廣東省增城市2025屆高三第二次診斷性檢測生物試卷含解析

廣東省增城市2025屆高三第二次診斷性檢測生物試卷注意事項：1．答卷前，考生務必將自己的姓名、準考證號、考場號和座位號填寫在試題卷和答題卡上。用2B鉛筆將試卷類型（B）填涂在答題卡相應位置上。將條形碼粘貼在答題卡右上角"條形碼粘貼處"。2．作答選擇題時，選出每小題答案后，用2B鉛筆把答題卡上對應題目選項的答案信息點涂黑；如需改動，用橡皮擦干凈后，再選涂其他答案。答案不能答在試題卷上。3．非選擇題必須用黑色字跡的鋼筆或簽字筆作答，答案必須寫在答題卡各題目指定區(qū)域內(nèi)相應位置上；如需改動，先劃掉原來的答案，然后再寫上新答案；不準使用鉛筆和涂改液。不按以上要求作答無效。4．考生必須保證答題卡的整潔?？荚嚱Y(jié)束后，請將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．下列關(guān)于臭氧的敘述錯誤的是（）A．臭氧層能保護人類免受短波輻射傷害B．氟利昂會影響平流層中的臭氧含量C．臭氧層出現(xiàn)空洞會使水產(chǎn)品產(chǎn)量下降D．各國對臭氧層的重要作用還沒有清醒認識2．下列相關(guān)說法中，正確的有幾項是（）①有絲分裂和減數(shù)分裂皆有細胞周期②豌豆雖然有X、Y染色體，但是自然情況下一般是自花傳粉，閉花授粉③雄性蜜蜂能夠正常進行減數(shù)分裂，產(chǎn)生的精子染色體數(shù)目比初級精母細胞減少一半④胰島素和胰高血糖素的功能相互拮抗，所以一方出現(xiàn)必然抑制另一方⑤人體體溫調(diào)節(jié)時，只有冬天存在神經(jīng)調(diào)節(jié)和體液調(diào)節(jié)⑥感受器一定是傳入神經(jīng)末梢和它所支配的附屬結(jié)構(gòu)共同構(gòu)成A．零項 B．一項 C．二項 D．三項3．關(guān)于生物體產(chǎn)生的酶的敘述，錯誤的是（）A．酶的化學本質(zhì)是蛋白質(zhì)或RNA B．脲酶能夠?qū)⒛蛩胤纸獬砂焙虲O2C．蛋白酶和淀粉酶都屬于水解酶類 D．纖維素酶能夠降解植物細胞壁和細菌細胞壁4．在細胞周期中有一系列的檢驗點對細胞增殖進行嚴密監(jiān)控，確保細胞增殖有序進行。周期蛋白cyclinB與蛋白激酶CDK1結(jié)合形成復合物MPF后，被激活的CDK1促進細胞由G2期進入M期；周期蛋白cyclinE與蛋白激酶CDK2結(jié)合形成復合物后，被激活的CDK2促進細胞由G1期進入S期。上述調(diào)控過程中MPF的活性和周期蛋白的濃度變化如下圖所示。有關(guān)敘述錯誤的是（）A．抑制cyclinB基因的表達或CDK1的活性都可使細胞周期停滯在G2/M檢驗點B．cyclinE可能與細胞內(nèi)染色質(zhì)螺旋化和紡錘體的形成密切相關(guān)C．若將G2期和M期細胞融合，則G2期細胞進入M期的時間會提前D．蛋白激酶CDK2可能參與了中心體復制的起始調(diào)控5．下列有關(guān)組織細胞中化合物鑒定實驗的敘述，正確的是（）A．脂肪鑒定實驗中，應使用體積分數(shù)為95%的酒精洗去浮色B．蛋白酶和蛋白質(zhì)的混合溶液中加入雙縮脲試劑后，仍然會產(chǎn)生紫色反應C．酵母菌進行有氧呼吸和無氧呼吸的產(chǎn)物都能用酸性重鉻酸鉀溶液來鑒定D．將斐林試劑加入葡萄糖溶液中后，溶液呈現(xiàn)無色，水浴加熱后有磚紅色沉淀生成6．下列有關(guān)物質(zhì)跨膜運輸?shù)臄⑹?，正確的是（）A．生長素極性運輸時不需要消耗能量B．固醇類激素進入靶細胞的過程屬于主動運輸C．神經(jīng)細胞受到刺激時產(chǎn)生的內(nèi)流屬于被動運輸D．護膚品中的甘油進入皮膚細胞的過程屬于協(xié)助擴散7．生命是物質(zhì)、能量和信息的統(tǒng)一體。下列物質(zhì)的生物合成不需要信息分子作為合成模板的是（）A．DNA和mRNAB．mRNA和血紅蛋白C．胃蛋白酶和胃蛋白酶基因D．ATP和NADPH8．（10分）下圖為轉(zhuǎn)錄過程中的一個片段，其核苷酸的種類有A．6種B．8種C．4種D．5種二、非選擇題9．（10分）2020年初新型冠狀病毒感染的肺炎患者的臨床表現(xiàn)與普通流感患者的臨床表現(xiàn)差別并不大，因此運用核酸檢測試劑盒進行確診十分必要，其檢測原理是采集患者的血液，肺部分泌物或咽拭子等樣本，提取樣本中的RNA，與試劑盒中的DNA片段進行配對，如果為陽性就可以確診。該檢測方法靈敏度很高，測試出結(jié)果只需要幾個小時。請回答下列相關(guān)問題：（1）新型冠狀病毒在人體內(nèi)增殖所需的原料、能量來自于_______。對病毒基因組測序是制備核酸檢測試劑盒必不可少的步驟，該病毒的基因組是指病毒體內(nèi)以核苷酸序列形式存儲的_______________。（2）試劑盒中的DNA片段是以新型冠狀病毒的RNA分子為模板，經(jīng)_________過程形成。用核酸檢測試劑盒檢測靈敏度較高的原因是______________________。（3）在2003年的“非典”中，核酸檢測試劑盒技術(shù)尚未普及，當時對“非典”的臨床診斷主要是在患者產(chǎn)生抗體后，通過抗原與抗體雜交實驗來完成免疫學測定，該檢測方法的原理是__________________?？贵w在患者體內(nèi)的作用是_______________________。10．（14分）回答有關(guān)微生物的問題．Ⅰ、凝乳酶是奶酪生產(chǎn)中的關(guān)鍵性酶．培育產(chǎn)高酶活力凝乳酶微生物菌種是目前最有前途的發(fā)展方向．圖1為產(chǎn)高酶活力凝乳酶的枯草芽孢桿菌培育過程．（1）枯草芽孢桿菌的芽孢是__________．A．休眠體B．營養(yǎng)繁殖體C．孢子D．營養(yǎng)體（2）圖1所示的b過程的目的是為__________，接種用的平板培養(yǎng)基在制備時需注意的是__________．A．待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時進行倒平板B．倒好的培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿要進行高壓滅菌處理C．等到平板培養(yǎng)基冷卻凝固后才可以蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋D．待平板冷卻凝固約5﹣10min后將平板倒過來放置Ⅱ、在35℃、40分鐘內(nèi)能凝固1mL10%奶粉所需的酶量為一個酶活力單位（U）．圖2表示圖1中提取得到的各種凝乳酶活力檢測結(jié)果．（3）據(jù)圖2所示，酶催化能力最強的是__________組，而各組酶催化能力存在差異的原因是__________．（4）A2、A5組酶活力與A0組芽孢桿菌相同，兩位同學對此做出了推測：①同學甲：A2、A5組芽孢桿菌可能未發(fā)生基因突變，用__________技術(shù)檢測即可證實．②同學乙：A2、A5組與A0組酶活力雖然相同，但也可能存在不同的基因突變，理論上的解釋是__________．11．（14分）在熒光素酶中加入正確的熒光素底物就可以放出熒光。熒光素酶及其合成基因在生物研究中有著廣泛的應用。請回答下列問題：（1）熒光素酶基因可以從基因文庫中獲取，也可以通過________方法得到，再利用PCR技術(shù)擴增即可，擴增熒光素酶基因利用的原理是__________________。（2）在基因工程操作過程中，需要用________酶和________酶構(gòu)建基因表達載體，基因表達載體要有________，以便篩選出含有目的基因的受體細胞。（3）熒光素酶基因也可以作為目的基因轉(zhuǎn)入某些動植物細胞中表達產(chǎn)生熒光素酶。將目的基因?qū)胫参锛毎?，目前常用的目的基因載體是農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒，目的基因需插入到該基因載體的________上，然后再轉(zhuǎn)移至受體細胞中。將目的基因?qū)雱游锛毎募夹g(shù)中，應用最多的是_______。12．鋁在土壤中常以鋁酸鹽的形式存在，可造成土壤酸化而影響植物生長。鋁能抑制植物根尖細胞的分裂，破壞根組織。某植物甲的根毛細胞的細胞膜上存在蘋果酸通道蛋白（ALMT），該通道蛋白能將蘋果酸轉(zhuǎn)運到細胞外來緩解鋁毒。可將控制ALMT的基因?qū)氩荒弯X的植物中，最終獲得耐鋁植物。請回答下列問題：（1）下表是運載體上出現(xiàn)的幾種限制酶的識別序列及切割位點。用表中的限制酶切割DNA后能形成相同黏性末端的是_____。限制酶識別序列和切割位點EcoRIG1AATTCBamHIG1GATCCHindIIIA1AGCTTXhoIC1TCGAGNdeICA1TATGSalIG1TCGAC（2）欲獲得ALMT基因的cDNA，科研人員從_______細胞中獲取總mRNA，在相應酶作用下獲得多種cDNA，再利用ALMT基因制作出特異性________，通過PCR方法得到ALMT基因的cDNA。（3）啟動子是_______識別并結(jié)合的位點，能調(diào)控目的基因的表達。ALMT基因的啟動子有兩種類型，其中α啟動子能使ALMT基因在酸性土壤的誘導下表達，β啟動子能使ALMT基因高效表達而無需酸性誘導。在獲得轉(zhuǎn)ALMT基因耐鋁植物時應使用_______啟動子，不使用另外一種啟動子的原因是_____________________。（4）科研人員采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，首先將ALM基因?qū)胫参锛毎⒄系绞荏w細胞染色體的DNA上，再通過_____技術(shù)成功獲得了耐鋁植株。若將一株耐鋁植株與普通植株雜交，得到的后代中耐鋁植株：普通植株約為3：1，則可判斷這株耐鋁植株細胞至少轉(zhuǎn)入了_____個ALMT基因，轉(zhuǎn)入的基因在染色體上的位置關(guān)系是：______；若使這株耐鋁植株自交，后代中耐鋁植株：普通植株約為_______。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、D【解析】

紫外線輻射能被蛋白質(zhì)和核酸吸收，并破壞蛋白質(zhì)和核酸的化學鍵，因此對生物有極大的殺傷力，還能引起基因突變。紫外線能使一些氧分子裂變成游離的氧原子，并和另一些氧分子結(jié)合成臭氧（O3），紫外線也可使臭氧裂變成氧氣，在平流層，氧氣和臭氧是保持平衡的。但是近年來，人類的活動正在逐漸破壞著這種平衡，使臭氧的分解過程大于合成過程。導致大氣中臭氧減少和耗竭的物質(zhì)主要是平流層內(nèi)超音速飛機排放的大量含氮廢氣以及冰箱和空調(diào)使用過程中散發(fā)出的氟利昂。臭氧層耗損和臭氧層空洞對人類與其他生物的主要危害包括：人類皮膚癌和白內(nèi)障等疾病的發(fā)病率提高；人體免疫系統(tǒng)受到抑制等?！驹斀狻緼、臭氧層能保護人類免受短波輻射傷害，A正確；B、氟利昂會影響平流層中的臭氧含量，B正確；C、臭氧層出現(xiàn)空洞會使水產(chǎn)品產(chǎn)量下降，C正確；D、各國對臭氧層的重要作用有清醒認識，D錯誤。故選D?！军c睛】本題主要考查臭氧層等知識，意在考查學生的理解與表達能力。2、A【解析】

只有連續(xù)分裂的細胞才有細胞周期。含有性染色體的生物一般為雌雄異體的生物。雄蜂屬于單倍體，產(chǎn)生精子的過程與有絲分裂類似。寒冷環(huán)境下的體溫調(diào)節(jié)主要是神經(jīng)-體液調(diào)節(jié)，炎熱環(huán)境下的體溫調(diào)節(jié)主要是神經(jīng)調(diào)節(jié)?！驹斀狻竣贉p數(shù)分裂沒有細胞周期，①錯誤；②豌豆為兩性植株，在自然情況下一般是自花傳粉、閉花授粉，沒有X、Y染色體，②錯誤；③雄性蜜蜂是由未受精的卵細胞直接發(fā)育形成的，為單倍體，不能夠正常進行減數(shù)分裂，其產(chǎn)生精子的過程類似有絲分裂，產(chǎn)生的精子中染色體數(shù)目與初級精母細胞相等，③錯誤；④胰島素的分泌可抑制胰高血糖素的分泌，而胰高血糖素的分泌可促進胰島素的分泌，④錯誤；⑤無論哪個季節(jié)，人體的體溫調(diào)節(jié)都既存在神經(jīng)調(diào)節(jié)又存在體液調(diào)節(jié)，⑤錯誤；⑥感受器是感覺神經(jīng)（傳入神經(jīng)）末梢的部分，大多數(shù)具有附屬結(jié)構(gòu)，⑥錯誤。綜上分析，A正確，BCD錯誤。故選A。【點睛】本題易錯點是雄蜂產(chǎn)生配子的過程，要注意雄蜂是單倍體，細胞中只含有受精卵中一半的染色體。3、D【解析】絕大多數(shù)酶是蛋白質(zhì)，極少數(shù)酶是RNA，A正確；脲酶能夠?qū)⒛蛩胤纸獬砂焙虲02，B正確；蛋白酶和淀粉酶都屬于水解酶類，C正確；細菌細胞壁的主要成分是肽聚糖，根據(jù)酶的專一性，纖維素酶不能降解細菌細胞壁，D錯誤?！究键c定位】酶的概念；酶的特性【名師點睛】解答本題，要熟練掌握酶的相關(guān)知識點：1、理解酶的概念：酶是由活細胞產(chǎn)生的具有催化活性的有機物，其中大部分是蛋白質(zhì)、少量是RNA。2、牢記酶的特性：①高效性：酶的催化效率大約是無機催化劑的107～1013倍。②專一性：每一種酶只能催化一種或者一類化學反應。③酶的作用條件較溫和：在最適宜的溫度和pH條件下，酶的活性最高；溫度和pH偏高或偏低，酶的活性都會明顯降低。4、B【解析】

有絲分裂間期：1、G1期主要進行RNA和蛋白質(zhì)的生物合成，并且為下階段S期的DNA合成做準備；2、S期最主要的特征是DNA的合成；3、G2期主要為M期做準備，但是還有RNA和蛋白質(zhì)的合成，不過合成量逐漸減少?！驹斀狻緼、由題干可知，周期蛋白cyclinB與蛋白激酶CDK1結(jié)合，可促進細胞由G2期進入M期，故抑制cyclinB基因的表達或CDK1的活性，都可使細胞周期停滯在G2/M檢驗點，A正確；B、由題干可知，周期蛋白cyclinE與蛋白激酶CDK2結(jié)合，促進細胞由G1期進入S期，而細胞內(nèi)染色質(zhì)螺旋化和紡錘體的形成在細胞分裂前期，B錯誤；C、由圖示看出，M期細胞中MPF的活性較高，若將G2期和M期細胞融合，則G2期細胞進入M期的時間會提前，C正確；D、中心體復制在S期，被激活的CDK2可促進細胞由G1期進入S期，故蛋白激酶CDK2可能參與了中心體復制的起始調(diào)控，D正確。故選B?！军c睛】本題考查細胞有絲分裂不同時期特點的相關(guān)知識，意在考查考生理解所學知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系、獲取題干信息以及解決問題的能力。5、B【解析】

生物組織中化合物的鑒定：（1）斐林試劑可用于鑒定還原糖，在水浴加熱的條件下，溶液的顏色變化為磚紅色（沉淀）。斐林試劑只能檢驗生物組織中還原糖（如葡萄糖、麥芽糖、果糖）存在與否，而不能鑒定非還原性糖（如淀粉）。（2）蛋白質(zhì)可與雙縮脲試劑產(chǎn)生紫色反應。（3）脂肪可用蘇丹Ⅲ染液（或蘇丹Ⅳ染液）鑒定，呈橘黃色（或紅色）。【詳解】在脂肪的鑒定實驗中，用50%的酒精洗去浮色的原因是蘇丹Ⅲ易溶于酒精，A錯誤；蛋白質(zhì)在蛋白酶的作用下會水解成多肽，由于多肽中含有肽鍵，并且蛋白酶的化學本質(zhì)就是蛋白質(zhì)，因此混合溶液中加入雙縮脲試劑后，會產(chǎn)生紫色反應，B正確；酸性重鉻酸鉀溶液只能用于鑒定酒精，酵母菌有氧呼吸不產(chǎn)生酒精，C錯誤；斐林試劑本身具有顏色，因此將斐林試劑加入葡萄糖溶液中后，溶液呈現(xiàn)藍色，D錯誤。故選B?！军c睛】酒精是生物學實驗中常用的試劑，如在細胞中脂肪的觀察、有絲分裂實驗、土壤中小動物豐富度研究等實驗中需要使用。需注意區(qū)分在不同實驗中的濃度和作用。6、C【解析】

小分子物質(zhì)物質(zhì)跨膜運輸方式分：主動運輸和被動運輸。被動運輸分自由擴散和協(xié)助擴散。被動運輸?shù)挠绊懸蛩赜斜贿\輸?shù)奈镔|(zhì)濃度差。協(xié)助擴散的影響因素有細胞膜上的載體蛋白。主動運輸?shù)挠绊懸蛩丶毎ど系妮d體蛋白和能量?！驹斀狻緼、生長素極性運輸時以主動運輸?shù)姆绞竭M行，因此需要消耗能量，A錯誤；B、固醇類激素進入靶細胞的過程屬于自由擴散（如性激素），B錯誤；C、神經(jīng)細胞受到刺激時產(chǎn)生的Na+內(nèi)流，需要載體，不消耗能量，屬于被動運輸，C正確；D、護膚品中的甘油進入皮膚細胞的過程屬于自由擴散，D錯誤。故選C。7、D【解析】

中心法則的含義：過程模板原料堿基互補產(chǎn)物實例DNA復制

（DNA→DNA）DNA兩條鏈含A、T、G、C的四種脫氧核苷酸A-T

G-CDNA絕大多數(shù)生物DNA轉(zhuǎn)錄（DNA→RNA）DNA

一條鏈含A、U、G、C的四種核糖核苷酸A-U

T-A

G-CRNA絕大多數(shù)生物RNA復制

（RNA→RNA）RNA含A、U、G、C的四種核糖核苷酸A-U

G-CRNA以RNA為遺傳物質(zhì)的生物，如煙草花葉病毒RNA逆轉(zhuǎn)錄

（RNA→DNA）RNA含A、T、G、C的四種脫氧核苷酸A-T

U-A

G-C

DNA某些致癌病毒、艾滋病病毒、SARS病毒翻譯（RNA→多肽）mRNA20種氨基酸A-U

G-C多肽所有生物【詳解】A、DNA和mRNA的合成均需要模板，前者的模板可以是DNA或RNA，后者的模板是DNA，A錯誤；B、mRNA和血紅蛋白的合成均需要模板，前者的模板是DNA，后者的模板是mRNA，B錯誤；C、胃蛋白酶和胃蛋白酶基因的合成均需要模板，前者的模板是mRNA，后者的模板主要是DNA，C錯誤；D、ATP和NADPH的合成均不需要模板，D正確。故選D?！军c睛】本題考查中心法則及其發(fā)展，要求考生識記中心法則的主要內(nèi)容及后人對其進行的補充和完善，能根據(jù)題干要求準確判斷各選項。8、A【解析】由于構(gòu)成DNA分子的五碳糖為脫氧核糖，所以在-C-T-T-A-片段中，共有3種脫氧核糖核苷酸；又構(gòu)成RNA分子的五碳糖為核糖，所以在-G-A-A-U-片段中，共有3種核糖核苷酸，因此，圖示片段中共有3+3=6種核苷酸，故選A。二、非選擇題9、人體（宿主）細胞全部遺傳信息逆（反）轉(zhuǎn)錄堿基之間的互補配對具有很強的專一性抗體只能與相應的抗原發(fā)生特異性免疫反應與病原體結(jié)合，從而抑制病原體的繁殖或?qū)θ梭w細胞的黏附【解析】

病毒沒有細胞結(jié)構(gòu)，不能獨立生活，只能寄生在宿主活細胞中?！驹斀狻浚?）新冠病毒需要在宿主細胞中進行增殖，所需要的原料和能量來自于人體（宿主）細胞；該病毒的基因組是指病毒體內(nèi)以核苷酸序列形式存儲的遺傳信息。（2）以新型冠狀病毒的RNA分子為模板，經(jīng)逆（反）轉(zhuǎn)錄過程形成DNA；用核酸檢測試劑盒檢測靈敏度較高的原因是逆轉(zhuǎn)錄過程遵循堿基互補配對的原則，具有很強的專一性。（3）患者產(chǎn)生抗體后，通過抗原與抗體雜交實驗來完成免疫學測定，該檢測方法的原理是抗體具有特異性，一種抗體只能與相應的抗原發(fā)生特異性免疫反應；抗體在患者體內(nèi)當作用是抗體與病原體結(jié)合后會抑制病原體的繁殖或?qū)θ梭w細胞的黏附?！军c睛】注意逆轉(zhuǎn)錄過程的的堿基互補配對是U與A配對，A與T配對，C與G配對、G和C配對。10、（1）A（2）獲得單個菌落AD（3）A6基因突變具有多向性（4）①PCR（DNA測序）②一種氨基酸可能對應多種密碼子（或基因突變發(fā)生在非編碼區(qū)）【解析】（1）芽孢是細菌在惡劣環(huán)境中的意在休眠體．A．（2）圖1所示的b過程為菌落的稀釋，目的是為獲得單個菌落．A、倒平板時需要待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時進行，A正確；B、培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿要先進行高壓滅菌處理，才能倒平板，B錯誤；C、倒平板過程中不能打開培養(yǎng)皿的皿蓋，C錯誤；D、平板冷凝后要倒置放置，D正確．（3）據(jù)圖2所示，凝固1mL10%脫脂奶粉的酶量最少的是A6組，故酶催化能力最強的是A6組．由于基因突變具有不定向性，故各組酶催化能力存在差異．（4）①檢測是否發(fā)生基因突變可以用PCR（DNA測序）技術(shù)檢測．②如果A2、A5組芽孢桿菌發(fā)生基因突變，但凝乳酶蛋白未改變，這可能是因為一種氨基酸可能對應多種密碼子，隨基因發(fā)生突變，但不會改變翻譯出來的氨基酸．【考點定位】微生物的分離和培養(yǎng)；酶活力測定的一般原理和方法．11、人工合成DNA（雙鏈）復制限制DNA連接標記基因T-DNA顯微注射技術(shù)【解析】

1、基因工程的工具：（1）限制酶：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。（2）DNA連接酶：連接的是兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵。（3）運載體：常用的運載體：質(zhì)粒、噬菌體的衍生物、動植物病毒2、基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣，將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚?）熒光素酶基因?qū)儆谀康幕?。目的基因可以從基因文庫中獲取，也可以通過人工合成方法得到，再利用PCR技術(shù)擴增即可。利用PCR技術(shù)擴增目的基因的原理是DNA雙鏈復制。（2）構(gòu)建基因表達載體時，需要用限制酶分別切割目的基因和載體，然后用DNA連接酶進行連接，基因表達載體要有標記基因，以便篩選出含有目的基因的受體細胞。（3）將目的基因?qū)胫参锛毎壳俺Ｓ玫哪康幕蜉d體是農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒，目的基因需插入到該基因載體的T-DNA上，然后再轉(zhuǎn)移至受體細胞中。將目的基因?qū)雱游锛毎募夹g(shù)中，應用最多的是顯微注射技術(shù)。【點睛】本題結(jié)合基因工程的原理及技術(shù)，要求考生識記基因工程的原理、操作工具、操作步驟及相關(guān)應用，能結(jié)合所學的知識準確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查。12、XhoI與SalI植物甲的根（根毛）細胞引物RNA聚合酶αβ啟動子可使植物根細胞持續(xù)轉(zhuǎn)運有機酸，導致正常土壤酸化，并影響植物自身的生長植物組織培養(yǎng)2分別位于兩條非同源染色體上15：1【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成?；虮磉_載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法