臨床本科3 溶貧檢測

第三節(jié)溶血性貧血(pínxuè)檢測共四十七頁溶血性貧血定義：

紅細胞的生存時間(shíjiān)縮短15～20天以下，破壞速度超過骨髓的代償造血能力時，才出現(xiàn)貧血發(fā)病機制分類：RBC內在因素（遺傳性/先天性）RBC外在因素（獲得性）共四十七頁freeHb(a2b2

tetramers)HbdimersHaptoglobin（Hp）haptoglobin-hemoglobincomplexkidneyslivermetHbbindstohemopexin&albuminferriheme(Fe3+)globin共四十七頁溶貧的臨床表現(xiàn)急性：發(fā)熱、畏寒，可出現(xiàn)Hb尿，腎功能改變慢性：貧血(pínxuè)、黃疸、脾腫大、免疫指標異常，膽紅素代謝異常共四十七頁紅細胞破壞增多的依據(jù)RBC壽命<15天血片見RBC碎片血漿游離Hb增高（血管內溶血）Hb尿檢測（＋），醬油(jiàngyóu)色尿含鐵血黃素試驗（＋）血清非結合膽紅素增高尿膽原增高血清結合珠蛋白減低血漿高鐵血紅素白蛋白檢測共四十七頁球形紅細胞共四十七頁破碎(pòsuì)紅細胞、盔形紅細胞等共四十七頁一、溶貧篩查試驗(shìyàn)1、血漿游離Hb測定

正常值：<50mg/L意義：血管(xuèguǎn)內溶血的指征共四十七頁2、血清(xuèqīng)結合珠蛋白測定正常值：0.7~1.5g/L各種溶血時結合(jiéhé)珠蛋白均可減低，嚴重血管內溶血明顯減低，甚至測不出（血漿游離血紅蛋白超過1.3g/L時）。巨幼細胞貧血、嚴重肝病、口服避孕藥、先天性無結合珠蛋白血癥等減低或消失。增高見于炎癥、感染、組織壞死、惡性腫瘤、風濕性疾病、口服避孕藥、類固醇激素治療。共四十七頁3、血漿高鐵血紅素清蛋白(dànbái)檢測

正常：陰性嚴重血管內溶血(rónɡxuè)時呈陽性4、RBC壽命測定（最佳）正常值：25~32天51Cr同位素標記，半衰期<15天，說明有溶血存在。共四十七頁5、尿含鐵血(tiěxuè)黃素試驗（Roustest)正常值：陰性(yīnxìng)

溶貧中陽性只占10~20%共四十七頁共四十七頁二、紅細胞膜缺陷(quēxiàn)的檢驗1、RBC滲透脆性試驗檢測紅細胞在不同濃度低滲鹽水中的抵抗力RBC表面積/RBC容積比值與RBC脆性成反比共四十七頁參考值：開始溶血0.42%~0.46%(NaCl液)完全(wánquán)溶血0.28%~0.32%(NaCl液)意義：脆性增高遺傳性球形細胞增多癥脆性減低地中海貧血、缺鐵性貧血共四十七頁2、自身溶血(rónɡxuè)試驗及其糾正試驗正常人紅細胞經(jīng)孵育48h后，溶血率很低<4.0%，加葡萄糖或ATP后更低（<0.6%）膜缺陷性溶貧時，溶血率升高(shēnɡɡāo)，但可被糾正G6PD缺陷：＋ATP：可糾正但不能糾至正常＋G：同上PK缺陷：＋ATP：可糾正＋G：不糾正共四十七頁三、酶缺陷(quēxiàn)的檢驗1、高鐵血紅蛋白還原(huányuán)試驗

G6PD高鐵血紅蛋白還原酶G6PNADP還原型美蘭HbFe3+6PGNADPH氧化型美蘭HbFe2+NaNO2

共四十七頁正常值：定性(dìngxìng)法（－）半定量法還原率>75%G6PD缺陷：定性（＋），半定量<70%。共四十七頁2、氰化物-抗壞血酸試驗(shìyàn)原理：略結果：正常血液幾小時后變暗色意義(yìyì)：G6PD缺乏者血液變成棕色（巧克力色），純合子在2h內即變色，雜合子要3~4h變化共四十七頁3、變性珠蛋白小體生成(shēnɡchénɡ)試驗受檢RBC＋乙酰苯肼作活體染色（甲基紫）37℃1~2h有變性珠蛋白小體，則膜上形成(xíngchéng)紫黑色顆粒下一張

G6PD缺乏致GSH減少，高鐵Hb增多，形成Heinz小體共四十七頁體外活體染色后，光鏡下發(fā)現(xiàn)的1~2μm顆粒狀折光小體。

結果：正常人<30%意義：見于(jiànyú)不穩(wěn)定血紅蛋白病、G6PD缺陷癥和芳香族苯胺或硝基類化合物中毒所致的溶貧。共四十七頁4、G6PDPK活性測定(cèdìng)共四十七頁四、珠蛋白生成異常試驗包括(bāokuò)血紅蛋白電泳、HbF定量測定（堿變性試驗）等共四十七頁五、免疫性溶血(rónɡxuè)的檢驗1、抗人球蛋白試驗(shìyàn)（Coombs`test）直接法、間接法共四十七頁直接(zhíjiē)抗人球蛋白試驗（DAGT）測RBC表面結合的抗體（更重要，價值高）受檢者RBC懸液+等量抗人球蛋白試劑

低速(dīsù)離心后觀察凝集37℃，15min

共四十七頁間接(jiànjiē)法（IAGT）：測游離特異的抗體（先使RBC致敏，再與抗人球蛋白血清結合）共四十七頁Coombs`test臨床意義正常人抗人球蛋白試驗直接、間接均陰性自身免疫性溶血性貧血(pínxuè)（溫抗體型37℃條件下作用最強IgG）,(冷抗體型4℃條件下進行試驗IgM)

新生兒同種免疫溶血病、SLE、RA、HD、NHL可陽性。共四十七頁2、冷熱溶血(rónɡxuè)試驗

檢測(jiǎncè)補體依賴性冷熱溶血素存在D-L雙向抗體，則（+）正常為（-），（+）見于PNH

3、冷凝集素試驗

參考值：效價<1:40意義：AIHA↑↑↑共四十七頁六、PNH相關檢測屬于(shǔyú)紅細胞膜缺陷，慢性血管內溶血PNH不同(bùtónɡ)時間尿樣共四十七頁1、酸化溶血試驗（Hamtest）特異性高，是國內外公認的PNH確診試驗利用補體(bǔtǐ)在弱酸性環(huán)境中激活，并攻擊RBC膜，致溶血。正常人陰性，PNH陽性。共四十七頁2、蔗糖溶血試驗特異性敏感性均不如Ham試驗，僅做篩選。參考值：陰性(yīnxìng)3、蛇毒因子溶血試驗特異檢測PNH共四十七頁第四節(jié)血型鑒定(jiàndìng)與交叉配血共四十七頁血型(xuèxíng)定義：紅細胞系統(tǒng)血型：共四十七頁一、ABO系統(tǒng)(xìtǒng)與臨床意義

1、分型原則

根據(jù)紅細胞膜上含有(hányǒu)抗原和血漿中含有(hányǒu)相應抗體分為A、B、AB、O四型

血型（表型）紅細胞上抗原血漿中抗體基因型

AA抗BAA、AO

BB抗ABB、BO

O無

抗A、

抗B、抗ABOO

ABA、B無

AB

共四十七頁共四十七頁父母的血型(xuèxíng)與子女的血型(xuèxíng)關系

共四十七頁2、抗原(kàngyuán)

A、B抗原(kàngyuán)（含H抗原(kàngyuán)）在胚胎期已形成，出生時抗原(kàngyuán)性不強，故胎兒、新生兒定血型時凝集性差。血型抗原終生不變。H抗原屬分泌型物質，存在各組織中，以唾液為多，可輔助鑒定ABO血型。共四十七頁3、抗體(kàngtǐ)

抗A、抗B、抗AB屬IgG或IgM型，天然性抗體以IgM為主，免疫性以IgG為主（如輸血、妊娠后）。O血型血清內抗體屬IgG。新生兒溶血(rónɡxuè)與IgG有關。抗體也終生不變

抗A、抗B在生后3-6月才開始產(chǎn)生,5-6歲達高峰，故嬰幼兒定血型時，抗體效價低，抗原位點少，易誤定共四十七頁

ABO亞型亞型是指屬同一血型抗原，但抗原結構或抗原位點數(shù)有一定(yīdìng)差異。最多見的最有意義亞型是A型中的A1、A2（A1A、A1B、A2B)。A2B含有A1抗體。凡在血型鑒定過程中出現(xiàn)不明顯或可疑結果時應做亞型鑒定。共四十七頁4、血型(xuèxíng)鑒定共四十七頁正向直接定型：用已知抗體(kàngtǐ)血清檢查紅細胞的抗原反轉定型：用已知血型的紅細胞檢查血清中抗體

正定型(dìngxíng) 反定型(dìngxíng)

抗A抗B抗AB A細胞B細胞O細胞

+-+ -+- A- ++ + -- B+++- -- AB- - - + +- O

血型共四十七頁三、交叉(jiāochā)配血、輸血原則

1、交叉(jiāochā)配血主側交叉配血：次側交叉配血:：共四十七頁

2、輸血(shūxuè)原則

輸血前復查血型，做交叉配血;輸同型血，多個不同血源間互相交叉配血;嚴格掌握輸血指征;提倡(tíchàng)成分輸血

共四十七頁意義(yìyì)輸血；輔助診斷新生兒溶血病；器官移植；遺傳(yíchuán)分析；其他共四十七頁二、Rh系統(tǒng)(xìtǒng)與臨床意義

1900年發(fā)現(xiàn)ABO血型，1940年發(fā)現(xiàn)Rh血型?？乖蠧cDEe五種(wǔzhǒnɡ)，一般以D定型。含有D抗原的紅細胞稱為Rh陽性，不含D抗原的為Rh陰性.我國人群漢族Rh（+）占99.7％，Rh(-)占0.3％。共四十七頁約80%以上Rh陰性受血者在接受Rh陽性血液后能產(chǎn)生抗體。首次輸血不合不發(fā)生輸血反應,但當Rh(-)第二次接受Rh(+)血液即刻(jíkè)發(fā)生，且嚴重，輸血前須定Rh血型共四十七頁本節(jié)重點內容(nèirón