華貴櫛孔扇貝“南澳金貝”苗種培育技術(shù)規(guī)程

ICS65.150ICS65.150B51備案號(hào)：汕頭市農(nóng)業(yè)地方標(biāo)準(zhǔn)DB汕頭市農(nóng)業(yè)地方標(biāo)準(zhǔn)DB44DB440501/T***—2022華貴櫛孔扇貝“南澳金貝”華貴櫛孔扇貝“南澳金貝”苗種培育技術(shù)規(guī)程TechnicalspecificationforseedlingsbreedinginChlamysnobilis（送審稿）廣東省汕頭市質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布20XX-廣東省汕頭市質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布20XX-XX-XX實(shí)施20XX-XX-XX發(fā)布前言本標(biāo)準(zhǔn)按GB/T1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》進(jìn)行編寫。本標(biāo)準(zhǔn)的制定由汕頭大學(xué)提出。本標(biāo)準(zhǔn)制定單位：汕頭大學(xué)。本標(biāo)準(zhǔn)主要制定人：鄭懷平、張洪寬。

華貴櫛孔扇貝“南澳金貝”苗種培育技術(shù)規(guī)程范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了華貴櫛孔扇貝“南澳金貝”（Chlamysnobilis）苗種培育的術(shù)語和定義、培育條件、親貝挑選、性腺強(qiáng)化促熟、人工催產(chǎn)、人工授精、受精卵孵化、選幼、幼蟲培育、采苗、附著后管理、出池、優(yōu)質(zhì)種苗標(biāo)準(zhǔn)等內(nèi)容。本標(biāo)準(zhǔn)適用于華貴櫛孔扇貝“南澳金貝”苗種規(guī)模化培育過程。規(guī)范性引用文件下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB11607-89漁業(yè)水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)NY5052-2001無公害食品海水養(yǎng)殖用水水質(zhì)DB440500/T272—2017華貴櫛孔扇貝“南澳金貝”種質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。3.1華貴櫛孔扇貝“南澳金貝”Nan’aoGoldenScallop：貝殼、閉殼肌、外套膜均為金黃色的華貴櫛孔扇貝。3.2眼點(diǎn)幼蟲eye-spotlarvae：D形幼蟲培養(yǎng)到8-10天時(shí)，在內(nèi)臟團(tuán)附近會(huì)出現(xiàn)一個(gè)黑色的眼點(diǎn)，此時(shí)的幼蟲被稱為眼點(diǎn)幼蟲，也被稱為早期殼頂幼蟲，隨著幼蟲的發(fā)育，該眼點(diǎn)變圓變大。3.3變態(tài)metamorphosis：幼蟲面盤消失、長出次生殼變?yōu)橹韶惖纳飳W(xué)過程。3.4規(guī)格合格率certifiedsizerate：達(dá)到規(guī)格的苗種數(shù)量占苗種總數(shù)的百分比。3.5傷殘死亡率woundedanddeathrate：殼殘缺和死亡苗種數(shù)量占苗種總數(shù)的百分比。3.6出池苗規(guī)格sizeofspatmovedhatchingroom：殼長≥500μm的稚貝。3.7商品苗規(guī)格sizeofcommercialspat，殼長≥5.0mm的稚貝。4育苗條件4.1設(shè)備和材料：水泵設(shè)施、海水沉淀池、砂濾池、凈化海水蓄水池、催產(chǎn)池、孵化池、育苗池、餌料保種室、餌料培育池、控溫設(shè)施、充氣設(shè)施、顯微鏡、附著基等。4.2水質(zhì)：苗種培育過程中所用水為潔凈砂濾海水，水源符合GB11607-89的規(guī)定，培育用水符合NY5052-2001的規(guī)定。5親貝挑選參照《華貴櫛孔扇貝“南澳金貝”種質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)》（DB440500/T272—2017）進(jìn)行親貝挑選。親貝的貝殼、閉殼肌、外套膜均為金黃色，貝殼完整，殼長≥60.0mm，健康，性腺發(fā)育良好，卵巢為金黃色、精巢為白色或微黃色。雌、雄比例為3~4:1。6性腺強(qiáng)化促熟在室內(nèi)采用三角褐指藻+亞心形扁藻+蛋黃+酵母粉混合投喂親貝，每3個(gè)小時(shí)投喂1次，投喂量為每毫升水體三角褐指藻5×105個(gè)細(xì)胞、亞心形扁藻2×104個(gè)細(xì)胞，每立方水體10g雞蛋黃和5g酵母粉，水溫23-25℃，鹽度30-32，連續(xù)微充氣，每天全換水1次，暗光或弱光培養(yǎng)。培養(yǎng)5-7天，性腺更加飽滿、成熟。7人工催產(chǎn)向每個(gè)個(gè)體的精巢或卵巢中注射0.02mM的5-羥色胺0.1mL，雌、雄分開放入加有1/3的砂濾海水產(chǎn)卵池中待產(chǎn)。所有雄性親貝可放入一個(gè)產(chǎn)卵池中，雌性親貝則按每平方米10個(gè)放入不同的產(chǎn)卵池中。水溫25-26℃，鹽度30-32，連續(xù)微充氣。約10分鐘后，親貝就開始排精或排卵。排放20分鐘后，即可移走親貝。8人工授精從含有精液的產(chǎn)卵池中舀取適量的精液加入含有卵子的產(chǎn)卵池中進(jìn)行人工授精，邊加精液邊攪拌。水溫25-26℃，鹽度30-32。5分鐘后，移取少量水體顯微鏡下檢查，每個(gè)卵子周圍4-5個(gè)精子即可。如發(fā)現(xiàn)精子不夠，可繼續(xù)添加少量精液，繼續(xù)開展人工授精；如精子過多，可添加新鮮的砂濾海水進(jìn)行稀釋。9受精卵孵化當(dāng)卵子完全受精20分鐘后，用新鮮的砂濾海水注滿產(chǎn)卵池，開始受精卵孵化。鏡檢計(jì)數(shù)受精卵密度，保持在40-50個(gè)/ml水體，如過多，則需要分入其他的孵化池中進(jìn)行孵化。水溫25-28℃，鹽度30-32，連續(xù)微充氣，暗光或弱光孵化。24小時(shí)后，受精卵可孵化為D形幼蟲。10選幼受精卵孵化為D形幼蟲后，停止充氣，暗光或弱光對(duì)D形幼蟲進(jìn)行選幼。30分鐘后，用300目篩絹網(wǎng)收集孵化池水體中上層的D形幼蟲，放入清潔的育苗池中添加新鮮的砂濾海水進(jìn)行幼蟲培育。11幼蟲培育11.1育苗池深度：1.8-2m。11.2氣石位置和數(shù)量：氣石距水面2/1-1/3處；氣石數(shù)量為1個(gè)/m2。11.3室內(nèi)光線：暗光或弱光，光照強(qiáng)度<100lux。11.4水溫和鹽度：水溫25-28℃，鹽度30-32。11.5幼蟲密度：D形幼蟲為3-4個(gè)/ml水體，眼點(diǎn)幼蟲為1-2個(gè)ml水體。11.6幼蟲餌料及投喂量：前3天為金藻（球等鞭金藻或湛江叉鞭金藻），從第一天的1次/天逐漸增加到第3天的3次/天，投餌量（藻細(xì)胞/ml水體）從第一天的1000個(gè)逐漸增加到5000個(gè)；第4-7天投喂金藻和扁藻，投餌次數(shù)為3次/天，投餌量（藻細(xì)胞/ml水體）從8000個(gè)逐漸增加到10000個(gè)；第7天后投喂金藻、扁藻和硅藻（小新月菱形藻或威氏海鏈藻或牟氏角毛藻），投餌次數(shù)為4次/天，投餌量（藻細(xì)胞/ml水體）為12000-15000個(gè)。8-9天幼蟲出現(xiàn)眼點(diǎn)即達(dá)到眼點(diǎn)幼蟲。11.7換水、倒池和充氣：幼蟲培育期間不換水、不倒池，連續(xù)微充氣，并嚴(yán)禁使用抗生素。11.8日常觀察：每日早晚兩次抽樣鏡檢觀察幼蟲的攝食和發(fā)育情況，每2天測(cè)量和記錄幼蟲生長和存活1次。12采苗12.1采苗時(shí)間：當(dāng)眼點(diǎn)幼蟲達(dá)到30%以上，應(yīng)立即倒池并投放附著基進(jìn)行采苗。12.2附著基種類：聚乙烯網(wǎng)片或棕繩；聚乙烯簾片可反復(fù)使用、棕繩只能使用1次。12.3附著基處理：棕繩需要經(jīng)過捶打、0.05%NaOH浸泡、煮沸、再浸泡等處理后才能使用，使用前要剪短為1.5-2m長的短繩并繞成捆；新的聚乙烯網(wǎng)片需用0.05%NaOH浸泡、捶打、搓洗干凈，舊的聚乙烯網(wǎng)片無需NaOH溶液浸泡，洗刷干凈后即可使用。附著基投放期均在潔凈的淡水中浸泡1天。12.4附著基投放數(shù)量：根據(jù)眼點(diǎn)幼蟲的數(shù)量投放附著基，一般按10個(gè)/m2的數(shù)量進(jìn)行投放。12.5附著基投放位置：棕繩可以垂直懸掛于育苗池中，聚乙烯網(wǎng)片則需要用聚乙烯細(xì)繩拴著一塊墜石投放于育苗池中，附著基底部距水面1/3-1/2。13附著后管理13.1加大換水量：投放附著基后適當(dāng)加大換水量，每天換水1次，減少充氣量，每天檢查幼蟲附著變態(tài)情況。13.2增加投餌量：餌料以硅藻為主，投餌量（藻細(xì)胞/ml水體）為3萬個(gè)逐漸增加到10萬個(gè)。投放附著基約1周后，95%的幼蟲可變態(tài)為稚貝，繼續(xù)培育10天左右，稚貝的殼長≥500μm，達(dá)到出池苗規(guī)格。13出池將附有稚貝的附著基按每袋1個(gè)放入60目的聚乙烯網(wǎng)袋中出池銷售，或選擇天氣晴朗的傍晚移到風(fēng)平浪靜的海灣進(jìn)行保