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第2章細(xì)胞工程第2節(jié)動物細(xì)胞工程一動物細(xì)胞培養(yǎng)課標(biāo)要點(diǎn)學(xué)法指導(dǎo)1.闡明動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件及過程2.說出干細(xì)胞的培養(yǎng)種類及特點(diǎn)3.舉例說出干細(xì)胞的應(yīng)用1.結(jié)合教材描述和插圖理解動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件(科學(xué)思維)2.構(gòu)建動物細(xì)胞培養(yǎng)的流程圖,區(qū)分原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)(科學(xué)思維)3.結(jié)合教材插圖理解干細(xì)胞的種類、特點(diǎn)及應(yīng)用(生命觀念、科學(xué)思維、社會責(zé)任)知識導(dǎo)圖
課前·新知導(dǎo)學(xué)
動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件1.動物細(xì)胞培養(yǎng)的概念從動物體中取出相關(guān)的組織,將它分散成____________,然后在適宜的培養(yǎng)條件下,讓這些細(xì)胞________和________的技術(shù)。單個細(xì)胞生長增殖2.動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件(1)營養(yǎng):動物細(xì)胞培養(yǎng)所需的營養(yǎng)有_________、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素等,將細(xì)胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)按種類和所需量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基,稱為____________。通常需要在培養(yǎng)基中加入________等一些天然成分。(2)無菌、無毒的環(huán)境:對________和所有__________進(jìn)行無菌處理以及在__________下進(jìn)行操作。培養(yǎng)液需要__________,以便清除代謝物,防止細(xì)胞代謝物積累對細(xì)胞自身造成危害。糖類合成培養(yǎng)基血清培養(yǎng)液培養(yǎng)用具無菌環(huán)境定期更換(3)溫度、pH和滲透壓①適宜的溫度條件:________±0.5℃。②適宜的pH條件:__________。③CO2的主要作用是維持______________。36.5℃
7.2~7.4
培養(yǎng)液的pH
動物細(xì)胞培養(yǎng)液中為什么要加動物血清?_____________________________________?!敬鸢浮垦逯泻械鞍踪|(zhì)、氨基酸、葡萄糖、激素等物質(zhì),而且還含有多種未知的促生長因子,能促進(jìn)細(xì)胞的生長、增殖
一般來說,動物細(xì)胞體外培養(yǎng)需要滿足以下哪些條件?
(
)①無毒的環(huán)境②無菌的環(huán)境③合成培養(yǎng)基需加血清④溫度與動物體溫相近⑤需要O2,不需要CO2
⑥需要O2和CO2A.①②③④⑤⑥
B.①②③④C.①③④⑤⑥ D.①②③④⑥【答案】D【解析】動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件有適宜的營養(yǎng)、無菌和無毒的環(huán)境、溫度、pH和滲透壓、氣體環(huán)境等。其中合成培養(yǎng)基中通常要加入血清,溫度條件為36.5℃±0.5℃,所需的氣體有O2和CO2,CO2的主要作用是調(diào)節(jié)培養(yǎng)液中的pH。
動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程1.原理____________。2.過程取動物組織塊→剪碎→用_________________________處理,將組織分散成___________→制成___________→放入培養(yǎng)瓶中在__________進(jìn)行培養(yǎng)。細(xì)胞增殖胰蛋白酶或膠原蛋白酶單個細(xì)胞細(xì)胞懸液適宜環(huán)境3.細(xì)胞貼壁和接觸抑制對動物細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)時,大多數(shù)細(xì)胞往往貼附在培養(yǎng)瓶的________上才能生長增殖,這種現(xiàn)象稱為__________。當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到________________時,細(xì)胞就會停止分裂增殖,這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的__________。4.原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)動物組織經(jīng)處理后的初次培養(yǎng)稱為__________,分瓶后的細(xì)胞培養(yǎng)稱為__________。瓶壁細(xì)胞貼壁表面相互接觸接觸抑制原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)動物細(xì)胞培養(yǎng)前為什么要將動物組織分散成單個細(xì)胞?_____________________________________?!敬鸢浮糠稚⒑蠹?xì)胞能與培養(yǎng)液充分接觸,更易進(jìn)行營養(yǎng)物質(zhì)的吸收和代謝廢物的排出
下列動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中屬于原代培養(yǎng)的是 (
)A.用胰蛋白酶使組織分散成單個細(xì)胞的過程B.從機(jī)體取得細(xì)胞后立即進(jìn)行培養(yǎng)的過程C.出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象后取下的細(xì)胞的培養(yǎng)過程D.哺乳動物細(xì)胞在培養(yǎng)基中的貼壁生長過程【答案】B【解析】用胰蛋白酶使組織分散成單個細(xì)胞的過程,可以是原代培養(yǎng),也可以是傳代培養(yǎng),A錯誤;原代培養(yǎng)是指從動物機(jī)體組織取得細(xì)胞后立即培養(yǎng),直到細(xì)胞出現(xiàn)接觸抑制為止,從機(jī)體取得細(xì)胞后立即進(jìn)行培養(yǎng)過程是原代培養(yǎng),B正確;出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象后,接去下的細(xì)胞的培養(yǎng)過程是傳代培養(yǎng),C錯誤;動物細(xì)胞具有貼壁生長的特點(diǎn),這與原代培養(yǎng)的定義無關(guān),D錯誤。
干細(xì)胞培養(yǎng)及其應(yīng)用1.干細(xì)胞的種類_____________和____________等。2.胚胎干細(xì)胞存在于____________中,具有________為成年動物體內(nèi)的任何一種類型的細(xì)胞,并進(jìn)一步形成機(jī)體的所有______________甚至個體的潛能。胚胎干細(xì)胞成體干細(xì)胞早期胚胎分化組織和器官3.成體干細(xì)胞(1)概念:成體______________內(nèi)的干細(xì)胞。(2)種類:骨髓中的______________、神經(jīng)系統(tǒng)中的_____________和睪丸中的________________等。(3)特點(diǎn):成體干細(xì)胞具有______________,只能分化成特定的______________,不具有__________________的能力。組織或器官造血干細(xì)胞神經(jīng)干細(xì)胞精原干細(xì)胞組織特異性細(xì)胞或組織發(fā)育成完整個體4.誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(1)概念:誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(簡稱iPS細(xì)胞)是通過體外誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞,獲得的類似______________的一類細(xì)胞。(2)應(yīng)用前景:誘導(dǎo)過程無需破壞胚胎,不涉及倫理問題;iPS細(xì)胞可以來源于病人自身的體細(xì)胞,將它移植回病人體內(nèi)后,理論上可以避免___________反應(yīng)。因此應(yīng)用前景優(yōu)于胚胎干細(xì)胞。胚胎干細(xì)胞免疫排斥5.應(yīng)用(1)將正常的______________移植到病人體內(nèi),恢復(fù)病人的______和免疫功能,用來治療白血病等疾病。(2)______________在治療神經(jīng)組織損傷和神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病方面(如帕金森病、阿爾茨海默病等)有重要的應(yīng)用價值。(3)用____________治療阿爾茨海默病、心血管疾病等領(lǐng)域的研究也取得了新進(jìn)展。造血干細(xì)胞造血神經(jīng)干細(xì)胞iPS細(xì)胞神經(jīng)干細(xì)胞為什么不具有發(fā)育成完整個體的能力?_____________________________________?!敬鸢浮可窠?jīng)干細(xì)胞是一種專能干細(xì)胞,已經(jīng)有了很高程度的分化,而細(xì)胞分化具有不可逆性,故神經(jīng)干細(xì)胞不具有發(fā)育成完整個體的能力判斷下列敘述的正誤。(1)干細(xì)胞存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中。
(
)(2)根據(jù)干細(xì)胞的分化程度可將干細(xì)胞分為全能干細(xì)胞、多能干細(xì)胞和造血干細(xì)胞。
(
)(3)動物胚胎的每一個細(xì)胞都是胚胎干細(xì)胞。 (
)【答案】(1)√
(2)×
(3)×
(4)胚胎干細(xì)胞具有發(fā)育的全能性,能分化為成年動物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。
(
)(5)成體干細(xì)胞可以分化成特定的組織或器官,也具有發(fā)育成完整個體的能力。
(
)【答案】(4)√
(5)×課堂·重難探究動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件[知識歸納][對點(diǎn)精練]1.(2023·廣東珠海期末)研究小組為測定某藥物對體外細(xì)胞培養(yǎng)的毒性,用不同濃度的藥物溶液對動物肝細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。下列有關(guān)該實(shí)驗的敘述中正確的是
(
)A.用胰蛋白酶或胃蛋白酶處理肝組織來制備肝細(xì)胞懸液B.恒溫培養(yǎng)箱中的CO2濃度維持在5%左右可促進(jìn)細(xì)胞呼吸C.培養(yǎng)液中添加多種抗生素以保證細(xì)胞培養(yǎng)所需的無毒環(huán)境D.可以通過檢測各組細(xì)胞的存活率來反映該藥物的毒性【答案】D【解析】在利用肝組織塊制備肝細(xì)胞懸液時,常用胰蛋白酶處理,不能使用胃蛋白酶,因為胃蛋白酶需要在強(qiáng)酸環(huán)境下才能起作用,但這樣的環(huán)境不適于細(xì)胞生存,A錯誤;恒溫培養(yǎng)箱中的CO2濃度維持在5%左右,以維持培養(yǎng)液的pH,B錯誤;抗生素是用來殺菌的,不是殺毒的,C錯誤;可以通過檢測各組細(xì)胞的存活率來反映該藥物的毒性,D正確。2.(2023·廣東肇慶期末)利用動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可獲得大量細(xì)胞。下列有關(guān)敘述錯誤的是
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)A.動物細(xì)胞培養(yǎng)包括原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)B.培養(yǎng)過程需在含95%O2和5%CO2的混合氣體環(huán)境中進(jìn)行C.培養(yǎng)基需定期更換,防止細(xì)胞代謝物積累對細(xì)胞自身造成傷害D.操作過程需在無菌、無毒的環(huán)境中進(jìn)行【答案】B【解析】動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程:取動物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中(原代培養(yǎng))→放入CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液(傳代培養(yǎng))→放入CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng),故動物細(xì)胞培養(yǎng)包括原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng),A正確;培養(yǎng)過程需在含95%空氣和5%CO2的混合氣體環(huán)境中進(jìn)行,B錯誤;動物細(xì)胞培養(yǎng)時,除保證環(huán)境是無菌、無毒外,還必須定期更換培養(yǎng)液,以防止細(xì)胞代謝物積累對細(xì)胞自身造成的傷害,C、D正確。[知識歸納]1.動物細(xì)胞培養(yǎng)的原理細(xì)胞增殖。2.動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程(1)動物的組織塊大部分取自動物胚胎或幼齡動物的器官或組織,這是因為這些器官或組織中的細(xì)胞生命力旺盛,分裂能力強(qiáng)。(2)用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理組織塊,使細(xì)胞分散開來,不能用胃蛋白酶,主要是因為pH不合適。使用胰蛋白酶時,要控制好作用時間,因為胰蛋白酶不僅能消化細(xì)胞間的蛋白質(zhì),長時間作用還會分解細(xì)胞膜蛋白等,對細(xì)胞造成損傷。(3)動物細(xì)胞的整個培養(yǎng)過程中多次用到胰蛋白酶或膠原蛋白酶,第一次使用的目的是使組織細(xì)胞分散開;傳代培養(yǎng)時使用的目的是使細(xì)胞從瓶壁上脫離下來,便于分瓶后繼續(xù)培養(yǎng)。(4)一般而言,動物細(xì)胞培養(yǎng)不需要經(jīng)過脫分化過程。要想使培養(yǎng)的動物細(xì)胞定向分化,通常采用定向誘導(dǎo)動物干細(xì)胞的方法,使其分化成所需要的組織或器官。1.多細(xì)胞動物和人體的細(xì)胞都生活在內(nèi)環(huán)境中。體外進(jìn)行的動物細(xì)胞培養(yǎng)需要什么樣的條件?提示:①充足的營養(yǎng),②無菌、無毒的環(huán)境,③適宜的溫度、pH和滲透壓,④氣體環(huán)境。2.胰蛋白酶的作用是什么呢?由此可說明細(xì)胞間的物質(zhì)是什么成分?提示:用胰蛋白酶分散細(xì)胞,說明細(xì)胞間的物質(zhì)主要是蛋白質(zhì)。3.培養(yǎng)過程中出現(xiàn)了什么現(xiàn)象?提示:動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中有兩種特殊現(xiàn)象:貼壁生長和接觸抑制。貼壁生長即懸液中分散的細(xì)胞貼附在瓶壁上生長的現(xiàn)象;接觸抑制是當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互接觸時,細(xì)胞就會停止分裂增殖的現(xiàn)象。4.培養(yǎng)過程中包括有原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng),什么是原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng),兩者有什么區(qū)別?提示:原代培養(yǎng)是動物組織經(jīng)胰蛋白酶處理后的初次培養(yǎng)。原代培養(yǎng)的細(xì)胞由于接觸抑制不再分裂,用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理后,再分瓶培養(yǎng),讓細(xì)胞繼續(xù)增殖,這種培養(yǎng)叫傳代培養(yǎng)??梢?,劃分原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)的界線是以分瓶為界,即配制細(xì)胞懸液后轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中的第一次培養(yǎng)為原代培養(yǎng),分瓶后的培養(yǎng)(無論再分瓶多少次)均為傳代培養(yǎng)。[對點(diǎn)精練]1.(2023·廣東深圳期中)下圖為動物成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)過程示意圖。下列敘述正確的是
(
)
A.步驟①的操作不需要在無菌環(huán)境中進(jìn)行B.步驟②中用鹽酸溶解細(xì)胞間物質(zhì)使細(xì)胞分離C.步驟③到④的分瓶操作前常用胰蛋白酶處理D.步驟④培養(yǎng)過程中不會發(fā)生細(xì)胞貼壁【答案】C【解析】動物細(xì)胞培養(yǎng)過程需要無菌操作,故步驟①的操作需要在無菌環(huán)境中進(jìn)行,A錯誤;動物細(xì)胞培養(yǎng)過程需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理動物組織,分散成單個細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液,B錯誤;傳代培養(yǎng)時需要用胰蛋白酶處理貼壁生長的細(xì)胞,使之分散成單個細(xì)胞,再分瓶培養(yǎng),C正確;步驟④為傳代培養(yǎng)過程,該過程中部分細(xì)胞可能發(fā)生細(xì)胞貼壁,D錯誤。2.(2023·廣東番禺期中)海拉(HeLa)細(xì)胞是1951年從一位患宮頸癌的美國病人身上分離出來的宮頸癌細(xì)胞,該病人已經(jīng)去世,但海拉細(xì)胞直到今天還在被用于科學(xué)研究。下列說法正確的是 (
)A.海拉細(xì)胞可在體外大量增殖,在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象B.將癌變的宮頸癌組織分散為單個的海拉細(xì)胞,可用胃蛋白酶處理C.培養(yǎng)海拉細(xì)胞時,氧氣是細(xì)胞代謝所必需的,可將培養(yǎng)皿置于含有95%的O2和5%的CO2的混合氣體的CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)D.培養(yǎng)液還需定期更換,以便清除代謝廢物,防止細(xì)胞代謝物積累對細(xì)胞自身造成危害【答案】D【解析】海拉細(xì)胞為癌細(xì)胞,具有無限增殖的能力,但海拉細(xì)胞在體外增殖需要適宜的條件;在細(xì)胞培養(yǎng)過程中不會出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象,A錯誤。將癌變的宮頸癌組織分散為單個的海拉細(xì)胞,可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理,B錯誤。培養(yǎng)海拉細(xì)胞時,O2是細(xì)胞代謝所必需的,可將培養(yǎng)皿置于含有95%的空氣加5%的CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng),C錯誤。應(yīng)定期更換培養(yǎng)液,以便清除代謝廢物,防止細(xì)胞代謝物積累對細(xì)胞自身造成危害,D正確?!痉椒记伞繄D解動物細(xì)胞培養(yǎng)過程[知識歸納]干細(xì)胞的培養(yǎng)及其應(yīng)用1.胚胎干細(xì)胞的分離途徑2.胚胎干細(xì)胞的特性與培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞是從早期胚胎或原始性腺中分離出來的一類細(xì)胞,包括人類囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán),具有胚胎細(xì)胞的特性。它能長期維持未分化狀態(tài),又有全能分化的潛能,在體外培養(yǎng)時仍能維持正常和穩(wěn)定的染色體組型,在特定的環(huán)境誘導(dǎo)下,能分化成各類細(xì)胞。培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞的關(guān)鍵是需要一種培養(yǎng)體系,這種體系必須能促進(jìn)胚胎干細(xì)胞的生長,同時還要抑制胚胎干細(xì)胞的分化。3.胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)的過程4.干細(xì)胞的種類名稱全能干細(xì)胞多能干細(xì)胞專能干細(xì)胞舉例胚胎干細(xì)胞造血干細(xì)胞神經(jīng)干細(xì)胞特點(diǎn)能形成機(jī)體的任何組織或器官甚至完整個體能分化成多種細(xì)胞或組織,但不能發(fā)育成完整的個體只能分化成某一種類型或功能密切相關(guān)的兩種類型的細(xì)胞名稱全能干細(xì)胞多能干細(xì)胞專能干細(xì)胞應(yīng)用用于病人的器官移植等通過造血干細(xì)胞移植治療白血病及一些惡性腫瘤放療或化療后引起的造血系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)功能障礙等疾病神經(jīng)干細(xì)胞用于治療神經(jīng)組織損傷和神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病等干細(xì)胞包括胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞等,干細(xì)胞的培養(yǎng)成功是動物細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域的重大成就之一。目前胚胎干細(xì)胞是胚胎工程的前沿課題之一,也是當(dāng)今生命科學(xué)研究的熱門課題之一。閱讀教材,結(jié)合圖示思考下列問題。1.胚胎干細(xì)胞的來源哺乳動物的胚胎干細(xì)胞簡稱ES或EK細(xì)胞,是從__________或原始性腺中分離出來的一類細(xì)胞。提示:早期胚胎2.胚胎干細(xì)胞的特性(1)具有發(fā)育的__________,可誘導(dǎo)分化為各種組織細(xì)胞。(2)在某些特定的條件下,體外培養(yǎng)的ES細(xì)胞可以增殖而不發(fā)生________。提示:(1)全能性(2)分化3.胚胎干細(xì)胞的應(yīng)用有什么局限性?提示:胚胎干細(xì)胞必須從胚胎中獲取,這涉及倫理問題,因而限制它在醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用。4.什么是誘導(dǎo)多能干細(xì)胞?它在醫(yī)學(xué)應(yīng)用上有什么優(yōu)勢?提示:誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(簡稱iPS細(xì)胞)是通過體外誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞等獲得的類似胚胎干細(xì)胞的一類細(xì)胞。因為誘導(dǎo)過程無需破壞胚胎,而且iPS細(xì)胞可以來源于病人自身的體細(xì)胞,將它移植回病人體內(nèi)后,理論上可以避免免疫排斥反應(yīng)。[對點(diǎn)精練]1.日本京都大學(xué)的教授將4個關(guān)鍵基因移植入已分化的體細(xì)胞中并表達(dá),使這個細(xì)胞成為具有類似干細(xì)胞功能的多能干細(xì)胞(iPS細(xì)胞)。如圖為該技術(shù)在人體細(xì)胞中實(shí)驗示意圖,據(jù)圖分析下列說法正確的是
(
)A.iPS細(xì)胞與肌肉細(xì)胞有相同的遺傳物質(zhì),關(guān)鍵基因在肌肉細(xì)胞中能復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和翻譯B.過程①②③是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果,圖示過程體現(xiàn)了iPS細(xì)胞具有全能性C.用該技術(shù)得到的新生器官替換供體病變器官,可避免異體移植產(chǎn)生的免疫排斥反應(yīng)D.4個關(guān)鍵基因表達(dá)過程將改變肌肉細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)環(huán)境,使iPS細(xì)胞功能趨向?qū)iT化【答案】C【解析】肌肉細(xì)胞中無關(guān)鍵基因,因此與iPS細(xì)胞的遺傳物質(zhì)不同,A錯誤;iPS細(xì)胞是誘導(dǎo)多能干細(xì)胞,具有分化成多種細(xì)胞的潛能,但iPS細(xì)胞不能分化成各種細(xì)胞或產(chǎn)生完整生物體,圖示過程不能體現(xiàn)iPS細(xì)胞具有全能性,B錯誤;用該技術(shù)得到的新生器官替換供體病變器官,可避免異體移植產(chǎn)生的免疫排斥反應(yīng),C正確;由圖可知,4個關(guān)鍵基因的表達(dá)使肌肉細(xì)胞發(fā)生了脫分化,使iPS細(xì)胞功能趨向多能化,D錯誤。2.已故物理學(xué)家霍金曾經(jīng)患有肌肉萎縮性側(cè)索硬化癥(俗稱“漸凍癥”)。有研究表明該病是由于突變的基因?qū)е律窠?jīng)元合成了某種毒蛋白,從而阻礙了軸突內(nèi)營養(yǎng)物質(zhì)的流動。最新研究發(fā)現(xiàn),利用誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPS細(xì)胞)制作前驅(qū)細(xì)胞,然后移植給漸凍癥實(shí)驗鼠,能延長其壽命。下列相關(guān)描述錯誤的是
(
)A.誘導(dǎo)iPS細(xì)胞分化成的多種細(xì)胞中核酸相同,蛋白質(zhì)卻不完全相同B.誘導(dǎo)iPS細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá),細(xì)胞種類增多C.將控制合成破壞運(yùn)動神經(jīng)元的毒蛋白基因替換,可以起到良好治療作用D.植入神經(jīng)干細(xì)胞,使受損的運(yùn)動功能得到恢復(fù),可在一定程度改善“漸凍癥”【答案】A【解析】細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá),因此誘導(dǎo)iPS細(xì)胞分化成的多種細(xì)胞中DNA相同,但RNA不完全相同,A錯誤;細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá),這會導(dǎo)致細(xì)胞種類增多,B正確;若將控制運(yùn)動神經(jīng)元合成毒蛋白基因替換,或許可以起到治療該病的作用,C正確;植入神經(jīng)干細(xì)胞,恢復(fù)受損的運(yùn)動功能,在一定程度上會使“漸凍癥”病情改善,D正確。課堂·延伸提分易錯易混:動物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)動物細(xì)胞培養(yǎng)、植物組織培養(yǎng)分別是動物細(xì)胞工程、植物細(xì)胞工程中比較重要的工程技術(shù),兩者在很多方面都有相似之處,但又有區(qū)別,比較列表如下:項目植物組織培養(yǎng)動物細(xì)胞培養(yǎng)原理植物細(xì)胞的全能性細(xì)胞的增殖培養(yǎng)基類型固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基成分蔗糖、氨基酸、礦質(zhì)元素、維生素、水、瓊脂、植物激素等葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素、動物血清等項目植物組織培養(yǎng)動物細(xì)胞培養(yǎng)取材植物幼嫩器官、組織或細(xì)胞幼齡動物的器官、組織或早期胚胎結(jié)果植物個體或新的組織,可以體現(xiàn)全能性獲得細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)物,不形成個體,不體現(xiàn)全能性應(yīng)用植物的快速繁殖;作物脫毒;單倍體育種;突變體的利用;細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)等人造皮膚的構(gòu)建;細(xì)胞分泌蛋白的規(guī)模化生產(chǎn)等相同點(diǎn)兩種技術(shù)手段培養(yǎng)過程中都進(jìn)行有絲分裂,都是無性繁殖;均為無菌操作;需要適宜的溫度、pH等條件例1下列關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)的敘述正確的是
(
)A.都需要在無菌條件下進(jìn)行B.都需要用相應(yīng)的酶分散成單個細(xì)胞C.培養(yǎng)的原理都是細(xì)胞的全能性D.都使用液體培養(yǎng)基,動物細(xì)胞培養(yǎng)時還需要添加血清【答案】A【解析】動物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)都需要無菌操作,以防止雜菌污染,A正確;動物細(xì)胞培養(yǎng)要用到胰蛋白酶分散成單個細(xì)胞,而植物組織培養(yǎng)過程不需要,B錯誤;動物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是細(xì)胞增殖,植物組織培養(yǎng)的原理是細(xì)胞的全能性,C錯誤;動物細(xì)胞培養(yǎng)使用液體培養(yǎng)基,還需要添加血清,植物組織培養(yǎng)使用固體培養(yǎng)基,還需要添加植物激素,D錯誤。錯因分析:一是對動物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)的操作條件掌握不清,兩者都是在無菌條件下進(jìn)行的;二是對動物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)的材料處理不清,前者動物組織在培養(yǎng)前要用剪刀剪碎,用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細(xì)胞制成細(xì)胞懸液后,再進(jìn)行培養(yǎng),后者直接利用外植體進(jìn)行接種;三是兩者的培養(yǎng)原理和培養(yǎng)基的性質(zhì)和成分區(qū)分不清,前者利用細(xì)胞增殖的原理,用的是液體培養(yǎng)基,培養(yǎng)時需要加入動物血清,后者利用植物細(xì)胞的全能性,用的是固體培養(yǎng)基,培養(yǎng)時需要加入植物激素。解題技巧:實(shí)驗方案的補(bǔ)充和完善例2食品保鮮劑——青鮮素能抑制植物細(xì)胞生長與分裂從而抑制發(fā)芽,被用于蔬菜的保鮮,但其殘留會損害人體健康??蒲腥藛T以小兔為實(shí)驗材料,用“動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)”對青鮮素毒害性進(jìn)行了檢測。(1)請完善檢測青鮮素毒性的實(shí)驗:主要實(shí)驗步驟:第一步:取大小相同的六個培養(yǎng)瓶編號為1~6,分別加入等量的相同培養(yǎng)液和小兔細(xì)胞。第二步:向1號培養(yǎng)瓶中加入生理鹽水,向2~6號培養(yǎng)瓶中分別加入_____________________________________。第三步:在相同且適宜條件下培養(yǎng)一段時間后,取樣制成臨時制片,用顯微鏡觀察_____________________________________,____________________________。結(jié)果如下表:培養(yǎng)瓶編號123456添加劑中青鮮素濃度/(mg/L)水103090270810變異細(xì)胞比例001/1061/1062/1068/106(2)分析表中數(shù)據(jù)可得出結(jié)論:__________________________。(3)該實(shí)驗檢測有毒物質(zhì)毒性的指標(biāo)是______________________,所用培養(yǎng)液中需要加入的特殊營養(yǎng)成分是________。【答案】(1)等量的不同濃度(10、30、90、270、810mg/L)的青鮮素溶液記錄變異細(xì)胞的數(shù)目統(tǒng)計變異細(xì)胞百分比(2)低濃度的青鮮素毒性很小,濃度90mg/L以上毒性增加明顯(3)變異細(xì)胞占全部培養(yǎng)細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)(或變異細(xì)胞比例)
血清審題流程:第一步解讀題干,提取有用信息題干“青鮮素殘留會損害人體健康
,科研人員以小兔為實(shí)驗材料,用動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)對青鮮素毒害性進(jìn)行檢測”。提取有用的信息:①青鮮素殘留會損害人體健康;②實(shí)驗對象是小兔;③實(shí)驗方法是動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù);④實(shí)驗?zāi)康氖菣z測青鮮素的毒害性。第二步結(jié)合實(shí)驗分析方法,遷移應(yīng)用結(jié)合實(shí)驗結(jié)果,分析實(shí)驗的自變量是青鮮素的濃度,實(shí)驗的因變量是變異細(xì)胞的比例。實(shí)驗步驟的設(shè)計一般分為三步:第一步,取材、分組、編號。取材要具有統(tǒng)一性,如取相同的(或生理狀態(tài)相同的)動物或植物;分組要具有隨機(jī)性,如隨機(jī)均分成若干組;編號要具有科學(xué)性,如編號為甲組、乙組、丙組等。比如本實(shí)驗中取大小相同的六個培養(yǎng)瓶編號為1~6,分別加入等量的相同培養(yǎng)液和小兔細(xì)胞。第二步,設(shè)置對照,即分組施加實(shí)驗變量,實(shí)驗組施加實(shí)驗變量(即施加自變量),對照組不施加實(shí)驗變量(注意遵循等量原則)。比如本實(shí)驗中向1號培養(yǎng)瓶中加入生理鹽水,向2~6號培養(yǎng)瓶中分別加入等量的不同濃度的青鮮素溶液。第三步,在相同且適宜條件下培養(yǎng)(或飼養(yǎng)、或靜置)一段時間,觀察或記錄(確定觀察指標(biāo))。比如本實(shí)驗中在相同且適宜條件下培養(yǎng)一段時間后,取樣制成臨時制片,用顯微鏡觀察,記錄變異細(xì)胞的數(shù)目,統(tǒng)計變異細(xì)胞百分比。第三步結(jié)合實(shí)驗結(jié)果分析,得出實(shí)驗結(jié)論結(jié)合表中實(shí)驗結(jié)果,得出實(shí)驗結(jié)論:低濃度的青鮮素毒性很小,濃度90mg/L以上毒性增加明顯。該實(shí)驗檢測有毒物質(zhì)毒性的指標(biāo)是變異細(xì)胞占全部培養(yǎng)細(xì)胞的百分?jǐn)?shù),所用培養(yǎng)液中需要加入的特殊營養(yǎng)成分是血清。實(shí)驗步驟的設(shè)計小結(jié):1.取材、分組、編號。為排除無關(guān)變量對實(shí)驗的干擾,取材要具有統(tǒng)一性,分組要具有隨機(jī)性,編號要具有科學(xué)性。2.設(shè)置對照即實(shí)驗變量的施加。對照組和實(shí)驗組施加變量時注意“等量”二字。3.培養(yǎng)觀察或記錄。為排除無關(guān)變量對實(shí)驗的干擾,對照組和實(shí)驗組應(yīng)在相同且適宜條件下培養(yǎng),觀察或記錄時要確立觀察或測量指標(biāo),觀察指標(biāo)或測量指標(biāo)要具有可觀測性。小練·素養(yǎng)達(dá)成1.(2023·廣東珠海期末)下列關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的敘述,錯誤的是 (
)A.兩者所用培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分不完全相同B.培養(yǎng)前都要用酶處理組織以得到單個細(xì)胞C.前者可使細(xì)胞增殖,后者可產(chǎn)生新的植株D.前者可檢測有毒物質(zhì),后者可使植物脫去病毒【答案】B【解析】動物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)所用培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分不完全相同,A正確;動物細(xì)胞培養(yǎng)前要用酶處理組織以得到單個細(xì)胞,但是植物組織培養(yǎng)不需要,B錯誤;動物細(xì)胞培養(yǎng)可使細(xì)胞增殖,植物組織培養(yǎng)可產(chǎn)生新的植株,C正確;動物細(xì)胞培養(yǎng)可檢測有毒物質(zhì),植物組織培養(yǎng)可使植物脫去病毒,D正確。2.(2023·廣東東莞期末)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSC)在某些誘導(dǎo)劑作用下可分化成心肌細(xì)胞,在心臟類疾病的治療中擁有廣闊的應(yīng)用前景。科研人員從大鼠體內(nèi)分離出BMSC并進(jìn)行多代培養(yǎng),通過檢測細(xì)胞中基因的表達(dá)產(chǎn)物可以判斷細(xì)胞的分化方向。下列敘述錯誤的是
(
)A.在CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)BMSC細(xì)胞時,CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pHB.原代培養(yǎng)的BMSC出現(xiàn)接觸抑制時,需用胃蛋白酶處理并分瓶培養(yǎng)C.培養(yǎng)BMSC時需定期更換培養(yǎng)液,防止細(xì)胞代謝物積累對細(xì)胞自身造成危害D.BMSC與誘導(dǎo)多能干細(xì)胞都是具有分裂能力的細(xì)胞,且具有一定的分化潛能【答案】B【解析】動物細(xì)胞培養(yǎng)時,氣體條件需要有95%空氣和5%的CO2,CO2的作用是維持培養(yǎng)液的pH,A正確;動物細(xì)胞培養(yǎng)的pH為7.2~7.4,胃蛋白酶在此條件下會變性失活,故原代培養(yǎng)的BMSC出現(xiàn)接觸抑制時,需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理并進(jìn)行分瓶培養(yǎng),B錯誤;為防止細(xì)胞代謝物積累對細(xì)胞自身造成危害,培養(yǎng)BMSC時需定期更換培養(yǎng)液,C正確;BMSC與誘導(dǎo)多能干細(xì)胞都是具有分裂能力的細(xì)胞,且具有一定的分化潛能,
故能在某些誘導(dǎo)劑作用下分化成心肌細(xì)胞,D正確。3.(2023·廣東清遠(yuǎn)期末)小鼠的某種上皮細(xì)胞與某種淋巴細(xì)胞在進(jìn)行體外培養(yǎng)時,細(xì)胞周期基本相同,但小鼠的這種上皮細(xì)胞在培養(yǎng)時,呈現(xiàn)扁平不規(guī)則多角形,且貼附在培養(yǎng)瓶內(nèi)壁上;而該種淋巴細(xì)胞則常常懸浮在培養(yǎng)液中。下列有關(guān)敘述錯誤的是 (
)A.兩種細(xì)胞的細(xì)胞周期基
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