鞣質(zhì)的分離和分析方法研究進(jìn)展

鞣質(zhì)的分離和分析方法研究進(jìn)展摘要：鞣質(zhì)又被稱之為單寧，鞣質(zhì)是一種存在植物內(nèi)的結(jié)構(gòu)相對復(fù)雜的化合物，肉質(zhì)可以與動物皮膚中的蛋白質(zhì)結(jié)合，形成穩(wěn)定性較強的皮革材料，因此，單寧被稱為鞣質(zhì)，鞣質(zhì)多元化的化合結(jié)構(gòu)使得鞣質(zhì)具有特殊的化學(xué)性質(zhì)，以及很強的生物活性，鞣質(zhì)是一種價值較高的天然的化合物，隨著鞣質(zhì)分離研究的不斷深入，鞣質(zhì)分離的技術(shù)開始得到人們的關(guān)注。引言近年來發(fā)現(xiàn)，植物提取物在替代抗生素方面的研究取得了良好進(jìn)展，其作用主要包括抗微生物活性、免疫增強活性和抗氧化活性等方面的提高，且負(fù)面效應(yīng)甚微。1、鞣質(zhì)的提取方法鞣質(zhì)有多種提取方法，最為常用的一種提取方法就是溫水浸泡提取法，有機溶劑溶解提取法，創(chuàng)新后的提取方法有微波鞣質(zhì)提取法，超聲波鞣質(zhì)提取法，膜技術(shù)提取法，高壓水鞣質(zhì)提取法等，這些創(chuàng)新的鞣質(zhì)提取法將傳統(tǒng)與現(xiàn)代的方法結(jié)合，最大限度提高了鞣質(zhì)的提取效率，為鞣質(zhì)在現(xiàn)實世界的應(yīng)用提供了更加廣闊的前景。2、鞣質(zhì)的分離方法當(dāng)前研究的鞣質(zhì)分離方法也有很多種，包括分級沉淀分離鞣質(zhì)法，活性炭吸附分離鞣質(zhì)法，離子交換分離鞣質(zhì)法等。2.1分級沉淀法分級沉淀分離鞣質(zhì)法是基于鞣質(zhì)中不同物質(zhì)的溶解度有所差別，使用濃度不同的溶解劑，比如說甲醇、乙醇等，可以達(dá)到分級分離鞣質(zhì)的目的，一般來說都使用乙醇作為溶質(zhì)分級沉淀的溶解劑，先使用明膠將宗鞣質(zhì)沉淀，之后在沉淀物中加入丙酮溶液，將鞣質(zhì)釋放出來，可以初步將老鸛草提取液分離出來，明膠溶液可以優(yōu)化鞣質(zhì)的沉淀分級工藝，有機溶液對于機械設(shè)備的要求也相對較低，成本也較低，但是這種方法分離的鞣質(zhì)不容易分離有害物質(zhì)，這種方法分離鞣質(zhì)的安全性還沒有完全得到認(rèn)可。2.2活性炭吸附活性炭是一種含碳的多孔物質(zhì)，活性炭的孔隙構(gòu)造高度發(fā)達(dá)，正是由于活性炭的孔隙構(gòu)造高度發(fā)達(dá)，使得活性炭可以為鞣質(zhì)分離提供大面積的平面，活性炭可以與鞣質(zhì)流體充分接觸，從而賦予活性炭更強的吸附功能，使得活性炭輕易將流體中的雜質(zhì)去除，使用活性炭可以去除鞣質(zhì)流體中的色素、樹膠等雜質(zhì)，可以一定程度上提高鞣質(zhì)提取的質(zhì)量，鞣質(zhì)的透射率顯著提高。2.3大孔樹脂吸附大孔樹脂的吸附法也有其優(yōu)勢所在，大孔樹脂吸附法可以進(jìn)一步分離和優(yōu)化鞣質(zhì)，一般非極性物質(zhì)在極性介質(zhì)(水)中容易被非極性樹脂吸附，極性物質(zhì)在非極性介質(zhì)中容易被極性樹脂吸附，具有較強極性基團的吸附劑在非極性溶劑中可以很好的吸附極性化合物。聚苯乙烯樹脂一般適用于非極性和弱極性物質(zhì)的化合物，如皂甙和類黃酮。聚丙烯酸樹脂一般有酯基或?；被?，它們能很好地吸附中等極性和極性化合物，如黃酮醇和酚類。李青等采用D141大孔樹脂對藏邊大黃鞣質(zhì)進(jìn)行分離純化。D141大孔樹脂靜態(tài)吸附鞣制質(zhì)量為27.5mg/g。大孔樹脂具有吸附選擇性好、再生簡單、解吸條件溫和、使用周期長、易形成閉路、節(jié)約成本等優(yōu)點，可廣泛應(yīng)用于物質(zhì)的分離純化。2.4膜分離技術(shù)膜分離技術(shù)是選擇性地透過膜為分離介質(zhì),當(dāng)有一定的推力(如壓力差、濃度差和電位差)兩岸的膜,原料端組件根據(jù)分子大小選擇性地透過膜,以達(dá)到分離純化的目的。該方法具有效率高、幾乎無相變、常溫操作、工藝簡單、操作方便、投資低等優(yōu)點。它已成為一種新型的綠色節(jié)能的澄清、分離、濃縮技術(shù)。杜云平等采用膜分離技術(shù)對板栗苞片單寧的純化工藝條件進(jìn)行了優(yōu)化。結(jié)果表明，在最佳工藝條件下，緩凝液中單寧含量可達(dá)64%左右，濁度在0以下。8濁度單元(NTU)。該方法具有操作簡單、效率高、節(jié)能環(huán)保等優(yōu)點，為進(jìn)一步開發(fā)單寧生產(chǎn)工藝提供了技術(shù)參考。2.5離子交換技術(shù)離子交換技術(shù)是基于某些溶質(zhì)解出陽離子或陰離子的特點,使用離子交換劑和不同離子約束力的強度差異,暫時溶質(zhì)交換離子交換劑,然后溶質(zhì)離子與一個合適的洗脫液洗脫,分離和富集溶質(zhì)的解決方案或凈化技術(shù)。為了獲得高純度的多肽組分，先后采用離子交換層析和凝膠過濾純化，采用水酶法提取菜籽粗肽。經(jīng)離子交換層析純化后，糖和單寧含量明顯下降。2.6凝膠柱色譜凝膠柱色譜法是一種用多孔凝膠填料作為固定相，按分子大小將樣品的各組分分離的液相色譜法。sephadexhl-20是最常用的單寧分離凝膠。主要用于分離不同聚合度的單寧，分離受各單寧的吸附影響，不受凝膠過濾的影響。原花青素可以用SephadexLH-20柱層析法分離，先用乙醇洗脫非鞣質(zhì)成分，再用丙酮-水或乙醇-水洗脫原花青素。2.7液滴逆流色譜法和高速逆流色譜法近年來，液滴逆流色譜(DCCC)已被用來替代液相色譜法分離多酚類物質(zhì)。優(yōu)點是操作條件溫和，樣品負(fù)荷高，分離能力強，不需要固體支撐，避免了因吸附各種物質(zhì)而造成單寧的損失。高速逆流色譜(HSCCC)是在DCCC的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的，彌補了DCCC發(fā)展時間長的缺點。采用HSCCC分離花青素。溶劑體系為叔丁基甲基醚/正丁醇/乙腈/水(2∶2∶1∶5)，以三氟乙酸為溶劑。2.8高效液相色譜法高效液相色譜法(HPLC)已被廣泛應(yīng)用于多酚類物質(zhì)的分離。正相高效液相色譜法可以根據(jù)聚合度對原花青素進(jìn)行分離，最高可達(dá)十聚體。用反相高效液相色譜法可以分離黃烷-3-醇類單體和低聚物，特別是二聚體和三聚體，但洗脫的順序與聚合度無關(guān)。3、結(jié)語近年來，我國對單寧的研究十分活躍，各種分離和分析單寧的新方法不斷涌現(xiàn)，為單寧的研究提供了新的思路和方法。但目前單寧的提取、分離和含量測定方法多集中在總單寧上，對某一類單寧較少，希望在今后的研究中更具針對性。我國對單寧的研究還處于起步階段，研究水平較低。參考文獻(xiàn)：[1]孟凡恒,李佳佳,董興童,等.仙鶴草中鞣質(zhì)類成分的提取分離鑒定實驗[J].山東化工,2019(13).[2]楊志剛,鄭文惠,張凱雪,等.沙棘葉中鞣質(zhì)類成分及其抗炎和抗肥胖活性研究[J].中草藥,2019,50(12).[3]胡夢.百藥煎傳統(tǒng)炮制過程中微生物的分離、鑒定及降解鞣質(zhì)最佳菌種組合的篩選[D].2019.[4]李博,彭靜,郭立瑋,等.基于Her