素是TaqDNA聚合酶活性的強(qiáng)克制劑B.肝素對(duì)Mg++有絡(luò)合作用C.經(jīng)典的核酸提取措施很難清除肝素D.以上A和C42.下列哪種狀況需對(duì)PCR檢測(cè)項(xiàng)目進(jìn)行措施學(xué)驗(yàn)證試驗(yàn)：（D）（）A.開展新項(xiàng)目前B.更換試劑品牌C.更換儀器D.以上全是43.在臨床基因擴(kuò)增檢查中，弱陽(yáng)性室內(nèi)質(zhì)控品發(fā)生失控，常見的原因有下述各項(xiàng)，除（B）外（）A.核酸提取中的丟失、有機(jī)溶劑的清除不徹底、標(biāo)本中擴(kuò)增克制物的殘留等B.擴(kuò)增儀孔間溫度的不一致性C.擴(kuò)增產(chǎn)物的污染D.Taq酶和/或反轉(zhuǎn)錄酶的失活44.PCR擴(kuò)增檢測(cè)采用內(nèi)標(biāo)，可以識(shí)別擴(kuò)增檢測(cè)的（C）（）A.假陰性B.假陽(yáng)性C.假陰性、假陽(yáng)性都可以防止D.假陰性、假陽(yáng)性都不能防止45.在一種DNA分子中，如G所占摩爾比為17.2%，則A所占摩爾比為（B）（）A.82.8%B.32.8%C.17.2%D.65.6%四.簡(jiǎn)答題(每題5分，共25分)1.簡(jiǎn)述什么狀況下應(yīng)進(jìn)行性能驗(yàn)證？(5分)（）答：（1）在常規(guī)應(yīng)用前，應(yīng)由試驗(yàn)室對(duì)未加修改而使用的已確認(rèn)的檢查程序進(jìn)行獨(dú)立驗(yàn)證。（2）任何嚴(yán)重影響檢測(cè)系統(tǒng)分析性能的狀況發(fā)生後，如儀器搬遷、設(shè)施、環(huán)境嚴(yán)重失控等。（3）常規(guī)有效期間，定期做。（4）啟用新的檢測(cè)系統(tǒng)：更換試劑、儀器、校準(zhǔn)品溯源性變化2.臨床PCR試驗(yàn)室質(zhì)量管理體系文獻(xiàn)應(yīng)包括哪些內(nèi)容？(5分)（）答：（1《質(zhì)量手冊(cè)》：質(zhì)量方針和質(zhì)量目的的申明。（2）準(zhǔn)則規(guī)定的程序和記錄。（3）試驗(yàn)室規(guī)定的文獻(xiàn)和記錄：為保證有效籌劃、運(yùn)行并控制其過程。（4）合用的法規(guī)、原則及其他規(guī)范文獻(xiàn)。3.請(qǐng)簡(jiǎn)述完整的員工培訓(xùn)計(jì)劃應(yīng)包括哪些內(nèi)容。(5分)（）答：（1）培訓(xùn)所波及的范圍：儀器設(shè)備的使用、維護(hù)和校準(zhǔn)。試劑措施原理。質(zhì)量管理體系。有關(guān)法律法規(guī)，有關(guān)領(lǐng)域的新技術(shù)、新理念和新進(jìn)展。試驗(yàn)操作技能等。（2）怎樣培訓(xùn)：講座，討論，自學(xué)和參與培訓(xùn)班。（3）培訓(xùn)的評(píng)估：書面考試，試驗(yàn)考核，討論心得，論文，綜述等。4.感染性疾病的定量、定性檢測(cè)，人基因組的基因型檢測(cè)，對(duì)上述三類PCR檢測(cè)的室內(nèi)質(zhì)控品的濃度水平和型別怎樣規(guī)定？(5分)（）答：定量PCR檢測(cè)的室內(nèi)質(zhì)控品的濃度：測(cè)定線性范圍內(nèi)的高、中、低三種濃度，型別：生物DNA/RNA參照原則品；定性PCR檢測(cè)的室內(nèi)質(zhì)控品的濃度：靠近措施測(cè)定下限（2-4倍）的濃度，型別：生物DNA參照原則品；人基因組的基因型檢測(cè)的室內(nèi)質(zhì)控品的濃度：型別：人類基因組DNA參照原則品。5.簡(jiǎn)述生物安全的概念、試驗(yàn)室生物安全水平的概念。(5分)（）答：試驗(yàn)室生物安全：為了防止微生物和醫(yī)學(xué)試驗(yàn)室中有害或有潛在危害的生物因子對(duì)人、環(huán)境和社會(huì)導(dǎo)致的危害或潛在危害，而采用的防護(hù)措施（硬件）和管理措施（軟件），到達(dá)對(duì)人、環(huán)境和社會(huì)的安全防護(hù)目的。生物安全水平：根據(jù)試驗(yàn)室的工作性質(zhì)及也許分離到的病原體等級(jí)進(jìn)行安全防護(hù)水平的劃分。6.什么是室內(nèi)質(zhì)量控制？(5分)（）答：由試驗(yàn)室工作人員，采用一定的措施和環(huán)節(jié)，持續(xù)評(píng)價(jià)本試驗(yàn)室工作的可靠性程度，意在監(jiān)測(cè)和控制本試驗(yàn)室工作的精密度，提高本試驗(yàn)室常規(guī)工作中批內(nèi)、批間樣本檢查的一致性，以確定測(cè)定成果與否可靠，可否發(fā)出匯報(bào)的一項(xiàng)工作。包括三個(gè)方面的內(nèi)容：測(cè)定前的質(zhì)量控制、記錄學(xué)質(zhì)量控制、質(zhì)量控制的評(píng)價(jià)。7.請(qǐng)從氣流方向、高效過濾器位置、保護(hù)對(duì)象、操作對(duì)象幾方面比較生物安全柜、超凈臺(tái)、通風(fēng)櫥三種設(shè)備。(5分)（）答：生物安全柜是一種負(fù)壓凈化工作臺(tái)，氣流方向是由外向內(nèi)，高效過濾器位置在生物安全柜的頂部漏器上，保護(hù)對(duì)象為試驗(yàn)室和試驗(yàn)員。超凈臺(tái)是正壓送風(fēng)，氣流方向是由內(nèi)向外，進(jìn)風(fēng)口在背面或正面的下方，工作臺(tái)正面的金屬網(wǎng)罩內(nèi)是超級(jí)濾清器。保護(hù)對(duì)象為試驗(yàn)材料。試驗(yàn)室通風(fēng)櫥氣流控制由控制器與風(fēng)閥來完畢，氣流方向是由外向內(nèi)，過濾裝置位于通風(fēng)櫥的上部。保護(hù)對(duì)象為試驗(yàn)室和試驗(yàn)員。8.進(jìn)行新冠病毒核酸檢測(cè)的樣本處理區(qū)試驗(yàn)臺(tái)面發(fā)生樣本溢灑時(shí)應(yīng)怎樣處理？(5分)（）答：樣本在試驗(yàn)臺(tái)面發(fā)生小面積溢灑時(shí)，應(yīng)立即用吸水材料覆蓋溢灑區(qū)域，覆蓋范圍要足夠大，包括噴濺的最遠(yuǎn)處。然後用0.55%含氯消毒劑從外圍向中心傾倒，直到吸水性材料所有濕潤(rùn)。消毒劑作用30分鐘後，用鑷子夾取溢灑物及吸水紙放入醫(yī)療廢棄物搜集器，利器及碎玻璃等放入利器盒，操作時(shí)注意不要擴(kuò)大污染范圍。再反復(fù)用新的吸水材料將剩余液體吸凈。再次用0.55%含氯消毒劑對(duì)污染區(qū)域噴灑、擦拭消毒，用清水擦拭。最終對(duì)溢灑及處理成果進(jìn)行記錄和匯報(bào)。覆蓋----消毒30min---丟棄----擦拭----再消毒---清水擦拭9.簡(jiǎn)述：熒光PCR定性項(xiàng)目檢測(cè)時(shí)，弱陽(yáng)性室內(nèi)質(zhì)控品出現(xiàn)假陰性失控的原因。(5分)（）答：（1）核酸提取中的隨機(jī)誤差，如核酸提取中的丟失，有機(jī)溶劑的清除不徹底，標(biāo)本中擴(kuò)增克制物的殘留，所用耗材如離心管有PCR克制物等。（2）儀器的問題，如擴(kuò)增儀孔間溫度的不一致性，孔內(nèi)溫度與所示溫度的不一致性等。（3）試劑的問題，如Taq酶和/或反轉(zhuǎn)錄酶的失活，探針的純度及標(biāo)識(shí)效率和核酸提取試