高三生物一輪復(fù)習(xí)練習(xí)微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用

微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用練習(xí)一、選擇題1.培養(yǎng)基是人們按照培養(yǎng)對象對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求配制的營養(yǎng)基質(zhì)。下列有關(guān)培養(yǎng)基的配制和使用的敘述，正確的是()A.微生物培養(yǎng)基的組成成分必需含有碳源、氮源、水和無機(jī)鹽B.用動(dòng)、植物的體細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，均可用固體培養(yǎng)基C.接種前要了解固體培養(yǎng)基是否被污染可接種蒸餾水來培養(yǎng)檢測D.使用過的微生物培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行高壓蒸汽滅菌處理后再丟棄2.下圖為實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)和純化大腸桿菌過程中的部分操作步驟，下列說法正確的是()A.步驟①后需將培養(yǎng)基滅菌并調(diào)節(jié)pHB.步驟①②③操作時(shí)需要在酒精燈火焰附近進(jìn)行C.步驟③到④的過程中，接種環(huán)共灼燒處理了5次D.圖中步驟①結(jié)束后需倒置平板，④結(jié)束后不需要3.獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵。下列有關(guān)無菌技術(shù)的敘述，正確的是()A.操作者的雙手清潔后，用無水乙醇擦拭消毒B.巴氏消毒法處理的食品不含微生物，可長期保存C.平板劃線接種微生物時(shí)須在酒精燈火焰旁操作D.培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿等均須采用干熱滅菌法滅菌4.利用纖維素解決能源問題的關(guān)鍵是獲取高性能的纖維素酶。某科學(xué)研究小組將產(chǎn)生纖維素酶的菌株，通過誘變處理獲得能產(chǎn)生高性能纖維素酶的新菌株，下列敘述錯(cuò)誤的是()A.操作前用70%左右的乙醇對雙手進(jìn)行消毒處理B.圖中1號培養(yǎng)基中所顯示的接種和計(jì)數(shù)的方法是平板劃線法C.用1號培養(yǎng)基培養(yǎng)的目的是獲得單個(gè)菌落D.由于誘變后的菌株突變方向是不定向的，因此需要用2號培養(yǎng)基進(jìn)行篩選5.(多選)根據(jù)食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)(GB19645－2010)規(guī)定，每毫升合格的牛奶中細(xì)菌總數(shù)不超過50000個(gè)。某興趣小組利用恒溫水浴鍋對新鮮牛奶進(jìn)行消毒后，進(jìn)行細(xì)菌總數(shù)測定，主要步驟如下圖所示。相關(guān)敘述正確的是()A.步驟①中用巴氏消毒法對新鮮牛奶進(jìn)行消毒，可以減少營養(yǎng)物質(zhì)的損失B.步驟②對牛奶進(jìn)行梯度稀釋可以使聚集的微生物分散，便于在培養(yǎng)基表面形成單菌落C.步驟③中牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基要先高壓蒸汽滅菌再調(diào)pH，以防止高溫影響pH的穩(wěn)定D.實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)培養(yǎng)基上的菌落可能不止一種，若平均菌落總數(shù)少于50個(gè)則表明消毒合格6.(多選)如圖是研究人員從紅棕壤中篩選高效分解尿素細(xì)菌的過程示意圖，下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.在配制步驟②③的培養(yǎng)基時(shí)，都應(yīng)添加瓊脂作凝固劑B.步驟③純化分解尿素細(xì)菌的原理是將聚集的細(xì)菌分散，可以獲得單細(xì)胞菌落C.步驟③采用稀釋涂布平板法接種，并需向牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中加入尿素D.步驟④挑?、壑胁煌N的菌落分別接種，可通過溶液pH的變化大小來比較細(xì)菌分解尿素的能力7.下列是某同學(xué)分離產(chǎn)脲酶菌的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，不合理的是()A.選擇農(nóng)田或公園土壤作為樣品分離目的菌株B.在選擇培養(yǎng)基中需添加尿素作為唯一氮源C.適當(dāng)稀釋樣品是為了在平板上形成單菌落D.可分解酚紅指示劑使其褪色的菌株是產(chǎn)脲酶菌株8.(多選)為提高一株石油降解菌的凈化能力，將菌涂布于石油為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，以致死率為90%的輻照劑量誘變處理，下列敘述不合理的是()A.將培養(yǎng)基分裝于培養(yǎng)皿中后滅菌，可降低培養(yǎng)基污染的概率B.涂布用的菌濃度應(yīng)控制在30～300個(gè)/mLC.需通過預(yù)實(shí)驗(yàn)考察輻射時(shí)間對存活率的影響，以確定最佳誘變時(shí)間D.挑取培養(yǎng)基上長出的較大單菌落，純化后進(jìn)行降解效率分析9.為純化菌種，在鑒別培養(yǎng)基上劃線接種纖維素降解細(xì)菌，培養(yǎng)結(jié)果如圖所示。下列敘述正確的是()A.倒平板后需間歇晃動(dòng)，以保證表面平整B.圖中Ⅰ、Ⅱ區(qū)的細(xì)菌數(shù)量均太多，應(yīng)從Ⅲ區(qū)挑取單菌落C.該實(shí)驗(yàn)結(jié)果因單菌落太多，不能達(dá)到菌種純化的目的D.菌落周圍的纖維素被降解后，可被剛果紅染成紅色10.下列關(guān)于微生物實(shí)驗(yàn)操作的敘述，錯(cuò)誤的是()A.培養(yǎng)微生物的試劑和器具都要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌B.接種前后，接種環(huán)都要在酒精燈火焰上進(jìn)行灼燒C.接種后的培養(yǎng)皿要倒置，以防培養(yǎng)污染D.菌種分離和菌落計(jì)數(shù)都可以使用固體培養(yǎng)基11.解脂菌能利用分泌的脂肪酶將脂肪分解成脂肪酸和甘油并吸收利用。脂肪酸會(huì)使醇溶青瓊脂平板變?yōu)樯钏{(lán)色。將不能直接吸收脂肪的甲、乙兩種菌分別等量接種在醇溶青瓊脂平板上培養(yǎng)。甲菌菌落周圍呈現(xiàn)深藍(lán)色，乙菌菌落周圍不變色。下列說法錯(cuò)誤的是()A.甲菌屬于解脂菌B.實(shí)驗(yàn)中所用培養(yǎng)基以脂肪為唯一碳源C.可將兩種菌分別接種在同一平板的不同區(qū)域進(jìn)行對比D.該平板可用來比較解脂菌分泌脂肪酶的能力二、非選擇題12.“掌心對掌心，手心壓手背，十指交叉摩，手握關(guān)節(jié)搓，拇指圍軸轉(zhuǎn)，指尖掌心揉，手腕別放過?！逼卟较词址梢郧宄植康奈畚锖臀⑸?，是預(yù)防新冠病毒感染的有效措施之一。某生物實(shí)驗(yàn)小組設(shè)計(jì)了“比較洗手前后手上細(xì)菌分布情況”的探究活動(dòng)：各小組成員分別將拇指在甲組培養(yǎng)基上輕輕按一下，然后用肥皂將該手洗干凈，再將洗凈后的拇指在乙組培養(yǎng)基上輕輕按一下。將這兩組培養(yǎng)基放入恒溫培養(yǎng)箱中，在適宜溫度下培養(yǎng)24小時(shí)后，統(tǒng)計(jì)兩組培養(yǎng)基中菌落數(shù)目，請回答下列問題：(1)該實(shí)驗(yàn)中用到的培養(yǎng)基中加入了牛肉膏、蛋白胨、NaCl和水，蛋白胨可以為微生物的生長提供____________________________________________________等營養(yǎng)物質(zhì)，為了使配制的溶液呈固體狀態(tài)，還需要加入________。為了防止外來雜菌的入侵，可以將培養(yǎng)基放入盛有適量________的高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)滅菌15～30min。(2)實(shí)驗(yàn)中“將拇指在培養(yǎng)基上輕輕按一下”相當(dāng)于微生物培養(yǎng)操作中的________，該操作應(yīng)該在酒精燈火焰附近進(jìn)行，原因是_______________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)統(tǒng)計(jì)甲、乙兩組培養(yǎng)皿中的菌落，乙組中菌落數(shù)比甲少得多，實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明肥皂洗手不能徹底清除手上的微生物。為避免手上微生物在無菌操作中污染培養(yǎng)基，洗過的手還應(yīng)進(jìn)行________________________________________________等方法處理(答出1種即可)。(4)有同學(xué)認(rèn)為乙中也有菌落產(chǎn)生，是因?yàn)榕囵B(yǎng)過程受到雜菌污染，請你在本實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上設(shè)計(jì)一個(gè)簡單的方案驗(yàn)證他的猜想是否正確，并預(yù)期結(jié)果和結(jié)論。_______________________________________________________________________________________________________________________________________。13.民間傳統(tǒng)酒曲中含有大量的微生物，現(xiàn)進(jìn)行下述實(shí)驗(yàn)分離酒曲中的主要微生物。(1)實(shí)驗(yàn)一：將酒曲用________制成懸液后，分別取不同稀釋度的酒曲懸液用________接種法接種到培養(yǎng)基上，經(jīng)培養(yǎng)后根據(jù)__________________________(寫出三種)等菌落特征以統(tǒng)計(jì)不同微生物的菌落數(shù)，發(fā)現(xiàn)酒曲中主要有兩類微生物，即酵母菌和霉菌。研究者發(fā)現(xiàn)在液體中酵母菌比霉菌生長快；而酸性培養(yǎng)基中酵母菌比細(xì)菌生長更適宜。據(jù)此設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)二將酵母菌從酒曲中進(jìn)行分離。(2)實(shí)驗(yàn)二：用小刀切開曲塊，挖取米粒大小一塊投入酸性蔗糖豆芽汁培養(yǎng)液中，然后置于25℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)兩天。上述實(shí)驗(yàn)操作中，需要滅菌的物品或材料有________。培養(yǎng)兩天后，可見培養(yǎng)液變渾濁，這是因?yàn)開_______________________。(3)實(shí)驗(yàn)三：取渾濁的培養(yǎng)液1mL轉(zhuǎn)接到另一瓶酸性蔗糖豆芽汁培養(yǎng)液中并培養(yǎng)，如此重復(fù)多次。多次轉(zhuǎn)接后，取稀釋液用下圖所示方法接種在蔗糖豆芽汁平板上。①如圖所示接種方法為________，使用該接種方法的目的是____________________________________________________________________。②與酸性蔗糖豆芽汁培養(yǎng)液成分相比，蔗糖豆芽汁平板培養(yǎng)基成分中少了乳酸，請簡要解釋不再需要添加乳酸的原因是______________________________；同時(shí)培養(yǎng)基中添加了瓊脂，這種成分改變的原因是_________________________________________________________________________________________________。14.研究深海獨(dú)特的生態(tài)環(huán)境對于開發(fā)海洋資源具有重要意義。近期在“科學(xué)號”考察船對中國南?？瓶贾?，中國科學(xué)家采集了某海域1146米深海冷泉附近沉積物樣品，分離、鑒定得到新的微生物菌株并進(jìn)一步研究了其生物學(xué)特性?；卮鹣铝袉栴}：(1)研究者先制備富集培養(yǎng)基，然后采用________________法滅菌，冷卻后再接入沉積物樣品，28℃厭氧培養(yǎng)一段時(shí)間后，獲得了含擬桿菌的混合培養(yǎng)物，為了獲得純種培養(yǎng)，除了稀釋涂布平板法，還可采用________法。據(jù)圖分析，擬桿菌新菌株在以________為碳源時(shí)生長狀況最好。(2)研究發(fā)現(xiàn)，將采集的樣品置于各種培養(yǎng)基中培養(yǎng)，仍有很多微生物不能被分離篩選出來，推測其原因可能是__________________________________________________________________________________________________________(答一點(diǎn)即可)。(3)藻類細(xì)胞解體后的難降解多糖物質(zhì)，通常會(huì)聚集形成碎屑沉降到深海底部。從生態(tài)系統(tǒng)組成成分的角度考慮，擬桿菌對深海生態(tài)系統(tǒng)碳循環(huán)的作用可能是_______________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)深海冷泉環(huán)境特殊，推測此環(huán)境下生存的擬桿菌所分泌的各種多糖降解酶，除具有酶的一般共性外，其特性可能還有________。答案：1.D微生物培養(yǎng)基不一定都含有碳源、氮源，如培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基中不需加入碳源，分離自生固氮菌的培養(yǎng)基中不需加入氮源，A錯(cuò)誤；動(dòng)物的體細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)用液體培養(yǎng)基，而植物的體細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)用固體培養(yǎng)基，B錯(cuò)誤；檢測培養(yǎng)基是否被污染的方法是：將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生，C錯(cuò)誤；使用過的微生物培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行高壓蒸汽滅菌處理后再丟棄，以防止雜菌污染環(huán)境，D正確。2.B步驟①表示倒平板，培養(yǎng)基需要先調(diào)節(jié)pH后滅菌，冷卻后倒平板，A錯(cuò)誤；接種環(huán)在每次接種前和接種結(jié)束后都要通過灼燒來滅菌，所以步驟③到步驟④的過程中5次劃線操作前都要灼燒滅菌，接種結(jié)束后還需灼燒滅菌1次，防止造成污染，由此可見，步驟③到步驟④的過程中共需灼燒接種環(huán)6次，C錯(cuò)誤；步驟④操作結(jié)束后需在培養(yǎng)皿的底上做好標(biāo)記并倒置后放入培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)，D錯(cuò)誤。3.C操作者的雙手清潔后，用體積分?jǐn)?shù)為75%的酒精擦拭消毒，不能用無水乙醇進(jìn)行消毒，這是因?yàn)檫^高濃度的酒精會(huì)在細(xì)菌表面形成一層保護(hù)膜，阻止其進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi)，難以將細(xì)菌徹底殺死，達(dá)不到消毒的目的，A錯(cuò)誤；巴氏消毒法處理的食品因微生物未被徹底殺死，仍會(huì)有部分較耐熱的細(xì)菌或細(xì)菌芽孢存在，故不能長期保存，B錯(cuò)誤；平板劃線接種微生物時(shí)須在酒精燈火焰旁操作，以保證接種時(shí)處于無菌的環(huán)境，防止雜菌污染，C正確；培養(yǎng)皿等玻璃器皿可采用干熱滅菌法滅菌，培養(yǎng)基需要用濕熱(高壓蒸汽)滅菌法滅菌，D錯(cuò)誤。4.B操作前用70%左右的乙醇對雙手進(jìn)行消毒處理，以避免雜菌污染，A正確；分析題圖可知，圖中1號培養(yǎng)皿中所顯示的接種方法是平板劃線法，但平板劃線法不能用于計(jì)數(shù)，應(yīng)用稀釋涂布平板法進(jìn)行計(jì)數(shù)，B錯(cuò)誤；由題圖可知，圖中1號培養(yǎng)皿中所顯示的接種方法是平板劃線法，平板劃線法分離菌株的目的是獲得單個(gè)菌落，C正確；基因突變具有不定向性，故誘變后的菌株突變方向是不定向的，所以2號培養(yǎng)基應(yīng)是以纖維素為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基，可以篩選出能分解纖維素的菌株，D正確。5.ABD62～65℃30min處理新鮮牛奶屬于巴氏消毒法，可以殺死牛奶中的絕大多數(shù)微生物并且盡量減少食物中營養(yǎng)物質(zhì)的損失，A正確；步驟②將牛奶進(jìn)行梯度稀釋的目的是使聚集在一起的微生物分散，便于能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落，B正確；牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基配制時(shí)應(yīng)先調(diào)pH再滅菌，C錯(cuò)誤；由于生牛奶中的微生物可能不止一種，而牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基屬于天然培養(yǎng)基，細(xì)菌、真菌等均可生長，因此，在實(shí)驗(yàn)中，培養(yǎng)基上可能不止出現(xiàn)一種菌落；依據(jù)樣品液稀釋1000倍，接種液體積為1mL，計(jì)算推測若平均菌落總數(shù)少于50個(gè)，則表明滅菌后牛奶中細(xì)菌總數(shù)不超過50000個(gè)，滅菌合格，D正確。6.AC②培養(yǎng)基是液體培養(yǎng)基，不需要添加瓊脂，A錯(cuò)誤；步驟③純化分解尿素細(xì)菌的原理是將聚集的細(xì)菌通過稀釋涂布平板法分散，獲得單細(xì)胞菌落，B正確；步驟③篩選分解尿素的細(xì)菌，培養(yǎng)基中應(yīng)以尿素為唯一氮源，不能加入牛肉膏蛋白胨(含有氮源)，C錯(cuò)誤；步驟④鑒定細(xì)菌分解尿素的能力時(shí)，挑?、壑胁煌N的菌落分別接種，分解尿素能力高的會(huì)產(chǎn)生更多NH3，溶液pH更高，所以可通過溶液pH的變化大小來比較細(xì)菌分解尿素的能力，D正確。7.D農(nóng)田或公園土壤中含尿素較多，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，所以可以利用這些地方的土壤作樣品來分離產(chǎn)脲酶菌，A正確；產(chǎn)脲酶菌能分解利用尿素，其他菌不能，因此在利用選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)時(shí)需要以尿素作為唯一氮源，B正確；適當(dāng)稀釋樣品可以降低菌的濃度，并有利于讓粘連在一起的菌相互分離，易于在平板上涂布，形成單菌落，C正確；酚紅是一種酸堿指示劑，由于尿素被脲酶分解成氨，氨會(huì)使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)，pH升高，從而使酚紅指示劑變紅，D錯(cuò)誤。8.AB培養(yǎng)基應(yīng)先滅菌再分裝于培養(yǎng)皿中，A錯(cuò)誤；涂布到平板上的菌落數(shù)在30～300個(gè)，涂布時(shí)菌液一般為0.1mL，則涂布用的菌濃度應(yīng)控制在300～3000個(gè)/mL，B錯(cuò)誤；需通過預(yù)實(shí)驗(yàn)考察輻射時(shí)間對存活率的影響，以確定最佳誘變時(shí)間，C正確；石油降解菌能分解石油獲得碳源，形成菌落，挑取培養(yǎng)基上長出的較大單菌落，純化后進(jìn)行降解效率分析，以獲得能高效降解石油的菌種，D正確。9.B倒平板后無需間歇晃動(dòng)，A錯(cuò)誤；圖中Ⅰ區(qū)、Ⅱ區(qū)的細(xì)菌數(shù)量均太多，Ⅲ區(qū)的細(xì)菌數(shù)量較少，可從Ⅲ區(qū)挑取單菌落，B正確；Ⅲ區(qū)中存在單菌落，該實(shí)驗(yàn)結(jié)果能達(dá)到菌種純化的目的，C錯(cuò)誤；剛果紅能與纖維素形成紅色復(fù)合物，但不能和纖維素水解后的纖維二糖和葡萄糖形成紅色復(fù)合物，因此菌落周圍的纖維素被降解后，不能被剛果紅染成紅色，D錯(cuò)誤。10.A培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基一般用高壓蒸汽滅菌法滅菌，微生物的接種工具，如接種針、接種環(huán)或其他金屬用具一般通過酒精燈火焰灼燒來滅菌，A錯(cuò)誤；接種前，接種環(huán)要在酒精燈火焰上進(jìn)行灼燒，防止接種環(huán)上附著的微生物對實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成干擾，接種后灼燒可以防止微生物擴(kuò)散，對人造成危害，B正確；接種后的培養(yǎng)皿要倒置，防止冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染，C正確；在固體培養(yǎng)基表面可形成單菌落，故菌種的分離和菌落的計(jì)數(shù)可以使用固體培養(yǎng)基，D正確。11.B根據(jù)題意，甲、乙兩種菌分別接種在醇溶青瓊脂平板上，二者都能生存，甲菌周圍呈現(xiàn)深藍(lán)色，說明培養(yǎng)基的脂肪被分解為脂肪酸，使醇溶青瓊脂平板呈現(xiàn)深藍(lán)色，脂肪的分解需要脂肪酶的催化，說明甲菌能夠分泌脂肪酶，屬于解脂菌，A正確；乙菌周圍不變色，說明乙菌不能分泌脂肪酶分解脂肪，沒有脂肪酸的產(chǎn)生，不能利用脂肪，但由于乙能在該培養(yǎng)基上生存，說明該培養(yǎng)基中除了脂肪作為碳源外，還存在別的碳源，否則乙不能在該培養(yǎng)基上生存，B錯(cuò)誤；為了便于比較結(jié)果，可以將兩種菌接種到同一平板的不同區(qū)域，C正確；菌落周圍深藍(lán)色的直徑越大，說明解脂菌分泌脂肪酶的能力越強(qiáng)，D正確。12.(1)氮源和維生素瓊脂水(2)接種避免周圍環(huán)境中的微生物污染培養(yǎng)基(3)酒精棉球擦拭雙手、戴消毒手套(4)再加一個(gè)不接種的相同培養(yǎng)基(空白培養(yǎng)基)，與甲、乙在相同條件下培養(yǎng)，若該培養(yǎng)基上沒有生長菌落，說明培養(yǎng)過程未被雜菌污染，猜想錯(cuò)誤；若該培養(yǎng)基上生長菌落，說明培養(yǎng)過程中被雜菌污染，猜想正確13.(1)無菌水稀釋涂布平板菌落的形狀、大小、隆起程度和顏色(2)小刀、培養(yǎng)液微生物進(jìn)行繁殖，數(shù)量增加(3)①平板劃線法分離出單個(gè)菌落②利用酵母菌在酸性液體培養(yǎng)基中的生長優(yōu)勢，通過多次轉(zhuǎn)接，已篩選出酵母菌，因此不必再用酸性培養(yǎng)液通過平板劃線法分離酵母菌，此操作需要在固體培養(yǎng)基上進(jìn)行解析(1)酒曲中含有大量的微生物，用無菌水制成懸液后，再稀釋成不同梯度的菌液，再通過稀釋涂布平板法接種到培養(yǎng)基上，經(jīng)培養(yǎng)