大學(xué)生物學(xué)（一）實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)

生物學(xué)（一）實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)

目錄

實(shí)驗(yàn)一顯微鏡下的生物世界.........................................................1

實(shí)驗(yàn)二植物組織滲透勢的測定.......................................................3

實(shí)驗(yàn)三常見食物營養(yǎng)成分的鑒定.....................................................5

實(shí)驗(yàn)四原生動(dòng)物（大草履蟲）的培養(yǎng)和觀察..........................................7

實(shí)驗(yàn)五植物葉脈標(biāo)本的制作.........................................................9

實(shí)驗(yàn)六ABO血型鑒定及交叉配血實(shí)驗(yàn)...............................................11

實(shí)驗(yàn)七植物的多樣性（校園植物的調(diào)查與分類）.....................................13

實(shí)驗(yàn)八硬骨魚的觀察和解剖........................................................14

實(shí)驗(yàn)九甜酒釀制作與根霉的分離....................................................16

實(shí)驗(yàn)十淀粉酶純化與活性測定......................................................18

實(shí)驗(yàn)十一酸奶中乳酸菌分離與發(fā)酵..................................................21

附錄I生物實(shí)驗(yàn)室守則............................................................23

附錄H實(shí)驗(yàn)報(bào)告的撰寫............................................................24

附錄m實(shí)驗(yàn)室意外事故的處理......................................................25

附錄IV常用的試劑和配制..........................................................26

實(shí)驗(yàn)一顯微鏡下的生物世界

一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

1.學(xué)習(xí)對運(yùn)動(dòng)活潑的微型動(dòng)物的觀察和實(shí)驗(yàn)方法。

2.練習(xí)生物繪圖

3.認(rèn)識(shí)微小生物是水生生物的重要組分，是池塘生態(tài)系統(tǒng)食物鏈的重要一環(huán)

二、實(shí)驗(yàn)原理

一滴池塘水中含有眾多的微小生命，它們大多因個(gè)體微小而無法用肉眼判明正身，必須借助

顯微鏡才能觀察清楚。鏡下可見，水中微小生物種類繁多，有單細(xì)胞植物和動(dòng)物或低等多細(xì)

胞生物。它們是水生生物的重要組分，也是池塘生態(tài)系統(tǒng)食物鏈的重要一環(huán)。

三、實(shí)驗(yàn)用品

1、材料富含有機(jī)質(zhì)的池塘水

2、器具顯微鏡、鏡子、載玻片、蓋玻片、試管、滴管、脫脂棉。

3、試劑魯哥式液蒸儲(chǔ)水。

四、實(shí)驗(yàn)操作

（-）水樣采集和處理

到池塘采集水生生物，分成兩份?可將樣品分裝兩瓶，1瓶按100毫升樣品加入1.5毫

升魯哥氏液的比例進(jìn)行固定（魯哥氏液：6g碘化鉀溶于20mL水中，溶解后加入4g碘，

充分搖動(dòng)待碘完全溶解后再加80mL水，溶液即配制完成）。另I瓶不固定，采樣后立即觀

察。

（-）制備臨時(shí)裝片

用滴管吸取池塘水水樣一滴于載玻片中央，慢慢蓋下蓋玻片，制成臨時(shí)裝片。

（三）顯微鏡下觀察

1.綠眼蟲眼蟲是單細(xì)胞生物。在低倍鏡下觀察，可看到許多綠色游動(dòng)的小蟲子，這是眼蟲。

找到一個(gè)游動(dòng)緩慢的眼蟲，移至高倍鏡下觀察，眼蟲的前端鈍圓，后端尖削，蟲體前端有一

個(gè)紅色的眼點(diǎn)，細(xì)胞內(nèi)有許多綠色的橢圓形小體——葉綠體，所以身體呈綠色，因?yàn)檫@兩個(gè)

特征稱為綠眼蟲。將光線調(diào)節(jié)暗些，可看見蟲體的前端有一根鞭毛，在不停地?cái)[動(dòng)，從而帶

動(dòng)身體運(yùn)動(dòng)。

2.喇叭蟲在低倍鏡下移動(dòng)裝片，尋找單細(xì)胞動(dòng)物喇叭蟲。其蟲體可伸縮，伸展時(shí)，體呈喇

叭形；體表具成行的纖毛，口圍有一圈口緣小膜帶，順時(shí)針旋至口旁。多數(shù)種類的大核呈念

珠狀或長棒狀；小核多個(gè)，極小。

3.鐘蟲在低倍鏡下繼續(xù)尋找鐘蟲。鐘蟲形體似倒置的鐘，鐘口即口緣有纖毛，纖毛不停地

快速擺動(dòng)，蟲體其他部分無纖毛?反口端有一柄，以柄附于水草或其他物體上，輕觸載玻片,

可見柄能伸縮。鐘蟲是單細(xì)胞動(dòng)物。

4.大草履蟲在低倍視野中，繼續(xù)尋找較眼蟲稍大的單細(xì)胞動(dòng)物——大草履蟲。草履蟲一般

運(yùn)動(dòng)迅速，為了限制草履蟲的游動(dòng)以便觀察，制作裝片時(shí)，將少許棉花撕松，鋪在載玻片上,

滴一滴池塘水，蓋好蓋玻片。如果草履蟲繼續(xù)運(yùn)動(dòng)迅速，可將吸水紙放在蓋玻片的一側(cè)吸去

部分水（注意不要吸干）再進(jìn)行觀察。

在低倍鏡下可見蟲體酷似倒置的草鞋底。將光線調(diào)暗一些，可看到蟲體滿覆纖毛，時(shí)時(shí)在擺

動(dòng)。

5.輪蟲輪蟲是體型極小的多細(xì)胞動(dòng)物。在低倍鏡下觀察，蟲體前端輪盤狀，沿輪盤邊緣

叢生著纖毛，纖毛不停地?cái)[動(dòng)，使蟲體運(yùn)動(dòng)。身體中部即軀干部膨大，其內(nèi)是內(nèi)臟。軀干部

向后漸削細(xì)，為足部。調(diào)節(jié)標(biāo)本移動(dòng)器，將輪蟲的足部移至視野中央，其足末端細(xì)細(xì)的趾附

著于玻片或其他物體上。

五、作業(yè)

1、觀察兩種方法獲得的水樣，結(jié)果有何不同.

2、繪制觀察到的2-4種生物

3、選出一些大草履蟲，放進(jìn)培養(yǎng)液中培養(yǎng)。

2

實(shí)驗(yàn)二植物組織滲透勢的測定

一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

1.觀察植物組織的細(xì)胞質(zhì)壁分離過程及其原理和方法的掌握。

2.學(xué)會(huì)用質(zhì)壁分離法測定植物細(xì)胞滲透勢的方法。

二、實(shí)驗(yàn)原理

滲透勢是指因溶質(zhì)溶解而使水的自由能降低（與純水相比）的數(shù)值，降低的值與溶質(zhì)的濃

度成正比，純水的水勢最大（值定為零），當(dāng)水中具有溶質(zhì)，水勢便降低，此時(shí)的水勢稱為滲

透勢，故是負(fù)值（滲透勢的絕對值等于溶質(zhì)的滲透壓，滲透壓為正值）。滲透勢的單位以巴表

示，1巴=0.985大氣壓（或1大氣壓=1.013巴）。植物成熟的細(xì)胞都具有液泡，液泡中具有

各種溶質(zhì)，故具有一定的滲透勢，液泡外面包裹著活的原生質(zhì)，原生質(zhì)外面有細(xì)胞壁包圍，

細(xì)胞壁可看作是層透膜，活的原生質(zhì)具有選擇性，所以整個(gè)細(xì)胞類似一個(gè)滲透系統(tǒng)。可用質(zhì)

壁分離法測量細(xì)胞滲透勢。

質(zhì)壁分離法當(dāng)細(xì)胞放在一種滲透勢比其細(xì)胞液滲透勢低的溶液中時(shí)，細(xì)胞液中的水向

外滲，液泡體積縮小，原生質(zhì)的胞壁也跟著向內(nèi)收縮，如水分繼續(xù)外滲，液泡體積縮小，而

胞壁彈性有限，不能繼續(xù)收縮，原生質(zhì)就和細(xì)胞壁脫離，這就是質(zhì)壁分離現(xiàn)象。

當(dāng)細(xì)胞放在某一溶液中，細(xì)胞內(nèi)外水分交換達(dá)到平衡，即處于滲透平衡狀態(tài)，此時(shí)細(xì)

胞內(nèi)的壓力勢為零，那么細(xì)胞液的滲透勢就等于該溶液的滲透勢，該溶液濃度稱為等滲濃度。

利用一系列梯度濃度的溶液，觀察質(zhì)壁分離現(xiàn)象時(shí)，細(xì)胞的等滲濃度將介于剛剛引起初始質(zhì)

壁分離現(xiàn)象時(shí)（即細(xì)胞只是角偶上與胞壁分離）的濃度和與其相鄰的尚不能引起質(zhì)壁分離濃

度梯度之間的溶液濃度。代人公式弘=-RTiC即可算出其滲透勢。

三、實(shí)驗(yàn)用品

（-）材料洋蔥鱗莖或紫鴨跖草葉片。

（二）器材顯微鏡、載玻片、蓋玻片、鏡子、刀片。

（三）試劑Imol/L蔗糖溶液。

四、實(shí)驗(yàn)操作

1.以1mol/L的蔗糖溶液作母液,用蒸儲(chǔ)水配成0.10,0.20,0.25,0.30,0.35,0.40,

0.45,0.50,0.60mol/L的一系列濃度的蔗糖溶液各10ml。各溶液分別裝入具塞子試管中，

按濃度梯度遞減的次序排成一行，并在試管壁上貼上標(biāo)簽注明濃度。各濃度溶液分別吸取

2ml分裝在具塞子青霉素小瓶中，小瓶上同樣標(biāo)記好濃度標(biāo)簽。

2.取帶有花青素的洋蔥鱗莖外表皮或紫鴨跖草表皮，從高濃度開始，每隔一定的時(shí)間

（5min）依次向濃度遞減的蔗糖溶液中迅速浸入3?5片表皮（約1cm2）,使其完全浸入。

3.在浸泡15?25min之間，從0.6mol/L開始依次取出表皮放在滴有同樣濃度溶液的載

玻片上，蓋上蓋玻片，在顯微鏡下觀察各種溶液中表皮細(xì)胞的質(zhì)壁分離的情況（見表8-1）,

如果在兩個(gè)相鄰濃度的蔗糖溶液中，一個(gè)開始有質(zhì)壁分離的現(xiàn)象（30%細(xì)胞在角隅上有初次

質(zhì)壁分離），而另一個(gè)沒有，我們就可以初步確定細(xì)胞的滲透勢與這兩個(gè)溶液濃度平均值的

滲透勢相等。

表8-1不同溶液中表皮細(xì)胞的質(zhì)壁分離的情況

溶液濃度（mol/L）材料在溶液中浸泡的時(shí)觀察時(shí)間觀察結(jié)果

間

0.52:002:25顯著質(zhì)壁分離

0.42:022:27在角隅上分離（30%左右）

0.32:032:28沒有質(zhì)壁分離

那么與細(xì)胞液等滲的濃度大致就在0.3?0.4（mol/L）之間。

4.在找到上述濃度時(shí)，用新的溶液和新鮮撕取的外表皮重復(fù)進(jìn)行一次，直到有把握為

3

止。并按下列公式計(jì)算在常壓下該組織細(xì)胞液的滲透勢。

^=-1.013RTiC（巴）

里表示滲透勢，單位（巴），1.013巴等于1大氣壓；

R表示氣體常數(shù)：0.0821；

T表示絕對溫度，單位K,即273+/C（實(shí)驗(yàn)溫度））；

i表示等滲系數(shù)，蔗糖等于l,NaCl為1.5（平均數(shù)）；

C表示等滲溶液的克分子濃度，單位是mol/L；

則本實(shí)驗(yàn)中蔗糖外液的滲透勢（即水勢）為：

必=-O.O83x（273+t）xC

五、實(shí)驗(yàn)建議

撕下的表皮組織必須完全浸沒于溶液中。

六、實(shí)驗(yàn)報(bào)告及作業(yè)

1.復(fù)習(xí)細(xì)胞滲透作用的原理。

2.了解植物組織滲透勢在細(xì)胞與周圍環(huán)境的水分平衡中起什么作用？

3.質(zhì)壁分離法測植物滲透勢的結(jié)果記錄在下表8-2中，并計(jì)算出細(xì)胞的滲透勢。

表8-2測得質(zhì)壁分離法植物滲透勢的結(jié)果

蔗糖克分子濃度（mol/L）滲透勢（巴）質(zhì)壁分離情況細(xì)胞的滲透勢

0.6

05

0.4

0.3

().2

0.1

4

實(shí)驗(yàn)三常見食物營養(yǎng)成分的鑒定

一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

1、練習(xí)臨時(shí)裝片（水裝片）制片方法。

2、練習(xí)徒手切片技術(shù)。

3、掌握常見植物性食物組織中糖類、脂肪的定性鑒定方法。

二、實(shí)驗(yàn)原理

植物因含有葉綠素，是自然界的初級生產(chǎn)者，能通過光合作用過程把太陽能轉(zhuǎn)化為化學(xué)

能，貯存在糖類、蛋白質(zhì)和脂肪中。這些物質(zhì)是人類賴以生存的食物來源。人類食物有3000

多種，其中主要的糧食植物就有20多種。這些植物可食部分有的是果實(shí)，如蘋果、梨、水

稻、玉米；有的是種子，如花生、油菜、黃豆、大豆；有的是塊莖，如馬鈴薯；有的是塊根,

如山芋（番薯）。其營養(yǎng)成分有的是糖類，如蘋果和梨主要是可溶性的葡萄糖和果糖；水稻、

玉米、馬鈴薯、山芋是不溶性的多糖——淀粉；有的是蛋白質(zhì)，如黃豆、大豆；有的是脂肪，

如花生、油菜。

特定的化學(xué)試劑能夠使生物組織中的有關(guān)有機(jī)化合物產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)。葡萄糖、果

糖是可溶性糖中的還原糖，與斐林（Fehling）試劑作用，可以生成磚紅色沉淀；淀粉是不溶性

的多糖，被碘-碘化鉀溶液染成藍(lán)紫色。脂肪可以被蘇丹IV染液染成桔紅色。蛋白質(zhì)與雙縮

服試劑發(fā)生作用，可以產(chǎn)生紫色反應(yīng)。為此來鑒定生物組織中糖、脂肪或蛋白質(zhì)的存在。

三、實(shí)驗(yàn)用品

（一）材料

1.做可溶性還原糖的鑒定實(shí)驗(yàn)，選擇蘋果、梨。

2.做淀粉的鑒定實(shí)驗(yàn)，選擇水稻穎果和馬鈴薯。

3.做脂肪的鑒定實(shí)驗(yàn)，選擇花生種子。

（-）器材

剪刀，解剖刀，雙面刀片，試管，試管架，試管夾，大小燒杯，小量筒，滴管，玻璃漏

斗，酒精燈，三腳架，石棉網(wǎng)，火柴，研缽，石英砂，紗布，載玻片，蓋玻片，毛筆，吸水

紙，顯微鏡。

（三）試劑

1.斐林試劑

取10g氫氧化鈉放入量筒中，加水至100mL,待充分溶解后倒入試劑瓶中，配成質(zhì)量

濃度為0.1g/mL的氫氧化鈉溶液，瓶口塞上膠塞，貼上標(biāo)簽，寫上試劑甲。

取5g硫酸銅放入量筒中，加水至100mL,待充分溶解后倒入試劑瓶中，配成質(zhì)量濃

度為0.05g/mL的硫酸銅溶液（藍(lán)色）。瓶口塞上膠塞，貼上標(biāo)簽，寫上試劑乙。

使用時(shí)將4~5滴乙液滴入2mL甲液中，配完后立即使用。

2.碘-碘化鉀（I-KI）染液

取3g碘化鉀溶于100ml蒸儲(chǔ)水中，再加1g碘，溶解后即可使用。它可將蛋白質(zhì)（糊粉

粒）染成黃色。將4%的碘-碘化鉀溶液加水稀釋4倍，可用于鑒定淀粉，染成藍(lán)紫色；若將

1%的碘-碘化鉀溶液加水稀釋100倍，即制成0.01%的碘-碘化鉀溶液，可用于觀察淀粉粒的

輪紋，比較清晰。

3.蘇丹IV染液取0.1g蘇丹【V溶解于50ml丙酮中，再加入70%乙醇50ml。

四、實(shí)驗(yàn)操作

（-）可溶性還原糖的鑒定

1.制備生物組織樣液將梨洗凈、去皮，切成小塊。用簡易磨漿機(jī)將梨進(jìn)行研磨。在大漏

5

斗上墊一層紗布，將梨研磨液進(jìn)行過濾，濾液置大燒杯中。供全體學(xué)生使用。

2.取1支試管，向試管內(nèi)注入2mL梨組織樣液。

3.向試管內(nèi)注入2mL剛配制的斐林試劑。振蕩試管，使溶液混合均勻，此時(shí)溶液呈藍(lán)色。

4.將這支試管放進(jìn)盛有開水的大燒杯中，用酒精燈加熱煮沸2min左右。在對試管加熱煮

沸的過程中，仔細(xì)觀察試管中溶液的顏色的變化。

(-)淀粉的鑒定

1.水稻果實(shí)結(jié)構(gòu)及胚乳中的淀粉。

取一粒已浸泡的水稻種子，觀察外形，腹面有一縱溝，在較小的一端有一叢果毛，另一

端有一長卵形小體為胚。通過腹溝將整個(gè)“種子”縱剖為二，用放大鏡觀察，可明顯分為兩部

分，中央乳白色部分為胚乳，外部顏色較深的部分為果皮和種皮的總和，胚偏居一角(圖

4-1)。如在縱剖面上滴少量1%的碘-碘化鉀，變成蘭色的部分是胚乳，淺黃色部分是胚的部

分。取水稻胚縱切片在顯微鏡下觀察胚的結(jié)構(gòu)。它也由胚根、胚軸、胚芽和子葉四部分組成,

但子葉只有一個(gè)，在靠近胚乳一面，因成盾形，也叫盾片。胚芽和胚根外都包著一套狀的組

織，即胚芽鞘和胚根鞘。

2.馬鈴薯淀粉粒

用針從塊莖上取下少許薯肉，在載玻片上涂抹，用水封片，在顯微鏡下看到發(fā)亮的卵圓

形或橢圓形顆粒即淀粉粒，留意淀粉粒上的輪紋。滴0.01%的碘-碘化鉀溶液，觀察顏色變

化。

(三)脂肪的鑒定

1.徒手切片法制備生物組織實(shí)驗(yàn)材料

(1)取一粒花生種子，去掉種皮，浸泡3-4小時(shí)。

(2)在培養(yǎng)皿中加入適量清水,將花生一片子葉斷面蘸以清水(整個(gè)切片過程中均應(yīng)用清

水潤濕材料和刀面)，以左手拇指、食指、中指住，拇指略低于食指與中指，花生子葉切面

應(yīng)稍高于食指，其余手指則略低于食指，以免損傷手指。右手持刀片，將子葉削去一層，形

成平面。

(3)刀口向內(nèi)，與花生斷面平行，以均勻的動(dòng)作，自左前方向右后方快速拉刀，滑行切

片(注意要整個(gè)臂部用力，而不要腕部用力)。要求動(dòng)作迅速，一次成型。連切數(shù)刀后，用毛

筆將最薄的幾片材料移至潔凈的載玻片中央。

2.用滴管在花生子葉薄片上滴2—3滴蘇丹IV染液，染色2—3min。

3.用吸水紙吸去花生子葉薄片周圍的染液，在薄片上滴1—2滴50%(v/v)的酒精溶液，洗去

浮色。

4.用吸水紙吸去花生子葉薄片周圍的酒精，在薄片上滴1—2滴蒸儲(chǔ)水，蓋上蓋玻片，制成

臨時(shí)裝片。

5.在低倍顯微鏡下尋找花生子葉薄片的最薄處，最好只有1—2層細(xì)胞，將這部分移至視野中

央，觀察細(xì)胞中被染成桔紅色的圓形小顆粒。為了觀察得更清楚，可以用高倍顯微鏡進(jìn)行觀

察。使用高倍顯微鏡進(jìn)行觀察的具體方法是：將要觀察的目標(biāo)移到視野的正中；轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器,

讓高倍物鏡正對著通光孔；將細(xì)準(zhǔn)焦螺旋輕輕向反時(shí)針方向轉(zhuǎn)動(dòng)，讓鏡筒略微上升，大約轉(zhuǎn)

動(dòng)半圈，就可以看清楚了。

五、實(shí)驗(yàn)報(bào)告及作業(yè)

分析總結(jié)實(shí)驗(yàn)中觀察到的現(xiàn)象和得出的結(jié)論，填寫在實(shí)驗(yàn)報(bào)告中。

6

實(shí)驗(yàn)四原生動(dòng)物（大草履蟲）的培養(yǎng)和觀察

一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

1.學(xué)習(xí)對運(yùn)動(dòng)活潑的微型動(dòng)物的觀察和實(shí)驗(yàn)方法。

2.通過實(shí)驗(yàn)，進(jìn)一步認(rèn)識(shí)和理解原生動(dòng)物的單個(gè)細(xì)胞是一個(gè)完整的能獨(dú)立生活的動(dòng)物有

機(jī)體。

3.通過對草履蟲觀察認(rèn)識(shí)原生動(dòng)物的應(yīng)激性。

二、實(shí)驗(yàn)原理

原生動(dòng)物是最簡單最原始的動(dòng)物，一個(gè)原生動(dòng)物體就只由一個(gè)細(xì)胞構(gòu)成，但原生動(dòng)物的

單個(gè)細(xì)胞不同于多細(xì)胞動(dòng)物體內(nèi)的一個(gè)細(xì)胞，它們可以其細(xì)胞質(zhì)分化形成的各種細(xì)胞器來行

使多細(xì)胞動(dòng)物的全部生命活動(dòng)，從而成為一個(gè)完整的、獨(dú)立的動(dòng)物有機(jī)體。

草履蟲的形態(tài)結(jié)構(gòu)和生命

活動(dòng)充分地展現(xiàn)了原生動(dòng)物的

這些特征，并且草履蟲對各種

刺激的反應(yīng)也說明應(yīng)激性是原

生質(zhì)的普遍特性。

草履蟲個(gè)體較大，結(jié)構(gòu)典

型，觀察方便，繁殖快速，易

采集培養(yǎng)，是生命科學(xué)基礎(chǔ)理

論研究的理想材料，尤其在細(xì)

胞生物學(xué)、細(xì)胞遺傳學(xué)研究中

更具科學(xué)價(jià)值。

圖5-1草履蟲結(jié)構(gòu)示意圖

（弓I自Purves等，2004）

三、實(shí)驗(yàn)用品

（一）材料大草履蟲培養(yǎng)液，草履蟲橫分裂及接合生殖的裝片。

（二）器具顯微鏡、體視顯微鏡、鑲子、載玻片、蓋玻片、試管、滴管、脫脂棉。

（三）試劑藍(lán)黑墨水、洋紅粉末、蒸鏘水。

四、實(shí)驗(yàn)操作

（一）草履蟲的形態(tài)結(jié)構(gòu)與運(yùn)動(dòng)

1.草履蟲臨時(shí)裝片的制備

為限制草履蟲的迅速游動(dòng)以便觀察，先將少許棉花纖維撕松放在載玻片中部，再用滴管

吸取草履蟲培養(yǎng)液滴1滴在棉花纖維之間，蓋上蓋玻片，在低倍鏡下觀察。如果草履蟲游動(dòng)

仍然過快，則用吸水紙?jiān)谏w玻片的一側(cè)吸去部分水（注意不要吸干），再進(jìn)行觀察。

2.草履蟲的外形與運(yùn)動(dòng)

在低倍鏡下，將光線適當(dāng)調(diào)暗點(diǎn)，使草履蟲與背景之間有足夠的明暗反差?？梢姴萋南x

形似倒置草鞋底，前端鈍圓，后端稍尖，體表密布纖毛，體末端纖毛較長。從蟲體前端開始,

體表有一斜向后行直達(dá)體中部的凹溝稱口溝，口溝處有較長而強(qiáng)的纖毛。

游泳時(shí)，草履蟲全身纖毛有節(jié)奏地呈波狀依次快速擺動(dòng)，由于口溝的存在和該處纖毛擺

動(dòng)有力，而使蟲體繞其中軸向左旋轉(zhuǎn)，沿螺旋狀路徑前進(jìn)。

3.內(nèi)部構(gòu)造

選擇一個(gè)比較清晰而又不太活動(dòng)的草履蟲轉(zhuǎn)高倍鏡觀察其內(nèi)部構(gòu)造。蟲體的表面是表

膜，緊貼表膜的一層細(xì)胞質(zhì)透明無顆粒，稱外質(zhì)，外質(zhì)內(nèi)有許多與表膜垂直排列的折光性較

強(qiáng)的橢圓形刺絲泡；外質(zhì)以內(nèi)的細(xì)胞質(zhì)多顆粒，稱為內(nèi)質(zhì)。

蟲體腹面口溝末端有一胞口，胞口后連一深入內(nèi)質(zhì)的彎曲短管，稱胞咽，胞咽壁上生有

由長纖毛聯(lián)合形成的波動(dòng)膜。內(nèi)質(zhì)內(nèi)有大小不同的圓形泡，多為食物泡。在蟲體的前后端各

有一透明的圓形泡，可以伸縮，為伸縮泡。當(dāng)伸縮泡主泡縮小時(shí)，可見其周圍有6?7個(gè)放

7

射狀排列的長形透明小管，即收集管。

大草履蟲有大、小2個(gè)細(xì)胞核，位于內(nèi)質(zhì)中央，生活時(shí)小核不易觀察到。在蓋玻片一側(cè)

滴1滴5%醋酸，另一側(cè)用吸水紙吸引，使蓋玻片下的草履蟲浸在醋酸中。將光線適當(dāng)調(diào)亮,

1?2min后，草履蟲被殺死。在低倍鏡下可見到蟲體中部被染成淺黃褐色、呈腎形的大核;

轉(zhuǎn)高倍鏡調(diào)焦后，可見大核凹處有一個(gè)點(diǎn)狀的小核。

（二）食物泡的形成及變化

取一滴草履蟲培養(yǎng)液于另一載玻片中央，用牙簽蘸取少許洋紅粉末摻入草履蟲液滴中，

混勻，再加少量棉花纖維并加蓋玻片。之后立即在低倍鏡下尋找一被棉花纖維阻攔而不易游

動(dòng)、但口溝未受壓迫的草履蟲，轉(zhuǎn)高倍鏡仔細(xì)觀察食物泡的形成、大小的變化以及在蟲體內(nèi)

環(huán)流的過程。

（三）草履蟲的應(yīng)激性實(shí)驗(yàn)

制備草履蟲臨時(shí)裝片。在蓋玻片的一側(cè)加1滴用蒸儲(chǔ)水稀釋20倍的藍(lán)黑墨水，另一側(cè)

用吸水紙吸引，使藍(lán)黑墨水浸過草履蟲。在高倍鏡下觀察，可見刺絲已射出，在草履蟲蟲體

周圍呈亂絲狀。思考：刺絲泡有何功用？

（四）草履蟲的生殖

取草履蟲分裂生殖和接合生殖裝片，于低倍顯微鏡下觀察。

1.草履蟲分裂生殖裝片

觀察草履蟲的無性生殖是橫裂還是縱裂。

2.草履蟲接合生殖裝片

觀察兩個(gè)蟲體在何處接合。

五、實(shí)驗(yàn)報(bào)告及作業(yè)

1.繪制草履蟲放大圖，表示出各種結(jié)構(gòu)，并注明其名稱。

2.分析總結(jié)各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)，舉例說明：

①為什么原生動(dòng)物是最原始最簡單的動(dòng)物。

②為什么說原生動(dòng)物的單個(gè)細(xì)胞是一個(gè)完整的能獨(dú)立生活的動(dòng)物個(gè)體。

8

實(shí)驗(yàn)五植物葉脈標(biāo)本的制作

一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/p>

1、學(xué)會(huì)制作葉脈標(biāo)本

2、培養(yǎng)動(dòng)手能力和對生物課的興趣

二、藥品：

NaOH（具強(qiáng)腐蝕性，使用時(shí)應(yīng)特別小心）、碳酸鈉、雙氧水（或漂白粉）、染料。

三、器材：

燒杯、電爐、大號鐐子、牙刷、塑料盤子、玻璃棒、小塑料桶、吸水紙（或草紙）

四、操作步驟：

1、選材：選取葉質(zhì)較厚、大小適中、葉面平整、葉脈豐富的葉片（如桂花葉、菩提葉），

用清水洗凈備用。

2、配制溶液：稱取35gNaOH和25gNa2co3放入燒杯中，加入1L水混溶，使之溶解，制

成溶液。

3、加熱：把溶液放到電爐中加熱，近沸時(shí)把葉片浸入溶液內(nèi)，此時(shí)把電滬溫度調(diào)低些，邊

加熱邊攪拌；加熱時(shí)間長短要根據(jù)葉片而定，可以過兩三分鐘取一片子出來觀察，直至葉片

變成褐色（或葉肉有脫落）即可。

4、漂洗：停止加熱，用鏡子取出葉片，放入盛有清水的小塑料桶中漂洗干凈（一般在兩次

以上）。

5、刷洗：將葉片放在塑料盤子中，加入一層水，把牙刷打斜（與水平面大約成45度角），

順葉脈輕輕地刷凈地肉，刷時(shí)注意：只向一個(gè)方向刷（絕對不能來回刷），以免將葉脈刷壞。

刷時(shí)先從背面開始，刷凈背面再刷正面，主葉脈邊沿處可用敲出法。刷洗干凈后放到吸水紙

（或草紙）上晾干。

6、漂白：用20%的雙氧水（或漂白粉）漂白葉脈。

7、染色繪圖：可以用紅藥水、紫藥水、品紅和染料等對葉脈進(jìn)行染色，也可以在葉脈上繪

圖。

8、粘貼、過膠：晾干后，可用紙粘住，過膠保存。

五、討論創(chuàng)新

1、對操作步驟的理解，為什么要這樣做？

2、各藥品的作用各是什么？

3、做葉脈標(biāo)本有沒有別的方法了？

互生對生輪生簇生

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口十脈的類型

全法

用占秋

iH比設(shè)伏毛狀貶黑西軟

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實(shí)驗(yàn)六ABO血型鑒定及交叉配血實(shí)驗(yàn)

一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

通過鑒定實(shí)驗(yàn)和配血實(shí)驗(yàn)來學(xué)習(xí)、掌握人類ABO血型的原理和方法。

二、實(shí)驗(yàn)原理

血型是特指血細(xì)胞膜表面抗原的類型。ABO血型系統(tǒng)是一類常用的血液分型體系。在

ABO血型系統(tǒng)中，紅細(xì)胞膜上抗原分A和B兩種抗原，而血清抗體分抗A和抗B兩種抗

體。A抗原加抗A抗體或B抗原加抗B抗體，則產(chǎn)生凝集現(xiàn)象。血型鑒定是將受試者的紅

細(xì)胞加入標(biāo)準(zhǔn)A型血清(含有抗B抗體)與標(biāo)準(zhǔn)B型血清(含有抗A抗體)中，觀察有無

凝集現(xiàn)象，從而測知受試者紅細(xì)胞膜上有無A或/和B抗原。在ABO血型系統(tǒng)，根據(jù)紅細(xì)

胞膜上是否含A、B抗原而分為A、B、AB、O四型(表7-1)。

表7-1ABO血型系統(tǒng)中的抗體和抗原

血型紅細(xì)胞膜上所含的抗原血清中所含的抗體

O無A和B抗A和抗B

AA抗B

BB抗A

ABA和B無抗A和抗B

此外人體還存在另一類Rh血型系統(tǒng)，可分為Rh(+)和Rh(-)?與ABO血型系統(tǒng)不同，

人群中Rh血型的不匹配非常罕見，尤其在黃種人中，Rh(+)型占到99.7%,而Rh(-)型還不到

0.3%,所以在醫(yī)療輸血中，通常只考慮獻(xiàn)血者和輸血者之間ABO血型是否匹配。

ABO血型在人群中的分布，存在著地理環(huán)境及民族、種族的差異，在我國漢族人群中，

各血型的比例由多到少依次是0(34.11%)>B(28.98%)>A(28,29%)>AB(8.69%)。

交叉配血是將受血者的紅細(xì)胞與血清分別同供血者的血清與紅細(xì)胞混合,觀察有無凝集

現(xiàn)象。輸血時(shí)，主要考慮供血者的紅細(xì)胞不要被受血者的血清所凝集，其次才考慮受血者的

紅細(xì)胞不被供血者的血清所凝集。前者叫交叉配血的主側(cè)，后者稱為交叉配血的次側(cè)。只有

主側(cè)和次側(cè)均無凝集，稱為“配血相合如果主側(cè)凝集，稱為“配血不合”或“配血禁忌”，絕

對不能輸血；如果主側(cè)不凝集，而次側(cè)凝集，可以認(rèn)為“基本相合”，但輸血要特別謹(jǐn)慎，不

宜過快過多，密切注視有無輸血反應(yīng)。

三、實(shí)驗(yàn)材料

人外周血

四、實(shí)驗(yàn)器材與試劑

(一)器材采血針'尖頭滴管、載玻片、1.5mlEppendorf管、75%酒精棉球、消毒干棉球

和記號筆。

(二)儀器顯微鏡、離心機(jī)。

(三)試劑標(biāo)準(zhǔn)A血清、標(biāo)準(zhǔn)B血清、生理鹽水、碘酒。

五、實(shí)驗(yàn)操作

(一)ABO血型鑒定

1、用記號筆在載玻片兩端分別作好標(biāo)記A、Bo

2、采血先揉搓采血的地方(小指或耳垂)，使血流暢通，以75%酒精棉球消毒皮膚，

待酒精揮發(fā)后用右手拇指及食指捏緊采血處,使皮膚緊張,用消過毒的采血針迅速刺破皮膚,

松開手指，血液自然流出，用消毒干棉球擦去第一滴血。用兩支尖頭滴管分別吸取標(biāo)準(zhǔn)A

血清和標(biāo)準(zhǔn)B血清，分別滴一滴于載玻片的A端和B端。注：采血針用前要嚴(yán)格消毒，嚴(yán)

禁交叉使用！

3、用吸管吸一滴血，以少量生理鹽水稀釋，分別滴于載玻片兩頭標(biāo)準(zhǔn)A血清和標(biāo)準(zhǔn)B

血清中。

4、室溫下靜置10?15min,觀察凝集現(xiàn)象：先肉眼觀察是否出現(xiàn)紅色點(diǎn)狀或小片狀凝

集塊；再在低倍顯微鏡下觀察紅細(xì)胞是否凝聚成團(tuán)。

5、根據(jù)被試者紅細(xì)胞是否被A、B型標(biāo)準(zhǔn)血清所凝集來判斷其血型，作好記錄。

II

（二）交叉配血實(shí)驗(yàn)

1、血樣采集及血清的制備：如上法分別獲取受血者及供血者靜脈血各0.5ml,用尖頭

吸管移至Eppendorf管中，標(biāo)明供血者與受血者，各取用一滴制備紅細(xì)胞懸液，其余的待其

凝固后析出血清備用。

2、取二試管，分別注明“主"、“次"字樣。前者滴入供血者紅細(xì)胞懸液一滴和受血者血

清一滴：后者滴入受血者紅細(xì)胞懸液一滴和供血者血清一滴?；靹蚝笤陔x心機(jī)上以1000轉(zhuǎn)/

分的速度離心1分鐘，取出觀察凝集，方法如實(shí)驗(yàn)（一）。

六、作業(yè)及思考題

根據(jù)所作的交叉配血血型，填寫下表，并說明受試者可接受和輸血給何種血型的人，試

述理由?試述觀察到的凝集反應(yīng)的現(xiàn)象。

表7-2不同血型配合時(shí)的凝集現(xiàn)象

凝集；不凝集）

凝集乒應(yīng)

0型A型B型AB型

受血主次主次主次主次

0型

A型

B型

AB型

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實(shí)驗(yàn)七植物的多樣性（校園植物的調(diào)查與分類）

目的：I、調(diào)查校園植物主要類群

2、了解植物器官的主要類型和特征和植物分類的基礎(chǔ)知識(shí)

江西農(nóng)大校園植物調(diào)查表

時(shí)間：年月日記錄人:

一征葉花果其他

生長類型

葉型葉序葉^葉脈

喬灌藤草單復(fù)互對輪簇全微波鋸重深掌網(wǎng)平平

顏色類型顏色類型

中文木木本本葉葉生生生生緣波齒鋸裂狀狀行行出

狀齒脈脈脈側(cè)脈

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實(shí)驗(yàn)八硬骨魚的觀察和解剖

一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/p>

1、同過對鯉魚外形和內(nèi)部結(jié)構(gòu)的觀察，了解硬骨魚類的主要特征及適應(yīng)水生生活的形態(tài)結(jié)

構(gòu)特征

2、掌握硬骨魚的一般測量方法及硬骨魚的解剖方法

二、材料用具：活鯉魚、解剖盤、解剖器械、直尺等。

三、實(shí)驗(yàn)步驟：

1、觀察魚的外形，區(qū)分頭部、軀干部、尾部。

2、進(jìn)行魚的一般測量

3、內(nèi)部解剖和觀察

（1）將鯉魚置于解剖盤，使其腹面朝上，用手術(shù)刀在肛門前與體軸垂直方向剪一小口

（2）使魚側(cè)臥，左側(cè)向上，自肛門前的開口向背方剪到脊柱，沿側(cè)線下方剪紙鰥蓋后緣，

再沿鯉蓋后緣剪紙下頜

（3）將左側(cè)體壁肌肉提起，使內(nèi)臟暴露

（4）用棉花拭凈血跡及體液，置于解剖盤內(nèi)觀察。（生殖腺、膽囊、膘、腸、腎臟、膀胱、

心臟、鰥、腦等）

4、解剖器具的清洗。（到各衛(wèi)生間）

四、作業(yè)與思考

1、記錄魚的外形測量的各項(xiàng)數(shù)據(jù)

2、根據(jù)觀察、繪鯉魚的心臟結(jié)構(gòu)圖、注明各器官名稱。

3、制作鯉魚的骨骼標(biāo)本（選作）

4、思考：魚類適應(yīng)水生生活的形態(tài)結(jié)構(gòu)特征

鯉魚測量數(shù)據(jù)表

全長體重

體長尾柄高

頭長尾柄長

軀干長尾長

體高眼間距

吻長眼后頭長

眼徑側(cè)線鱗數(shù)

鰭數(shù)鯉片數(shù)

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背鰭

尾柄長

囑蓋骨

側(cè)線鱗

鰥蓋膜

全長

體長

輸精管肛n尿殖孔

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實(shí)驗(yàn)九甜酒釀制作與根霉的分離

一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

1.學(xué)會(huì)甜酒釀的制作技術(shù)

2.熟悉自甜酒藥中分離根霉并初步鑒定的方法

二、基本知識(shí)與原理

甜酒釀簡稱酒釀，是我國民間廣泛食用的一種高糖、低酒精含量的發(fā)酵食品。由優(yōu)質(zhì)大

米（糯米）經(jīng)小曲中的根霉和酹母的糖化和發(fā)酵制成的。小曲又稱白藥.傳統(tǒng)的制法是用早

釉糙米粉加辣蓼草和適量水后經(jīng)自然發(fā)酵和干燥而成，一般制成球狀或方塊狀，白色，有香

味，內(nèi)含豐富的根霉（R/?izop“s.”N.）、毛霉（/"corspp.）和野生酹母等天然發(fā)酵菌群。目前

市場上出售的“濃縮甜酒藥”，實(shí)為用純種根霉經(jīng)過液體培養(yǎng)后的菌絲體干粉，由它配制的甜

酒釀一般甜味甚濃而酒味不足。

甜酒釀的制作原理十分簡單。根霉的抱子在米飯基質(zhì)上發(fā)芽后，迅速萌發(fā)出大量菌絲體,

它們分泌的幾種淀粉酶將基質(zhì)中的淀粉水解為葡萄糖，這就是糖化階段。接著，再由根霉和

多種酵母菌繼續(xù)將其中一部分葡萄糖轉(zhuǎn)化為乙醇，此即酒精發(fā)酵階段。一般優(yōu)質(zhì)的甜酒釀要

求甜味濃郁、酒味清淡、香味宜人、固液分明。

甜酒釀的制作方法是：糯米用水浸透后蒸煮、冷卻—?接種小曲粉并攪勻一裝入潔

凈容器后壓實(shí)—25℃下培養(yǎng)3?5d成品。若對甜酒釀進(jìn)行過濾、壓榨，還可得到低醇度

的營養(yǎng)甜酒，俗稱“老白酒從甜酒釀或小曲等材料中可分離優(yōu)質(zhì)根霉菌種。

三、實(shí)驗(yàn)器材

1.實(shí)驗(yàn)材料：種曲：市售：“甜酒藥”、“白藥”等小曲或“濃縮甜酒藥”（滬產(chǎn)根霉菌絲粉）

優(yōu)質(zhì)糯米

2.實(shí)驗(yàn)試劑：馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（PDA）

3.儀器設(shè)備：鋁制小飯盒、培養(yǎng)皿、吸管、試管、接種環(huán)、研缽等。

四、實(shí)驗(yàn)步驟

1.甜酒釀制作

（1）選好米料：選擇優(yōu)質(zhì)糯米作發(fā)酵原料。

?選擇的糯米必須是優(yōu)質(zhì)的，待它吸足水分后再隔水蒸煮熟透，使米飯粒既粒粒飽滿

又易于散開，從而可使拌種均勻、有利于空氣及液體流動(dòng)，并使酒醋成熟度一致。

（2）淘凈浸透：糯米用清水淘凈后浸泡12~24ho

（3）蒸煮熟透：用蒸籠或高壓鍋隔水蒸透糯米。

（4）降溫接種：將蒸熟的米飯從蒸鍋中取出、分散、降溫（約30℃）,再按干米量接種“濃

縮甜酒藥滬產(chǎn)"濃縮甜酒藥”每包能接種1.5?2.0kg糯米。為使接種時(shí)酒藥與米飯拌勻，

可將酒藥先與冷開水?dāng)噭颍缓缶鶆蛉霾己笤侔鑴?。若使用的曲種是市售塊狀或球狀酒藥，

則應(yīng)按用量先將它在研缽中研細(xì)，再用一定量的炒熟面粉混勻，然后再與大量米飯拌勻。

（5）裝料發(fā)酵：接種后的米飯可裝入陶瓷碗中或其他容器（壓實(shí)后體積占2/3）,中央再留

一散熱和積液孔道。

?陶瓷碗事先應(yīng)洗凈和開水淋泡，以防雜菌污染。操作者的手和指甲尤應(yīng)認(rèn)真清洗。

（6）保溫發(fā)酵：在30℃溫箱中先培養(yǎng)2d左右。第一天可在米飯表面見到縱橫交錯(cuò)的大量

菌絲體延伸，接著可見米飯的黏度逐漸下降，糖化液慢慢溢出；至第二天，菌絲體生長與發(fā)

酵繼續(xù)進(jìn)行。這是若發(fā)現(xiàn)米酷較干，可適當(dāng)補(bǔ)加涼開水。

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（7）后熟發(fā)酵：釀造2d后的酒釀已初步成熟，但口味不佳（酸澀、甜味和酒香味較差），

因此必須在8?10℃較低溫度下放置數(shù)天，進(jìn)行后發(fā)酵，以減少酸味、提高糖度和酒香味。

?酒釀保溫時(shí)間稍長后，表面會(huì)產(chǎn)生許多黑色抱子囊，這是根霉成熟后的正?，F(xiàn)象。若表

面出現(xiàn)紅色、黃色或其他顏色的菌落或霉斑，則是污染雜菌的表現(xiàn)，嚴(yán)重時(shí)應(yīng)棄去。

（8）質(zhì)量評估：優(yōu)質(zhì)的甜酒釀應(yīng)是色澤潔白、米粒分明、酒香濃郁、醛體充盈、甜醇爽口

的發(fā)酵食品。

2.甜酒釀中根霉的分離

（1）平板接種：先將若干酒藥放入研缽中研細(xì)（若用“濃縮甜酒藥”則可省略研細(xì)步驟），然

后采用稀釋液平板涂布法或平板劃線分離法進(jìn)行平板菌落分離。

（2）在28℃培養(yǎng)12?24h后進(jìn)行菌落挑選。

?因根霉的匍匐菌絲在平板表面蔓延極快.故培養(yǎng)時(shí)間稍長后即無法區(qū)分單菌落，從而影

響分離效果。

（3）初步鑒定：挑菌絲少許制作水浸片，然后用低倍鏡觀察根霉的形態(tài)，并注意假根、抱

子囊、抱子的特征。各種甜酒藥中的根霉主要是米根霉（Rhizopusoryzae）和華根霉

{R.chinensis'）等。

五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄

1.把你的結(jié)果填入下表

項(xiàng)目色澤米粒清晰度醪液量甜度酸度酒味其他結(jié)論

結(jié)果

注：除色澤外，其他指標(biāo)可以用1?5隔“+”

六思考題：

1、為什么天然小曲（酒藥、白藥）可作甜酒釀制作中的菌種？

2、為何用天然小曲制作的甜酒釀其甜味和酒味都很濃郁，而用“濃縮甜藥酒”制作的則甜味

濃而酒味淡，有什么方法可提高后者的酒味？

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實(shí)驗(yàn)十淀粉酶純化與活性測定

一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

1.了解淀粉酶對不同底物的專一性；

2.了解溫度對酶的影響；

2.掌握測定淀粉酶活力的原理和基本方法。

二、基本知識(shí)與原理

1.酶的概念

自然界中的一切生命現(xiàn)象都與酶的活動(dòng)有關(guān)系。活細(xì)胞內(nèi)全部的生物化學(xué)反應(yīng)都是在酶

的催化作用下進(jìn)行的。如果離開了酶，新陳代謝就不能進(jìn)行，生命就會(huì)停止。酶是生物體活

細(xì)胞產(chǎn)生的具有特殊催化活性的生物大分子，包括蛋白質(zhì)及核酸，又稱為生物催化劑。絕大

多數(shù)醐是蛋白質(zhì)，少數(shù)的酶是RNA。

2.酶的性質(zhì)

酶是生物催化劑，除了具有化學(xué)催化劑的特性（例如只需微量就可以使所催化的反應(yīng)加

速進(jìn)行，而其本身的質(zhì)和量都不發(fā)生變化）以外，還具有一些不同于化學(xué)催化劑的特性。（1）

酶的催化能力遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過化學(xué)催化劑；（2）酶具有高度的專一性：（3）同一般的催化劑相比，

酶很容易失活。

3.影響酶活力因素

酶的催化作用，受到溫度、pH和某些化合物等因素的影響。（D溫度的影響在一定

的溫度范圍（0?40℃）內(nèi)，酶催化作用速度隨著溫度的升高而加快。但超過60℃,絕大多

數(shù)的酶就會(huì)失去活性。（2）pH的影響酶對環(huán)境中的pH十分敏感，只有在一定的pH范圍

內(nèi)才能表現(xiàn)出活性，超過這個(gè)范圍，酶就失活了。一般酶的最適pH在4?8之間。（3）激活

劑和抑制劑的影響有些物質(zhì)（大都是離子或簡單的有機(jī)化合物），能夠增強(qiáng)酶的活性：有

些物質(zhì)能夠抑制酶的活性。

5.淀粉酶

淀粉酶能作用于淀粉中的a-l,4葡萄糖昔鍵，使淀粉分解為麥芽糖。反應(yīng)方程式如下：

2（CeHioOs）n+nH2O--------?nCi2H22O11

但是不能作用于蔗糖分子的a-D毗嚏葡萄糖的C1和b-D-吠喃果糖的C2之間的糖普

鍵。淀粉的還原性極小，而唾液淀粉酶（主要含a-淀粉酶）水解淀粉后形成的麥芽糖有還

原性，能使3,5-二硝基水楊酸（DNS試劑）還原成棕色的3-氨基-5-硝基水楊酸。據(jù)此可以

檢驗(yàn)蔗糖和淀粉有無被唾液淀粉酶水解，從而了解酶作用的專一性。

6.酶活力

也稱酶活性，是以酶在最適溫度、最適pH條件下，催化一定的化學(xué)反應(yīng)的初速度來表

示。本實(shí)驗(yàn)是以一定量的唾液淀粉醐液，于37℃、pH6.8的條件下，在一定的初始作用時(shí)間

里將淀粉轉(zhuǎn)化為還原糖，然后通過與DNS試劑作用，比色測定，求得還原糖的生成量，從

而計(jì)算出酶反應(yīng)的初速度，即酶的活力。在一定范圍內(nèi)，反應(yīng)液的棕色深淺與還原糖的含量

成正比，在波長540nm處測定溶液的吸光度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)液濃度得吸光度，便可求得樣品中

還原糖得含量。

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三、實(shí)驗(yàn)器材

1.實(shí)驗(yàn)材料：淀粉酶液

2.實(shí)驗(yàn)試劑：可溶性淀粉、二硝基水楊酸、酒石酸鉀鈉、磷酸緩沖液（0.2moi/L,pH6.8）、

lmg/ml標(biāo)準(zhǔn)麥芽糖溶液

3.實(shí)驗(yàn)設(shè)備：洗瓶、試管架、玻棒、水浴鍋、分光光度計(jì)

四、實(shí)驗(yàn)步驟

1.唾液淀粉酶的制備

（1）提?。合扔盟谇鍧嵖谇?，然后含1小口（約5ml）蒸儲(chǔ)水于口中輕漱1?2min。

（2）過濾：將口腔中的酶提取液用一層脫脂棉過濾。

（3）稀釋：取濾液1ml,用水定容至50ml。作為淀粉酶的樣品。

?由于不同人或者同一人不同時(shí)間收集到的唾液淀粉酶的活性并不相同，稀釋倍數(shù)可以

是50?300倍，甚至超過此范圍。

2.唾液淀粉酶的專一性實(shí)驗(yàn)

取4支試管，按表5.1編號并記錄所觀察到的顏色。

衣5.1唾液淀粉酶的專?性實(shí)驗(yàn)和酶活測定

管號123455

操作

pH6.8緩沖液(ml)121121

蔗糖溶液（ml）110000

淀粉溶液（ml）001111

淀粉酶液（ml）101000

煮沸過的唾液（ml）000100

標(biāo)準(zhǔn)麥芽糖溶液（ml）000001

酶促反應(yīng)搖勻，37℃水浴3min

DNS試劑(ml)各2

顯色反應(yīng)沸水浴5min

顏色

A5（X）nm光吸收值

3.唾液淀粉酶活力的測定

用5號空白管座對照：在500nm處測定3、5管的吸收值。將數(shù)據(jù)填入表5.1。

4.計(jì)算

根據(jù)溶液濃度與光吸光值成正比的關(guān)系，即：

A標(biāo)準(zhǔn)=c標(biāo)準(zhǔn)則c（酶液管中麥芽糖濃度）=A酶xc酶

A酶c酶A標(biāo)準(zhǔn)

（其中c為濃度，A為吸光值）

本實(shí)驗(yàn)規(guī)定：在37℃、pH6.8的條件下，每3min水解淀粉釋放Img麥芽糖所需的酶量

為1個(gè)酶活單位。

總活力單位=。酶乂11酶（c酶為麥芽糖的濃度；n酶為稀釋倍數(shù)）

附：分光光度計(jì)的使用:

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（1）先了解儀器的各個(gè)操作旋鈕的功能和電表的讀數(shù)方法。

（2）開啟電源，指示燈亮，選擇開關(guān)置于“T”，波長調(diào)置使用波長。打開比色皿暗箱蓋（光

門自動(dòng)關(guān)閉），預(yù)熱20min后。

（3）將預(yù)先裝好空白溶液和待測液的比色杯，依次放入暗箱內(nèi)的比色皿架上。

?比色杯中所盛溶液不宜過滿，大概2/3體積，若不慎使溶液流出比色杯外面，應(yīng)用濾紙

吸干，再用擦鏡紙擦凈后才能放入比色杯架內(nèi)。

?手不能接觸比色杯的光滑面，切忌用濾紙等物擦拭比色杯的光滑面。

（4）打開暗箱蓋，調(diào)節(jié)“0”旋鈕，使數(shù)字顯示為“00.0”。蓋上暗箱蓋，將對照液處于校正

位置，使光電管受光，調(diào)節(jié)透光率“100”旋鈕，使數(shù)字顯為“100.0”。連續(xù)幾次調(diào)整“00.0”和

“100.0”，儀器即可進(jìn)行測定工作。

?如果顯示不到“100.0”，則可適當(dāng)增加微電流放大器的倍率檔數(shù)，但盡可能使用低倍率

檔，這樣儀器有更高的穩(wěn)定性。但改變倍率后必須按步驟4重新校正“00.0”和“100.0”。

（5）將選擇開置于“A”，調(diào)節(jié)吸光度調(diào)零旋鈕，使得數(shù)字顯示為“.000”，然后將待測樣品

移入光路，現(xiàn)實(shí)值即為吸光值。

?測定時(shí)盡量使光吸收值不要超過1。

（6）測定完畢，將每個(gè)旋鈕、開關(guān)和調(diào)節(jié)器等復(fù)原和關(guān)閉，拔掉電源插頭。

?用完比色杯后立即用自來水沖洗比色杯，再用蒸儲(chǔ)水洗凈，將比色杯倒立晾干；每套儀

器所配套的比色皿，不能與其他儀器上的比色皿單個(gè)調(diào)換。

五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄

1.計(jì)算酶活

2.為什么酶促反應(yīng)要在37℃水??？沸水浴的目的是什么？

3.本實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了酶的哪些特性？

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實(shí)驗(yàn)十一酸奶中乳酸菌分離與發(fā)酵

一、目的要求

(1)初步掌握乳酸菌分離的一般方法。

(2)了解乳酸菌在乳發(fā)酵過程中所起的作用及酸奶發(fā)酵方法。

二、基本原理

一般指酸牛奶，它是以新鮮的牛奶為原料，經(jīng)過馬氏殺菌后再向牛奶中添加有益菌(發(fā)

酵劑)，經(jīng)發(fā)醇后，再冷卻灌裝的一種牛奶制品。目前市場上酸奶制品多以凝固型、攪拌型

和添加各種果汁果醬等輔料的果味型為多。酸奶不但保留了牛奶的所有優(yōu)點(diǎn)，而且某些方面

經(jīng)加工過程還揚(yáng)長避短，成為更加適合于人類的營養(yǎng)保健品。

面粉經(jīng)發(fā)酵制成饅頭就容易消化吸收，牛奶發(fā)酵制成酸奶也有同樣效果，發(fā)酵過程使奶

中糖、蛋白質(zhì)有20%左右被分解成為小的分子(如半乳糖和乳酸、小的肽鏈和氨基酸等)。

奶中脂肪含量一般是3%-5%。經(jīng)發(fā)酵后，乳中的脂肪酸可比原料奶增加2倍。這些變化使

酸奶更易消化和吸收，各種營養(yǎng)素的利用率得以提高。酸奶由純牛奶發(fā)酵而成，除保留了鮮

牛奶的全部營養(yǎng)成分外，在發(fā)酵過程中乳酸菌還可產(chǎn)生人體營養(yǎng)所必須的多種維生素，如

VB1、VB2、VB6、VB12等。

特別是對乳糖消化不良的人群，吃酸奶也不會(huì)發(fā)生腹脹、氣多或腹瀉現(xiàn)象。鮮奶中鈣含

量豐富，經(jīng)發(fā)酵后，鈣等礦物質(zhì)都不發(fā)生變化，但發(fā)酵后產(chǎn)生的乳酸，可有效地提高鈣、磷

在人體中的利用率，所以酸奶中的鈣磷更容易被人體吸收。

酸奶還是鈣的良好來源雖然說酸奶的營養(yǎng)成分取決于原料奶的來源和成分，但是一般

說，酸奶比原料奶的成分都有所提高，一方面因?yàn)樵腺|(zhì)量的要求高，另一方面因?yàn)橛行┧?/p>

奶制作中加入少量奶粉。所以一般來講，飲用一杯150克的酸奶，可以滿足10歲以下兒童

所需的一大鈣量的1/3、成人鈣量的1/5。

乳酸菌的細(xì)胞形態(tài)為桿狀或球狀，一般沒有運(yùn)動(dòng)性，革蘭氏染色陽性，微需氧、厭氧或

兼性