現(xiàn)代生物科技-2021屆高三生物模擬試卷分類匯編（2月刊）

2021屆河北省衡水中學(xué)高三上學(xué)期22.2020年初，國內(nèi)牛奶制品因?yàn)槟敛葸M(jìn)口成本上漲而

漲價(jià)的現(xiàn)象引起了人們的關(guān)注。紫花苜蓿是一種重要的牧草。某研究團(tuán)隊(duì)擬將耐鹽基因

HLA1導(dǎo)入紫花苜蓿中培育耐鹽牧草。具體實(shí)驗(yàn)流程如圖甲。圖乙是載體pCHLAl中T-DNA

示意圖?；卮鹣铝袉栴}。

酵母菌@-HLA1基因

表達(dá)載體pCHLAl匈京朦國II

農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒BastaHLAl

抗性基因

圖甲實(shí)驗(yàn)流程圖圖乙T-DNA示意圖

(1)過程①稱為一，過程②需要使用的工具是o過程③的轉(zhuǎn)化方法是

(2)已知Basta是--種除草劑，則為達(dá)到培養(yǎng)并篩選的目的，過程④的培養(yǎng)基應(yīng)有哪些成

分？?

(3)過程④得到的幼苗一(填“一定”“一定不”“不一定”)含有HLA1基因，為進(jìn)

一步確認(rèn)，可用PCR擴(kuò)增的方法進(jìn)行鑒定，則進(jìn)行PCR反應(yīng)的引物應(yīng)根據(jù)—設(shè)計(jì)。

(4)判斷本實(shí)驗(yàn)的目的是否達(dá)到，還應(yīng)進(jìn)行—實(shí)驗(yàn)。

【答案】(1).獲取目的基因(2).限制性核酸內(nèi)切醐和DNA連接酶⑶.脫分化

(4).除草劑和鹽(5).不一定(6).HLA1基因進(jìn)行(7).抗原-抗體雜交

【解析】

【分析】

分析圖示可知，①過程是獲取目的基因，②過程是構(gòu)建基因表達(dá)載體。③過程是脫分化形成

愈傷組織，④過程是再分化形成幼苗的過程。

【詳解】(1)過程①是從酵母菌中獲取HLA1基因，這是獲取目的基因的過程。過程②是構(gòu)

建基因表達(dá)載體的過程，該過程需要的工具酶有限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶。過程③

是形成了愈傷組織，是脫分化的過程。

(2)Basta是一種除草劑，而HLA1基因是一種耐鹽基因，所以培養(yǎng)基的成分中應(yīng)該有除草

劑和鹽。

(3)過程④是再分化過程，形成的幼苗不一定含有HLA1基因，需要進(jìn)一步確認(rèn)才可以，

可用PCR擴(kuò)增的方法進(jìn)行確認(rèn)。PCR引物設(shè)計(jì)的目的是為了找到一對(duì)合適的核甘酸片段，使

其有效的擴(kuò)增模板DNA序列。PCR反應(yīng)的引物應(yīng)該根據(jù)HLA1基因進(jìn)行設(shè)計(jì)。

(4)判斷實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖欠襁_(dá)到，需要進(jìn)行分子水平的檢測(cè)，可利用抗原抗體雜交原理來檢驗(yàn)

產(chǎn)物的有無。

【點(diǎn)睛】本題考查基因工程和植物組織培養(yǎng)的內(nèi)容，意在考查考生的識(shí)記能力。

2021屆四川省成都市石室中學(xué)高三一診模擬12.新一代基因編輯CRISPR/Cass技術(shù)的實(shí)質(zhì)

是用特殊的引導(dǎo)序列(sgRNA)將Cas9酶一一“基因剪刀精準(zhǔn)定位到所需切割的基因上，然

后進(jìn)行編輯?？蒲腥藛T設(shè)想利用新一代基因編輯技術(shù)來預(yù)防艾滋病?；卮鹣铝袉栴}：

(1)動(dòng)物細(xì)胞中沒有編碼Cas9酶基因，可通過構(gòu)建,用法將其導(dǎo)

入受體細(xì)胞，最終表達(dá)出Cas9酶。

(2)CCR5蛋白是HIV病毒入侵機(jī)體細(xì)胞的主要輔助受體之一，HIV通過識(shí)別膜通道蛋白CCR5

侵入宿主細(xì)胞。為有效阻止HW侵染新分化生成的T淋巴細(xì)胞，科研人員將SgRNA序列導(dǎo)入

骨髓細(xì)胞中，以構(gòu)建sgRNA-Cas9酶復(fù)合體。Cas9酶可以催化鍵斷

裂，以實(shí)現(xiàn)對(duì)DNA序列的定向切割。設(shè)計(jì)SgRNA序列需要根據(jù)的核甘酸序列，

原因是O

(3)為檢測(cè)T淋巴細(xì)胞的CCR5基因是否成功被編輯，采用技術(shù)檢測(cè)是否含有

CCR5基因，還需要對(duì)___________蛋白進(jìn)行檢測(cè)。

【答案】(1).基因表達(dá)載體(2).顯微注射(3).造血干(4).磷酸二酯(5).

CCR5基因⑹.sgRNA序列需要與比后基因上部分堿基互補(bǔ)配對(duì)，從而精準(zhǔn)定位到

基因進(jìn)行編輯(7).DNA分子雜交⑻.CCR5

【解析】

【分析】

根據(jù)題意，新一代基因編輯CRISPR/Cass技術(shù)的實(shí)質(zhì)是用特殊的引導(dǎo)序列(sgRNA)將Cas9

酶-基因剪刀精準(zhǔn)定位到所需切割的基因上，可知Cas9酶是一種核酸內(nèi)切酶，可斷開DNA

上的磷酸二酯鍵;如果T淋巴細(xì)胞的CCR5基因被成功編輯,則T細(xì)胞不能表達(dá)CCR5蛋白，

故可采用DNA分子雜交檢測(cè)是否含有CCR5基因。

【詳解】(1)動(dòng)物細(xì)胞中沒有編碼Cas9酶的基因，可通過構(gòu)建基因表達(dá)載體，用顯微注射

法將其導(dǎo)入受體細(xì)胞，最終表達(dá)出Cas9酶。

(2)為有效阻止HIV侵染新分化生成的T淋巴細(xì)胞，科研人員將SgRNA序列導(dǎo)入骨髓造

血干細(xì)胞中，以構(gòu)建sgRNA-Cas9酶復(fù)合體。Cas9酶可以催化磷酸二酯鍵斷裂，以實(shí)現(xiàn)對(duì)

DNA序列的定向切割。HIV能通過識(shí)別膜通道蛋白CCR5侵入宿主細(xì)胞，為預(yù)防艾滋病，

根據(jù)題意，可利用Cas9酶對(duì)CCR5基因進(jìn)行編輯，因此sgRNA序列需要與CCR5基因上部

分堿基互補(bǔ)配對(duì)，從而精準(zhǔn)定位到CCR5基因進(jìn)行編輯，故設(shè)計(jì)SgRNA序列時(shí)需要根據(jù)

CCR5基因的核甘酸序列。

（3）可采用DNA分子雜交技術(shù)檢測(cè)是否含有CCR5基因，為了檢測(cè)基因編輯是否成功，

還需要對(duì)CCR5蛋白進(jìn)行檢測(cè)。

【點(diǎn)睛】本題考查基因工程的相關(guān)操作，以CRISPR/Cass基因編輯技術(shù)來預(yù)防艾滋病為背

景，考查學(xué)生對(duì)基因工程基本原理、基本工具和基本操作的掌握，要求學(xué)生能以教材知識(shí)為

基礎(chǔ)，結(jié)合題干信息進(jìn)行發(fā)散和延伸，重在考查學(xué)生對(duì)知識(shí)的實(shí)際運(yùn)用能力，有一定難度。

2021屆浙江省金麗衢十二校高三上學(xué)期第一次聯(lián)考25.新型冠狀病毒可通過表面的刺突蛋

白（S蛋白）與人呼吸道黏膜上皮細(xì)胞的ACE2受體結(jié)合，侵人人體，引起肺炎。單克隆抗

體可阻斷病毒融合的粘附或人侵，故抗體藥物的研發(fā)已成為治療HAT篩選新冠肺炎的研究

熱點(diǎn)之一。圖為篩選、制備抗S蛋白單克隆抗體的示意圖。下列相關(guān)敘述，不正確的是（）

*二?-抗體

fx

——-ACE2受體

A.研制抗S蛋白單克隆抗體，需先注射刺突蛋白免疫小鼠以激活小鼠的免疫細(xì)胞抗體

B.雜交細(xì)胞經(jīng)抗體檢驗(yàn)后即可用于單克隆抗體的生產(chǎn)

C.單克隆抗體可以制成診斷盒，用于疾病的診斷

D.單克隆抗體的制備采用了動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)

【答案】B

【解析】

【分析】

1.單克隆抗體的制備是將骨髓瘤細(xì)胞與漿細(xì)胞結(jié)合，經(jīng)過選擇培養(yǎng)基的篩選得到雜交瘤細(xì)胞

并經(jīng)專一抗體檢測(cè)后，培養(yǎng)能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞即可得單克隆抗體，涉及動(dòng)物細(xì)胞

培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)；雜交瘤細(xì)胞集合了兩個(gè)細(xì)胞的遺傳物質(zhì)，但不一定全部表達(dá)；

2.單克隆抗體最廣泛的用途是用作體外診斷試劑，具有準(zhǔn)確、快速等優(yōu)點(diǎn).

【詳解】A、研制抗S蛋白單克隆抗體，需先注射刺突蛋白免疫小鼠以激活小鼠的免疫細(xì)胞,

從而獲得能產(chǎn)生相應(yīng)抗體的效應(yīng)B細(xì)胞，A正確；

B、經(jīng)選擇性培養(yǎng)基篩選出來的雜交瘤細(xì)胞還需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和專一抗體檢測(cè)，才可用于

單克隆抗體的生產(chǎn)，B錯(cuò)誤

C、根據(jù)抗原-抗體特異性結(jié)合的原理，將單克隆抗體制成診斷盒，用于疾病的診斷，C正確；

D、結(jié)合分析可知，單克隆抗體的制備采用了動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，因?yàn)?/p>

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基本技術(shù)，D正確。

故選Bo

【點(diǎn)睛】

2021屆浙江省金麗衢十二校高三上學(xué)期第一次聯(lián)考（二）回答與基因工程及植物育種有關(guān)

的問題：

某研究小組為研究水稻B基因表達(dá)對(duì)其卵細(xì)胞的影響，設(shè)計(jì)了如下過程：（Luc基因表達(dá)的

熒光素酶能夠催化熒光素產(chǎn)生熒光;啟動(dòng)子和終止子分別是重組質(zhì)粒中啟動(dòng)和終止基因轉(zhuǎn)錄

的序列）。

水稻B基因

編碼蛋白的序列及屋因T-DNA

QT

-------②水稻鑒定

臼1T*B-Luc融合基因農(nóng)桿菌占水稻

啟動(dòng)子*愈傷組織篩選4

潮霉素鑒定

止子

抗性基因

轉(zhuǎn)者

卡那霉素植7

抗性基因*啟動(dòng)子可在水稻卵細(xì)胞中啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄

(1)若水稻B基因的核甘酸序列已知，可采用化學(xué)合成或(中文名稱)的方法。為

了提高目的基因和Ti質(zhì)粒重組的成功率，選擇使用對(duì)含目的基因的DNA片段和質(zhì)粒

進(jìn)行處理形成不同的黏性末端，然后用DNA連接酶連接構(gòu)建重組載體。酶切位點(diǎn)能否選在

潮霉素抗性基因中?理由是。

(2)過程①中，應(yīng)在培養(yǎng)基中加入以篩選含有目的基因的農(nóng)桿菌。過程②中應(yīng)向培養(yǎng)

愈傷組織的培養(yǎng)基中加入,以初篩染色體上含有目的基因的愈傷組織。

(3)從轉(zhuǎn)基因植株未成熟種子中分離出胚，觀察到細(xì)胞內(nèi)僅含有一個(gè)染色體組，判定該胚

是由未受精的卵細(xì)胞發(fā)育形成的，而普通水稻的卵細(xì)胞是不進(jìn)行發(fā)育的，這表明

【答案】(1).聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(2).不同的限制性核酸內(nèi)切酶(3).不能(4).由

于潮霉素抗性基因位于啟動(dòng)子前面，若將酶切位點(diǎn)選在此處，則插入的融合基因不會(huì)表達(dá)

(5).卡那霉素或潮霉素(6).潮霉素(7).B基因表達(dá)能使卵細(xì)胞不經(jīng)受精直接發(fā)育成

胚

【分析】

基因表達(dá)載體的構(gòu)建包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因。啟動(dòng)子是一段有特殊結(jié)構(gòu)

的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出

mRNA,最終獲得所需的蛋白質(zhì)；終止子也是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的尾

端；標(biāo)記基因的作用是為了鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞

篩選出來，常用的標(biāo)記基因是抗生素基因。

【詳解】(二)

(1)若已知核甘酸序列，則可以利用化學(xué)合成法或PCR技術(shù)(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))合成擴(kuò)增

目的基因；不同的黏性末端可以有效防止目的基因之間的連接、質(zhì)粒之間的連接，故用不同

的限制性核酸內(nèi)切酶對(duì)含目的基因的DNA片段和質(zhì)粒進(jìn)行處理。不能將酶切位點(diǎn)選在潮霉

素抗性基因中，因?yàn)閱?dòng)子位于潮霉素抗性基因后邊，而轉(zhuǎn)錄是從啟動(dòng)子開始，若插入到潮

霉素抗性基因中，則重組的目的基因不會(huì)表達(dá)。

(2)質(zhì)粒上有抗卡那霉素標(biāo)記基因和抗潮霉素標(biāo)記基因，如果選擇培養(yǎng)基中加入的是卡那

霉素，起作用的是抗卡那霉素標(biāo)記基因，如果選擇培養(yǎng)基中加入的是潮霉素，起作用的是抗

潮霉素標(biāo)記基因。過程②是農(nóng)桿菌侵染愈傷組織的過程，此時(shí)農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的

T-DNA(可轉(zhuǎn)移的DNA)可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上。由

于T-DNA中含有潮霉素抗性基因，應(yīng)向培養(yǎng)愈傷組織的培養(yǎng)基中加入潮霉素來進(jìn)行篩選。

(3)由于B基因在水稻卵細(xì)胞中不能表達(dá)，一般情況下卵細(xì)胞未受精時(shí)不能發(fā)育成胚，而

轉(zhuǎn)基因植株的卵細(xì)胞能發(fā)育成胚，說明B基因表達(dá)能使卵細(xì)胞不經(jīng)受精直接發(fā)育成胚?

【點(diǎn)睛】目的基因的獲取方法：①從基因文庫中獲?。虎谌斯ず铣?反轉(zhuǎn)錄法和化學(xué)合成法);

③PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因。

江西省上饒市民校考試聯(lián)盟2020-2021學(xué)年高三上學(xué)期12.HPV是一種雙鏈DNA病毒，該

病毒在人體內(nèi)持續(xù)感染是引起宮頸癌的主要原因。請(qǐng)回答：

(1)目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的HPV亞型超過200種，對(duì)不同HPV亞型的區(qū)分可采用—

的方法，對(duì)病毒的DNA進(jìn)行鑒定，也可以采用的方法，對(duì)病毒的蛋白質(zhì)進(jìn)行鑒

定。

(2)經(jīng)研究得知，該病毒DNA存在一個(gè)能控制轉(zhuǎn)錄過程的特殊區(qū)段，科學(xué)家通過PCR技

術(shù)獲得了大量該區(qū)段。該技術(shù)操作流程的三個(gè)重要步驟的溫度分別是:設(shè)計(jì)引物

的前提是;至少需經(jīng)過次循環(huán)才能分離，得到所需要的DNA區(qū)段。

(3)從理論上講，可以用單克隆抗體治療宮頸癌，制備單克隆抗體時(shí)，常用作

化學(xué)促融劑，誘導(dǎo)經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合產(chǎn)生的雜交瘤細(xì)胞具有

_____________的特點(diǎn)。

【答案】(1).DNA分子雜交⑵.抗原一抗體雜交⑶.

90—95℃55—60℃70—75℃(4).需要知道該病毒DNA部分核甘酸序列⑸.三

(6).聚乙二醇(PEG)(7).既能無限增殖又能產(chǎn)生單一抗體

【解析】

【分析】

11、目基因的檢測(cè)和鑒定：（1）分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA

是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技

術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)-抗原-抗體雜交技術(shù)。（2）個(gè)體水平上的鑒定：抗

蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

2、PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）是利用DNA在體外攝氏95。高溫時(shí)變性會(huì)變成單鏈，低溫（經(jīng)常

是60℃左右）時(shí)引物與單鏈按堿基互補(bǔ)配對(duì)的原則結(jié)合，再調(diào)溫度至DNA聚合酶最適反應(yīng)

溫度（72。（2左右），DNA聚合酶沿著5,玲3,的方向合成互補(bǔ)鏈。

【詳解】（1）由于HPV是一種雙鏈DNA病毒，對(duì)不同HPV亞型的區(qū)分可采用DNA分子雜

交的方法，對(duì)病毒的DNA進(jìn)行鑒定，也可以采用抗原-抗體雜交的方法，對(duì)病毒的蛋白質(zhì)進(jìn)

行鑒定。

（2）PCR技術(shù)操作流程的三個(gè)重要步驟的溫度分別是90—95℃55—60℃70—75℃；設(shè)計(jì)引

物的前提是需要知道該病毒DNA部分核甘酸序列;根據(jù)PCR過程特點(diǎn)繪制PCR過程示意圖:

3/531

?B7

35—一53

早

物

弓

弓2

①②?1

T1

?533/1夕

I

353夕F4

.④.137

,35

基

X因

5%

⑤

圖

圖2

由圖分析可知：X基因第一次復(fù)制得到兩個(gè)兩種：①和②：X基因第二次復(fù)制得到四個(gè)四

種：①復(fù)制得①和③、②復(fù)制得②和④；X基因第三次復(fù)制得到八個(gè)五種：①復(fù)制得

①和③、③復(fù)制得③和⑤、②復(fù)制得②和④、④復(fù)制得④和⑤；X基因第四次復(fù)制

得到16個(gè)五種：①復(fù)制得①和③、兩個(gè)③復(fù)制得兩個(gè)③和兩個(gè)⑤、兩個(gè)④復(fù)制得兩個(gè)

④和兩個(gè)⑤、兩個(gè)⑤得到4個(gè)⑤。從上面的推測(cè)可知，第三輪循環(huán)產(chǎn)物中才能開始出現(xiàn)

獨(dú)立且完整的X基因。即至少需經(jīng)過三次循環(huán)才能分離，得到所需要的DNA區(qū)段。

（3）制備單克隆抗體時(shí)，常用聚乙二醇作化學(xué)促融劑或用滅活的病毒作生物促融劑，誘導(dǎo)

經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合產(chǎn)生的雜交瘤細(xì)胞具有既能無限增殖又能產(chǎn)生單

一抗體的特點(diǎn)。

【點(diǎn)睛】本題考查基因工程、PCR技術(shù)和單克隆抗體制備的相關(guān)知識(shí)，解題關(guān)鍵是識(shí)記基因

工程的應(yīng)用，PCR技術(shù)的過程，識(shí)記單克隆抗體的特點(diǎn)及相關(guān)應(yīng)用，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確

答題。

24.（2021屆湖北省“大課改大數(shù)據(jù)大測(cè)評(píng)”高三上學(xué)期聯(lián)合測(cè)評(píng)生物試題）某特殊病毒為

RNA病毒，易引起大規(guī)模流行。科學(xué)家發(fā)明了一種制備該病毒活疫苗的新方法。主要環(huán)節(jié)

如下。

請(qǐng)回答下列問題：

（1）環(huán)節(jié)1中，以病毒RNA為模板，逆轉(zhuǎn)錄成對(duì)應(yīng)DNA后，利用技術(shù)擴(kuò)增，

并將其中某些基因（不包括表面抗原基因）內(nèi)個(gè)別編碼氨基酸的序列替換成編碼終止密碼的

序列，與改造前的基因相比，改造后的基因表達(dá)時(shí)不能合成完整長(zhǎng)度長(zhǎng)度的，因

此不能產(chǎn)生子代病毒，將該改造基因，表面抗原基因等其他基因構(gòu)建重組質(zhì)粒，并保存。

（2）環(huán)節(jié)2中，設(shè)計(jì)合成一種特殊的tRNA的基因，其產(chǎn)物的反密碼子能與環(huán)節(jié)1中的終

止密碼子配對(duì)結(jié)合，并可攜帶一個(gè)非天然氨基酸（Uaa）。將該基因與拼接后導(dǎo)

入宿主細(xì)胞，提取宿主細(xì)胞總的（填“DNA”或“RNA”）進(jìn)行分子雜交鑒定，篩

選獲得表達(dá)上述tRNA的轉(zhuǎn)基因宿主細(xì)胞。

（3）將環(huán)節(jié)1中的重組質(zhì)粒倒入環(huán)節(jié)2中的轉(zhuǎn)基因宿主細(xì)胞，并在補(bǔ)加非天然氨基酸（Uaa）

的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，則該宿主細(xì)胞能利用上述特殊tRNA,翻譯出改造病毒基因的完整蛋白，

產(chǎn)生大量子代病毒，用于制備疫苗。特殊tRNA轉(zhuǎn)錄時(shí)，識(shí)別其啟動(dòng)子的酶是宿主的

（填"病毒的RNA聚合酶”或“宿主的RNA聚合酶

（4）上述子代病毒不能再正常宿主細(xì)胞中增殖，沒有致病性，因此不經(jīng)滅活減毒即可制成

疫苗，與不具侵染性的滅活病毒疫苗相比，該病毒活疫苗的優(yōu)勢(shì)之一是還可引起

（填“體液”或“細(xì)胞”）免疫，增強(qiáng)免疫保護(hù)效果。

【答案】（1）.PCR⑵.多肽（或蛋白質(zhì)）⑶.載體（4）.RNA（5）.RNA聚

合酶缶）.細(xì)胞

【解析】

【分析】

1、本題以甲型流感病毒為素材，考查了基因工程、基因的表達(dá)、免疫調(diào)節(jié)的相關(guān)知識(shí)，意

在考查學(xué)生的理解能力，綜合運(yùn)用所學(xué)知識(shí)解決問題的能力?？梢愿脑觳《镜牟糠只颍?/p>

其失去在正常宿主細(xì)胞內(nèi)的增殖能力，此過程中需要用到PCR技術(shù)，然后通過基因工程構(gòu)

建適合改造病毒增殖的轉(zhuǎn)基因宿主細(xì)胞。最后利用轉(zhuǎn)基因宿主細(xì)胞制備疫苗，以預(yù)防該病毒

再次侵染；

2、PCR技術(shù)是體外酶促合成特異DNA片段的一種方法，由高溫變性、低溫退火（復(fù)性）

及適溫延伸等反應(yīng)組成一個(gè)周期，循環(huán)進(jìn)行，使目的DNA得以迅速擴(kuò)增，具有特異性強(qiáng)、

靈敏度高、操作簡(jiǎn)便、省時(shí)等特點(diǎn)。

【詳解】（I）以病毒RNA為模板，逆轉(zhuǎn)錄成對(duì)應(yīng)DNA后，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增，由于將其

中某些基因（不包括表面抗原基因）內(nèi)個(gè)別編碼氨基酸的序列替換成編碼終止密碼子的序列,

因此肽鏈合成提前終止，這樣與改造前的基因相比，改造后的基因表達(dá)時(shí)不能合成完整長(zhǎng)度

的多肽（或蛋白質(zhì)），因此不能產(chǎn)生子代病毒。

（2）基因工程的核心步驟為基因表達(dá)載體的構(gòu)建，將該基因與載體連接后才能導(dǎo)入宿主細(xì)

胞，檢測(cè)目的基因是否成功表達(dá)上述tRNA時(shí)，利用核酸分子雜交技術(shù)，即用相應(yīng)的DNA

探針與宿主細(xì)胞的總RNA分子進(jìn)行雜交鑒定，進(jìn)而篩選獲得成功表達(dá)上述tRNA的轉(zhuǎn)基因

宿主細(xì)胞。

（3）因?yàn)樵O(shè)計(jì)的宿主細(xì)胞具有能合成一種特殊tRNA的基因，其產(chǎn)物的反密碼子能與（1）

中的終止密碼子配對(duì)結(jié)合，并可攜帶一個(gè)非天然氨基酸（Uaa）,因此可在補(bǔ)加非天然氨基

酸（Uaa）的培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，篩選出宿主細(xì)胞。進(jìn)而利用該宿主細(xì)胞，翻譯出改造病毒

基因的完整蛋白，產(chǎn)生大量子代病毒，用于制備疫苗。因?yàn)檗D(zhuǎn)錄在宿主細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行，且啟動(dòng)

子是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，因此需要使用宿主細(xì)胞的RNA聚合酶。

（4）不具侵染性的流感病毒滅活疫苗，不能侵入細(xì)胞內(nèi)部，只能引起體液免疫，產(chǎn)生相應(yīng)

的抗體與記憶細(xì)胞，而該疫苗能夠侵入細(xì)胞，引起的免疫屬于細(xì)胞免疫。

【點(diǎn)睛】解答本題需要考生掌握基因工程的原理、操作步驟及其一些細(xì)節(jié)問題，同時(shí)還要熟

練掌握有關(guān)基因的表達(dá)及免疫調(diào)節(jié)方面的問題。

11.（2021屆湖北省九師聯(lián)盟高三12月聯(lián)考?（新高考）生物試題）馬鈴薯四倍體栽培種沒有

青枯病的抗性基因，少數(shù)馬鈴薯野生種存在青枯病的抗性基因。由于核型等差異，野生種難

以與四倍體馬鈴薯栽培種直接雜交繁育，為獲得具有抗青枯病的馬鈴薯栽培種，研究人員進(jìn)

行了植物體細(xì)胞雜交的實(shí)驗(yàn)研究（已知雜種細(xì)胞會(huì)發(fā)生部分染色體缺失現(xiàn)象），過程如下圖

所示。下列分析正確的是（）

胚狀體（E）

A.在低滲溶液中，用酶解法或聚乙二醇處理A和B可以獲得兩種原生質(zhì)體

過程①體現(xiàn)了生物膜的流動(dòng)性，可用顯微鏡觀察并篩選出雜種細(xì)胞C

C.過程②所配制的培養(yǎng)基中添加了等量的生長(zhǎng)素類和赤霉素類植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑

D.過程③為脫分化、再分化過程，可采用DNA分子雜交技術(shù)鑒定植株的抗病性狀

【答案】B

【解析】

【分析】

植物體細(xì)胞雜交技術(shù):

1、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)：就是將不同種的植物體細(xì)胞原生質(zhì)體在一定條件下融合成雜種細(xì)

胞，并把雜種細(xì)胞培育成完整植物體的技術(shù)。

2、過程:

（1）誘導(dǎo)融合的方法：物理法包括離心、振動(dòng)、電刺激等?；瘜W(xué)法一般是用聚乙二醇（PEG）

作為誘導(dǎo)劑。

（2）細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是新的細(xì)胞壁的生成。

（3）植物體細(xì)胞雜交的終點(diǎn)是培育成雜種植株，而不是形成雜種細(xì)胞就結(jié)束。

（4）雜種植株的特征：具備兩種植物的遺傳特征，原因是雜種植株中含有兩種植物的遺傳

物質(zhì)。

3、意義：克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。

【詳解】A、酶解法可用于去除細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體，但不能在低滲溶液中進(jìn)行，否則原生

質(zhì)體會(huì)吸水漲破，獲得原生質(zhì)體不能采用聚乙二醇，A錯(cuò)誤;

B、過程①代表原生質(zhì)體的融合，利用了生物膜的流動(dòng)性，由于一種細(xì)胞選用具有葉綠體的

葉肉細(xì)胞，?種選用不含葉綠體的胚軸細(xì)胞，所以可用顯微鏡觀察并篩選出雜種細(xì)胞C,B

正確；

C、過程②為脫分化，培養(yǎng)愈傷組織需要在培養(yǎng)基中添加等量的生長(zhǎng)素類和細(xì)胞分裂素類植

物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，C錯(cuò)誤；

D、過程③表示再分化，由于雜種細(xì)胞發(fā)生部分染色體缺失現(xiàn)象，可能含抗性基因的染色體

缺失，所以可采用DNA分子雜交技術(shù)鑒定植株是否含有抗性基因，D錯(cuò)誤。

故選Bo

15.（2021屆湖北省九師聯(lián)盟高三12月聯(lián)考（新高考）生物試題）嵌合體是指由兩個(gè)或兩個(gè)

以上具有不同遺傳物質(zhì)的細(xì)胞系形成的聚合胚胎發(fā)育而成的個(gè)體。嵌合體的制備是研究干細(xì)

胞體內(nèi)分化能力的有效方法之一，有望在未來為解決器官移植供體短缺等醫(yī)學(xué)難題開辟新的

方向。研究人員將小鼠誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞（iPSCs）注入到豬孤雌激活后的囊胚期胚胎后獲

得豬一鼠嵌合體。已知孤雌生殖是指某些生物在進(jìn)行有性生殖時(shí)不通過兩性生殖細(xì)胞的融

合，由卵子直接發(fā)育成子代個(gè)體的生殖現(xiàn)象。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A.培育嵌合體與克隆動(dòng)物的生物學(xué)原理相同，但操作方法有差別

B.iPSCs細(xì)胞的培養(yǎng)要置于滋養(yǎng)層細(xì)胞上，以維持其不分化的狀態(tài)

C.從豬卵巢抽取卵母細(xì)胞并培養(yǎng)成熟后，進(jìn)行激活培養(yǎng)可獲得孤雌胚胎

D.將iPSCs細(xì)胞注入豬囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)處才能獲得豬-鼠嵌合體

【答案】AB

【解析】

【分析】

1、胚胎移植的基本程序主要包括：

①對(duì)供、受體的選擇和處理。選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體，有健康的體質(zhì)和正常繁

殖能力的受體，供體和受體是同一物種。并用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對(duì)供體

母牛做超數(shù)排卵處理。

②配種或人工授精。

③對(duì)胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存。配種或輸精后第7天，用特制的沖卵裝置，把供體母

牛子宮內(nèi)的胚胎沖洗出來（也叫沖卵）。對(duì)胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查，此時(shí)的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑根胚

或囊胚階段。直接向受體移植或放入-196℃的液氮中保存。

④對(duì)胚胎進(jìn)行移植。

⑤移植后的檢查。對(duì)受體母牛進(jìn)行是否妊娠的檢查。

2、胚胎移植的生理學(xué)基礎(chǔ)：

①動(dòng)物發(fā)情排卵后，同種動(dòng)物的供、受體生殖器官的生理變化是相同的。這就為供體的胚胎

移入受體提供了相同的生理環(huán)境。

②早期胚胎在一定時(shí)間內(nèi)處于游離狀態(tài)。這就為胚胎的收集提供了可能。

③受體對(duì)移入子宮的外來胚胎不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。這為胚胎在受體內(nèi)的存活提供了可能。

④供體胚胎可與受體子宮建立正常的生理和組織聯(lián)系，但供體胚胎的遺傳特性在孕育過程中

不受影響。

【詳解】A、培育嵌合體的生物學(xué)原理是細(xì)胞的增殖和分化，克隆動(dòng)物的生物學(xué)原理是動(dòng)物

細(xì)胞核具有全能性，兩者的原理不相同，操作方法有差別，A錯(cuò)誤；

B、干細(xì)胞置于飼養(yǎng)層細(xì)胞上培養(yǎng)，可以維持不分化狀態(tài)，B錯(cuò)誤；

C、獲得孤雌胚胎需要從豬卵巢抽取卵母細(xì)胞培養(yǎng)成熟后，進(jìn)行激活，C正確；

D、由于內(nèi)細(xì)胞團(tuán)的細(xì)胞會(huì)發(fā)育成胚胎的各組織，故將iPSCs細(xì)胞注入豬囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)處

才能獲得豬-鼠嵌合體，D正確。

故選AB?

20.（2021屆湖北省“大課改大數(shù)據(jù)大測(cè)評(píng)”高三上學(xué)期聯(lián)合測(cè)評(píng)生物試題）研究發(fā)現(xiàn)甘蔗

莖尖經(jīng)適當(dāng)溫度處理后組織培養(yǎng)獲得的幼苗脫毒效果更好。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

接種到培養(yǎng)基

B中誘導(dǎo)生根

①②③④

A.甘蔗莖尖與其他成熟組織相比病毒含量更低

B.推測(cè)②過程的溫度導(dǎo)致部分病毒失去活性

C.過程③、④均屬于再分化，培養(yǎng)基A和B的激素比例不同

D.獲得的脫毒苗與原甘蔗苗相比細(xì)胞核遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變

【答案】D

【解析】

【分析】

植物的莖尖病毒極少，甚至無病毒，取芽培養(yǎng)可以利用其較強(qiáng)的分裂和分化能力培養(yǎng)脫毒苗,

經(jīng)過脫水處理脫毒效果好與阻礙病毒進(jìn)入有一定的關(guān)系，圖中的③、④均屬于再分化。

【詳解】A、莖尖細(xì)胞含有的病毒含量極少或者沒有病毒，A正確：

B、經(jīng)過熱水處理脫毒效果好與阻礙病毒進(jìn)入有關(guān)，其作用是使組織中的病毒在圖中處理溫

度下部分或全部失活，B正確：

C、過程③、④所用的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的含量和比例不同，C正確；

D、圖中獲得脫毒苗采用的是植物組織培養(yǎng)激素，該技術(shù)不改變生物的細(xì)胞核遺傳物質(zhì)，D

錯(cuò)誤。

故選D。

21.（2021屆湖北省九師聯(lián)盟高三12月聯(lián)考（新高考）生物試題）新型冠狀病毒（2019-nCoV,

一種RNA病毒）的S蛋白和N蛋白都是誘發(fā)機(jī)體免疫反應(yīng)的主要抗原。病毒載體疫苗是研

制新冠病毒疫苗的技術(shù)路線之一，下圖是生產(chǎn)重組腺病毒疫苗的流程?；卮鹣铝袉栴}：

（1）制備新冠病毒疫苗時(shí)，需將獲得的目的基因轉(zhuǎn)入轉(zhuǎn)移載體pShuttle質(zhì)粒，圖中的目的

基因應(yīng)選川。不能直接從2019-nCoV的基因組中獲取目的基因，理由是

（2）pAdEasy質(zhì)粒可表達(dá)出腺病毒，除了啟動(dòng)子、終止子、復(fù)制原點(diǎn)外，其相關(guān)基因序列

還包含（答兩種），過程①需要的酶是。

（3）若PacI酶在過程②中使用，該酶所作用的化學(xué)鍵是—。線性pAd需要轉(zhuǎn)入特定細(xì)

胞才能產(chǎn)生重組腺病毒，理由是。據(jù)圖分析，與重組pAd相比，線性pAd

對(duì)人體相對(duì)安全，理由是。

（4）通常將重組腺病毒進(jìn)行,可使人獲得新冠病毒的免疫力。

【答案】⑴.編碼S蛋白的基因或N蛋白的基因（2）.2019-nCoV的基因組為RNA,

不能轉(zhuǎn)移至質(zhì)粒上⑶.病毒基因（組）、標(biāo)記基因（4）.限制酶和DNA連接酶（5）.

磷酸二酯鍵（6）.基因的表達(dá)需要細(xì)胞提供場(chǎng)所、原料和酶等條件（7）.線性pAd缺失

復(fù)制原點(diǎn)，不會(huì)在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制（8）.肌肉注射

【解析】

【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、

終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)?/p>

入植物細(xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最

有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否

插入目的基因-DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA-分子雜交技術(shù)；

③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)-抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、

抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】（1）制備新冠病毒疫苗時(shí)，需將獲得的目的基因轉(zhuǎn)入轉(zhuǎn)移載體pShuttle質(zhì)粒，新

型冠狀病毒的S蛋白和N蛋白都是誘發(fā)機(jī)體免疫反應(yīng)的主要抗原，所以圖中的目的基因應(yīng)

選用編碼S蛋白的基因或N蛋白的基因。不能直接從2019-nCoV的基因組中獲取目的基因，

理由是2019-nCoV的基因組為RNA,不能轉(zhuǎn)移至質(zhì)粒上。

（2）pAdEasy質(zhì)?？杀磉_(dá)出腺病毒，除了啟動(dòng)子、終止子、復(fù)制原點(diǎn)外，其相關(guān)基因序列

還包含病毒基因（組人標(biāo)記基因，過程①是基因表達(dá)載體的構(gòu)建，需要的酶是限制酶和DNA

連接酶。

（3）若PacI酶在過程②中使用，該酶所作用的化學(xué)鍵是磷酸二酯鍵。由于基因的表達(dá)需

要細(xì)胞提供場(chǎng)所、原料和酶等條件，所以線性pAd需要轉(zhuǎn)入特定細(xì)胞才能產(chǎn)生重組腺病毒。

據(jù)圖分析，與重組pAd相比，線性pAd對(duì)人體相對(duì)安全，理由是線性pAd缺失復(fù)制原點(diǎn)，

不會(huì)在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制。

（4）通常將重組腺病毒進(jìn)行肌肉注射，可使人獲得新冠病毒的免疫力。

【點(diǎn)睛】本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的概念、原理及操作步驟，

掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題。

11..（2021屆九師聯(lián)盟高三12月聯(lián)考（新高考）生物試題）馬鈴薯四倍體栽培種沒有青枯病

的抗性基因，少數(shù)馬鈴薯野生種存在青枯病的抗性基因。由于核型等差異，野生種難以與四

倍體馬鈴薯栽培種直接雜交繁育，為獲得具有抗青枯病的馬鈴薯栽培種，研究人員進(jìn)行了植

物體細(xì)胞雜交的實(shí)驗(yàn)研究（已知雜種細(xì)胞會(huì)發(fā)生部分染色體缺失現(xiàn)象），過程如下圖所示.

下列分析正確的是（）

A.在低滲溶液中，用酶解法或聚乙二醇處理A和B可以獲得兩種原生質(zhì)體

B.過程①體現(xiàn)了生物膜的流動(dòng)性，可用顯微鏡觀察并篩選出雜種細(xì)胞C

C.過程②所配制的培養(yǎng)基中添加了等量的生長(zhǎng)素類和赤霉素類植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑

D.過程③為脫分化、再分化過程，可采用DNA分子雜交技術(shù)鑒定植株的抗病性狀

【答案】B

【解析】

【分析】

植物體細(xì)胞雜交技術(shù)：

1、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)：就是將不同種的植物體細(xì)胞原生質(zhì)體在一定條件下融合成雜種細(xì)

胞，并把雜種細(xì)胞培育成完整植物體的技術(shù)。

2、過程:

（1）誘導(dǎo)融合的方法：物理法包括離心、振動(dòng)、電刺激等?；瘜W(xué)法一般是用聚乙二醇（PEG）

作為誘導(dǎo)劑。

（2）細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是新的細(xì)胞壁的生成。

（3）植物體細(xì)胞雜交的終點(diǎn)是培育成雜種植株，而不是形成雜種細(xì)胞就結(jié)束。

（4）雜種植株的特征：具備兩種植物的遺傳特征，原因是雜種植株中含有兩種植物的遺傳

物質(zhì)。

3、意義：克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。

【詳解】A、酶解法可用于去除細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體，但不能在低滲溶液中進(jìn)行，否則原生

質(zhì)體會(huì)吸水漲破，獲得原生質(zhì)體不能采用聚乙二醇，A錯(cuò)誤；

B、過程①代表原生質(zhì)體的融合，利用了生物膜的流動(dòng)性，由于一種細(xì)胞選用具有葉綠體的

葉肉細(xì)胞，一種選用不含葉綠體的胚軸細(xì)胞，所以可用顯微鏡觀察并篩選出雜種細(xì)胞c,B

正確；

C、過程②為脫分化，培養(yǎng)愈傷組織需要在培養(yǎng)基中添加等量的生長(zhǎng)素類和細(xì)胞分裂素類植

物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，C錯(cuò)誤；

D、過程③表示再分化，由于雜種細(xì)胞發(fā)生部分染色體缺失現(xiàn)象，可能含抗性基因的染色體

缺失，所以可采用DNA分子雜交技術(shù)鑒定植株是否含有抗性基因，D錯(cuò)誤。

故選Bo

昆明市第一中學(xué)2021屆高中新課標(biāo)高三第四次一輪復(fù)習(xí)檢

測(cè)理科綜合試卷生物部分

［生物一選修1：生物技術(shù)實(shí)踐］

［生物一選修3：現(xiàn)代生物科技專題］

12.（2021屆云南省昆明市一中高三第四次復(fù)習(xí)檢測(cè)理綜生物試題）農(nóng)業(yè)生態(tài)工程能增加農(nóng)民

收人、開發(fā)可以更新的資源、減少環(huán)境污染。下圖是某家庭農(nóng)場(chǎng)示意圖?；卮鹑讼铝袉栴}。

光飼料

（1）流經(jīng)該生態(tài)系統(tǒng)的總能量是。

（2）該生態(tài)農(nóng)業(yè)所遵循的生態(tài)學(xué)基本原理是（至少答兩點(diǎn)），其優(yōu)點(diǎn)是—

（3）果園中年年種植單一品種果樹往往會(huì)造成病蟲害增加，因此農(nóng)場(chǎng)主在果園內(nèi)間種甘薯、

油菜可提高果園的穩(wěn)定性，原理是,每種作物的種植量不宜超過其。

（4）為提高產(chǎn)量，農(nóng)場(chǎng)主不僅需要適量施加氮肥，還要進(jìn)行除草和滅害蟲等工作，從物質(zhì)

循環(huán)的角度分析，適量施加氮肥的主要原因是。

（5）該生態(tài)系統(tǒng)中哪些途徑實(shí)現(xiàn)了能量的多級(jí)利用？（至少答兩

條）。

【答案】（1）.生產(chǎn)者通過光合作用固定的太陽能和飼料中含有的能量（2）.物質(zhì)循環(huán)

再生原理、物種多樣性原理、整體性原理（3）.使廢物資源化，以便提高能量利用率，減

少環(huán)境污染（4）.種植多種作物能提高果園的生物多樣性，為各類生物的生存提供多種機(jī)

會(huì)和條件，使果園的營養(yǎng)結(jié)構(gòu)復(fù)雜化，提高生態(tài)系統(tǒng)的自我調(diào)節(jié)能力（5）.環(huán)境容納量（或

環(huán)境承載力）（6）.該生態(tài)系統(tǒng)中的氮元素不斷隨農(nóng)產(chǎn)品、畜產(chǎn)品大量輸出，需要不斷地

補(bǔ)充（7）.果樹、甘薯、油菜的廢棄物飼養(yǎng)動(dòng)物；消費(fèi)者的糞便等廢棄物作為沼氣發(fā)酵的

原料，產(chǎn)生供人利用的清潔能源

【解析】

【分析】

1,建立該人工生態(tài)系統(tǒng)的目的是實(shí)現(xiàn)對(duì)能量的多級(jí)利用，提高能量的利用率，減少環(huán)境污

染。

2、與種植單一作物的農(nóng)田相比，該生態(tài)系統(tǒng)生物種類多，自我調(diào)節(jié)能力強(qiáng)，建立該生態(tài)系

統(tǒng)遵循的原理主要是物質(zhì)循環(huán)再生原理和生物多樣性原理。

【詳解】（1）該系統(tǒng)為人工生態(tài)系統(tǒng)，故流經(jīng)該生態(tài)系統(tǒng)的總能量是生產(chǎn)者通過光合作用固

定的太陽能和飼料中含有的能量。

（2）該農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)中有多種物種，遵循了物種多樣性原理，通過多層次分級(jí)利用有機(jī)廢

棄物中的物質(zhì)，既充分利用了有機(jī)物中的能量、又減少環(huán)境污染，同時(shí)兼顧了經(jīng)濟(jì)、社會(huì)和

環(huán)境效益，故遵循了整體性原理。即該生態(tài)農(nóng)業(yè)所遵循的生態(tài)學(xué)基本原理是物質(zhì)循環(huán)再生原

理、物種多樣性原理、整體性原理；其優(yōu)點(diǎn)是使廢物資源化，以便提高能量利用率，減少環(huán)

境污染。

（3）在農(nóng)業(yè)和林業(yè)生產(chǎn)中，連年種植單一品種會(huì)造成病蟲害增加，其主要原因是營養(yǎng)結(jié)構(gòu)

簡(jiǎn)單，生態(tài)系統(tǒng)的抵抗力穩(wěn)定性降低，而農(nóng)場(chǎng)主在果園內(nèi)間種甘薯、油菜可提高果園的穩(wěn)定

性,是因?yàn)榉N植多種作物能提高果園的生物多樣性,為各類生物的生存提供多種機(jī)會(huì)和條件,

使果園的營養(yǎng)結(jié)構(gòu)復(fù)雜化，提高牛態(tài)系統(tǒng)的自我調(diào)節(jié)能力；但由于環(huán)境的承載能力是有一定

限度的，故每種作物的種植量不宜超過其環(huán)境容納量（或環(huán)境承載力）。

（4）從物質(zhì)循環(huán)的角度分析，該生態(tài)系統(tǒng)中仍需適量施加氮肥，主要原因是該生態(tài)系統(tǒng)中

的氮元素不斷隨農(nóng)產(chǎn)品、畜產(chǎn)品大量輸出，需要不斷補(bǔ)充適量氮源。

（5）該生態(tài)系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)了能量的多級(jí)利用，主要表現(xiàn)在：果樹、甘薯、油菜的廢棄物飼養(yǎng)動(dòng)

物；消費(fèi)者的糞便等廢棄物作為沼氣發(fā)酵的原料，產(chǎn)生供人利用的清潔能源。

【點(diǎn)睛】本題考查生態(tài)農(nóng)業(yè)工程，要求考生識(shí)記生態(tài)農(nóng)業(yè)工程的原理及實(shí)例，掌握生態(tài)農(nóng)業(yè)

的優(yōu)點(diǎn)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題。

［生物——選修3:現(xiàn)代生物科技專題］

12.（2021屆卓越聯(lián)盟高三12月聯(lián)考理綜生物試題）通過基因工程將抗生素基因轉(zhuǎn)入植物體

內(nèi)，可以增強(qiáng)植物抗病菌的能力。據(jù)此回答下列問題。

（1）抗生素能選擇性地作用于細(xì)菌的DNA、RNA和合成系統(tǒng)的特定環(huán)節(jié)，干擾細(xì)胞的

代謝作用，妨礙生命活動(dòng)或使其停止生長(zhǎng)，甚至死亡?？股匕l(fā)揮作用的主要場(chǎng)所都有

（2）基因工程中常需要使用的DNA連接酶有E.coliDNA連接酶和T4DNA連接酶兩種，這兩

種連接酶在作用底物方面的主要差別是o

（3）若要使目的基因在受體細(xì)胞中表達(dá)，需要構(gòu)建基因表達(dá)載體，基因表達(dá)載體包含目的基

因、啟動(dòng)子、―復(fù)制原點(diǎn)。

（4）將目的基因?qū)胫参矬w細(xì)胞通常用。原理是利用其菌體中質(zhì)粒的T-DNA

片段可的特點(diǎn)。

（5）要確認(rèn)抗生素基因是否在轉(zhuǎn)基因植株中正確表達(dá)，應(yīng)檢測(cè)轉(zhuǎn)基因植株中該基因的

是否呈陽性。

【答案】（1）.蛋白質(zhì)⑵.擬核（或細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)）和核糖體⑶.E.coliDNA連接酶

只能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的粘性末端之間連接起來，TQNA連接酶既可以連接雙鏈DNA

片段互補(bǔ)的粘性末端，也可以連接雙鏈DNA片段的平末端（4）.標(biāo)記基因（5）.終止

子（6）.農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法（7）.轉(zhuǎn)移并整合到染色體DNA上（8）.表達(dá)產(chǎn)物

【解析】

【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、

終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)?/p>

入植物細(xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最

有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插

入目的基因（DNA分子雜交技術(shù)）；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mR\A（分子雜交技術(shù)）；③

檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)（抗原-抗體雜交技術(shù)）。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗

病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】（1）抗生素能選擇性地作用于細(xì)菌體細(xì)胞DNA、RNA和蛋白質(zhì)合成系統(tǒng)的特定環(huán)

節(jié)，干擾細(xì)胞的代謝作用，妨礙生命活動(dòng)或使其停止生長(zhǎng)，甚至死亡。DNA復(fù)制、RNA合成

的場(chǎng)所是擬核（或細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)），蛋白質(zhì)場(chǎng)所是核糖體，故抗生素發(fā)揮作用的主要場(chǎng)所是擬

核（或細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)）和核糖體。

（2）基因工程中常需要使用DNA連接酶，既能連接黏性末端，又能連接平末端的DNA連

接酶是TQNA連接酶，只能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的粘性末端之間連接起來的是E.coliDNA

連接酶。

（3）基因表達(dá)載體需要包含的結(jié)構(gòu)有目的基因、標(biāo)記基因、啟動(dòng)子、終止子、復(fù)制原點(diǎn)。

（4）菌體中質(zhì)粒的T-DNA片段可轉(zhuǎn)移并整合到染色體DNA上，因此常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目

的基因?qū)胫参矬w細(xì)胞。

（5）要確認(rèn)抗生素基因是否在轉(zhuǎn)基因植株中正確表達(dá)，應(yīng)用抗原-抗體雜交的方法檢測(cè)轉(zhuǎn)基

因植株中該基因的表達(dá)產(chǎn)物是否呈陽性。

【點(diǎn)睛】掌握基因工程的相關(guān)知識(shí)，能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)解決相關(guān)的生物學(xué)問題是解題的關(guān)鍵。

［生物——選修3:現(xiàn)代生物科技專題］

12.（黑龍江省哈爾濱市六中2020-2021學(xué)年高三上學(xué)期期末理綜生物試題）某種植物甲能抗

真菌病，其抗性是由細(xì)胞內(nèi)的幾丁質(zhì)酶基因A決定的。利用基因工程將甲的A基因轉(zhuǎn)移到

乙植物體內(nèi)，可提高乙抗真菌病的能力。請(qǐng)回答下列問題：

（1）在獲取目的基因A時(shí)，可從甲的細(xì)胞中提取幾丁質(zhì)酶的mRNA,然后合成cDNA。利用

mRNA合成cDNA的過程稱為—；也可以利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因A,進(jìn)行PCR擴(kuò)增

時(shí)，反應(yīng)體系加熱到90?95℃時(shí)，DNA雙鏈間的鍵打開，延伸的過程中在熱穩(wěn)定DNA

聚合醐的作用下形成—鍵。

（2）在利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法時(shí)，需將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA中，原因是「一；將

目的基因插入到T-DNA中用到的工具酶有—（答兩種）。

（3）在獲得轉(zhuǎn)基因植物乙后，可利用分子檢測(cè)來檢測(cè)乙的細(xì)胞中是否存在A基因的表達(dá)產(chǎn)

物蛋白質(zhì)，可采用一。

（4）實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，將攜帶了A基因的乙植株體細(xì)胞進(jìn)行離體培養(yǎng)，會(huì)獲得具有抗真菌病能力

的完整植株。植物細(xì)胞發(fā)育成完整植株的潛能稱作，其根本原因是o

【答案】⑴.逆轉(zhuǎn)錄（2）.氫鍵（3）.磷酸二酯鍵⑷.T-DNA可轉(zhuǎn)移到植物細(xì)

胞中，并能整合到染色體DNA上（5）.限制酶和DNA連接酶（6）.抗原一抗體雜交

（7）.細(xì)胞的全能性⑻.分化后的植物細(xì)胞中具有形成完整植株的全部基因

【解析】

【分析】基因工程又稱基因拼接技術(shù)和DNA重組技術(shù)，是以分子遺傳學(xué)為理論基礎(chǔ)，以分

子生物學(xué)和微生物學(xué)的現(xiàn)代方法為手段，將不同來源的基因按預(yù)先設(shè)計(jì)的藍(lán)圖，在體外構(gòu)建

雜種DNA分子，然后導(dǎo)入活細(xì)胞，以改變生物原有的遺傳特性、獲得新品種、生產(chǎn)新產(chǎn)品

的遺傳技術(shù)。

【詳解】（1）以DNA的一條鏈為模板合成RNA的過程稱為轉(zhuǎn)錄，而以RNA為模板合成DNA

的過程稱為逆轉(zhuǎn)錄。PCR是體外進(jìn)行DNA的復(fù)制，復(fù)制以DNA的兩條鏈為模板，因此應(yīng)先

打開DNA的兩條鏈，即破壞氫鍵。然后在DNA聚合酶的作用下形成磷酸二酯鍵，使得小分

子脫氧核甘酸可以聚合形成大分子DNA。

（2）T-DNA可轉(zhuǎn)移到植物細(xì)胞中，并能整合到染色體DNA上，因此需將目的基因插入到Ti

質(zhì)粒的T-DNA中。將目的基因插入到T-DNA中用到的工具酶有限制酶和DNA連接酶，先用

限制酶使得目的基因和T-DNA具有相同的粘性末端，再用DNA連接酶使其連成重組DNA分

子。

（3）利用分子檢測(cè)來檢測(cè)乙的細(xì)胞中是否存在A基因的表達(dá)產(chǎn)物蛋白質(zhì)，可以采用抗原一

抗體雜交的方法：把A基因的表達(dá)產(chǎn)物當(dāng)成抗原，加入能與其特異性結(jié)合的抗體，若有產(chǎn)

物，則能形成抗原-抗體復(fù)合物。

（4）植物細(xì)胞具有全能性，具有發(fā)育成完整植株的潛能，原因是分化后的植物細(xì)胞中具有

形成完整植株的全部基因，可以控制該植株的性狀。

【點(diǎn)睛】本題主要考查轉(zhuǎn)基因技術(shù)的相關(guān)知識(shí)，要求學(xué)生有一定的理論聯(lián)系實(shí)際的能力。

36.（江西省南昌市十中2020-2021學(xué)年高三上學(xué)期第二次月考生物試題）溶菌酶具有強(qiáng)力殺

菌作用。人乳汁中溶菌酶的含量比牛、綿羊和山羊乳汁中溶菌酶的含量高出1500~4000倍，

破壞和溶解細(xì)菌的能力約為牛乳汁中溶菌酶的300倍。我國科學(xué)家設(shè)想通過構(gòu)建乳腺特異表

達(dá)載體等培育出人溶菌酶轉(zhuǎn)基因豬，從而增強(qiáng)仔豬的免疫力，提高其存活率。回答下列問題:

（1）人乳汁中的溶菌酶具有殺菌作用，但其不屬于人體的第二道防線，原因是

（2）乳腺特異表達(dá)載體的組成中，位于人溶菌酶基因的首端的是。它能驅(qū)

動(dòng)人溶菌酶基因在豬的乳腺中轉(zhuǎn)錄出。

（3）將轉(zhuǎn)人溶菌酶基因的細(xì)胞注入豬的卵母細(xì)胞，通過一定的方法構(gòu)建出

重組胚胎；利用胚胎分割技術(shù)可獲得多只轉(zhuǎn)基因豬，這體現(xiàn)了早期胚胎細(xì)胞具有

（4）檢測(cè)人溶菌酶基因?qū)胧欠癯晒?，可以采用技術(shù)，若要進(jìn)行個(gè)體生物

學(xué)水平的鑒定，可以進(jìn)行抑菌實(shí)驗(yàn)檢測(cè)

【答案】（1）.體液中的殺菌物質(zhì)和吞噬細(xì)胞是保衛(wèi)人體的第二道防線，而乳汁不屬于體

液（2）.豬的乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子（3）.mRNA⑷.去核⑸.全能性⑹.

DNA分子雜交（7）.豬乳汁中溶菌酶的生物活性

【解析】

【分析】

抗原不都是外來物質(zhì)，體內(nèi)異常細(xì)胞也能被特異性免疫系統(tǒng)識(shí)別；吞噬細(xì)胞可以清除被抗體

結(jié)合后形成的沉淀物或細(xì)胞集團(tuán)：漿細(xì)胞只能分泌抗體，沒有識(shí)別抗原的能力。

【詳解】（1）體液中的殺菌物質(zhì)和吞噬細(xì)胞是保衛(wèi)人體的第二道防線，而乳汁不屬于體液。

（2）要想讓人溶菌酶基因在豬的乳腺中特異表達(dá)，可在人溶菌酶基因的首端接入豬的乳腺

蛋白基因的啟動(dòng)子，這樣人溶菌酶基因就能在豬的乳腺中轉(zhuǎn)錄出mRNA（信使RNA）。

（3）進(jìn)行細(xì)胞核移植時(shí)，受體細(xì)胞應(yīng)選擇豬去核的卵母細(xì)胞；早期胚胎細(xì)胞具有全能性，

利用胚胎分制技術(shù)將重組胚胎分隔開，再通過一定的方法可獲得多只轉(zhuǎn)基因豬。

（4）檢測(cè)目的基因?qū)胧欠癯晒?，可以采用DNA分子雜交技術(shù)，若要進(jìn)行個(gè)體生物學(xué)水

平的鑒定，可以進(jìn)行抑菌實(shí)驗(yàn)檢測(cè)豬乳汁中（重組人）溶菌酶的生物活性。

【點(diǎn)睛】本題主要考查基因工程和胚胎工程，考查學(xué)生的理解能力。

15.（（新高考）2020-2021學(xué)年高三上學(xué)期期末備考金卷生物試題（B卷））關(guān)于利用細(xì)胞

工程方法，以H7N9病毒的核衣殼蛋白為抗原制備單克隆抗體，下列相關(guān)敘述正確的是（）

A.用純化的核衣殼蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi)，產(chǎn)生的血清抗體為單克隆抗體

B.體外培養(yǎng)單個(gè)已免疫的B淋巴細(xì)胞可以獲得大量抗H7N9病毒的單克隆抗體

C.將等量已免疫的B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞混合，經(jīng)PEG誘導(dǎo)融合后的細(xì)胞均為雜交瘤細(xì)

胞

D.利用該單克隆抗體與H7N9病毒的核衣殼蛋白特異性結(jié)合的方法可診斷出H7N9病毒感染

者

【答案】D

【解析】

【分析】

單克隆抗體的制備過程是：對(duì)小動(dòng)物注射抗原，從該動(dòng)物的脾臟中獲取效應(yīng)B細(xì)胞；將效應(yīng)

B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞；克隆化培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞（體

內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)），最后獲取單克隆抗體。誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法有：物理法（離心、

振動(dòng)）、化學(xué)法（聚乙二醵）、生物法（滅活的病毒）。

【詳解】A、用純化的核衣殼蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi)，產(chǎn)生的血清抗體化學(xué)性質(zhì)不單一，

不是單克隆抗體，A錯(cuò)誤；

B、體外培養(yǎng)單個(gè)已免疫的B淋巴細(xì)胞，由于該B淋巴細(xì)胞不能無限