油菜籽中多農藥殘留成分檢測技術中期總結報告

油菜籽多農藥殘留成分檢測技術

中期總結報告匯報的主要內容●資料分析●油菜籽多農藥殘留GC-MS聯(lián)用檢測技術研究●下一步研究計劃資料分析一、油菜及前茬使用的主要農藥

1.油菜主要病蟲草害，及防治所施用的主要農藥

2.油菜及前茬主要農藥的殘效期和最高限量二、我國油菜籽中可能存在的農藥殘留油菜及前茬使用的主要農藥

根據(jù)《油菜籽病蟲草害防治》一書和對油料所試驗農場的調查訪問，并在查閱大量相關資料的基礎上：●油菜主要病蟲草害及防治所施用的主要農藥歸納如表1●油菜前茬作物（水稻、花生、大豆）的施藥情況歸納如表2●油菜及前茬主要農藥的殘效期和最高限量如表3表1、油菜主要病蟲草害及防治所施用的主要農藥

類別主要的病蟲草害施用的主要農藥病害油菜病毒病油菜菌核病油菜霜霉病瑞毒霉,退菌特,甲基托布津,菌核凈,代森鋅,異菌尿,腐霉利蟲害油菜蚜蟲黃曲條跳甲菜青蟲樂果,水胺硫磷,久效磷,克百威,抗蚜威,敵敵畏,氯氰菊酯,敵百蟲甲胺磷草害看麥糧牛繁僂早熟樂豬秧秧卡草胺甲草胺（拉索）異丙甲草胺（都耳）吡氟乙草靈表2、油菜田前茬作物（水稻、大豆，花生）施藥情況農藥種類農藥名稱

殺蟲劑殺蟲雙、殺蟲單、螟死凈、敵敵畏、氯氰菊酯、甲胺磷、克百威、乙酰甲胺磷殺菌劑百菌清、多菌靈、甲基托布津、退菌特除草劑拉索、都耳、野老、佛樂靈表3、油菜及前茬主要農藥的殘效期和最高限量種類農藥名稱

殘效期（天）最高限量MRL（mg/kg）

殺蟲劑樂果7-14/水胺硫磷7-14①稻谷1.0,②在無公害蔬菜中不得檢出久效磷7—14①棉籽中0.1,②在無公害蔬菜中不得檢出克百威30-60FAO/WHO規(guī)定油料籽0.1抗蚜威7—10①FAO/WHO規(guī)定0.2,②中國（糧食包括大豆）0.05敵敵畏易分解,殘效短/氯氰菊酯殘效期較長1甲胺磷殘效期較長/水氨硫磷7-14/氧化樂果7-142ppm(在作物中

殺菌劑

菌核凈7-14/甲基托布津7-14/

除草劑

異丙甲草胺30-35美國花生仁0.5

卡草胺60

法國菜籽油及油菜籽0.05

甲草胺14棉籽0.05、大豆0.2

我國油菜籽中可能存在的農藥殘留

●根據(jù)資料顯示，我國油菜農藥防治主要是菜青蟲、蚜蟲及草害，而油菜菌核病、病毒病、霜霉病等一般不使用農藥防治●由于高效低毒殘效期短的農藥的推廣使用，前茬作物（水稻、大豆、花生等）所施用的農藥有可能在油菜籽中殘留的是敵敵畏、呋喃丹、乙酰甲胺磷●我國油菜所使用農藥且可能在油菜籽中殘留的主要是樂果、呋喃丹、卡草胺、甲胺磷、敵百蟲、氯氰菊酯、異丙甲草胺。●因此，我國油菜籽中可能存在的殘留農藥主要有敵百蟲、異菌脲、異丙甲草胺、久效磷、氯氰菊酯、甲胺磷、樂果油菜籽多農藥殘留GC-MS聯(lián)用檢測技術研究●提取劑、萃取劑和凈化柱的篩選

●樣品粉碎粒度研究●提取方式的研究●液樣比的研究●油菜籽多農藥殘留GC-MS聯(lián)用檢測技術研究●由于卡草胺、克百威屬于氨基甲酸脂類農藥，如采用氣質聯(lián)用方法檢測，必須經過酯化，而不能直接采用氣質聯(lián)用方法檢測，故不在本研究之列●本實驗研究的主要對象是敵百蟲、異菌脲、異丙甲草胺、久效磷、氯氰菊酯、甲胺磷、樂果（一）提取劑、萃取劑和凈化柱的篩選●實驗設計●實驗結果1、

實驗設計●實驗采用L9(34)正交設計●通過實驗旨在篩選出適宜的提取劑、萃取劑和凈化柱●實驗因子如表4，處理組合如表5●不同處理的效果通過加標回收和計算回收表示本實驗所加標樣1.0mg/kg樂果●實驗流程見圖1

表4、實驗因子代號實驗因子A1丙酮A2乙腈A3甲醇B11：4二氯甲烷-正已烷B2正已烷B31：1二氯甲烷-正已烷C1C18柱C2Florsil柱C3PSA柱表5、實驗處理組合

代號處理組合1A1B1C12A1B2C23A1B3C34A2B1C25A2B2C36A2B3C17A3B1C38A3B2C19A3B3C2圖1、農藥殘留成分檢測操作流程

稱取油菜粉碎樣10.×××于100mL具塞試管加入50.0mL提取劑(A1、A2或A3)加入40.0mL5%Na2SO4加入標樣高速勻漿機10000r/min勻漿2min加入15-20克NaCl，用力振搖1min，靜置10min用濾紙過濾至250mL分液漏斗中加入50.0mL萃取劑(B1、B2或B3)，用力振搖2min，靜置分層，將水溶液層（下層）放入另一250mL分液漏斗中，水層再加入25.0mL萃取劑，振搖、靜置分層，合并萃取劑層將萃取劑層通過預先加有0.2克活性碳和30克左右無水Na2SO4的漏斗濾入250mL圓底燒瓶中在旋轉濃縮儀中0.8-0.9Mpa，40℃以下濃縮近干凈化柱先用5mL丙酮淋洗，濃縮物用丙酮溶解并轉移至凈化柱（C1、C2或C3）中，用10mL具塞刻度試管接收，并定容至10mL

上機檢測2、實驗結果

●提取劑的選擇●萃取體系的選擇●凈化柱的選擇●實驗不同處理組合對樂果加標回收率的影響見表61、提取劑的選擇●不同提取劑對樂果加標回收率的影響較大●以丙酮作提取劑，提取效率很高，但提取的雜質也很多●以甲醇作提取劑，提取的雜質少，提取效率也低●以乙腈作提取劑，提取效率較高，且提取的雜質也較少?！鴪D2、圖3、圖4和圖5也進一步顯示了丙酮、乙腈和甲醇三種提取劑提取效果的差異。表6、不同處理對加標回收率的影響

代號處理組合加標回收率（%）因子代號加標回收率（%）1A1B1C193.8A190.12A1B2C287.2A291.03A1B3C389.3A352.14A2B1C291.3B178.25A2B2C394.8B277.36A2B3C186.9B377.87A3B1C349.4C176.98A3B2C149.9C278.59A3B3C257.1C377.8圖2、丙酮、乙腈和甲醇提取農殘的差異

圖3、丙酮和乙腈提取農殘的差異

圖4、丙酮和甲醇提取農殘的差異

圖5、乙腈和甲醇提取農殘的差異

乙腈甲醇2、萃取體系的選擇

在提取農殘的過程中，樣品中的水份、油份等雜質也跟著提取了出來，選擇適當?shù)妮腿┻M行液液分化，可以去除提取液中絕大部份水份和部份油份。實驗比較了正已烷、1：4二氯甲烷-正已烷、1：1二氯甲烷-正已烷3種萃取劑，結果發(fā)現(xiàn)：●當單純用正已烷做萃取劑時出現(xiàn)渾濁不分層現(xiàn)象●用1：1二氯甲烷-正已烷做萃取劑時，容易發(fā)生乳化現(xiàn)象●用1：4二氯甲烷-正已烷作萃取劑，易于分層，萃取層澄清，色素等其他的雜質含量較少，且加標回收率也較好●幾種萃取劑的萃取效果見表7表7、不同萃取劑萃取效果比較

萃取劑加標回收率（%）1:4二氯甲烷-正已烷78.2正已烷77.31:1二氯甲烷-正已烷77.83、凈化柱的選擇

本實驗采用C18柱、FlorisiL柱和PSA柱進行比較，實驗結果如表8，F(xiàn)lorisiL柱凈化效果較好。

凈化柱種類加標回收率（%）C18柱76.9FlorisiL柱78.5

PSA柱77.8表8、不同的凈化柱加回收率比較（二）樣品粉碎粒度研究實驗設3個處理：1、油菜籽粉碎過20目篩

2、油菜籽粉碎過40目篩

3、油菜籽粉碎過60目篩實驗重復3次，不同處理平均值見表9結果表明，40目樣品可以滿足農殘檢測要求。樣品粒度20目40目60目甲胺磷（mg/kg）1.21.61.5

表9、不同樣品粒度加回收率比較（三）提取方式研究實驗設3個處理：1、以每分鐘100000轉的速度高速勻漿得取2min2、超聲波提取5min3、以每分鐘60次的速度往復震蕩提取1h實驗重復3次，不同處理平均值見表10結果表明，高速勻漿提取效果較好提取方式甲胺磷（mg/kg）高速勻漿2min1.7超聲波提取5min1.5振蕩提取1h1.0

表10、不同提取方式加回收率比較（四）液樣比研究

實驗以50ml乙腈做提取劑，設三個處理：

1、稱樣量10g，即液樣比5：12、稱樣量20g，即液樣比5：23、稱樣量5g，即液樣比10：1

實驗重復3次，不同處理平均值見表10

結果表明，液樣比5：1效果較好液樣比（V/m）10：15：15：2甲胺磷（mg/kg）1.51.61.3表11、不同液樣比加回收率