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ICS65.020.3054CCSB4354西 藏 自 治 區(qū) 地 方 標(biāo) 準(zhǔn)DB54/T0409—2024羊布病防控技術(shù)規(guī)程2024-09-15發(fā)布 2024-10-15實(shí)施西藏自治區(qū)市場(chǎng)監(jiān)督管理局??發(fā)布DB54/T0409DB54/T0409—2024PAGE\*ROMANPAGE\*ROMANII目 次前言 II范圍 1規(guī)范性引用文件 1術(shù)語(yǔ)和定義 1診斷 1疫情的報(bào)告 3疫情的確認(rèn)和疫點(diǎn)的處置 3免疫 3監(jiān)測(cè) 4檢疫 4管理 5防控措施 6附錄A(資料性) 虎紅平板凝集試驗(yàn)(RBT) 7附錄B(資料性) 試管凝集試驗(yàn)(SAT) 8附錄C(資料性) 防疫情況 10前 言本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則 第1部分:標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則編寫(xiě)》規(guī)定起草編寫(xiě)。請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。本文件由西藏自治區(qū)農(nóng)業(yè)農(nóng)村標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)提出并歸口。本文件起草單位:西藏自治區(qū)農(nóng)牧科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所。東。DB54/T0409DB54/T0409—2024PAGEPAGE10羊布病防控技術(shù)規(guī)程范圍本文件規(guī)定藏羊布魯氏菌病的診斷、疫情報(bào)告、疫情處置、預(yù)防與控制措施。本文件適用于藏羊布魯氏菌病的預(yù)防和控制。規(guī)范性引用文件(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T18646 動(dòng)物布魯氏菌病診斷技術(shù)WS269 布魯氏菌病診斷術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。3.1羊布魯氏桿菌病布魯氏菌引起的常見(jiàn)細(xì)菌性人畜共患病。3.2防控羊布病的預(yù)防、檢疫和其他必要處理措施。3.3疫點(diǎn)發(fā)生疫病的自然單位(圈、舍、場(chǎng)、村),在一定時(shí)期內(nèi)成為疫源地。診斷流行特點(diǎn)14d~180d母羊的發(fā)病率尤其高。臨床癥狀3或第4產(chǎn)。而患病公羊的發(fā)病癥狀一般是睪丸出現(xiàn)炎癥,睪丸部位會(huì)發(fā)生硬化。病理變化2-3有肺炎病灶。公羊生殖器官精囊內(nèi)可能有出血點(diǎn)和壞死灶,睪丸和附睪可能有炎性壞死灶和化膿灶。實(shí)驗(yàn)室診斷細(xì)菌學(xué)診斷血清學(xué)診斷虎紅平板凝集試驗(yàn)(RBT)在玻片上加30ul被檢血清,然后加入30ul虎紅平板凝集抗原,搖勻或者用牙簽混均勻,室溫下3-5min內(nèi)觀察結(jié)果。具體操作參照附錄A執(zhí)行。試管凝集試驗(yàn)(SAT)采集和分離受檢血清,血清稀釋及檢測(cè)步驟參照附錄B執(zhí)行。結(jié)果判定疑似病例非免疫羊同時(shí)符合4.1、4.2、4.3且符合4.4.2.1陽(yáng)性者。確診病例疑似病例且符合4.4任何一項(xiàng)陽(yáng)性者。疑似病例,在不能獲得病原學(xué)檢測(cè)樣本或不具備病原學(xué)檢測(cè)條件的情況下,符合陽(yáng)性者。疫情的報(bào)告疫情的確認(rèn)和疫點(diǎn)的處置縣(市)及以上動(dòng)物防疫監(jiān)督機(jī)構(gòu)按照《中華人民共和國(guó)動(dòng)物防疫法》和《重大動(dòng)物疫情應(yīng)急條例》執(zhí)行。免疫免疫對(duì)象3月齡以上的臨床健康羊(不包括種羊、懷孕羊及28d內(nèi)不屠宰上市的育肥羊)。免疫范圍以縣(區(qū))為單位,羊布病虎紅平板凝集試驗(yàn)抗體群體陽(yáng)性率不小于10%或個(gè)體陽(yáng)性率不小于2%,進(jìn)行普遍免疫。免疫程序應(yīng)免縣(區(qū))連續(xù)免疫3年,第一年所有應(yīng)免羊全部免疫,第二年和第三年只免當(dāng)年新生3月~6月齡羔羊,第四年停止免疫,第五年實(shí)施免疫效果評(píng)估,決定是否實(shí)現(xiàn)疫苗退出。免疫時(shí)間當(dāng)年的羔羊,3月齡以上即可免疫;規(guī)模羊場(chǎng)在母羊產(chǎn)后1個(gè)月或配種前30d進(jìn)行免疫;散養(yǎng)戶一般在每年4月~8月份配種前或轉(zhuǎn)至夏牧場(chǎng)前進(jìn)行集中免疫。免疫注意事項(xiàng)做好個(gè)人防護(hù)工作,避免人直接接觸疫苗,用過(guò)的疫苗、容器及其沾染器具,應(yīng)進(jìn)行消毒處理。疫苗免疫前后3d,應(yīng)避免使用抗生素、含抗菌素添加飼料或發(fā)酵飼料。監(jiān)測(cè)監(jiān)測(cè)方法臨床觀察、實(shí)驗(yàn)室診斷及流行病學(xué)調(diào)查。監(jiān)測(cè)種類及監(jiān)測(cè)結(jié)果的處理免疫地區(qū)免疫后18個(gè)月進(jìn)行監(jiān)測(cè),虎紅平板凝集試驗(yàn)檢測(cè)陰性者列為假定健康羊群,陽(yáng)性者撲殺。非免疫地區(qū)散養(yǎng)戶、規(guī)模場(chǎng)每年抽檢1次;種羊場(chǎng)每年抽檢2次。緊急免疫的監(jiān)測(cè)在疫點(diǎn)實(shí)施處置措施15d~30d后,對(duì)疫點(diǎn)內(nèi)3月齡以上羊進(jìn)行監(jiān)測(cè)。采樣數(shù)按存欄數(shù)1%~5%隨機(jī)抽樣,樣本數(shù)不低于30份。檢疫產(chǎn)地檢疫實(shí)施羊布病免疫的縣(區(qū))出具的產(chǎn)地檢疫證明要標(biāo)注布病免疫情況,若無(wú)標(biāo)注則按檢測(cè)陽(yáng)性羊處理。屠宰檢疫對(duì)要進(jìn)入屠宰場(chǎng)的羊按照1%~5%比例進(jìn)行抽檢,虎紅平板凝集試驗(yàn)或布病快速診斷試紙條抗體檢測(cè)陽(yáng)性者禁止進(jìn)入屠宰場(chǎng)。異地調(diào)運(yùn)檢疫異地調(diào)運(yùn)要標(biāo)注布病免疫情況,若未標(biāo)注,按照1%~5%比例進(jìn)行抽檢,虎紅平板凝集試驗(yàn)或快速診斷試紙條抗體檢測(cè)陽(yáng)性羊禁止進(jìn)入隔離場(chǎng),檢測(cè)陰性羊進(jìn)入隔離場(chǎng)隔離30d,復(fù)檢合格后方可同群飼養(yǎng)。管理生產(chǎn)環(huán)節(jié)防疫監(jiān)督機(jī)構(gòu)應(yīng)加強(qiáng)日常監(jiān)督檢查。流通環(huán)節(jié)各地(市)動(dòng)物防疫監(jiān)督機(jī)構(gòu)在活畜交易、屠宰、公路運(yùn)輸?shù)攘魍ōh(huán)節(jié)中,對(duì)出具的檢疫證明進(jìn)照GB16548-2006進(jìn)行無(wú)害化處理。防護(hù)環(huán)節(jié)實(shí)施羔羊接產(chǎn)、羊只保定、免疫、疫點(diǎn)處置、樣品采集等相關(guān)工作,要穿戴好一次性防護(hù)服、上述工作完成后,要用消毒液浸泡用具,洗手,焚燒或深埋處理一次性防護(hù)服、口罩、帽子、手套等。所有使用的廢棄物要裝入塑料袋內(nèi)在指定地點(diǎn)進(jìn)行無(wú)害化處理。實(shí)施羊布病防控相關(guān)工作人員可選擇藥物預(yù)防,連續(xù)用藥3d~7d,及時(shí)到醫(yī)院進(jìn)行確診和治療。衛(wèi)生環(huán)節(jié)羊舍應(yīng)遠(yuǎn)離居民區(qū)和人用水源。個(gè)人飼養(yǎng)羊應(yīng)提倡圈養(yǎng),無(wú)論是成年畜還是幼畜,都不能進(jìn)入公共場(chǎng)所。飼喂家畜使用專門(mén)的盆和碗,小孩不要和幼畜玩耍。切忌食用生的或半生羊肉,切割生、熟羊肉使用的刀具及砧板要分開(kāi),不能混用。加強(qiáng)水源管理,定期消毒,防止飲水污染。防控措施建立健全規(guī)章制度,飼養(yǎng)場(chǎng)內(nèi)工作人員及使用工具相對(duì)固定,場(chǎng)內(nèi)不飼養(yǎng)牛、豬、犬。堅(jiān)持自繁自養(yǎng)、全進(jìn)全出飼養(yǎng)方式,不得從疫區(qū)調(diào)入羊,控制人員、車輛、相關(guān)物品的出入。養(yǎng)殖專業(yè)戶應(yīng)建立產(chǎn)羔室,并配備防護(hù)服、消毒液、肥皂、毛巾等用品。人工授精確保凍精顆粒不能污染,并做好器具消毒。加強(qiáng)飼養(yǎng)管理及衛(wèi)生消毒等基礎(chǔ)防疫工作。附錄 A(資料性)虎紅平板凝集試驗(yàn)(RBT)試劑和材料ml清。操作方法在玻片上加30ul被檢血清,然后加入30ul虎紅平板凝集抗原,搖勻或者用牙簽混均勻,室溫下3-5min內(nèi)觀察結(jié)果。判斷結(jié)果判定凝結(jié)程度(—對(duì)照無(wú)自凝(—)現(xiàn)象時(shí),試驗(yàn)成立,按照平板凝集反應(yīng)可判定結(jié)果。a)b)被檢血清出現(xiàn)“+”凝集現(xiàn)象時(shí),判為可疑;c)被檢血清出現(xiàn)“—”時(shí),判定為陰性??梢山Y(jié)果的處理試驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)可疑的羊,30d后采血重驗(yàn),如果仍為可疑,該羊判為陽(yáng)性。附錄 B(資料性)試管凝集試驗(yàn)(SAT)器材玻璃試管、試管架、移液器、滅菌液器吸頭及溫箱37℃士1℃。試劑商品化布魯氏菌試管凝集試驗(yàn)抗原、布魯氏菌標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性血清和布魯氏菌標(biāo)準(zhǔn)陰性血清、稀釋液為含0.5%石炭酸的生理鹽水和(或)含0.5%石炭酸的10%氯化鈉溶液(用于檢驗(yàn)羊血清時(shí)稀釋血清和抗原)。操作方法按常規(guī)方法采集和分離受檢血清。受檢血清的稀釋:41920μL2~4500μL80μL,1500μL244L;141:12.5、1:25、1:501:100;將按說(shuō)明書(shū)要求稀釋的抗原液500μL分別加入已稀釋好的各管血清中,并振搖均勻,血清稀釋度為1:25。每次試驗(yàn)均應(yīng)設(shè)陽(yáng)性血清、陰性血清和抗原對(duì)照,即:陰性血清對(duì)照:凍干陰性血清按說(shuō)明書(shū)稀釋到規(guī)定容量后,對(duì)照試驗(yàn)中稀釋和加抗原的方法與受檢血清相同;陽(yáng)性血清對(duì)照:凍干陽(yáng)性血清按說(shuō)明書(shū)稀釋到規(guī)定容量后,對(duì)照試驗(yàn)中稀釋和加抗原的方法與受檢血清相同;500μL將加樣后的試管置溫箱37℃±1℃孵育18h~24h,取出檢查并記錄結(jié)果。結(jié)果判定及處理凝集反應(yīng)程度凝集反應(yīng)程度應(yīng)根據(jù)參照比濁管(制備方法見(jiàn)附錄A)++++菌體完全凝集,100%100%清亮;75%清亮;50%清亮;25%清亮;一無(wú)凝集物,液體均勻混濁。試驗(yàn)成立體條件及結(jié)果判定當(dāng)陽(yáng)性對(duì)照血清出現(xiàn)完全凝集(++++),陰性對(duì)照血清無(wú)凝集(一),抗原對(duì)照無(wú)自凝
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