如何分離標本中污染了變形桿菌的其他細菌

2/2如何分離標本中污染了變形桿菌的其他細菌發(fā)布時間:2013-09-11如何分離標本中污染了變形桿菌的其他細菌

一、如何從變形桿菌中分離G+球菌？

A、用棉簽沾無水乙醇涂布于MH平板上，置入溫箱中烘干，讓瓊脂脫水。將球菌接種到該平板上即可。此平板可抑制變形桿菌的遷徙生長。

B、在分離平板上貼氨曲南紙片可以分出G+菌。

二、同一標本中同時存在金葡和變形桿菌的分離方法？

A、解決的辦法：以前曾經(jīng)討論過多種解決奇異變形桿菌和其他細菌混合生長時的單菌落分離方法，如加大瓊脂硬度、接種高鹽肉湯等。我個人比較喜歡貼藥敏紙片的方法。挑取含有金葡菌的菌苔劃線分離后，在第一區(qū)和第二區(qū)的交界處貼一張頭孢西丁紙片。經(jīng)培養(yǎng)后，頭孢西丁紙片周圍生長的奇異變形桿菌被抑制，而金葡菌仍可以生長。此時應即使挑取抑菌圈中的金葡菌進行純分離，從而達到將兩種細菌完全分離的目的。

B、貼氨曲南紙片可抑制變形桿菌生長，而金葡菌耐藥，這樣就可以把金葡分出來。

C、分純方法應根據(jù)目標菌不同而異。我喜歡用時間差的方發(fā)來分純，這樣不會使目標菌受抑制。這要看那株變形桿菌的遷徙速度了，一般4-6h可以分離到目標菌。

D、我用過一種弱選擇的麥慷慨，成品的，葡萄球菌可以生長，變形遷徙生長可以被抑制，oxoid的。

評價一：老師的方法不錯，有空試試！我試過用時間差的方法，比較麻煩．操作過程如下：挑起混合菌分區(qū)接種于血平板上，待平板上剛長出小菌落后，挑取菌落涂片染色，找到革蘭陽性球菌就立刻轉(zhuǎn)種．這個過程比較麻煩，一定要在變形菌沒有明顯擴大的時候挑取菌落涂片，培養(yǎng)時間一般４～６小時，這個時間內(nèi)葡萄球菌和變形菌只形成小菌落，而變形還沒有明顯遷徙．涂片時可以只看濕片．

評價二：我認為幾種方法各有長處：如果變形桿菌生長慢的話，時間差法很好，可以節(jié)省時間，早些發(fā)出報告；如果變形生長快，只能用傾倒酒精法或貼紙片法，貼紙片法不是萬能的，如都敏感或都耐藥，很難分離出純菌，酒精法沒試過不知效果如何：至于增加瓊脂硬度，我覺得有些麻煩，還要單獨配一些這樣平皿（是現(xiàn)配還是提前備一些？）

三、總結解決的辦法有：

1、貼藥敏紙片的方法。挑取含有金葡菌的菌苔劃線分離后，在第一區(qū)和第二區(qū)的交界處貼一張頭孢西丁紙片。經(jīng)培養(yǎng)后，頭孢西丁紙片周圍生長的奇異變形桿菌被抑制，而金葡菌仍可以生長。此時應即使挑取抑菌圈中的金葡菌進行純分離，從而達到將兩種細菌完全分離的目的。

2、配制平皿時混入少許95%的酒精，混勻后倒平板；或者在血平板上倒入95%酒精后，把剩余酒精倒掉，平板表面干后即可。用于分離金葡菌和變形桿菌。酒精主要起抑制變形桿菌的遷徙作用。

注：酒精平板：90mm平板加無水乙醇0.5ml加20ml血液瓊脂基礎（最好用進口的哥倫比亞瓊脂配制）或Ｍ－Ｈ瓊脂基礎。

3、加了結晶紫的麥康凱葡萄球菌不長，變形不遷徙。另外，提高血平板的瓊脂含量到4%，也可以將二者分開。

4、時間差的方法，操作過程如下：挑起混合菌分區(qū)接種于血平板上，待平板上剛長出小菌落后，挑取菌落涂片染色，找到革蘭陽性球菌就立刻轉(zhuǎn)種。這個過程比較麻煩，一定要在變形菌沒有明顯擴大的時候挑取菌落涂片，培養(yǎng)時間一般４～６小時，這個時間內(nèi)