《2.2.1 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)》學(xué)與練

學(xué)而優(yōu)·教有方PAGE1PAGE2.2.1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)Part1目標(biāo)任務(wù)：對(duì)接課標(biāo)，了解目標(biāo)Part1目標(biāo)任務(wù)：對(duì)接課標(biāo)，了解目標(biāo)Part2預(yù)習(xí)導(dǎo)學(xué)：自主梳理+預(yù)習(xí)檢測(cè)，掌握基本知識(shí)點(diǎn)Part3探究提升：代入情景+典例精講，深入學(xué)習(xí)知識(shí)要點(diǎn)iPS細(xì)胞的培養(yǎng)和利用Part4網(wǎng)絡(luò)梳理：建立知識(shí)間的聯(lián)系Part5強(qiáng)化訓(xùn)練：必刷經(jīng)典試題，能力提升內(nèi)容導(dǎo)航新課程標(biāo)準(zhǔn)學(xué)習(xí)目標(biāo)1.闡明動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是從動(dòng)物體獲得相關(guān)組織、分散成單個(gè)細(xì)胞后，在適宜的培養(yǎng)條件下讓細(xì)胞生長和增殖的過程。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)。2．簡述干細(xì)胞在生物醫(yī)學(xué)工程中有廣泛的應(yīng)用價(jià)值。闡明動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件和過程。闡述干細(xì)胞在生物醫(yī)學(xué)工程中有廣泛的應(yīng)用價(jià)值。闡明利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)制備單克隆抗體的過程，認(rèn)同單克隆抗體在臨床上有重要的應(yīng)用價(jià)值。闡明利用動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆動(dòng)物的過程和該技術(shù)的應(yīng)用前景。自主梳理動(dòng)物細(xì)胞工程常用的技術(shù)包括、和等，其中是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是指從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的組織，將它分散成，然后放在適宜的培養(yǎng)條件下，讓這些細(xì)胞和的技術(shù)。一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件（1）營養(yǎng)：所用培養(yǎng)從物理性質(zhì)劃分類型為，從成分上劃分類型為。通常需加入等天然成分。（2）無菌、無毒的環(huán)境①對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行處理以及在環(huán)境下進(jìn)行操作。②定期更換，以便清除，防止細(xì)菌代謝物積累對(duì)細(xì)胞自身造成傷害。（3）溫度、pH和滲透壓①溫度：多以℃為宜。②pH：。③滲透壓：適宜（4）氣體環(huán)境①氧氣是細(xì)胞新陳代謝的，二氧化碳的主要作用是。②在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，并將他們置于含有空氣和CO2的混合氣體的CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程取動(dòng)物組織塊（動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織）→剪碎→用的方法或用、處理一段時(shí)間，將組織分散成→制成→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用或處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng)。（1）體外培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞可以分為兩大類：一類細(xì)胞能夠在培養(yǎng)液中生長增殖。另一類則需要于某些基質(zhì)表面才能生長增殖，大多數(shù)細(xì)胞屬于這種類型。（2）細(xì)胞貼壁：將細(xì)胞懸液放入培養(yǎng)瓶內(nèi)，置于適宜環(huán)境中培養(yǎng)，懸液中分散的細(xì)胞很快就，稱為細(xì)胞貼壁。（3）接觸抑制：當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面時(shí)，細(xì)胞停止的現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制。（4）原代培養(yǎng)：指動(dòng)物組織經(jīng)處理后的。（分瓶之前的培養(yǎng)）（5）傳代培養(yǎng)：指的細(xì)胞培養(yǎng)。（6）在進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí)，懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞直接用收集；貼壁細(xì)胞需要重新用等處理，使之分散成，然后再用法收集。三、干細(xì)胞培養(yǎng)及其應(yīng)用1.干細(xì)胞的概念：動(dòng)物和人體內(nèi)仍保留的少數(shù)具有和能力的細(xì)胞。在一定條件下，干細(xì)胞可以分化成其他類型的細(xì)胞。2.干細(xì)胞的分布：存在于、和等多種組織和器官中。3.干細(xì)胞的分類：包括胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞等。（1）胚胎干細(xì)胞（簡稱細(xì)胞）①分布：存在于中。②特點(diǎn)：具有分化為成年動(dòng)物體內(nèi)的一種類型的細(xì)胞，并進(jìn)一步形成機(jī)體的所有組織和器官甚至的潛能。③局限性：胚胎干細(xì)胞必須從胚胎中獲取，涉及倫理問題，因而限制了在醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用。④應(yīng)用實(shí)例：ES細(xì)胞在體外分化成心肌細(xì)胞、神經(jīng)元細(xì)胞和造血干細(xì)胞等。（2）成體干細(xì)胞①分布：存在于成體組織或器官內(nèi)中。②舉例：骨髓中的造血干細(xì)胞、神經(jīng)系統(tǒng)中的神經(jīng)干細(xì)胞、睪丸中的精原干細(xì)胞等。③特點(diǎn)：一般認(rèn)為，成體干細(xì)胞具有組織，只能分化成特定的細(xì)胞或組織，發(fā)育成完整個(gè)體的能力。④發(fā)現(xiàn)最早、研究最多的、應(yīng)用最成熟的實(shí)例：造血干細(xì)胞，主要存在于成體的中。（3）誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞）①概念：通過體外誘導(dǎo)小鼠成纖維細(xì)胞，獲得了類似的一種細(xì)胞。②優(yōu)點(diǎn)：誘導(dǎo)過程無須破壞胚胎。iPS細(xì)胞可來源于病人自身的體細(xì)胞，將它移植回病人體內(nèi)后，理論上可以避免。4.干細(xì)胞的應(yīng)用（1）應(yīng)用原理：有著自我更新能力及分化潛能的干細(xì)胞，與組織、器官的發(fā)育、再生和修復(fù)等密切相關(guān)。（2）應(yīng)用實(shí)例：造血干細(xì)胞：治療白血病及一些惡性腫瘤放療或化療后引起的造血系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)功能障礙等疾病。神經(jīng)干細(xì)胞：治療神經(jīng)組織損傷和神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病（如帕金森病、阿爾茨海默病等）。（3）面臨的問題：存在導(dǎo)致腫瘤發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)。（4）應(yīng)用展望：干細(xì)胞將在再生醫(yī)學(xué)、藥物安全性與有效性檢測(cè)等領(lǐng)域發(fā)揮大作用。預(yù)習(xí)檢測(cè)（限時(shí)10分鐘）1．如圖為科學(xué)家制備誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPS細(xì)胞)的操作流程圖。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．該項(xiàng)技術(shù)將來有可能用于再生醫(yī)學(xué)、藥物安全性與有效性檢測(cè)等領(lǐng)域B．借助載體將特定基因?qū)爰?xì)胞中可以制備iPS細(xì)胞C．成纖維細(xì)胞可以轉(zhuǎn)化為iPS細(xì)胞，已分化的B細(xì)胞、T細(xì)胞也可以轉(zhuǎn)化為iPS細(xì)胞D．誘導(dǎo)多能干細(xì)胞應(yīng)用前景不如胚胎干細(xì)胞2．科學(xué)家通過體外誘導(dǎo)小鼠成纖維細(xì)胞形成iPS細(xì)胞，iPS細(xì)胞可進(jìn)一步分化為神經(jīng)元細(xì)胞、胰島細(xì)胞、肝細(xì)胞等組織細(xì)胞。下列說法錯(cuò)誤的是（

）A．iPS細(xì)胞是誘導(dǎo)多能干細(xì)胞，在誘導(dǎo)過程中不需要破壞胚胎B．誘導(dǎo)過程中需在培養(yǎng)液添加適量的干擾素，以防止雜菌污染C．iPS細(xì)胞分化為神經(jīng)元細(xì)胞的過程并未體現(xiàn)出細(xì)胞的全能性D．對(duì)iPS細(xì)胞進(jìn)行定向誘導(dǎo)獲得的胰島細(xì)胞可用于治療某些疾病3．下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，正確的是（

）A．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)一般使用固體培養(yǎng)基B．培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具要進(jìn)行消毒處理C．定期更換培養(yǎng)液可以防止代謝產(chǎn)物的積累對(duì)細(xì)胞造成的危害D．細(xì)胞培養(yǎng)液中通常含有維生素、激素、糖等多種能源物質(zhì)4．科學(xué)家將4個(gè)關(guān)鍵基因移植入已分化的肌肉細(xì)胞中并表達(dá)，使這個(gè)細(xì)胞成為多能干細(xì)胞(iPS細(xì)胞)。下圖為該實(shí)驗(yàn)示意圖。下列有關(guān)敘述正確的是（）

A．應(yīng)用該技術(shù)可大大降低免疫排斥反應(yīng)，提高器官移植的成功率B．iPS細(xì)胞所攜帶的遺傳信息與肌肉細(xì)胞相同C．關(guān)鍵基因表達(dá)使細(xì)胞功能趨向?qū)ｉT化，降低了細(xì)胞的分化程度D．圖示過程體現(xiàn)了iPS細(xì)胞的全能性5．下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的敘述，錯(cuò)誤的是（）A．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)都需要無菌條件B．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)過程中都要用到胰蛋白酶C．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)可獲得大量細(xì)胞，莖尖組織培養(yǎng)可獲得脫毒植株D．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的理論基礎(chǔ)不同6．對(duì)某種動(dòng)物的肝腫瘤細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．在利用肝組織塊制備細(xì)胞懸液時(shí)，可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理B．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行，CO2的作用是刺激細(xì)胞呼吸C．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中必須保證培養(yǎng)環(huán)境是無菌、無毒的D．在合成培養(yǎng)基中，通常需加入血清等天然成分7．治療大面積燒傷時(shí)，可通過細(xì)胞培養(yǎng)構(gòu)建“人造皮膚”進(jìn)行移植。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．使用燒傷病人健康皮膚細(xì)胞可培養(yǎng)出不產(chǎn)生免疫排斥反應(yīng)的“皮膚”B．用胰蛋白酶處理皮膚組織，目的是使它分散成單個(gè)細(xì)胞C．貼壁生長的皮膚細(xì)胞會(huì)發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象D．傳代培養(yǎng)時(shí)，貼壁細(xì)胞直接用離心法收集，然后再分瓶培養(yǎng)8．現(xiàn)在有一個(gè)嬰兒在出生后醫(yī)院為他保留了臍血，在他以后生長發(fā)育過程中如果出現(xiàn)了某種難治療的疾病，就可以通過血液中的干細(xì)胞來為他治病，關(guān)于這個(gè)實(shí)例說法正確的是（）A．用干細(xì)胞培育出人體需要的器官用來移植治病，需要激發(fā)細(xì)胞的全能性B．用臍血中的干細(xì)胞能夠治療這個(gè)孩子所有的疾病C．如果要移植用他的干細(xì)胞培育出的器官，需要用到細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)D．如果要移植用他的干細(xì)胞培育出的器官，應(yīng)該長期給他使用免疫抑制藥物9．某科研團(tuán)隊(duì)利用7個(gè)小分子化合物的組合處理小鼠體細(xì)胞。使其重編程為多潛能干細(xì)胞（稱為CiPS細(xì)胞），使得轉(zhuǎn)入外源基因的方法不再是細(xì)胞編程所必需的。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（

）A．這一過程類似于植物細(xì)胞的脫分化過程B．小鼠的體細(xì)胞誘導(dǎo)成CiPS細(xì)胞后，細(xì)胞周期會(huì)變短C．與小鼠的體細(xì)胞相比，誘導(dǎo)形成的CiPS細(xì)胞全能性較低D．小鼠體細(xì)胞誘導(dǎo)成CiPS細(xì)胞是形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生穩(wěn)定性差異的過程10．干眼癥是由于淚液分泌減少導(dǎo)致的眼睛干澀病癥。將有關(guān)基因?qū)胍逊只捏w細(xì)胞獲得誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞），培養(yǎng)iPS細(xì)胞得到的眼結(jié)膜組織可分泌淚液成分“粘液素”，有望治療干眼癥。下列說法不正確的是（

）A．導(dǎo)入的基因具有促使體細(xì)胞恢復(fù)分裂能力的作用B．利用iPS細(xì)胞獲得眼結(jié)膜組織時(shí)，應(yīng)加入分化抑制因子C．利用iPS細(xì)胞治療人類疾病理論上可避免免疫排斥反應(yīng)D．iPS細(xì)胞可在一定程度上避免胚胎干細(xì)胞涉及的倫理問題?環(huán)節(jié)iPS細(xì)胞的培養(yǎng)和利用【情景材料】在治療大面積燒傷時(shí)，通常采用的方法是取燒傷病人的健康皮膚進(jìn)行自體移植。但對(duì)這樣的病人來說，自體健康皮膚非常有限，使用他人皮膚來源又不足，而且還會(huì)產(chǎn)生免疫排斥反應(yīng)。那么，怎樣才能獲得大量的自體健康皮膚？能不能用自體皮膚的單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)出可供移植的皮膚？下圖為iPS細(xì)胞的培養(yǎng)和利用過程示意圖，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題?！締栴}探究】1．由iPS細(xì)胞分化為各種組織細(xì)胞過程的實(shí)質(zhì)是什么？2．從病人體內(nèi)提取成纖維細(xì)胞，將其轉(zhuǎn)化成iPS細(xì)胞，經(jīng)誘導(dǎo)后產(chǎn)生所需細(xì)胞，將所需細(xì)胞植入病人體內(nèi)，這種技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)有哪些？3．iPS細(xì)胞是多能干細(xì)胞，還是專能干細(xì)胞？在分裂過程中會(huì)發(fā)生哪些變異？4．誘導(dǎo)多能干細(xì)胞用于治療人類的某些頑癥的原理是什么？誘導(dǎo)多能干細(xì)胞為什么可以解決器官移植時(shí)供體器官不足和器官移植后免疫排斥的問題？典例精講【例1】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)。下列有關(guān)敘述正確的是（

）A．一般選擇幼齡動(dòng)物的細(xì)胞培養(yǎng)，原因是其細(xì)胞分化程度低B．進(jìn)行細(xì)胞傳代培養(yǎng)時(shí)，細(xì)胞每傳一代，細(xì)胞數(shù)目增加一倍C．傳代培養(yǎng)前需用胰蛋白酶處理貼壁細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液D．為保證無菌的環(huán)境，需要定期更換培養(yǎng)液，清除代謝物【例2】目前肺類器官主要有兩種培養(yǎng)方式：其一是誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPS細(xì)胞)生成；其二是將肺上皮干細(xì)胞與篩選后的體細(xì)胞進(jìn)行共培養(yǎng)(過程如圖所示)。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．iPS細(xì)胞具有組織特異性，只能分化成特定的細(xì)胞或組織B．肺類裝配體的培養(yǎng)需要適宜的營養(yǎng)、溫度、pH等基本條件C．培養(yǎng)肺類裝配體時(shí)需定期更換培養(yǎng)液以便清除代謝廢物等D．肺類器官A和B細(xì)胞中的DNA相同，RNA和蛋白質(zhì)存在差異【例3】下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，不正確的是（）A．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)可用于檢測(cè)有毒物質(zhì)和獲得大量自身健康細(xì)胞B．從細(xì)胞株中分離出特殊性質(zhì)的細(xì)胞經(jīng)過培養(yǎng)獲得細(xì)胞系C．培養(yǎng)保留接觸抑制的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成單層細(xì)胞D．能連續(xù)傳代的細(xì)胞系是發(fā)生轉(zhuǎn)化的細(xì)胞系，但不一定有異倍體核型、接觸抑制【例4】如圖為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的基本過程，以下敘述錯(cuò)誤的是（

）A．a(chǎn)中放置的一般是幼齡動(dòng)物的器官或組織，原因是其細(xì)胞分裂能力強(qiáng)B．c過程屬于原代培養(yǎng)，d過程屬于傳代培養(yǎng)C．c、d瓶中的培養(yǎng)液需要加入血清等天然成分D．將培養(yǎng)的細(xì)胞置于95%O2和5%CO2混合氣體的CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)【例5】研究人員利用逆轉(zhuǎn)錄病毒將Oct-3/4等四個(gè)關(guān)鍵基因?qū)肫つw纖維母細(xì)胞并表達(dá)，獲得了與胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）極為相似的誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞），其在體外可分化成神經(jīng)細(xì)胞、心血管細(xì)胞等組織細(xì)胞。相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A．?dāng)y帶關(guān)鍵基因的逆轉(zhuǎn)錄病毒以胞吞的方式進(jìn)入皮膚纖維母細(xì)胞B．iPS細(xì)胞與ES細(xì)胞一樣具有細(xì)胞周期和組織特異性C．利用iPS細(xì)胞對(duì)自身受損器官進(jìn)行修復(fù)，可以避免免疫排斥反應(yīng)D．獲得iPS細(xì)胞過程無須破壞胚胎，可以避免獲取ES細(xì)胞涉及的倫理問題【例6】為探究H基因?qū)δ[瘤細(xì)胞M增殖能力的影響，分別將H基因和突變h基因過量表達(dá)的細(xì)胞M在含瓊脂的半固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，檢測(cè)細(xì)胞克隆（由單個(gè)細(xì)胞分裂形成的肉眼可見的細(xì)胞群）數(shù)量如下表，作為判斷腫瘤細(xì)胞惡性程度的指標(biāo)之一。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）①②③④10%血清-+++H基因--+-突變h基因+細(xì)胞克隆數(shù)量（個(gè)）591527注：“+”表示加入或過量表達(dá)；“-”表示未加入或無表達(dá)A．血清為細(xì)胞M的生長增殖提供了營養(yǎng)物質(zhì)等天然成分B．克隆間相互離散，能有效避免克隆內(nèi)細(xì)胞的接觸抑制C．H基因的過量表達(dá)導(dǎo)致克隆數(shù)增加，說明其不是抑癌基因D．突變h基因過量表達(dá)，容易引起細(xì)胞M在體內(nèi)分散和轉(zhuǎn)移【例7】再生醫(yī)學(xué)領(lǐng)域在2019年首次利用異源誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞）培養(yǎng)出的眼角膜組織，移植到病人體內(nèi)，成功治療一名失明患者，且未發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。下列有關(guān)敘述正確的是（）A．造血干細(xì)胞和誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞）的分化程度相同B．體外培養(yǎng)iPS細(xì)胞時(shí)培養(yǎng)液中通常需要加入血清等物質(zhì)C．干細(xì)胞分化成特定組織細(xì)胞后可再受刺激變回原來的干細(xì)胞D．患者未發(fā)生免疫排斥反應(yīng)是因?yàn)橐浦布?xì)胞與其自身細(xì)胞的基因相同【例8】我國科研人員利用人的成纖維細(xì)胞培養(yǎng)出可增殖、具有功能的肝樣細(xì)胞（hihep細(xì)胞），成功構(gòu)建了新型的生物人工肝。下列敘述不正確的是（

）A．培養(yǎng)過程中需要在培養(yǎng)液中添加動(dòng)物血清B．成纖維細(xì)胞與hihep細(xì)胞的遺傳物質(zhì)不相同C．成纖維細(xì)胞培養(yǎng)成hihep細(xì)胞并未體現(xiàn)細(xì)胞的全能性D．成纖維細(xì)胞培養(yǎng)成hihep細(xì)胞的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)要點(diǎn)歸納1．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程(1)原理：細(xì)胞增殖。(2)選材：一般取自幼齡動(dòng)物的器官或組織，因?yàn)檫@些組織或器官的生命力旺盛，分裂能力強(qiáng)。(3)酶處理①用酶兩次處理的目的：第一次使用的目的是使組織細(xì)胞分散開；第二次使用的目的是使細(xì)胞從瓶壁上脫離下來，便于分散后繼續(xù)培養(yǎng)。②使細(xì)胞分散開的原因：一是能保證細(xì)胞所需要的營養(yǎng)供應(yīng)；二是能保證細(xì)胞內(nèi)有害代謝產(chǎn)物的及時(shí)排出。③不能用胃蛋白酶處理：由于大多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH為7.2～7.4，而胃蛋白酶發(fā)揮作用的最適pH為2.0左右，因此不能用胃蛋白酶使細(xì)胞分散開。（4）原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)區(qū)分兩種“培養(yǎng)”的關(guān)鍵是看用胰蛋白酶處理的對(duì)象。①第一次：用胰蛋白酶對(duì)剪碎的動(dòng)物組織進(jìn)行處理，使其分散成單個(gè)細(xì)胞后進(jìn)行培養(yǎng)，為原代培養(yǎng)。②第二次：細(xì)胞培養(yǎng)過程中出現(xiàn)接觸抑制，用胰蛋白酶使其從瓶壁上脫離下來，然后，將其分散到多個(gè)培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)，為傳代培養(yǎng)。2．干細(xì)胞的種類和比較來源功能及應(yīng)用胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞)早期胚胎能夠分化成為動(dòng)物體內(nèi)的任何細(xì)胞，并進(jìn)一步形成組織、器官甚至生物個(gè)體成體干細(xì)胞成體組織或器官只能分化成特定的細(xì)胞或組織，不具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPS細(xì)胞)體外誘導(dǎo)體細(xì)胞產(chǎn)生能分化成為具有特定功能的細(xì)胞，用于治療疾病【特別提醒】1.關(guān)于細(xì)胞培養(yǎng)的提醒（1）細(xì)胞培養(yǎng)過程中的接觸抑制說明了細(xì)胞膜能進(jìn)行細(xì)胞間的信息交流。細(xì)胞膜接受信息后，細(xì)胞停止分裂，說明了細(xì)胞膜接受的信息能夠傳遞到細(xì)胞核。（2）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中有貼壁生長的特性是因?yàn)閯?dòng)物細(xì)胞膜上的糖蛋白使細(xì)胞具有黏著性。（3）癌細(xì)胞細(xì)胞膜上糖蛋白的減少，細(xì)胞的黏著性降低，在適宜的條件下可以無限增殖，因此培養(yǎng)的癌細(xì)胞無接觸抑制的現(xiàn)象，在培養(yǎng)瓶中能生長成多層。2.關(guān)于iPS細(xì)胞的提醒（1）由iPS細(xì)胞分化為各種組織細(xì)胞過程的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)。（2）從病人體內(nèi)提取成纖維細(xì)胞，將其轉(zhuǎn)化成iPS細(xì)胞，經(jīng)誘導(dǎo)后產(chǎn)生所需細(xì)胞，將所需細(xì)胞植入病人體內(nèi)，該過程無須破壞胚胎，不會(huì)產(chǎn)生倫理問題，且因iPS細(xì)胞來自病人身上，將誘導(dǎo)產(chǎn)生所需細(xì)胞移植回病人體內(nèi)后，理論上可以避免免疫排斥反應(yīng)。（3）iPS細(xì)胞是多功能干細(xì)胞，由于iPS細(xì)胞的增殖方式為有絲分裂，故能發(fā)貨發(fā)生基因突變，染色體變異。3.培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí)沒有脫分化的過程，因?yàn)楦叨确只膭?dòng)物細(xì)胞發(fā)育潛能變低，失去了發(fā)育成完整個(gè)體的能力。4.不是所有的細(xì)胞在增殖過程中都存在接觸抑制。例如：癌細(xì)胞增殖時(shí)不存在接觸抑制，所以在培養(yǎng)瓶中可以形成多層細(xì)胞1．2013年8月，世界上第一個(gè)“試管漢堡”問世，其中的“牛肉餅”是科學(xué)家通過體外培養(yǎng)牛的細(xì)胞而得到的，其基本流程如圖所示。有關(guān)說法正確的是（）A．甲處還需要胰蛋白酶的處理B．乙處利用液體懸浮培養(yǎng)獲得單細(xì)胞C．丙處需添加高壓蒸汽滅菌后的動(dòng)物血清D．丙處采用開放式培養(yǎng)以減少培養(yǎng)基pH的波動(dòng)2．下列與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)有關(guān)的敘述，不正確的是（

）A．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是細(xì)胞的全能性B．CO?的作用是維持細(xì)胞培養(yǎng)液pH的相對(duì)穩(wěn)定C．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要添加一定量的動(dòng)物血清D．可以用體外培養(yǎng)的人體細(xì)胞培養(yǎng)病毒3．牙齒再生術(shù)的難點(diǎn)在于牙髓再生和牙周組織再生?？哲娷娽t(yī)大學(xué)口腔醫(yī)院金巖教授率領(lǐng)團(tuán)隊(duì)經(jīng)歷多年潛心努力，從患者脫落的乳牙中獲取牙髓干細(xì)胞，經(jīng)過體外培養(yǎng)，將形成的干細(xì)胞聚合體植入患者牙髓腔里，使得牙齒神經(jīng)、血管再生，完全恢復(fù)牙齒原有功能。針對(duì)以上技術(shù)，下列敘述正確的是（

）A．此技術(shù)的原理與植物組織培養(yǎng)的原理相同B．此技術(shù)需要適宜的溫度（36.5℃）和pH（6.8—7.8）C．牙髓干細(xì)胞與胚胎干細(xì)胞一樣都可以分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種類型的細(xì)胞，甚至產(chǎn)生個(gè)體D．對(duì)于牙髓干細(xì)胞的培養(yǎng)過程需要經(jīng)歷原代培養(yǎng)，用胰蛋白酶處理后再用離心法收集懸液中的細(xì)胞進(jìn)行傳代4．如圖表示科學(xué)家利用牛的體細(xì)胞誘導(dǎo)出多能干細(xì)胞（iPS），進(jìn)而再分化成多種體細(xì)胞的過程。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（

）

A．過程①所取的組織可用胰蛋白酶處理成單個(gè)細(xì)胞B．過程②轉(zhuǎn)入的相關(guān)因子影響體細(xì)胞內(nèi)基因的表達(dá)C．過程③所用培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具需進(jìn)行滅菌處理D．過程④獲得的神經(jīng)細(xì)胞和肌細(xì)胞含有的基因種類不同5．從1907年哈里森首創(chuàng)動(dòng)物組織體外培養(yǎng)法，到2017年我國科學(xué)家首次培育出體細(xì)胞克隆猴，動(dòng)物細(xì)胞工程獲得了突破性的進(jìn)展。其中，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（

）A．用培養(yǎng)基培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí)，通常需要加入血清等一些天然成分B．體外培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí)，所需的氣體主要有O2和CO2C．體外培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí)，大多數(shù)細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞貼壁現(xiàn)象D．體外培養(yǎng)的癌細(xì)胞常發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象，此時(shí)應(yīng)用胰蛋白酶處理6．如圖是某動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液中活細(xì)胞和死亡細(xì)胞密度統(tǒng)計(jì)結(jié)果，敘述錯(cuò)誤的是（）A．實(shí)驗(yàn)中要控制胰蛋白酶溶液濃度和處理時(shí)間，以免損傷細(xì)胞B．培養(yǎng)液中應(yīng)適當(dāng)加入青霉素、鏈霉素等抗生素，以避免雜菌污染C．曲線bc段變化的主要原因是培養(yǎng)液中營養(yǎng)物質(zhì)不足及有害代謝產(chǎn)物積累D．培養(yǎng)至第6天時(shí)，新產(chǎn)生的細(xì)胞數(shù)等于死亡細(xì)胞數(shù)7．研究人員從動(dòng)物體內(nèi)取出正常結(jié)腸組織和結(jié)腸瘤，經(jīng)酶處理后制成單細(xì)胞懸浮液，然后分瓶并在適宜的相同條件下進(jìn)行培養(yǎng)。在上述培養(yǎng)過程中均會(huì)發(fā)生的現(xiàn)象是（）A．細(xì)胞因接觸抑制而失去分裂能力B．細(xì)胞出現(xiàn)貼壁生長現(xiàn)象C．部分細(xì)胞核型發(fā)生改變并逐漸凋亡D．細(xì)胞增殖并只能形成一層細(xì)胞8．無菌操作在微生物培養(yǎng)、植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中都至關(guān)重要。下列敘述正確的是（

）A．生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)中所有器皿、培養(yǎng)基及生物材料均需進(jìn)行滅菌處理B．酒精能使細(xì)胞中的蛋白質(zhì)變性失活，95%的酒精用來消毒效果最好C．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基配置時(shí)，加入抗生素即可達(dá)到無菌培養(yǎng)的目的D．易分解的活性物質(zhì)過濾除菌后，在無菌條件下加入滅菌的培養(yǎng)基中9．為了檢測(cè)藥物X、Y和Z的抗癌效果，采用細(xì)胞培養(yǎng)板添加溶于DMSO溶劑的三種藥物培養(yǎng)肺癌細(xì)胞，培養(yǎng)過程及結(jié)果如圖所示。下列說法正確的是（

）

A．細(xì)胞培養(yǎng)液中通常需要加入一定量的血清和抗生素，防止病毒污染B．對(duì)照組中應(yīng)加入等體積的生理鹽水在CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)肺癌細(xì)胞C．起始肺癌細(xì)胞數(shù)量應(yīng)保持一致，計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)用胃蛋白酶處理貼壁細(xì)胞D．根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，藥物X的抗癌效果比Y好，藥物Z沒有抗癌作用10．中國科學(xué)家用一種簡單的化學(xué)物質(zhì)誘導(dǎo)方法，將成年鼠皮膚細(xì)胞制成多潛能干細(xì)胞，并用這種細(xì)胞培育出多只健康的小鼠。這是一項(xiàng)革命性的研究成果，是比克隆羊“多莉”更徹底更方便的克隆技術(shù)。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．皮膚細(xì)胞制成多潛能干細(xì)胞的過程，類似于植物組織培養(yǎng)中的脫分化B．多潛能干細(xì)胞培育出多只小鼠的過程，不需要用到胚胎移植技術(shù)C．多潛能干細(xì)胞與皮膚細(xì)胞的基因型相同，化學(xué)物質(zhì)的作用是誘導(dǎo)基因表達(dá)D．此項(xiàng)技術(shù)可用自身細(xì)胞實(shí)現(xiàn)器官克隆，避免外來器官移植發(fā)生免疫排斥11．實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)小鼠的體細(xì)胞中轉(zhuǎn)入四種基因就可以誘導(dǎo)產(chǎn)生一種與胚胎干細(xì)胞功能類似的誘導(dǎo)多能干（iPS）細(xì)胞?？茖W(xué)家將獲得的iPS細(xì)胞分化為T細(xì)胞以期用于傳染病的治療。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（

）

A．誘導(dǎo)iPS細(xì)胞的過程細(xì)胞發(fā)生形態(tài)、結(jié)構(gòu)的改變B．誘導(dǎo)iPS細(xì)胞中含有本物種生長發(fā)育所需的遺傳信息C．研制iPS細(xì)胞的原理類似于植物細(xì)胞的脫分化與再分化D．KLF4基因能夠抑制細(xì)胞凋亡和衰老，可使細(xì)胞無限增殖12．（多選）微載體培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞技術(shù)是目前公認(rèn)的最有發(fā)展前途的一種動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)，其兼具懸浮培養(yǎng)和貼壁培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)。培養(yǎng)的細(xì)胞貼附在微載體表面，可以在較短時(shí)間內(nèi)得到大量的細(xì)胞，細(xì)胞傳代只需要添加新的微載體，基本上可避免細(xì)胞在胰蛋白酶消化過程中受到的損傷。下列敘述正確的是（

）A．動(dòng)物細(xì)胞必須貼壁才可以在培養(yǎng)液中生長B．培養(yǎng)液中添加微載體可以使細(xì)胞在懸浮狀態(tài)下培養(yǎng)C．培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí)應(yīng)保證無菌、無毒的環(huán)境及適宜的溫度、pH等條件D．在培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí)提供的氣體環(huán)境應(yīng)為95%的空氣和5%的CO213．（多選）敲除大鼠心肌細(xì)胞H的T基因，對(duì)照組與敲除組的H細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中貼壁生長，檢測(cè)兩組細(xì)胞的數(shù)量變化，結(jié)果如圖所示。下列相關(guān)敘述合理的是（

）A．體外培養(yǎng)H細(xì)胞需要添加動(dòng)物血清B．可用胰蛋白酶處理H細(xì)胞便于計(jì)數(shù)C．敲除T基因的H細(xì)胞失去了分裂能力D．提高T基因表達(dá)可能促進(jìn)心臟損傷修復(fù)14．CAR-T細(xì)胞療法又名嵌合抗原受體T細(xì)胞療法，是近年來推出的新型精準(zhǔn)靶向治療腫瘤細(xì)胞技術(shù)。CAR-T細(xì)胞治療的基本過程：從癌癥患者身上取出免疫的T細(xì)胞，通過轉(zhuǎn)染技術(shù)給T細(xì)胞加入一個(gè)能快速識(shí)別腫瘤細(xì)胞并能同時(shí)激活T細(xì)胞殺死腫瘤細(xì)胞的嵌合抗體，制成CAR-T細(xì)胞，再輸回病人體內(nèi)，其制備過程如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：

(1)T細(xì)胞是由增殖分化而來的，先天性胸腺發(fā)育不良的患者幾乎沒有特異性免疫能力，原因是。(2)圖中T細(xì)胞在體外培養(yǎng)需要滿足以下條件：加入血清的液體培養(yǎng)基；培養(yǎng)基必須保持無菌、的環(huán)境；適宜的溫度、pH和；含有95%的空氣和5%CO2的混合氣體。(3)CAR-T細(xì)胞識(shí)別癌細(xì)胞表面的某些特定結(jié)構(gòu)，攻擊并清除癌細(xì)胞，達(dá)到治療癌癥的目的。分泌抗體的漿細(xì)胞由增殖分化而成。把免疫的Т細(xì)胞制成CAR-T細(xì)胞的目的是。(4)健康人的免疫系統(tǒng)對(duì)腫瘤細(xì)胞具有功能。CAR-T細(xì)胞輸回患者體內(nèi)后，患者并沒有發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，原因是。15．下圖為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中細(xì)胞增殖情況的變化曲線，圖中O、A、B、C、D、E是曲線上的點(diǎn)，其中B、E兩點(diǎn)表示經(jīng)篩選、分裝后繼續(xù)培養(yǎng)。據(jù)圖回答問題：(1)通常將動(dòng)物組織消化后的初次培養(yǎng)稱為，在圖中是段（填字母）。(2)在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，將細(xì)胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)按其種類和所需數(shù)量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基稱為培養(yǎng)基。通常在培養(yǎng)基中還需要加入適量血清、血漿等一些天然成分，血清、血漿作為天然培養(yǎng)基的作用是。(3)進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，選用液體培養(yǎng)基的pH的范圍是，若將組織塊剪碎，加入胰蛋白酶，可使其分散成單個(gè)細(xì)胞，為什么不能改用胃蛋白酶？。16．干細(xì)胞的應(yīng)用前景吸引眾多科學(xué)家投入到相關(guān)研究中。請(qǐng)回答下列問題：(1)人體干細(xì)胞主要包括成體干細(xì)胞和。(2)科學(xué)家將Oct3/4、Sox2、Klf4和c﹣Myc基因通過逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)入小鼠成纖維細(xì)胞中，然后在特定培養(yǎng)基中培養(yǎng)可獲得iPS細(xì)胞。①在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)除了提供充足的營養(yǎng)和所需氣體環(huán)境外，還需滿足的條件有（答兩點(diǎn)內(nèi)容）。②實(shí)驗(yàn)中逆轉(zhuǎn)錄病毒的作用是。③已知c﹣Myc是原癌基因，研究表明將誘導(dǎo)iPS細(xì)胞獲得的神經(jīng)干細(xì)胞移入小鼠體內(nèi)會(huì)增加發(fā)生惡性腫瘤的風(fēng)險(xiǎn)，推測(cè)可能的原因是細(xì)胞中原癌基因?qū)е孪鄳?yīng)蛋白質(zhì)活性過強(qiáng)。當(dāng)實(shí)驗(yàn)對(duì)象是人類成纖維細(xì)胞時(shí)，為提高應(yīng)用iPS細(xì)胞的安全性，可通過設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)判斷c﹣Myc在誘導(dǎo)獲得iPS細(xì)胞的過程中是否必需，思路如下：將導(dǎo)入的小鼠成纖維細(xì)胞，與導(dǎo)入的小鼠成纖維細(xì)胞的誘導(dǎo)情況進(jìn)行比較。2.2.1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)Part1目標(biāo)任務(wù)：對(duì)接課標(biāo)，了解目標(biāo)Part1目標(biāo)任務(wù)：對(duì)接課標(biāo)，了解目標(biāo)Part2預(yù)習(xí)導(dǎo)學(xué)：自主梳理+預(yù)習(xí)檢測(cè)，掌握基本知識(shí)點(diǎn)Part3探究提升：代入情景+典例精講，深入學(xué)習(xí)知識(shí)要點(diǎn)iPS細(xì)胞的培養(yǎng)和利用Part4網(wǎng)絡(luò)梳理：建立知識(shí)間的聯(lián)系Part5強(qiáng)化訓(xùn)練：必刷經(jīng)典試題，能力提升內(nèi)容導(dǎo)航新課程標(biāo)準(zhǔn)學(xué)習(xí)目標(biāo)1.闡明動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是從動(dòng)物體獲得相關(guān)組織、分散成單個(gè)細(xì)胞后，在適宜的培養(yǎng)條件下讓細(xì)胞生長和增殖的過程。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)。2．簡述干細(xì)胞在生物醫(yī)學(xué)工程中有廣泛的應(yīng)用價(jià)值。闡明動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件和過程。闡述干細(xì)胞在生物醫(yī)學(xué)工程中有廣泛的應(yīng)用價(jià)值。闡明利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)制備單克隆抗體的過程，認(rèn)同單克隆抗體在臨床上有重要的應(yīng)用價(jià)值。闡明利用動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆動(dòng)物的過程和該技術(shù)的應(yīng)用前景。自主梳理動(dòng)物細(xì)胞工程常用的技術(shù)包括動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合和動(dòng)物細(xì)胞核移植等，其中動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是指從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個(gè)細(xì)胞，然后放在適宜的培養(yǎng)條件下，讓這些細(xì)胞生長和增殖的技術(shù)。一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件（1）營養(yǎng)：所用培養(yǎng)從物理性質(zhì)劃分類型為液體培養(yǎng)基，從成分上劃分類型為合成培養(yǎng)基。通常需加入血清等天然成分。（2）無菌、無毒的環(huán)境①對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行滅菌處理以及在無菌環(huán)境下進(jìn)行操作。②定期更換培養(yǎng)液，以便清除代謝物，防止細(xì)菌代謝物積累對(duì)細(xì)胞自身造成傷害。（3）溫度、pH和滲透壓①溫度：多以36.5±0.5℃為宜②pH：7.2-7.4③滲透壓：適宜（4）氣體環(huán)境①氧氣是細(xì)胞新陳代謝必須的，二氧化碳的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH②在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，并將他們置于含有95%空氣和5%CO2的混合氣體的CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程取動(dòng)物組織塊（動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織）→剪碎→用機(jī)械的方法或用胰蛋白酶、膠原蛋白酶處理一段時(shí)間，將組織分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)分瓶培養(yǎng)。（1）體外培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞可以分為兩大類：一類細(xì)胞能夠懸浮在培養(yǎng)液中生長增殖。另一類則需要貼附于某些基質(zhì)表面才能生長增殖，大多數(shù)細(xì)胞屬于這種類型。（2）細(xì)胞貼壁：將細(xì)胞懸液放入培養(yǎng)瓶內(nèi)，置于適宜環(huán)境中培養(yǎng)，懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在培養(yǎng)瓶的瓶壁上，稱為細(xì)胞貼壁。（3）接觸抑制：當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞停止分裂增殖的現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制。（4）原代培養(yǎng)：指動(dòng)物組織經(jīng)處理后的初次培養(yǎng)。（分瓶之前的培養(yǎng)）（5）傳代培養(yǎng)：指分瓶后的細(xì)胞培養(yǎng)。（6）在進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí)，懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞直接用離心法收集；貼壁細(xì)胞需要重新用胰蛋白酶等處理，使之分散成單個(gè)細(xì)胞，然后再用離心法收集。三、干細(xì)胞培養(yǎng)及其應(yīng)用1.干細(xì)胞的概念：動(dòng)物和人體內(nèi)仍保留的少數(shù)具有分裂和分化能力的細(xì)胞。在一定條件下，干細(xì)胞可以分化成其他類型的細(xì)胞。2.干細(xì)胞的分布：存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中。3.干細(xì)胞的分類：包括胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞等。（1）胚胎干細(xì)胞（簡稱ES細(xì)胞）①分布：存在于早期胚胎中。②特點(diǎn)：具有分化為成年動(dòng)物體內(nèi)的任何一種類型的細(xì)胞，并進(jìn)一步形成機(jī)體的所有組織和器官甚至個(gè)體的潛能。③局限性：胚胎干細(xì)胞必須從胚胎中獲取，涉及倫理問題，因而限制了在醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用。④應(yīng)用實(shí)例：ES細(xì)胞在體外分化成心肌細(xì)胞、神經(jīng)元細(xì)胞和造血干細(xì)胞等。（2）成體干細(xì)胞①分布：存在于成體組織或器官內(nèi)中。②舉例：骨髓中的造血干細(xì)胞、神經(jīng)系統(tǒng)中的神經(jīng)干細(xì)胞、睪丸中的精原干細(xì)胞等。③特點(diǎn)：一般認(rèn)為，成體干細(xì)胞具有組織特異性，只能分化成特定的細(xì)胞或組織，不具有發(fā)育成完整個(gè)體的能力。④發(fā)現(xiàn)最早、研究最多的、應(yīng)用最成熟的實(shí)例：造血干細(xì)胞，主要存在于成體的骨髓、外周血、臍帶血中。（3）誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞）①概念：通過體外誘導(dǎo)小鼠成纖維細(xì)胞，獲得了類似胚胎干細(xì)胞的一種細(xì)胞。②優(yōu)點(diǎn)：誘導(dǎo)過程無須破壞胚胎。iPS細(xì)胞可來源于病人自身的體細(xì)胞，將它移植回病人體內(nèi)后，理論上可以避免免疫排斥反應(yīng)。4.干細(xì)胞的應(yīng)用（1）應(yīng)用原理：有著自我更新能力及分化潛能的干細(xì)胞，與組織、器官的發(fā)育、再生和修復(fù)等密切相關(guān)。（2）應(yīng)用實(shí)例：造血干細(xì)胞：治療白血病及一些惡性腫瘤放療或化療后引起的造血系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)功能障礙等疾病。神經(jīng)干細(xì)胞：治療神經(jīng)組織損傷和神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾?。ㄈ缗两鹕　柎暮Ｄ〉龋＃?）面臨的問題：存在導(dǎo)致腫瘤發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)。（4）應(yīng)用展望：干細(xì)胞將在再生醫(yī)學(xué)、藥物安全性與有效性檢測(cè)等領(lǐng)域發(fā)揮大作用。預(yù)習(xí)檢測(cè)（限時(shí)10分鐘）1．如圖為科學(xué)家制備誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPS細(xì)胞)的操作流程圖。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．該項(xiàng)技術(shù)將來有可能用于再生醫(yī)學(xué)、藥物安全性與有效性檢測(cè)等領(lǐng)域B．借助載體將特定基因?qū)爰?xì)胞中可以制備iPS細(xì)胞C．成纖維細(xì)胞可以轉(zhuǎn)化為iPS細(xì)胞，已分化的B細(xì)胞、T細(xì)胞也可以轉(zhuǎn)化為iPS細(xì)胞D．誘導(dǎo)多能干細(xì)胞應(yīng)用前景不如胚胎干細(xì)胞【答案】D【詳解】A、誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPS細(xì)胞)是類似胚胎干細(xì)胞的一種細(xì)胞，該項(xiàng)技術(shù)將來有可能用于再生醫(yī)學(xué)、藥物安全性與有效性檢測(cè)等領(lǐng)域，A正確；B、借助載體將特定基因?qū)爰?xì)胞中可以制備iPS細(xì)胞，也可以直接將特定蛋白導(dǎo)入細(xì)胞或用小分子化合物誘導(dǎo)形成iPS細(xì)胞，B正確；C、成纖維細(xì)胞可以轉(zhuǎn)化為iPS細(xì)胞，已分化的B細(xì)胞、T細(xì)胞也可以轉(zhuǎn)化為iPS細(xì)胞，C正確；D、誘導(dǎo)多能干細(xì)胞無需破壞胚胎，理論上可以避免免疫排斥反應(yīng)，科學(xué)家普遍認(rèn)為iPS細(xì)胞的應(yīng)用前景優(yōu)于胚胎干細(xì)胞，D錯(cuò)誤。故選D。2．科學(xué)家通過體外誘導(dǎo)小鼠成纖維細(xì)胞形成iPS細(xì)胞，iPS細(xì)胞可進(jìn)一步分化為神經(jīng)元細(xì)胞、胰島細(xì)胞、肝細(xì)胞等組織細(xì)胞。下列說法錯(cuò)誤的是（

）A．iPS細(xì)胞是誘導(dǎo)多能干細(xì)胞，在誘導(dǎo)過程中不需要破壞胚胎B．誘導(dǎo)過程中需在培養(yǎng)液添加適量的干擾素，以防止雜菌污染C．iPS細(xì)胞分化為神經(jīng)元細(xì)胞的過程并未體現(xiàn)出細(xì)胞的全能性D．對(duì)iPS細(xì)胞進(jìn)行定向誘導(dǎo)獲得的胰島細(xì)胞可用于治療某些疾病【答案】B【詳解】A、科學(xué)家通過體外誘導(dǎo)小鼠成纖維細(xì)胞，誘導(dǎo)過程無需破壞胚胎，獲得了類似胚胎干細(xì)胞的一種細(xì)胞，將它稱為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞，簡稱iPS細(xì)胞，A正確；B、誘導(dǎo)過程中需在培養(yǎng)液添加適量的抗生素，以防止雜菌污染，B錯(cuò)誤；C、成纖維細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)分化為iPS細(xì)胞，并未形成完整個(gè)體，也未形成各種細(xì)胞，沒有體現(xiàn)了細(xì)胞全能性，C正確；D、iPS細(xì)胞是多能干細(xì)胞，可以進(jìn)行定向誘導(dǎo)，使特定基因表達(dá)，分化成胰島細(xì)胞，可用于治療某些疾病，D正確。故選B。3．下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，正確的是（

）A．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)一般使用固體培養(yǎng)基B．培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具要進(jìn)行消毒處理C．定期更換培養(yǎng)液可以防止代謝產(chǎn)物的積累對(duì)細(xì)胞造成的危害D．細(xì)胞培養(yǎng)液中通常含有維生素、激素、糖等多種能源物質(zhì)【答案】C【詳解】A、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)一般使用液體培養(yǎng)基，能大量增殖，A錯(cuò)誤；B、培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具要滅菌處理，消毒不能起到徹底殺菌的作用，B錯(cuò)誤;C、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生代謝產(chǎn)物，包括有害物質(zhì)，故定期更換培養(yǎng)液可以防止代謝產(chǎn)物的積累對(duì)細(xì)胞造成危害，C正確；D、維生素既不是細(xì)胞的結(jié)構(gòu)物質(zhì)，也不能提供能量，只是對(duì)細(xì)胞的生長和代謝起到調(diào)節(jié)作用；激素是信息分子，對(duì)細(xì)胞的生長只具有調(diào)節(jié)作用，兩者都不是能源物質(zhì)，D錯(cuò)誤。故選C。4．科學(xué)家將4個(gè)關(guān)鍵基因移植入已分化的肌肉細(xì)胞中并表達(dá)，使這個(gè)細(xì)胞成為多能干細(xì)胞(iPS細(xì)胞)。下圖為該實(shí)驗(yàn)示意圖。下列有關(guān)敘述正確的是（）

A．應(yīng)用該技術(shù)可大大降低免疫排斥反應(yīng)，提高器官移植的成功率B．iPS細(xì)胞所攜帶的遺傳信息與肌肉細(xì)胞相同C．關(guān)鍵基因表達(dá)使細(xì)胞功能趨向?qū)ｉT化，降低了細(xì)胞的分化程度D．圖示過程體現(xiàn)了iPS細(xì)胞的全能性【答案】A【詳解】A、用iPS細(xì)胞誘導(dǎo)分化成需要的器官后進(jìn)行自體移植，沒有免疫排斥反應(yīng)，故提高了器官移植的成功率，A正確；B、iPS細(xì)胞中多了4個(gè)關(guān)鍵基因，故iPS細(xì)胞所帶遺傳信息與肌肉細(xì)胞不同，B錯(cuò)誤；C、圖中關(guān)鍵基因表達(dá)形成iPS細(xì)胞，沒有使細(xì)胞功能趨向?qū)ｉT化，C錯(cuò)誤；D、圖示過程只是分化形成幾種細(xì)胞，沒有分化出各種細(xì)胞或者形成個(gè)體，故沒有體現(xiàn)iPS細(xì)胞的全能性，D錯(cuò)誤。故選A。5．下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的敘述，錯(cuò)誤的是（）A．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)都需要無菌條件B．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)過程中都要用到胰蛋白酶C．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)可獲得大量細(xì)胞，莖尖組織培養(yǎng)可獲得脫毒植株D．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的理論基礎(chǔ)不同【答案】B【詳解】A、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)都需要無菌、無毒條件，以防止雜菌污染，保證動(dòng)植物細(xì)胞正常生長和增殖，A正確；B、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要用胰蛋白酶處理使細(xì)胞分散，但植物組織培養(yǎng)過程不需要胰蛋白酶處理，B錯(cuò)誤；C、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)通過細(xì)胞增殖獲得大量細(xì)胞，植物的莖尖幾乎不含病毒，經(jīng)植物組織培養(yǎng)可獲得脫毒植株，C正確；D、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的理論基礎(chǔ)是細(xì)胞增殖，但植物組織培養(yǎng)的理論基礎(chǔ)是植物細(xì)胞一般具有全能性，D正確。故選B。6．對(duì)某種動(dòng)物的肝腫瘤細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．在利用肝組織塊制備細(xì)胞懸液時(shí)，可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理B．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行，CO2的作用是刺激細(xì)胞呼吸C．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中必須保證培養(yǎng)環(huán)境是無菌、無毒的D．在合成培養(yǎng)基中，通常需加入血清等天然成分【答案】B【詳解】A、在利用肝組織塊制備細(xì)胞懸液時(shí)，可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，以分解組織細(xì)胞間的蛋白質(zhì)，得到單個(gè)細(xì)胞，A正確；B、細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行，CO2的作用是維持培養(yǎng)液的pH，B錯(cuò)誤；C、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中必須保證培養(yǎng)環(huán)境是無菌、無毒的，C正確；D、合成培養(yǎng)基的成分包括糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等，通常需加入血清、血漿等天然成分，D正確。故選B。7．治療大面積燒傷時(shí)，可通過細(xì)胞培養(yǎng)構(gòu)建“人造皮膚”進(jìn)行移植。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．使用燒傷病人健康皮膚細(xì)胞可培養(yǎng)出不產(chǎn)生免疫排斥反應(yīng)的“皮膚”B．用胰蛋白酶處理皮膚組織，目的是使它分散成單個(gè)細(xì)胞C．貼壁生長的皮膚細(xì)胞會(huì)發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象D．傳代培養(yǎng)時(shí)，貼壁細(xì)胞直接用離心法收集，然后再分瓶培養(yǎng)【答案】D【詳解】A、用于人造皮膚的細(xì)胞取自患者本身而非其他個(gè)體，可以有效降低皮膚移植后的排斥反應(yīng)，A正確；B、組織中細(xì)胞間的主要成分為蛋白質(zhì)，可以用胰蛋白酶處理細(xì)胞組織，以便得到單個(gè)細(xì)胞，但是處理時(shí)間不宜過長，B正確；CD、貼壁生長的皮膚細(xì)胞會(huì)發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象，當(dāng)貼壁培養(yǎng)細(xì)胞出現(xiàn)接觸抑制時(shí)，需要用胰蛋白酶處理，將接觸的細(xì)胞分散為單個(gè)細(xì)胞，才可用離心法收集，之后再進(jìn)行分瓶進(jìn)行傳代培養(yǎng)，C正確，D錯(cuò)誤。故選D。8．現(xiàn)在有一個(gè)嬰兒在出生后醫(yī)院為他保留了臍血，在他以后生長發(fā)育過程中如果出現(xiàn)了某種難治療的疾病，就可以通過血液中的干細(xì)胞來為他治病，關(guān)于這個(gè)實(shí)例說法正確的是（）A．用干細(xì)胞培育出人體需要的器官用來移植治病，需要激發(fā)細(xì)胞的全能性B．用臍血中的干細(xì)胞能夠治療這個(gè)孩子所有的疾病C．如果要移植用他的干細(xì)胞培育出的器官，需要用到細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)D．如果要移植用他的干細(xì)胞培育出的器官，應(yīng)該長期給他使用免疫抑制藥物【答案】C【詳解】A、用干細(xì)胞培育出人體需要的器官用來移植治療，只要誘導(dǎo)細(xì)胞分化成該組織、器官即可，不需激發(fā)其所有全能性，A錯(cuò)誤；B、臍血中含有大量未成熟的造血干細(xì)胞，將臍血細(xì)胞移植，對(duì)白血病、再生障礙性貧血等惡性血液病的治療具有療效，但不是所有疾病都能治療(如流行性疾病)，B錯(cuò)誤；C、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)，如果要移植用他的干細(xì)胞培育出的器官，需要用到細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，C正確；D、臍血移植屬自體移植，基本不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，不需長期給他使用免疫抑制藥物，D錯(cuò)誤。故選C。9．某科研團(tuán)隊(duì)利用7個(gè)小分子化合物的組合處理小鼠體細(xì)胞。使其重編程為多潛能干細(xì)胞（稱為CiPS細(xì)胞），使得轉(zhuǎn)入外源基因的方法不再是細(xì)胞編程所必需的。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（

）A．這一過程類似于植物細(xì)胞的脫分化過程B．小鼠的體細(xì)胞誘導(dǎo)成CiPS細(xì)胞后，細(xì)胞周期會(huì)變短C．與小鼠的體細(xì)胞相比，誘導(dǎo)形成的CiPS細(xì)胞全能性較低D．小鼠體細(xì)胞誘導(dǎo)成CiPS細(xì)胞是形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生穩(wěn)定性差異的過程【答案】C【詳解】A、已高度分化的小鼠體細(xì)胞，使其重編程為具有分裂、分化能力的多潛能干細(xì)胞CiPS細(xì)胞，這一過程類似于植物細(xì)胞的脫分化過程，A正確；B、小鼠的體細(xì)胞誘導(dǎo)成CiPS細(xì)胞后，細(xì)胞增殖能力增強(qiáng)，細(xì)胞周期會(huì)變短，B正確；C、與小鼠的體細(xì)胞相比，誘導(dǎo)形成的CiPS具有分裂、分化能力，細(xì)胞全能性較高，C錯(cuò)誤；D、小鼠體細(xì)胞誘導(dǎo)成CiPS細(xì)胞的過程類似于植物細(xì)胞的脫分化過程，該過程發(fā)生基因選擇性表達(dá)，其形態(tài)、結(jié)構(gòu)、功能發(fā)生了穩(wěn)定性差異，D正確。故選C。10．干眼癥是由于淚液分泌減少導(dǎo)致的眼睛干澀病癥。將有關(guān)基因?qū)胍逊只捏w細(xì)胞獲得誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞），培養(yǎng)iPS細(xì)胞得到的眼結(jié)膜組織可分泌淚液成分“粘液素”，有望治療干眼癥。下列說法不正確的是（

）A．導(dǎo)入的基因具有促使體細(xì)胞恢復(fù)分裂能力的作用B．利用iPS細(xì)胞獲得眼結(jié)膜組織時(shí)，應(yīng)加入分化抑制因子C．利用iPS細(xì)胞治療人類疾病理論上可避免免疫排斥反應(yīng)D．iPS細(xì)胞可在一定程度上避免胚胎干細(xì)胞涉及的倫理問題【答案】B【詳解】A、根據(jù)題文，導(dǎo)入的基因能促使已分化的體細(xì)胞成為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞），體細(xì)胞無分裂能力，而干細(xì)胞是一類有分裂能力的細(xì)胞，故導(dǎo)入的基因能促使已分化的體細(xì)胞恢復(fù)分裂能力，A正確；B、iPS可分化為多種細(xì)胞，加入分化誘導(dǎo)因子才能獲得相應(yīng)的組織或器官，B錯(cuò)誤；C、iPS細(xì)胞可以來自于病人自身，誘導(dǎo)成的組織進(jìn)行移植，可以避免免疫排斥反應(yīng)，C正確；D、iPS技術(shù)不使用胚胎細(xì)胞或卵細(xì)胞，只需對(duì)體細(xì)胞進(jìn)行操作及適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)即可，沒有倫理學(xué)的問題，D正確。故選B。?環(huán)節(jié)iPS細(xì)胞的培養(yǎng)和利用【情景材料】在治療大面積燒傷時(shí)，通常采用的方法是取燒傷病人的健康皮膚進(jìn)行自體移植。但對(duì)這樣的病人來說，自體健康皮膚非常有限，使用他人皮膚來源又不足，而且還會(huì)產(chǎn)生免疫排斥反應(yīng)。那么，怎樣才能獲得大量的自體健康皮膚？能不能用自體皮膚的單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)出可供移植的皮膚？下圖為iPS細(xì)胞的培養(yǎng)和利用過程示意圖，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題。【問題探究】1．由iPS細(xì)胞分化為各種組織細(xì)胞過程的實(shí)質(zhì)是什么？2．從病人體內(nèi)提取成纖維細(xì)胞，將其轉(zhuǎn)化成iPS細(xì)胞，經(jīng)誘導(dǎo)后產(chǎn)生所需細(xì)胞，將所需細(xì)胞植入病人體內(nèi)，這種技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)有哪些？3．iPS細(xì)胞是多能干細(xì)胞，還是專能干細(xì)胞？在分裂過程中會(huì)發(fā)生哪些變異？4．誘導(dǎo)多能干細(xì)胞用于治療人類的某些頑癥的原理是什么？誘導(dǎo)多能干細(xì)胞為什么可以解決器官移植時(shí)供體器官不足和器官移植后免疫排斥的問題？【答案】1．基因的選擇性表達(dá)。2．iPS細(xì)胞誘導(dǎo)過程無須破壞胚胎，不會(huì)產(chǎn)生倫理問題，且因iPS細(xì)胞來自病人自身，將誘導(dǎo)產(chǎn)生的所需細(xì)胞移植回病人體內(nèi)后，理論上可以避免免疫排斥反應(yīng)。3．多能干細(xì)胞。由于細(xì)胞增殖方式為有絲分裂，故能發(fā)生基因突變、染色體變異。4．誘導(dǎo)多能干細(xì)胞具有發(fā)育的全能性，可以被誘導(dǎo)分化形成新的組織細(xì)胞，經(jīng)移植后可使壞死或退化部位得以修復(fù)并恢復(fù)正常功能。5．通過干細(xì)胞體外誘導(dǎo)分化，可以培育出人造器官，從而解決供體器官不足的問題。另一方面，由于是自身細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)分化形成的，所以無免疫排斥反應(yīng)。典例精講【例1】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)。下列有關(guān)敘述正確的是（

）A．一般選擇幼齡動(dòng)物的細(xì)胞培養(yǎng)，原因是其細(xì)胞分化程度低B．進(jìn)行細(xì)胞傳代培養(yǎng)時(shí)，細(xì)胞每傳一代，細(xì)胞數(shù)目增加一倍C．傳代培養(yǎng)前需用胰蛋白酶處理貼壁細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液D．為保證無菌的環(huán)境，需要定期更換培養(yǎng)液，清除代謝物【答案】C【詳解】A、選用幼齡動(dòng)物的器官或組織進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，是因?yàn)橛g動(dòng)物的器官或組織的分裂能力強(qiáng)，A錯(cuò)誤；B、細(xì)胞培養(yǎng)中每更換一次培養(yǎng)瓶算是傳一代，并不是細(xì)胞分裂一次，B錯(cuò)誤；C、貼壁細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)相互抑制現(xiàn)象，需用胰蛋白酶處理進(jìn)行傳代培養(yǎng)，C正確；D、為保證無菌、無毒的環(huán)境，需要對(duì)培養(yǎng)液和培養(yǎng)用具進(jìn)行滅菌處理及在無菌條件下操作，而不是更換培養(yǎng)液，定期更換培養(yǎng)液,其目的是便于清除代謝物,防止代謝物積累對(duì)細(xì)胞的毒害，D錯(cuò)誤。故選C。【例2】目前肺類器官主要有兩種培養(yǎng)方式：其一是誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPS細(xì)胞)生成；其二是將肺上皮干細(xì)胞與篩選后的體細(xì)胞進(jìn)行共培養(yǎng)(過程如圖所示)。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．iPS細(xì)胞具有組織特異性，只能分化成特定的細(xì)胞或組織B．肺類裝配體的培養(yǎng)需要適宜的營養(yǎng)、溫度、pH等基本條件C．培養(yǎng)肺類裝配體時(shí)需定期更換培養(yǎng)液以便清除代謝廢物等D．肺類器官A和B細(xì)胞中的DNA相同，RNA和蛋白質(zhì)存在差異【答案】A【詳解】A、成體干細(xì)胞具有組織特異性，只能分化成特定的細(xì)胞或組織，iPS細(xì)胞類似胚胎干細(xì)胞，可以分化成各種細(xì)胞或組織，A錯(cuò)誤；B、在體外培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞，需要滿足相應(yīng)的條件，所以肺類裝配體的培養(yǎng)需要適宜的營養(yǎng)、溫度、pH等基本條件，B正確；C、培養(yǎng)肺類裝配體時(shí)需定期更換培養(yǎng)液以便清除代謝廢物等，防止細(xì)胞代謝物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害，C正確；D、由題圖可知，肺類器官A和B細(xì)胞是由肺上皮干細(xì)胞分化而來，細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)，所以肺類器官A和B細(xì)胞中的DNA相同，RNA和蛋白質(zhì)存在差異，D正確。故選A?！纠?】下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，不正確的是（）A．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)可用于檢測(cè)有毒物質(zhì)和獲得大量自身健康細(xì)胞B．從細(xì)胞株中分離出特殊性質(zhì)的細(xì)胞經(jīng)過培養(yǎng)獲得細(xì)胞系C．培養(yǎng)保留接觸抑制的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成單層細(xì)胞D．能連續(xù)傳代的細(xì)胞系是發(fā)生轉(zhuǎn)化的細(xì)胞系，但不一定有異倍體核型、接觸抑制【答案】B【詳解】A、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理即是細(xì)胞增殖，可獲得大量自身健康細(xì)胞，用于檢測(cè)有毒物質(zhì)等，A正確；B、通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的培養(yǎng)物稱為細(xì)胞株，細(xì)胞株是具有特殊性質(zhì)的細(xì)胞系，B錯(cuò)誤；C、由于接觸抑制，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)只能形成單層細(xì)胞，C正確；D、連續(xù)細(xì)胞系是指發(fā)生了轉(zhuǎn)化的細(xì)胞系，有的獲得了不死性（癌變），但保留接觸抑制現(xiàn)象，大多數(shù)具有異倍體核型，D正確。故選B?！纠?】如圖為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的基本過程，以下敘述錯(cuò)誤的是（

）A．a(chǎn)中放置的一般是幼齡動(dòng)物的器官或組織，原因是其細(xì)胞分裂能力強(qiáng)B．c過程屬于原代培養(yǎng)，d過程屬于傳代培養(yǎng)C．c、d瓶中的培養(yǎng)液需要加入血清等天然成分D．將培養(yǎng)的細(xì)胞置于95%O2和5%CO2混合氣體的CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)【答案】D【詳解】A、a中放置的一般是幼齡動(dòng)物的器官或組織，原因是其細(xì)胞分裂能力強(qiáng)，因而可以作為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的材料，A正確；B、細(xì)胞培養(yǎng)過程中沒有分瓶之前的培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)，分瓶之后的培養(yǎng)稱為傳代培養(yǎng)，即c過程屬于原代培養(yǎng)，d過程屬于傳代培養(yǎng)，B正確；C、c、d瓶中的培養(yǎng)液屬于合成培養(yǎng)基，通常還需要加入血清等天然成分，因?yàn)槟壳皩?duì)于動(dòng)物細(xì)胞增殖所需要的營養(yǎng)尚不完全清楚，C正確；D、將培養(yǎng)的細(xì)胞置于95%空氣和5%CO2混合氣體的CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)，其中二氧化碳起到了維持pH相對(duì)穩(wěn)定的作用，D錯(cuò)誤。故選D。【例5】研究人員利用逆轉(zhuǎn)錄病毒將Oct-3/4等四個(gè)關(guān)鍵基因?qū)肫つw纖維母細(xì)胞并表達(dá)，獲得了與胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）極為相似的誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞），其在體外可分化成神經(jīng)細(xì)胞、心血管細(xì)胞等組織細(xì)胞。相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A．?dāng)y帶關(guān)鍵基因的逆轉(zhuǎn)錄病毒以胞吞的方式進(jìn)入皮膚纖維母細(xì)胞B．iPS細(xì)胞與ES細(xì)胞一樣具有細(xì)胞周期和組織特異性C．利用iPS細(xì)胞對(duì)自身受損器官進(jìn)行修復(fù)，可以避免免疫排斥反應(yīng)D．獲得iPS細(xì)胞過程無須破壞胚胎，可以避免獲取ES細(xì)胞涉及的倫理問題【答案】B【詳解】A、有些逆轉(zhuǎn)錄病毒是存在包膜的，如HIV，其侵入細(xì)胞的方式是膜的融合，A正確；B、iPS細(xì)胞與ES細(xì)胞一樣具有細(xì)胞周期，不具有組織特異性，B錯(cuò)誤；C、用該技術(shù)得到的新生器官替換供體病變器官，屬于自體移植，不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，這可以大大提高器官移植成功率，C正確；D、ES細(xì)胞需從胚胎中獲得，而獲得iPS細(xì)胞過程無須破壞胚胎，可以避免獲取ES細(xì)胞涉及的倫理問題，D正確。故選B。【例6】為探究H基因?qū)δ[瘤細(xì)胞M增殖能力的影響，分別將H基因和突變h基因過量表達(dá)的細(xì)胞M在含瓊脂的半固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，檢測(cè)細(xì)胞克隆（由單個(gè)細(xì)胞分裂形成的肉眼可見的細(xì)胞群）數(shù)量如下表，作為判斷腫瘤細(xì)胞惡性程度的指標(biāo)之一。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）①②③④10%血清-+++H基因--+-突變h基因+細(xì)胞克隆數(shù)量（個(gè)）591527注：“+”表示加入或過量表達(dá)；“-”表示未加入或無表達(dá)A．血清為細(xì)胞M的生長增殖提供了營養(yǎng)物質(zhì)等天然成分B．克隆間相互離散，能有效避免克隆內(nèi)細(xì)胞的接觸抑制C．H基因的過量表達(dá)導(dǎo)致克隆數(shù)增加，說明其不是抑癌基因D．突變h基因過量表達(dá)，容易引起細(xì)胞M在體內(nèi)分散和轉(zhuǎn)移【答案】B【詳解】A、在進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)液中通常需加入血清、血漿等一些天然成分，主要目的是為細(xì)胞提供促生長因子，以補(bǔ)充細(xì)胞生長和增殖過程中所需的營養(yǎng)物質(zhì)，A正確；B、形成的肉眼可見的細(xì)胞群過程中發(fā)生了基因突變，則可能不會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象，B錯(cuò)誤；C、原癌基因負(fù)責(zé)調(diào)節(jié)細(xì)胞周期，控制細(xì)胞生長和分裂的過程，抑癌基因主要是阻止細(xì)胞不正常的增殖，原癌基因突變使相應(yīng)的基因產(chǎn)物過量表達(dá)可引起細(xì)胞癌變，因此H基因的過量表達(dá)導(dǎo)致克隆數(shù)增加，說明其不是抑癌基因，C正確；D、突變h基因過量表達(dá)，導(dǎo)致細(xì)胞克隆數(shù)量增多，容易引起細(xì)胞M在體內(nèi)分散和轉(zhuǎn)移，D正確。故選B。【例7】再生醫(yī)學(xué)領(lǐng)域在2019年首次利用異源誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞）培養(yǎng)出的眼角膜組織，移植到病人體內(nèi)，成功治療一名失明患者，且未發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。下列有關(guān)敘述正確的是（）A．造血干細(xì)胞和誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞）的分化程度相同B．體外培養(yǎng)iPS細(xì)胞時(shí)培養(yǎng)液中通常需要加入血清等物質(zhì)C．干細(xì)胞分化成特定組織細(xì)胞后可再受刺激變回原來的干細(xì)胞D．患者未發(fā)生免疫排斥反應(yīng)是因?yàn)橐浦布?xì)胞與其自身細(xì)胞的基因相同【答案】B【詳解】A、造血干細(xì)胞和誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞）的分化程度不同，前者大于后者，A錯(cuò)誤；B、iPS細(xì)胞是動(dòng)物細(xì)胞的一種，動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)通常需要加入血清等物質(zhì)，B正確；C、細(xì)胞分化具有不可逆性，C錯(cuò)誤；D、患者未發(fā)生免疫排斥反應(yīng)是因?yàn)橐浦布?xì)胞與其自身細(xì)胞的HLA相同，D錯(cuò)誤。故選B?！纠?】我國科研人員利用人的成纖維細(xì)胞培養(yǎng)出可增殖、具有功能的肝樣細(xì)胞（hihep細(xì)胞），成功構(gòu)建了新型的生物人工肝。下列敘述不正確的是（

）A．培養(yǎng)過程中需要在培養(yǎng)液中添加動(dòng)物血清B．成纖維細(xì)胞與hihep細(xì)胞的遺傳物質(zhì)不相同C．成纖維細(xì)胞培養(yǎng)成hihep細(xì)胞并未體現(xiàn)細(xì)胞的全能性D．成纖維細(xì)胞培養(yǎng)成hihep細(xì)胞的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)【答案】B【詳解】A、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要在培養(yǎng)液中添加一些天然成分，比如動(dòng)物血清，A正確；B、人的成纖維細(xì)胞培養(yǎng)出可增殖、具有功能的肝樣細(xì)胞（hihep細(xì)胞），均由同一個(gè)受精卵發(fā)育而來，所含遺傳物質(zhì)相同，B錯(cuò)誤；C、細(xì)胞核具有全能性是指分化為完整個(gè)體或其他各種細(xì)胞的潛能，成纖維細(xì)胞培養(yǎng)成hihep細(xì)胞并未體現(xiàn)細(xì)胞的全能性，C正確；D、人的成纖維細(xì)胞培養(yǎng)出可增殖、具有功能的肝樣細(xì)胞（hihep細(xì)胞）發(fā)生了細(xì)胞的分化，實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)，D正確。故選B。要點(diǎn)歸納1．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程(1)原理：細(xì)胞增殖。(2)選材：一般取自幼齡動(dòng)物的器官或組織，因?yàn)檫@些組織或器官的生命力旺盛，分裂能力強(qiáng)。(3)酶處理①用酶兩次處理的目的：第一次使用的目的是使組織細(xì)胞分散開；第二次使用的目的是使細(xì)胞從瓶壁上脫離下來，便于分散后繼續(xù)培養(yǎng)。②使細(xì)胞分散開的原因：一是能保證細(xì)胞所需要的營養(yǎng)供應(yīng)；二是能保證細(xì)胞內(nèi)有害代謝產(chǎn)物的及時(shí)排出。③不能用胃蛋白酶處理：由于大多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH為7.2～7.4，而胃蛋白酶發(fā)揮作用的最適pH為2.0左右，因此不能用胃蛋白酶使細(xì)胞分散開。（4）原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)區(qū)分兩種“培養(yǎng)”的關(guān)鍵是看用胰蛋白酶處理的對(duì)象。①第一次：用胰蛋白酶對(duì)剪碎的動(dòng)物組織進(jìn)行處理，使其分散成單個(gè)細(xì)胞后進(jìn)行培養(yǎng)，為原代培養(yǎng)。②第二次：細(xì)胞培養(yǎng)過程中出現(xiàn)接觸抑制，用胰蛋白酶使其從瓶壁上脫離下來，然后，將其分散到多個(gè)培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)，為傳代培養(yǎng)。2．干細(xì)胞的種類和比較來源功能及應(yīng)用胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞)早期胚胎能夠分化成為動(dòng)物體內(nèi)的任何細(xì)胞，并進(jìn)一步形成組織、器官甚至生物個(gè)體成體干細(xì)胞成體組織或器官只能分化成特定的細(xì)胞或組織，不具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPS細(xì)胞)體外誘導(dǎo)體細(xì)胞產(chǎn)生能分化成為具有特定功能的細(xì)胞，用于治療疾病【特別提醒】1.關(guān)于細(xì)胞培養(yǎng)的提醒（1）細(xì)胞培養(yǎng)過程中的接觸抑制說明了細(xì)胞膜能進(jìn)行細(xì)胞間的信息交流。細(xì)胞膜接受信息后，細(xì)胞停止分裂，說明了細(xì)胞膜接受的信息能夠傳遞到細(xì)胞核。（2）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中有貼壁生長的特性是因?yàn)閯?dòng)物細(xì)胞膜上的糖蛋白使細(xì)胞具有黏著性。（3）癌細(xì)胞細(xì)胞膜上糖蛋白的減少，細(xì)胞的黏著性降低，在適宜的條件下可以無限增殖，因此培養(yǎng)的癌細(xì)胞無接觸抑制的現(xiàn)象，在培養(yǎng)瓶中能生長成多層。2.關(guān)于iPS細(xì)胞的提醒（1）由iPS細(xì)胞分化為各種組織細(xì)胞過程的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)。（2）從病人體內(nèi)提取成纖維細(xì)胞，將其轉(zhuǎn)化成iPS細(xì)胞，經(jīng)誘導(dǎo)后產(chǎn)生所需細(xì)胞，將所需細(xì)胞植入病人體內(nèi)，該過程無須破壞胚胎，不會(huì)產(chǎn)生倫理問題，且因iPS細(xì)胞來自病人身上，將誘導(dǎo)產(chǎn)生所需細(xì)胞移植回病人體內(nèi)后，理論上可以避免免疫排斥反應(yīng)。（3）iPS細(xì)胞是多功能干細(xì)胞，由于iPS細(xì)胞的增殖方式為有絲分裂，故能發(fā)貨發(fā)生基因突變，染色體變異。3.培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí)沒有脫分化的過程，因?yàn)楦叨确只膭?dòng)物細(xì)胞發(fā)育潛能變低，失去了發(fā)育成完整個(gè)體的能力。4.不是所有的細(xì)胞在增殖過程中都存在接觸抑制。例如：癌細(xì)胞增殖時(shí)不存在接觸抑制，所以在培養(yǎng)瓶中可以形成多層細(xì)胞1．2013年8月，世界上第一個(gè)“試管漢堡”問世，其中的“牛肉餅”是科學(xué)家通過體外培養(yǎng)牛的細(xì)胞而得到的，其基本流程如圖所示。有關(guān)說法正確的是（）A．甲處還需要胰蛋白酶的處理B．乙處利用液體懸浮培養(yǎng)獲得單細(xì)胞C．丙處需添加高壓蒸汽滅菌后的動(dòng)物血清D．丙處采用開放式培養(yǎng)以減少培養(yǎng)基pH的波動(dòng)【答案】A【詳解】A、甲處動(dòng)物組織被剪碎后還需要胰蛋白酶處理獲得單個(gè)細(xì)胞，A正確；B、懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞會(huì)細(xì)胞密度過大，不能獲得單細(xì)胞，B錯(cuò)誤；C、高壓蒸汽滅菌會(huì)破壞動(dòng)物血清中的營養(yǎng)成分，故動(dòng)物血清不能高壓蒸汽滅菌，C錯(cuò)誤；D、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)需要特殊的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，不能開放式培養(yǎng)，D錯(cuò)誤。故選A。2．下列與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)有關(guān)的敘述，不正確的是（

）A．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是細(xì)胞的全能性B．CO?的作用是維持細(xì)胞培養(yǎng)液pH的相對(duì)穩(wěn)定C．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要添加一定量的動(dòng)物血清D．可以用體外培養(yǎng)的人體細(xì)胞培養(yǎng)病毒【答案】A【詳解】A、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是細(xì)胞增殖，A錯(cuò)誤；B、進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，需要提供95％的空氣和5％CO2，CO?的作用是維持細(xì)胞培養(yǎng)液pH的相對(duì)穩(wěn)定，B正確；C、由于人們對(duì)細(xì)胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)尚未全部研究清楚，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要添加一定量的動(dòng)物血清，C正確；D、病毒需要寄生在活細(xì)胞中，可以用體外培養(yǎng)的人體細(xì)胞培養(yǎng)病毒，D正確。故選A。3．牙齒再生術(shù)的難點(diǎn)在于牙髓再生和牙周組織再生。空軍軍醫(yī)大學(xué)口腔醫(yī)院金巖教授率領(lǐng)團(tuán)隊(duì)經(jīng)歷多年潛心努力，從患者脫落的乳牙中獲取牙髓干細(xì)胞，經(jīng)過體外培養(yǎng)，將形成的干細(xì)胞聚合體植入患者牙髓腔里，使得牙齒神經(jīng)、血管再生，完全恢復(fù)牙齒原有功能。針對(duì)以上技術(shù)，下列敘述正確的是（

）A．此技術(shù)的原理與植物組織培養(yǎng)的原理相同B．此技術(shù)需要適宜的溫度（36.5℃）和pH（6.8—7.8）C．牙髓干細(xì)胞與胚胎干細(xì)胞一樣都可以分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種類型的細(xì)胞，甚至產(chǎn)生個(gè)體D．對(duì)于牙髓干細(xì)胞的培養(yǎng)過程需要經(jīng)歷原代培養(yǎng)，用胰蛋白酶處理后再用離心法收集懸液中的細(xì)胞進(jìn)行傳代【答案】D【詳解】A、該技術(shù)屬于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，原理是細(xì)胞增殖，而植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞的全能性，兩者不同，A錯(cuò)誤；B、此技術(shù)即動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要適宜的溫度（36.5±0.5℃）和pH（7.2-7.4），B錯(cuò)誤；C、由于技術(shù)條件等的制約，目前不能將動(dòng)物體細(xì)胞培養(yǎng)為完整個(gè)體，且牙髓干細(xì)胞屬于分化程度較高的細(xì)胞，不能分為任何一種類型的細(xì)胞，C錯(cuò)誤；D、對(duì)于牙髓干細(xì)胞的培養(yǎng)過程需要經(jīng)歷原代培養(yǎng)（分瓶前的培養(yǎng)過程），用胰蛋白酶處理后再用離心法收集懸液中的細(xì)胞進(jìn)行傳代，D正確。故選D。4．如圖表示科學(xué)家利用牛的體細(xì)胞誘導(dǎo)出多能干細(xì)胞（iPS），進(jìn)而再分化成多種體細(xì)胞的過程。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（

）

A．過程①所取的組織可用胰蛋白酶處理成單個(gè)細(xì)胞B．過程②轉(zhuǎn)入的相關(guān)因子影響體細(xì)胞內(nèi)基因的表達(dá)C．過程③所用培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具需進(jìn)行滅菌處理D．過程④獲得的神經(jīng)細(xì)胞和肌細(xì)胞含有的基因種類不同【答案】D【詳解】A、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：取動(dòng)物組織塊（動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞，A正確；B、由題圖可知，過程②轉(zhuǎn)入的相關(guān)因子會(huì)影響體細(xì)胞內(nèi)基因的表達(dá)，使細(xì)胞恢復(fù)未分化狀態(tài)，B正確；C、細(xì)胞培養(yǎng)成功的關(guān)鍵條件是培養(yǎng)基（液）、培養(yǎng)用具及培養(yǎng)環(huán)境無菌無毒，故過程③所用培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具需進(jìn)行滅菌處理，C正確；D、過程④為細(xì)胞再分化，其實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)，不改變基因種類，故獲得的神經(jīng)細(xì)胞和肌細(xì)胞含有的基因種類相同，D錯(cuò)誤。故選D。5．從1907年哈里森首創(chuàng)動(dòng)物組織體外培養(yǎng)法，到2017年我國科學(xué)家首次培育出體細(xì)胞克隆猴，動(dòng)物細(xì)胞工程獲得了突破性的進(jìn)展。其中，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（

）A．用培養(yǎng)基培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí)，通常需要加入血清等一些天然成分B．體外培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí)，所需的氣體主要有O2和CO2C．體外培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí)，大多數(shù)細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞貼壁現(xiàn)象D．體外培養(yǎng)的癌細(xì)胞常發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象，此時(shí)應(yīng)用胰蛋白酶處理【答案】D【詳解】A、通常需要加入血清等一些天然成分，從而有利于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，A正確；B、體外培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí)，O2用于細(xì)胞呼吸，CO2維持培養(yǎng)液的PH，B正確；C、體外培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí)，大多數(shù)細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞貼壁生長的現(xiàn)象，C正確；D、癌細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí)不會(huì)發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象，D錯(cuò)誤。故選D。6．如圖是某動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液中活細(xì)胞和死亡細(xì)胞密度統(tǒng)計(jì)結(jié)果，敘述錯(cuò)誤的是（）A．實(shí)驗(yàn)中要控制胰蛋白酶溶液濃度和處理時(shí)間，以免損傷細(xì)胞B．培養(yǎng)液中應(yīng)適當(dāng)加入青霉素、鏈霉素等抗生素，以避免雜菌污染C．曲線bc段變化的主要原因是培養(yǎng)液中營養(yǎng)物質(zhì)不足及有害代謝產(chǎn)物積累D．培養(yǎng)至第6天時(shí)，新產(chǎn)生的細(xì)胞數(shù)等于死亡細(xì)胞數(shù)【答案】D【詳解】A、實(shí)驗(yàn)中貼壁細(xì)胞需要重新用胰蛋白酶等處理，使之分散成單個(gè)細(xì)胞，然后再用離心法收集，要控制胰蛋白酶溶液濃度和處理時(shí)間，以免損傷細(xì)胞，A正確；B、培養(yǎng)液中應(yīng)適當(dāng)加入青霉素、鏈霉素等抗生素，以避免培養(yǎng)過程中雜菌污染，B正確；C、曲線bc段表示活細(xì)胞密度減少而死細(xì)胞密度增加，產(chǎn)生的主要原因是培養(yǎng)液中營養(yǎng)物質(zhì)不足及有害代謝產(chǎn)物積累等，C正確；D、圖中可以看出培養(yǎng)第6天時(shí)，活細(xì)胞數(shù)等于死亡細(xì)胞數(shù)，D錯(cuò)誤。故選D。7．研究人員從動(dòng)物體內(nèi)取出正常結(jié)腸組織和結(jié)腸瘤，經(jīng)酶處理后制成單細(xì)胞懸浮液，然后分瓶并在適宜的相同條件下進(jìn)行培養(yǎng)。在上述培養(yǎng)過程中均會(huì)發(fā)生的現(xiàn)象是（）A．細(xì)胞因接觸抑制而失去分裂能力B．細(xì)胞出現(xiàn)貼壁生長現(xiàn)象C．部分細(xì)胞核型發(fā)生改變并逐漸凋亡D．細(xì)胞增殖并只能形成一層細(xì)胞【答案】B【詳解】A、在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，首先出現(xiàn)細(xì)胞貼壁現(xiàn)象，隨著培養(yǎng)瓶中細(xì)胞數(shù)目的增多，正常細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)接觸抑制，癌細(xì)胞不會(huì)出現(xiàn)接觸抑制或接觸抑制弱，但細(xì)胞仍可分裂，A錯(cuò)誤；B、在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，首先都會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞貼壁現(xiàn)象，B正確；C、在培養(yǎng)過程中，多數(shù)正常細(xì)胞會(huì)失去分裂能力而出現(xiàn)凋亡，少數(shù)細(xì)胞因核型發(fā)生改變而獲得不死性，癌細(xì)胞具有無限分裂能力，不會(huì)凋亡，C錯(cuò)誤；D、在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，癌細(xì)胞增殖可形成多層細(xì)胞，正常細(xì)胞因接觸抑制而形成單層細(xì)胞，D錯(cuò)誤。故選B。8．無菌操作在微生物培養(yǎng)、植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中都至關(guān)重要。下列敘述正確的是（

）A．生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)中所有器皿、培養(yǎng)基及生物材料均需進(jìn)行滅菌處理B．酒精能使細(xì)胞中的蛋白質(zhì)變性失活，95%的酒精用來消毒效果最好C．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基配置時(shí)，加入抗生素即可達(dá)到無菌培養(yǎng)的目的D．易分解的活性物質(zhì)過濾除菌后，在無菌條件下加入滅菌的培養(yǎng)基中【答案】D【詳解】A、要對(duì)所有培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿消毒，但是生物材料要根據(jù)實(shí)際情況來，比如說植物組織培養(yǎng)，外植體只能消毒，不能滅菌，不然高溫下植物細(xì)胞會(huì)死亡，A錯(cuò)誤；B、一般消毒用的是70%的酒精，B錯(cuò)誤；C、抗生素只能殺滅細(xì)菌和一部分真菌，不能達(dá)到無菌的效果，C錯(cuò)誤；D、易分解的活性物質(zhì)應(yīng)該用過濾滅菌，無菌條件下加入無菌培養(yǎng)基，D正確。故選D。9．為了檢測(cè)藥物X、Y和Z的抗癌效果，采用細(xì)胞培養(yǎng)板添加溶于DMSO溶劑的三種藥物培養(yǎng)肺癌細(xì)胞，培養(yǎng)過程及結(jié)果如圖所示。下列說法正確的是（

）

A．細(xì)胞培養(yǎng)液中通常需要加入一定量的血清和抗生素，防止病毒污染B．對(duì)照組中應(yīng)加入等體積的生理鹽水在CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)肺癌細(xì)胞C．起始肺癌細(xì)胞數(shù)量應(yīng)保持一致，計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)用胃蛋白酶處理貼壁細(xì)胞D．根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，藥物X的抗癌效果比Y好，藥物Z沒有抗癌作用【答案】D【詳解】A、抗生素具有殺菌（不是殺病毒）作用，為防止培養(yǎng)液被污染，可在培養(yǎng)液中加入一定量的抗生素，A錯(cuò)誤；B、由題干信息可知，三種藥物是溶于DMSO溶劑的，則對(duì)照組中應(yīng)加入等體積的DMSO溶劑，以排除體積和溶劑等無關(guān)因素的影響，B錯(cuò)誤；C、遵循實(shí)驗(yàn)的單一變量原則，無關(guān)變量起始肺癌細(xì)胞數(shù)量應(yīng)保持一致，計(jì)數(shù)時(shí)要使貼壁細(xì)胞從瓶壁上分離下來，需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，C錯(cuò)誤；D、分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果，加入X的癌細(xì)胞個(gè)數(shù)是6.7×104，加入Y的癌細(xì)胞個(gè)數(shù)是5.3×105，說明藥物X的抗癌效果比Y好，加入Z的癌細(xì)胞個(gè)數(shù)是8.0×106，與空白對(duì)照相比，藥物Z無抗癌作用，D正確。故選D。10．中國科學(xué)家用一種簡單的化學(xué)物質(zhì)誘導(dǎo)方法，將成年鼠皮膚細(xì)胞制成多潛能干細(xì)胞，并用這種細(xì)胞培育出多只健康的小鼠。這是一項(xiàng)革命性的研究成果，是比克隆羊“多莉”更徹底更方便的克隆技術(shù)。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．皮膚細(xì)胞制成多潛能干細(xì)胞的過程，類似于植物組織培養(yǎng)中的脫分化B．多潛能干細(xì)胞培育出多只小鼠的過程，不需要用到胚胎移植技術(shù)C．多潛能干細(xì)胞與皮膚細(xì)胞的基因型相同，化學(xué)物質(zhì)的作用是誘導(dǎo)基因表達(dá)D．此項(xiàng)技術(shù)可用自身細(xì)胞實(shí)現(xiàn)器官克隆，避免外來器官移植發(fā)生免疫排斥【答案】B【詳解】A、皮膚細(xì)胞是高度分化的細(xì)胞，而多潛能干細(xì)胞的分化程度很低，所以皮膚細(xì)胞制成多潛能干細(xì)胞的過程，類似于植物組織培養(yǎng)中的脫分化，A正確；B、多潛能干細(xì)胞培育出多只小鼠的過程，需要用到胚胎移植技術(shù)，B錯(cuò)誤；C、多潛能干細(xì)胞是皮膚細(xì)胞經(jīng)化學(xué)物質(zhì)誘導(dǎo)后形成的。所以基因型相同，化學(xué)物質(zhì)的作用是誘導(dǎo)基因表達(dá)，C正確；D、此項(xiàng)技術(shù)可用自身細(xì)胞實(shí)現(xiàn)器官克隆，由于是自身細(xì)胞克隆出來的器官，所以可以避免外來器官移植發(fā)生免疫排斥，D正確。故選B。11．實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)小鼠的體細(xì)胞中轉(zhuǎn)入四種基因就可以誘導(dǎo)產(chǎn)生一種與胚胎干細(xì)胞功能類似的誘導(dǎo)多能干（iPS）細(xì)胞。科學(xué)家將獲得的iPS細(xì)胞分化為T細(xì)胞以期用于傳染病的治療。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（

）

A．誘導(dǎo)iPS細(xì)胞的過程細(xì)胞發(fā)生形態(tài)、結(jié)構(gòu)的改變B．誘導(dǎo)iPS細(xì)胞中含有本物種生長發(fā)育所需的遺傳信息C．研制iPS細(xì)胞的原理類似于植物細(xì)胞的脫分化與再分化D．KLF4基因能夠抑制細(xì)胞凋亡和衰老，可使細(xì)胞無限增殖【答案】C【詳解】A、iPS細(xì)胞是由體細(xì)胞誘導(dǎo)分化而成的，該過程中有細(xì)胞形態(tài)、結(jié)構(gòu)的改變，A正確；B、iPS細(xì)胞內(nèi)具有本物種的全套遺傳信息，因此具有全能性，由iPS細(xì)胞分化產(chǎn)生其他種類細(xì)胞，其實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)，B正確；C、小鼠的體細(xì)胞中轉(zhuǎn)入四種基因就可以誘導(dǎo)產(chǎn)生一種與胚胎干細(xì)胞功能類似的誘導(dǎo)多能干（iPS）細(xì)胞，類似于植物組織培養(yǎng)中的脫分化的過程，C錯(cuò)誤；D、據(jù)圖可知，KLF4基因能夠抑制細(xì)胞凋亡和衰老，可實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的無限增殖，從而產(chǎn)生腫瘤細(xì)胞，D正確。故選C。12．（多選）微載體培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞技術(shù)是目前公認(rèn)的最有發(fā)展前途的一種動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)，其兼具懸浮培養(yǎng)和貼壁培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)。培養(yǎng)的細(xì)胞貼附在微載體表面，可以在較短時(shí)間內(nèi)得到大量的細(xì)胞，細(xì)胞傳代只需要添加新的微載體，基本上可避免細(xì)胞在胰蛋白酶消化過程中受到的損傷。下列敘述正確的是（

）A．動(dòng)物細(xì)胞必須貼壁才可以在培養(yǎng)液中生長B．培養(yǎng)液中添加微載體可以使細(xì)胞在懸浮狀態(tài)下培養(yǎng)C．培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí)應(yīng)保證無菌、無毒的環(huán)境及適宜的溫度、pH等條件D．在培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí)提供的氣體環(huán)境應(yīng)為95%的空氣和5%的CO2【答案】CD【詳解】A、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，有些細(xì)胞需要貼壁生長，而有些細(xì)胞可以懸浮生長，如腫瘤細(xì)胞，A錯(cuò)誤；B、微載體為細(xì)胞提供附著位點(diǎn)，使細(xì)胞能夠在微載體上貼壁生長，B錯(cuò)誤；C、培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí)應(yīng)保證無菌、無毒的環(huán)境及適宜的溫度、pH等條件，C正確；D、在培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí)應(yīng)提供的氣體環(huán)境為95%的空氣和5%的CO2，D正確。故選CD。13．（多選）敲除大鼠心肌細(xì)胞H的T基因，對(duì)照組與敲除組的H細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中貼壁生長，檢測(cè)兩組細(xì)胞的數(shù)量變化，結(jié)果如圖所示。下列相關(guān)敘述合理的是（

）A．體外培養(yǎng)H細(xì)胞需要添加動(dòng)物血清B．可用胰蛋白酶處理H細(xì)胞便于計(jì)數(shù)C．敲除T基因的H細(xì)胞失去了分裂能力D．提高T基因表達(dá)可能促進(jìn)心臟損傷修復(fù)【答案】ABD【詳解】A、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)常加入動(dòng)物血清，因此體外培養(yǎng)H細(xì)胞需要添加動(dòng)物血清，A正確；B、可用胰蛋白酶處理H細(xì)胞使其分離為單細(xì)胞，便于計(jì)數(shù)，B正確；C、隨著時(shí)間的延長，敲除組的H細(xì)胞數(shù)量依然增加了，說明敲除T基因的H細(xì)胞仍然有分裂能力，C錯(cuò)誤；D、對(duì)照組含有T基因，相同培養(yǎng)時(shí)間內(nèi)，對(duì)照組的細(xì)胞數(shù)量多于敲除組，說明T基因能促進(jìn)細(xì)胞分裂，因此提高T基因表