番茄對(duì)主要病害抗性鑒定評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)程 第1部分：番茄抗枯萎病、根腐病鑒定評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)程-送審討論稿

1鑒定番茄苗培育、鑒定方法、病情調(diào)查、結(jié)本文件適用于所有種類的番茄，包括番茄屬（LycopersiconMiller.）下2個(gè)亞群和9個(gè)種，以及栽培24接種體制備4.1基本設(shè)備持在20℃~30℃)、塑料盆、鋁鍋、電爐、培養(yǎng)皿4.2接種體分離定，確認(rèn)為番茄枯萎病菌（Fusariumoxysporumf.sp.），腐病病菌（Fusariumsolani4.3接種體確定4.4接種體保存4.4.1短期保存將番茄枯萎病菌、根腐病菌分別接種于PDA斜面養(yǎng)基上，在25℃~28℃培養(yǎng)7d后，置4℃~8℃的3紙片，在25℃~28℃培養(yǎng)7d后，取出濾紙片，經(jīng)真空干燥后于-20℃~-80℃的低溫冰箱中保存。4.5接種體懸浮液制備將保存的人工接種鑒定使用的番茄枯萎病菌、根腐病菌分別移植于PDA平板培養(yǎng)基上，在25℃~28℃培養(yǎng)7d。在無(wú)菌操作下，番茄枯萎病菌、根腐病菌接種體接種于裝有PL液體培養(yǎng)養(yǎng)基的三角瓶中（液體培養(yǎng)基的體積是三角瓶容量的30%～35%置于25℃~28℃恒溫振蕩培養(yǎng)箱中，160r/min～180r/mi除上清液，加適量的無(wú)菌水稀釋，得到接種5鑒定番茄苗培育露白發(fā)芽后播植于溫室，采用營(yíng)養(yǎng)缽盆栽法進(jìn)行育苗，基質(zhì)應(yīng)自來(lái)水澆透育苗基質(zhì)，隨后將已催芽的待鑒定番茄種子播于上述塑料營(yíng)養(yǎng)缽中，每缽1粒種子，然后用泥炭育苗基質(zhì)覆蓋，以蓋住種子為宜。重復(fù)3次，每重復(fù)30缽，5.5接種前管理播種后將塑料缽置于溫室中，進(jìn)行培育，出苗前，溫室溫度保持在25℃~30℃,保持盆中土壤濕度；番茄苗出土后，溫室溫度保持在23℃~28℃,土壤濕度保持在60%～80%，正常栽培管理，不施用每年4月～6月和9月～11月為番茄對(duì)枯萎病和根腐病抗性鑒定與抗4番茄對(duì)枯萎病、根腐病的抗病性鑒定接種，分別在用無(wú)菌水將接種體懸浮液稀釋，配制成接種體濃度為1.0×106個(gè)孢子/mL～4.0×106個(gè)孢子/mL接種直向下?lián)p傷根系后，每株用接種液200ml～250ml澆根，用透明薄膜覆蓋的小拱棚保濕24接種后的番茄苗，置于溫度為23℃~28℃的溫室中，黑暗保濕（RH85%～100%）24h；以后每天光照12h～14h，溫室溫度保持在23℃~28℃,適時(shí)澆水，保持正常栽培管理，不施用殺菌劑。番茄植株莖干病斑較明顯，5%～20%變色，葉番茄植株莖干病斑明顯，20%～50%變色5×100………………9結(jié)果評(píng)價(jià)9.1鑒定有效性判別當(dāng)感病對(duì)照品種達(dá)到其相應(yīng)感病程度（DI≥50.0），該批9.2抗病性劃分根據(jù)被鑒定品種的病情指數(shù)的大小評(píng)定品種的抗性級(jí)別，12R345S669.3鑒定結(jié)果記錄編號(hào)品種/種質(zhì)名稱來(lái)源重復(fù)病情級(jí)別病情指數(shù)平均病指抗性評(píng)價(jià)013579ⅠⅡⅢ……播種日期接種日期接種生育期接種病原物分離編號(hào)接種病原物株系類型調(diào)查時(shí)間鑒定人（簽字）：校核人（簽字）：鑒定技術(shù)負(fù)責(zé)人（簽字）：鑒定單位蓋章）7200g，切成小塊放入鍋中，加水1000ml，在加熱器上加熱至沸騰，維持30min，用2層紗布趁熱在量杯上過(guò)濾，棄濾渣，取濾液補(bǔ)充水分到1000ml；把濾液放入鍋中，加入葡萄糖20g，瓊脂17g，然后至6.8～7.0。將配制的培養(yǎng)基分裝入試管或500ml三角瓶?jī)?nèi)，在試管口或三角燒瓶口上塞上棉塞或泡沫度的1/5，滅菌后制成斜面；三角瓶的分裝量以不超過(guò)其容積的一半為宜，滅菌后倒入滅菌培養(yǎng)皿，制渣，取濾液補(bǔ)充水分到1000ml；把濾液放入鍋中，加入乳糖20g，用玻璃棒攪拌后放在石棉網(wǎng)上，小火加熱至沸騰，再補(bǔ)充水分至1000ml。將配制的培養(yǎng)基分裝入500ml三角瓶?jī)?nèi)，在三角燒瓶再補(bǔ)充水分至1000ml。將配制的培養(yǎng)基分裝入500ml三角瓶?jī)?nèi)，在三角燒瓶口上塞上棉塞或泡沫塑料8B.1番茄枯萎病菌：Fusariumoxysporumf.sp.LycopersiciSynder＆Hensen；在PDA培養(yǎng)基上，至紡錘形，橢圓型彎曲基部有小柄，兩端尖，頂端呈鉤狀，有的呈圓形、倒卵形、腎形、柱形，大小為（5μm～12μm）×（2.2μm～3.5μm通