DB15-T 1056-2024 香菇菌種制作技術規(guī)程

15I本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)定h)增加了瓶裝液體菌種檢驗要求（見6——2016年首次發(fā)布為DB15/T11香菇菌種制作技術規(guī)程3.13.2通過生產(chǎn)試驗驗證具有特異性、均一性和穩(wěn)定性，豐產(chǎn)性好、抗性強的香菇菌株或品種，生長在適宜基質上具結實性的菌絲培養(yǎng)物，包括母種、原種和栽3.3試管和培養(yǎng)皿為培養(yǎng)容器和使用單位，也稱為一級種、試3.423.53.63.7在液體培養(yǎng)基中，通過搖瓶震蕩培養(yǎng)或深層發(fā)酵技4.2廠房冷卻室、接種室，培養(yǎng)室都要有凈化設施。菌種生產(chǎn)廠房條件符合NY/T174.3生產(chǎn)設備超凈工作臺或接種箱、恒溫培養(yǎng)箱、培養(yǎng)架、搖床、液體菌種灌（30L～250L）、冰箱、顯微鏡等設馬鈴薯200g加水1200ml煮沸20min，濾液定容至1000ml，加入葡萄糖1麥粒100g加水1200ml煮沸20min，濾液定容至1000ml，加入葡萄糖10g、蔗糖10g、蛋白胨53試管選用18mm×180mm或者20mm×200mm；培養(yǎng)皿選用直徑7cm～9cm玻璃培養(yǎng)皿或一次性塑分裝培養(yǎng)基至試管1/4處，用棉塞或硅膠塞子封閉試管口，每5支試管為1把，牛皮紙包棉塞，橡皮培養(yǎng)基裝入300ml～500ml三角瓶至刻度的2/3處，用帶濾膜的封口膜封口后滅菌。培養(yǎng)皿用報紙包好，放入滅菌鍋。121℃~122℃（0.11MPa～0.12MPa）恒溫滅菌25min。5.4檢測5.5接種超凈工作臺或接種箱內紫外燈照射30min后吹風，之后用75%酒精進行表面消毒。接菌過程嚴格執(zhí)5.6培養(yǎng)在通風避光、22℃~26℃下培養(yǎng)。糧食培養(yǎng)基：谷粒、麥粒或玉米粒89%，檸過磷酸鈣%，水分含量（60±2）%，石灰水調節(jié)pH6.0檸條粉60%，玉米芯20%，麩子18%，石膏1%，過磷酸鈣1%，水分含量（60±2）%，石灰水調節(jié)pH值4豆秸粉60%，玉米芯20%，麩子18%，石膏1%，過磷酸鈣1%，水分含量（60±2）%，石灰水調節(jié)pH值硬雜木屑87%，麥麩12%，石膏1%，水分含量（60±2）%，石灰水調節(jié)pH值到6～6硬雜木屑84%，麩皮12%，高粱殼3%，石膏1%，水分含量（60±2）%，石灰水調節(jié)pH值到6～6.1.5cm深度為8cm～12cm，每袋（瓶）裝培養(yǎng)基500g～60每批接種應為單一品種，如中途換品種時采用75%酒精對超凈工作臺或接種箱及接種工具進行表面通風避光、22℃~27℃下培養(yǎng)。原種和栽培種0℃~4℃下貯存，貯存期不超過50d。6.2液體菌種生產(chǎn)在121℃~122℃（0.11MPa～0.12MPa）保持25min。5取3mm～5mm大小母種10～15塊接r/min～160r/min下振蕩培養(yǎng)6d～10接種后第3天對三角瓶逐個進行純度檢驗，及時清理未活或污染的140r/min～180r/min，灌格執(zhí)行無菌操作，每袋接種10m