全國(guó)統(tǒng)考版2025屆高考生物二輪復(fù)習(xí)梳理糾錯(cuò)預(yù)測(cè)專(zhuān)題十四生物技術(shù)實(shí)踐學(xué)案

2024年高考“2024年高考“最終三十天”專(zhuān)題透析PAGE好教化好教化云平臺(tái)--教化因你我而變PAGE17生物技術(shù)實(shí)踐1．近五年的考題中，對(duì)微生物的分別和培育的考查尤為突出，側(cè)重考查微生物的培育、分別、計(jì)數(shù)、無(wú)菌技術(shù)等基本學(xué)問(wèn)，對(duì)傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的發(fā)酵原理、制作流程等的考查頻度也在不斷提高。對(duì)植物組織培育、胡蘿卜素的提取僅進(jìn)行了兩次考查，前者側(cè)重考查養(yǎng)分條件及有關(guān)植物激素的作用等；后者側(cè)重考查胡蘿卜素的萃取劑的選擇等。2．本專(zhuān)題以非選擇題的形式考查。常借助某一特定的微生物的分別和培育考查微生物的養(yǎng)分、接種方法等；對(duì)于生物技術(shù)在食品加工中的應(yīng)用，常借助發(fā)酵實(shí)例考查，填充內(nèi)容多為教材中一些結(jié)論性語(yǔ)句等。植物組織培育技術(shù)、植物有效成分的提取的考查也多以教材基礎(chǔ)學(xué)問(wèn)為主。3．2024年備考時(shí)應(yīng)留意：(1)某種微生物數(shù)量的測(cè)定。(2)利用微生物進(jìn)行發(fā)酵來(lái)生產(chǎn)特定的產(chǎn)物以及微生物在其他方面的應(yīng)用。(3)利用比較法歸納總結(jié)并駕馭常見(jiàn)傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的原理、流程及影響因素等。(4)列表比較玫瑰精油、橘皮精油及胡蘿卜素的提取方法、原理、試驗(yàn)步驟等異同?？键c(diǎn)一微生物的培育、分別與計(jì)數(shù)1．消毒和滅菌的比較2．平板劃線法每次灼燒的目的3．純化微生物的接種方法項(xiàng)目平板劃線法稀釋涂布平板法原理通過(guò)接種環(huán)在瓊脂固體培育基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培育基的表面。在數(shù)次劃線后培育，可以分別到由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的肉眼可見(jiàn)的子胞群體，即菌落將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋?zhuān)缓髮⒉煌♂尪鹊木悍謩e涂布到瓊脂固體培育基的表面，進(jìn)行培育。在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培育基表面形成單個(gè)的菌落優(yōu)點(diǎn)可以視察菌落特征，對(duì)混合菌進(jìn)行分別可以計(jì)數(shù)，可以視察菌落特征缺點(diǎn)不能計(jì)數(shù)汲取量較少，較麻煩，平板不干燥效果不好，簡(jiǎn)單擴(kuò)散4．選擇培育基與鑒別培育基的比較考點(diǎn)二傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用5．比較果酒、果醋、腐乳、泡菜的制作項(xiàng)目?jī)?nèi)容果酒和果醋的制作腐乳的制作制作泡菜并檢測(cè)亞硝酸鹽含量作用菌種果酒:酵母菌果醋:醋酸菌毛霉乳酸菌原理(1)酵母菌在無(wú)氧條件下將葡萄糖氧化成乙醇(2)醋酸菌在有氧條件下將乙醇氧化為醋酸毛霉將蛋白質(zhì)、脂肪分解成小分子有機(jī)物乳酸菌將糖轉(zhuǎn)化為乳酸原料選擇簇新葡萄(或蘋(píng)果)豆腐大白菜、花椰菜等簇新干凈的蔬菜發(fā)酵條件果酒:前期需氧，后期不需氧果醋:始終需氧始終需氧無(wú)氧發(fā)酵溫度果酒:18~25℃果醋:30~35℃15~18℃常溫試驗(yàn)流程選擇葡萄↓榨汁↓↘酒精發(fā)酵醋酸發(fā)酵↓↓果酒果醋讓豆腐上長(zhǎng)出毛霉↓加鹽腌制↓加鹵湯裝瓶↓密封腌制制泡菜：選材配制鹽水↓加調(diào)味料，裝壇↓發(fā)酵↓成品測(cè)亞硝酸鹽含量:配制溶液制備標(biāo)準(zhǔn)顯色液→制備樣品處理液→比色考點(diǎn)三植物有效成分的提取6．植物有效成分的提取實(shí)例(1)玫瑰精油的提取留意：①加入NaCl的目的是增加水層的密度，有利于玫瑰油與水分層。②加入無(wú)水Na2SO4的目的是汲取精油中殘留的水分。(2)橘皮精油的提取留意：①為了提高出油率，須要將柑橘皮干燥去水，并用石灰水浸泡，浸泡時(shí)間為10h以上。②橘皮要浸透，這樣壓榨時(shí)不會(huì)滑脫，且出油率高，過(guò)濾時(shí)不會(huì)堵塞篩眼。(3)胡蘿卜素的提取留意：原料顆粒的大小、緊密程度、含水量、萃取的溫度和時(shí)間等條件也能影響萃取效率。因此在萃取的過(guò)程中，要先將胡蘿卜進(jìn)行粉碎和干燥，使之與萃取劑充分接觸，提高溶解度。

1．（2024年全國(guó)統(tǒng)一高考生物試卷（新課標(biāo)Ⅰ）·37）某種物質(zhì)S（一種含有C、H、N的有機(jī)物）難以降解，會(huì)對(duì)環(huán)境造成污染，只有某些細(xì)菌能降解S。探討人員依據(jù)下圖所示流程從淤泥中分別得到能高效降解S的細(xì)菌菌株。試驗(yàn)過(guò)程中須要甲、乙兩種培育基，甲的組分為無(wú)機(jī)鹽、水和S，乙的組分為無(wú)機(jī)鹽、水、S和Y?；卮鹣铝袉?wèn)題：（1）試驗(yàn)時(shí)，盛有水或培育基的搖瓶通常采納_______________的方法進(jìn)行滅菌。乙培育基中的Y物質(zhì)是_______________。甲、乙培育基均屬于______________培育基。（2）試驗(yàn)中初步估測(cè)搖瓶M中細(xì)菌細(xì)胞數(shù)為2×107個(gè)/mL，若要在每個(gè)平板上涂布100μL稀釋后的菌液，且保證每個(gè)平板上長(zhǎng)出的菌落數(shù)不超過(guò)200個(gè)，則至少應(yīng)將搖瓶M中的菌液稀釋________________倍。（3）在步驟⑤的篩選過(guò)程中，發(fā)覺(jué)當(dāng)培育基中的S超過(guò)某一濃度時(shí)，某菌株對(duì)S的降解量反而下降，其緣由可能是________________（答出1點(diǎn)即可）。（4）若要測(cè)定淤泥中能降解S的細(xì)菌細(xì)胞數(shù)，請(qǐng)寫(xiě)出主要試驗(yàn)步驟________________。（5）上述試驗(yàn)中，甲、乙兩種培育基所含有的組分雖然不同，但都能為細(xì)菌的生長(zhǎng)供應(yīng)4類(lèi)養(yǎng)分物質(zhì)，即________________。【答案】（1）高壓蒸汽滅菌瓊脂選擇（2）104（3）S的濃度超過(guò)某一值時(shí)會(huì)抑制菌株的生長(zhǎng)（4）取淤泥加入無(wú)菌水，涂布（或稀釋涂布）到乙培育基上，培育后計(jì)數(shù)（5）水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽【解析】（1）常用高壓蒸汽滅菌法處理盛有水或培育基的搖瓶，乙為固體培育基，故須要加入Y瓊脂；甲和乙培育基可以用于篩選能降解S的菌株，故均屬于選擇培育基。（2）若要在每個(gè)平板上涂布100μL稀釋液后的菌液，且每個(gè)平板上長(zhǎng)出的菌落數(shù)不超過(guò)200個(gè)，則搖瓶M中的菌液稀釋的倍數(shù)至少為2×107÷1000×100÷200=1×104倍。（3）當(dāng)培育基中的S超過(guò)某一濃度后，可能會(huì)抑制菌株的生長(zhǎng)，從而造成其對(duì)S的降解量下降。（4）要測(cè)定淤泥中能降解S的細(xì)菌的細(xì)胞數(shù)，可以取淤泥加無(wú)菌水制成菌懸液，稀釋涂布到乙培育基上，培育后進(jìn)行計(jì)數(shù)。（5）甲和乙培育基均含有水、無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源?！军c(diǎn)評(píng)】培育基常用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌，接種工具應(yīng)當(dāng)進(jìn)行灼燒滅菌，玻璃器皿等耐高溫的、須要干燥的物品，常采納干熱滅菌。2．（2024年全國(guó)統(tǒng)一高考生物試卷（新課標(biāo)Ⅱ）·37）探討人員從海底微生物中分別到一種在低溫下有催化活性的α-淀粉酶A3，并對(duì)其進(jìn)行了探討?；卮鹣铝袉?wèn)題：（1）在以淀粉為底物測(cè)定A3酶活性時(shí)，既可檢測(cè)淀粉的削減，檢測(cè)應(yīng)采納的試劑是_________，也可采納斐林試劑檢測(cè)________的增加。（2）在A3的分別過(guò)程中可采納聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測(cè)其純度，通常會(huì)在凝膠中添加SDS，SDS的作用是___________________和___________________。（3）本試驗(yàn)中，探討人員在確定A3的最適pH時(shí)運(yùn)用了三種組分不同的緩沖系統(tǒng)，結(jié)果如圖所示。某同學(xué)據(jù)圖推斷，緩沖系統(tǒng)的組分對(duì)酶活性有影響，其推斷依據(jù)是______________。（4）在制備A3的固定化酶時(shí)，一般不宜采納包埋法，緣由是_________________________（答出1點(diǎn)即可）?！敬鸢浮浚?）碘液還原糖（或答：葡萄糖）（2）消退蛋白質(zhì)所帶凈電荷對(duì)遷移率的影響使蛋白質(zhì)發(fā)生變性（3）在pH相同時(shí)，不同緩沖系統(tǒng)條件下所測(cè)得的相對(duì)酶活性不同（4）酶分子體積小，簡(jiǎn)單從包埋材料中漏出【解析】（1）測(cè)定酶活性時(shí)，可以通過(guò)檢測(cè)反應(yīng)物的削減或生成物的增加來(lái)反映酶活性，所以可以用碘液檢測(cè)淀粉的削減，也可用斐林試劑檢測(cè)還原糖（或葡萄糖）的增加。（2）鑒定蛋白質(zhì)純度常用SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法，凝膠中加入SDS可以消退蛋白質(zhì)所帶凈電荷對(duì)遷移率的影響，并使蛋白質(zhì)發(fā)生變性。（3）分析題中曲線可知，在pH相同時(shí)，不同緩沖系統(tǒng)條件下所測(cè)得的相對(duì)酶活性不同，可推想緩沖系統(tǒng)的組分對(duì)酶活性有影響。（4）由于酶分子體積小，簡(jiǎn)單從包埋材料中漏出，所以固定化酶時(shí)，一般不采納包埋法?！军c(diǎn)評(píng)】本題比較基礎(chǔ)，考查蛋白質(zhì)的提取和分別、固定化酶技術(shù)等相關(guān)學(xué)問(wèn)，對(duì)于此類(lèi)試題，須要考生留意的細(xì)微環(huán)節(jié)較多，照試驗(yàn)的原理、試驗(yàn)采納的試劑及試劑的作用、試驗(yàn)操作步驟等，考生在平常的學(xué)習(xí)過(guò)程中應(yīng)留意積累。3．（2024年全國(guó)統(tǒng)一高考生物試卷（新課標(biāo)Ⅲ）·37）水果可以用來(lái)加工制作果汁、果酒和果醋等?；卮鹣铝袉?wèn)題：（1）制作果汁時(shí)，可以運(yùn)用果膠酶、纖維素酶等提高水果的出汁率和澄清度。果膠酶是分解果膠的一類(lèi)酶的總稱(chēng)，包括多聚半乳糖醛酸酶、________（答出2種即可）。纖維素酶可以分解植物______________（填細(xì)胞膜或細(xì)胞壁）中的纖維素。（2）用果膠酶處理果泥時(shí)，為了提高出汁率，須要限制反應(yīng)的溫度，緣由是__________________。（3）現(xiàn)有甲乙丙三種不同來(lái)源的果膠酶，某同學(xué)擬在果泥用量、溫度、pH等全部條件都相同的前提下比較這三種酶的活性。通常，酶活性的凹凸可用_____________來(lái)表示。（4）獲得的果汁（如蘋(píng)果汁）可以用來(lái)制作果酒或者果醋，制作果酒須要__________________菌，這一過(guò)程中也須要O2，O2的作用是__________________。制作果醋須要醋酸菌，醋酸菌屬于_____________（填好氧或厭氧）細(xì)菌?！敬鸢浮浚?）果膠分解酶、果膠酯酶細(xì)胞壁（2）溫度對(duì)果膠酶活性有影響，在最適溫度下酶活性最高，出汁率最高（3）在肯定條件下，單位時(shí)間內(nèi)、單位體積中反應(yīng)物的消耗量或者產(chǎn)物的增加量（4）酵母促進(jìn)有氧呼吸，使酵母菌大量繁殖好氧【解析】（1）果膠酶包括多聚半乳糖醛酸酶、果膠分解酶和果膠酯酶等。植物細(xì)胞壁由纖維素和果膠構(gòu)成，故可用纖維素酶分解細(xì)胞壁。（2）酶發(fā)揮催化作用須要相宜的溫度和pH條件，在最適溫度下，果膠酶的活性最高，出汁率最高。（3）酶的活性是指酶催化肯定化學(xué)反應(yīng)的實(shí)力，酶活性的凹凸可以用在肯定條件下，單位時(shí)間內(nèi)、單位體積中反應(yīng)物的消耗量或者產(chǎn)物的增加量來(lái)表示。（4）由分析可知，果酒的制作離不開(kāi)酵母菌，在初期通入氧氣，可以促進(jìn)酵母菌的有氧呼吸，使其大量繁殖；醋酸菌是一種好氧細(xì)菌?！军c(diǎn)評(píng)】本題考查果酒、果醋的制作和果膠酶的相關(guān)內(nèi)容，要求考生識(shí)記制作果酒、果醋的原理，駕馭果汁生產(chǎn)中果膠酶的作用，并結(jié)合題干信息解題。1．紅樹(shù)莓果酒釀造的基本工藝流程為：破裂原料→酶解處理→發(fā)酵→后處理→成品。回答下列問(wèn)題：（1）來(lái)自紅樹(shù)莓破裂細(xì)胞壁的果膠會(huì)造成原料液渾濁，所以在“酶解處理”環(huán)節(jié)須要加入果膠酶。某些微生物能夠產(chǎn)生果膠酶，要篩選一株高產(chǎn)果膠酶的微生物，最佳菌體采樣點(diǎn)應(yīng)為_(kāi)____________（填“紅樹(shù)莓果實(shí)”“紅樹(shù)莓果汁產(chǎn)品”或“紅樹(shù)莓果酒產(chǎn)品”）。要獲得高產(chǎn)果膠酶微生物的單菌落，需配制的選擇性固體培育基應(yīng)包括水、磷酸氫二鉀、硫酸鎂、硝酸鈉、剛果紅，還須要_____________（填序號(hào)：A．牛肉膏B．蛋白陳C．果膠D．葡萄糖E．瓊脂）。接種、培育一段時(shí)間后，選擇____________的菌落作為高產(chǎn)果膠酶微生物的候選菌種。（2）寫(xiě)出從微生物中提取和分別果膠酶的基本步驟____________。（3）果膠酶是能夠分解果膠的一類(lèi)酶的總稱(chēng)，包括多聚半乳糖醛酸酶、果膠分解酶、果膠酯酶等，采納凝膠電泳分別果膠酶中不同組分，是利用了各種酶分子____________的差異。（4）在反應(yīng)體系中底物足量且處于最適溫度和pH條件下，測(cè)定果膠酶活性須要在反應(yīng)____________（填“初期”“中期”或“末期”）進(jìn)行，主要緣由是____________。（5）工藝中“發(fā)酵”環(huán)節(jié)所用菌株為酵母菌，如圖中____________號(hào)試管為酵母菌在半固體培育基中培育后狀態(tài)。（6）工藝中“后處理”環(huán)節(jié)的一個(gè)重要工序是將酒樣置于87℃保溫30min，目的是____________?！敬鸢浮浚?）紅樹(shù)莓果實(shí)CE具有透亮圈（2）原料處理→粗分別→純化→純度鑒定（3）分子本身大小、形態(tài)以及帶電性質(zhì)（4）中期中期時(shí)全部酶都與底物充分接觸，化學(xué)反應(yīng)速率穩(wěn)定（5）2（6）殺死酵母菌，停止酒精發(fā)酵，同時(shí)防止發(fā)酵液中有機(jī)物的破壞和酒精的流失【解析】（1）找尋目的菌株時(shí)，要依據(jù)它對(duì)生存環(huán)境的要求，到相應(yīng)的環(huán)境中區(qū)找尋。本題中須要篩選一株分解紅樹(shù)莓果實(shí)中果膠酶的微生物，最佳菌體采樣點(diǎn)應(yīng)為紅樹(shù)莓果實(shí)。該培育基為固體培育基，所以要加入凝固劑：瓊脂。因?yàn)橐Y選分解過(guò)膠的微生物，所以要以果膠作為唯一的碳源。因此，培育基中還需加入果膠和瓊脂，而不能加入蛋白胨和牛肉膏。培育基中的剛果紅可以與果膠結(jié)合生成紅色復(fù)合物，但是不與果膠分解后的產(chǎn)物結(jié)合，接種一段時(shí)間后，假如微生物能產(chǎn)生分解果膠的酶，就會(huì)出現(xiàn)透亮圈，所以選擇具有透亮圈的菌落。（2）從微生物中提取和分別果膠酶的基本步驟：原料處理→粗分別→純化→純度鑒定。（3）采納凝膠電泳分別果膠酶中不同組分，在同一電場(chǎng)下，由于各種酶分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身大小、形態(tài)的不同，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分別。（4）在反應(yīng)體系中底物足量且處于最適溫度和pH條件下，測(cè)定果膠酶活性須要在反應(yīng)中期進(jìn)行，主要緣由是前期酶和底物接觸不充分，化學(xué)反應(yīng)速率慢；后期由于產(chǎn)物增多、積累，可能會(huì)影響酶促反應(yīng)的進(jìn)行；中期時(shí)全部酶都與底物充分接觸，化學(xué)反應(yīng)速率穩(wěn)定。（5）工藝中“發(fā)酵”環(huán)節(jié)所用菌株為酵母菌，圖中2號(hào)試管為酵母菌在半固體培育基中培育后狀態(tài)，因?yàn)榻湍妇鸀榧嫘詤捬蹙?，在有氧的條件下大量繁殖，在無(wú)氧的條件下進(jìn)行酒精發(fā)酵，所以固體培育基與空氣接觸的部位分布了較多酵母菌，固體培育基底部和中部無(wú)氧的環(huán)境中也有酵母菌生活。（6）工藝中“后處理”環(huán)節(jié)的一個(gè)重要工序是將酒樣置于87℃保溫30min，目的是殺死酵母菌，停止酒精發(fā)酵；同時(shí)87℃的條件下可以防止有發(fā)酵液中機(jī)物的破壞和酒精流失（合理即可）。【點(diǎn)評(píng)】本題以紅樹(shù)莓果酒釀造為背景，綜合考察了微生物的培育和分別、酶的分別和提純。結(jié)合生活實(shí)際，聯(lián)系應(yīng)用所學(xué)學(xué)問(wèn)是解決本題的關(guān)鍵。2．近年來(lái)，紀(jì)錄片《舌尖上的中國(guó)》引發(fā)全民關(guān)注美食的熱潮，其中多次講解并描述了利用不同微生物的發(fā)酵作用制作的美味食品。依據(jù)相關(guān)學(xué)問(wèn)，回答關(guān)于果酒、果醋和腐乳制作的相關(guān)問(wèn)題。(1)醋酸桿菌屬于________核生物，其細(xì)胞結(jié)構(gòu)中________(填“含有”或“不含有”)線粒體。(2)在果酒制作中，溫度是重要的限制條件，________左右的溫度最適合酵母菌繁殖，酵母菌無(wú)氧呼吸產(chǎn)生的酒精可用________________溶液進(jìn)行檢驗(yàn)。(3)下圖為腐乳制作的試驗(yàn)流程示意圖：①圖中A代表____________，毛霉菌在-20℃長(zhǎng)期保存時(shí)，菌液中常須要加入肯定量的________(填“蒸餾水”、“甘油”或“碳酸鈣”)。②配制鹵湯中酒的含量一般限制在________左右，酒精含量過(guò)低，________________________，可能導(dǎo)致豆腐腐敗?！敬鸢浮浚?）原不含有（2）20℃(酸性)重鉻酸鉀（3）①加鹽腌制甘油②12%不足以抑制微生物的生長(zhǎng)【解析】(1)醋酸桿菌屬于原核生物，其細(xì)胞結(jié)構(gòu)中只有核糖體，不含有線粒體。(2)在果酒制作中，溫度是重要的限制條件，20℃左右的溫度最適合酵母菌繁殖；酒精可用重鉻酸鉀溶液進(jìn)行檢驗(yàn)，顏色由橙色變成灰綠色。(3)①腐乳制作的流程為：eq\x(\a\al(讓豆腐上,長(zhǎng)出毛霉))→eq\x(\a\al(加鹽,腌制))→eq\x(\a\al(加鹵湯,裝瓶))→eq\x(\a\al(密封,腌制))，因此圖中A代表加鹽腌制，其主要目的是析出豆腐中的水分，使豆腐塊變硬，同時(shí)還能抑制微生物的生長(zhǎng)，避開(kāi)豆腐塊腐敗變質(zhì)。毛霉菌在－20℃長(zhǎng)期保存時(shí)，菌液中須要加入肯定量的甘油。②在配制鹵湯中酒的含量一般限制在12%左右，酒精含量過(guò)高腐乳成熟時(shí)間將會(huì)延長(zhǎng)；酒精含量過(guò)低，不足以抑制微生物的生長(zhǎng)，可能導(dǎo)致豆腐腐敗。3．探討人員欲從土壤中篩選高淀粉酶活性的細(xì)菌（目標(biāo)菌），并對(duì)其進(jìn)行探討?；卮鹣铝袉?wèn)題：（1）在細(xì)菌篩選過(guò)程中，將土壤樣品稀釋液接種至以__________為唯一碳源的固體培育基上進(jìn)行培育，除碳源外，該培育基還含有氨源、水、無(wú)機(jī)鹽和___________。（2）進(jìn)行微生物菌種純化時(shí)，為得到單菌落，最常用的兩種接種方法是___________。（3）從土壤中篩選目標(biāo)菌時(shí)，加碘液染色后，平板上出現(xiàn)了A、B和C三種菌落（如圖1所示）。假如要得到淀粉酶活力最高的菌株，應(yīng)當(dāng)選擇__________（填“A”、“B”或“C”）菌落進(jìn)一步純化。A菌落經(jīng)檢測(cè)其為硝化細(xì)菌，據(jù)此說(shuō)明A菌落能在此培育基上生長(zhǎng)且沒(méi)有形成透亮圈的緣由是__________。（4）經(jīng)篩選獲得了一菌株，能同時(shí)產(chǎn)兩種不同的淀粉酶X和Y，其相對(duì)分子量分別為45000和58000。采納凝膠色譜法將這兩種淀粉酶分別時(shí)，先洗脫出來(lái)的是淀粉酶__________（填“X”或“Y”），其緣由是___________。（5）在探討過(guò)程中獲得了三種淀粉酶，其酶活性與反應(yīng)溫度和pH值有關(guān)（如圖2和圖3所示），假如要選擇一種耐酸耐高溫的淀粉酶進(jìn)行后續(xù)探討，應(yīng)當(dāng)選擇淀粉酶__________（填“甲”“乙”或“丙”），理由是__________?！敬鸢浮浚?）淀粉瓊脂（凝固劑）（2）稀釋涂布平板法和平板劃線法（3）B硝化細(xì)菌為自養(yǎng)菌，不能產(chǎn)生淀粉酶，能夠利用空氣中的二氧化碳合成有機(jī)物（4）Y在凝膠色譜柱中，淀粉酶Y的相對(duì)分子質(zhì)量大，不簡(jiǎn)單進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，只能在凝膠外部移動(dòng)，路程短，移動(dòng)的速度快，先洗脫出來(lái)（5）丙淀粉酶丙的最適溫度最高，最適pH最低，且為酸性【解析】（1）分析題意可知，該試驗(yàn)?zāi)康氖怯麖耐寥乐泻Y選高淀粉酶活性的細(xì)菌，故在細(xì)菌篩選過(guò)程中，將土壤樣品稀釋液接種至以淀粉為唯一碳源的固體培育基上進(jìn)行培育，除碳源外，該培育基還含有氨源、水、無(wú)機(jī)鹽和瓊脂（凝固劑）。（2）進(jìn)行微生物菌種純化時(shí)，為得到單菌落，最常用的兩種接種方法是稀釋涂布平板法和平板劃線法。（3）分析題圖可知，從土壤中篩選目標(biāo)菌時(shí)，加碘液染色后，平板上B菌落的透亮圈最大說(shuō)明B菌產(chǎn)生的淀粉酶活力最高，故應(yīng)當(dāng)選擇B菌落進(jìn)一步純化。A菌落經(jīng)檢測(cè)其為硝化細(xì)菌，據(jù)此說(shuō)明A菌落能在此培育基上生長(zhǎng)且沒(méi)有形成透亮圈，緣由是硝化細(xì)菌為自養(yǎng)型細(xì)菌，不能利用現(xiàn)成的淀粉，而能利用空氣中的二氧化碳合成糖類(lèi)等有機(jī)物。（4）凝膠色譜法是依據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小分別蛋白質(zhì)的有效方法，相對(duì)分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)簡(jiǎn)單進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程長(zhǎng)，移動(dòng)的速度慢；相對(duì)分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)不簡(jiǎn)單進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，只能在凝膠外部移動(dòng)，路程短，移動(dòng)的速度快，因此相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)得以分別，由于淀粉酶Y的相對(duì)分子量比X大，故采納凝膠色譜法將這兩種淀粉酶分別時(shí)，先洗脫出來(lái)的是淀粉酶Y。（5）分析題中曲線可知，三種淀粉酶中，丙的最適溫度為70℃，比甲乙的最適溫度高，最適pH是3，比甲乙的最適pH低，故要選擇一種耐酸耐高溫的淀粉酶進(jìn)行后續(xù)探討，應(yīng)當(dāng)選擇淀粉酶丙。【點(diǎn)評(píng)】本題考查微生物的分別和培育、蛋白質(zhì)的提取和分別的相關(guān)學(xué)問(wèn)，意在考查考生對(duì)相關(guān)學(xué)問(wèn)點(diǎn)的識(shí)記、理解和運(yùn)用實(shí)力，把握學(xué)問(wèn)間內(nèi)在聯(lián)系，構(gòu)建學(xué)問(wèn)網(wǎng)絡(luò)。4．青蒿素是一種無(wú)色針狀晶體，易溶于有機(jī)溶劑，不溶于水，不易揮發(fā)，60℃以上易分解，主要從黃花蒿中提取。近年來(lái)又發(fā)覺(jué)青蒿素具有較強(qiáng)的抗腫瘤作用，某科研小組按如下步驟進(jìn)行了相關(guān)試驗(yàn)：①?gòu)狞S花蒿中提取青蒿素；②將等量癌細(xì)胞分別接種到4組培育瓶中，相宜條件下培育24h后除去上清液；③向4組培育瓶中分別加入等量含2μmol/L、4μmol/L、8μmol/L、16μmol/L青蒿素的培育液，相宜條件下接著培育；④72h后統(tǒng)計(jì)并計(jì)算各組的細(xì)胞增殖抑制率?；卮鹣铝袉?wèn)題：(1)提取青蒿素時(shí)不宜運(yùn)用水蒸氣蒸餾法，緣由是____________________________；依據(jù)青蒿素____________________的特點(diǎn)，可采納有機(jī)溶劑萃取的方法，現(xiàn)有四氯化碳(沸點(diǎn)76.5℃)和乙醚(沸點(diǎn)34.5℃)兩種溶劑，應(yīng)選用________作為萃取劑，不選用另外一種的理由是____________________________。(2)萃取青蒿素的過(guò)程應(yīng)采納________加熱；加熱時(shí)常在加熱瓶口安裝回流冷凝裝置，目的是____________________。(3)科研小組進(jìn)行上述②～④步驟試驗(yàn)的目的是_______________________。步驟③中須要設(shè)置比照組，比照組的處理方法為_(kāi)______________________?！敬鸢浮?1)青蒿素不易揮發(fā)，不能隨水蒸氣蒸餾出來(lái)(或水蒸氣蒸餾法適用于蒸餾揮發(fā)性物質(zhì)，而青蒿素不易揮發(fā))易溶于有機(jī)溶劑乙醚青蒿素在60℃以上易分解，應(yīng)選擇低沸點(diǎn)的萃取劑(2)水浴防止有機(jī)溶劑揮發(fā)(3)探究青蒿素的濃度與細(xì)胞增殖抑制率的關(guān)系在另一培育瓶中加入等量的不含青蒿素的培育液，相宜條件下接著培育【解析】(1)水蒸氣蒸餾法適用于蒸餾揮發(fā)性物質(zhì)，而青蒿素不易揮發(fā)，所以提取青蒿素時(shí)不宜運(yùn)用水蒸氣蒸餾法；依據(jù)青蒿素易溶于有機(jī)溶劑的特點(diǎn)，可采納有機(jī)溶劑萃取的方法；依據(jù)題意可知，青蒿素在60℃以上易分解，因此應(yīng)選擇低沸點(diǎn)的乙醚作為萃取劑。(2)由于有機(jī)溶劑易燃，所以萃取青蒿素的過(guò)程應(yīng)采納水浴加熱；為防止有機(jī)溶劑揮發(fā)，加熱時(shí)可在加熱瓶口安裝回流冷凝裝置。(3)上述②～④步驟試驗(yàn)的目的是探究青蒿素的濃度與細(xì)胞增殖抑制率的關(guān)系；步驟③中缺少空白比照組，須要設(shè)置一組加入等量的不含青蒿素的培育液，在相宜條件下接著培育從而確定青蒿素的作用。1．山楂酒具有活血、補(bǔ)氣、健脾等功效，對(duì)復(fù)原體力、增加精力、促進(jìn)食欲有較顯著的功效。以下為山楂酒制作的有關(guān)過(guò)程。分析回答以下問(wèn)題。主要原料山楂設(shè)備榨汁機(jī)、發(fā)酵桶、地下室、大鍋等制作過(guò)程山楂經(jīng)充分水洗，用榨汁機(jī)榨汁。將山楂汁倒入發(fā)酵桶中，經(jīng)7～10d的發(fā)酵，即成果酒。將經(jīng)過(guò)發(fā)酵的果酒濾出，倒入發(fā)酵容器內(nèi)，儲(chǔ)存在地下室里，進(jìn)行30d的再發(fā)酵。并接著放置在陰涼的地下室進(jìn)行陳釀，陳釀期間，要堅(jiān)持倒桶(換桶)，并保持酒桶常滿，即得原汁山楂酒。(1)請(qǐng)寫(xiě)出山楂酒制作的原理(用反應(yīng)式表示)____________________。(2)與山楂酒發(fā)酵有關(guān)的微生物主要是________，在山楂酒制作中菌種的主要來(lái)源是____________________。(3)發(fā)酵的溫度應(yīng)當(dāng)在________℃，在發(fā)酵過(guò)程中要先通氣后密封，先通氣的緣由是_________________________。(4)檢驗(yàn)是否產(chǎn)生酒精可在________條件下，用____________試劑檢測(cè)。(5)若要進(jìn)一步制作果醋，應(yīng)在發(fā)酵液中加入__________菌種?！敬鸢浮浚?）C6H12O6eq\o(→,\s\up7())2C2H5OH＋2CO2酵母菌山楂果皮上的野生酵母菌18～25酵母菌在有氧條件下大量繁殖，增加菌種數(shù)量酸性重鉻酸鉀醋酸菌【解析】(1)山楂酒的制作須要微生物無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精，反應(yīng)式為C6H12O6eq\o(→,\s\up7())2C2H5OH＋2CO2。(2)與山楂酒發(fā)酵有關(guān)的微生物主要是酵母菌，菌種的主要來(lái)源是山楂果皮攜帶的野生的酵母菌。(3)20℃左右最適合酵母菌生長(zhǎng)繁殖，所以發(fā)酵的溫度應(yīng)當(dāng)在18～25℃，先通氣后密封，緣由是酵母菌在有氧條件下大量繁殖，增加菌種數(shù)量。(4)酒精可使酸性的重鉻酸鉀試劑由橙色變?yōu)榛揖G色。(5)果醋發(fā)酵的菌種為醋酸菌。2．微生物合成的油脂是制備生物柴油的新型原料。圖為產(chǎn)油脂芽孢桿菌篩選的流程，其中B平板上的5個(gè)菌落是初篩得到的芽孢桿菌，C為B平板上菌落的原位影印，利用蘇丹黑B可使脂類(lèi)物質(zhì)呈黑色的特性，對(duì)C進(jìn)行染色，得到結(jié)果D?；卮鹣铝袉?wèn)題：（1）圖中對(duì)土壤菌液進(jìn)行系列梯度稀釋的目的是_________。（2）若要使菌落能在A平板上生長(zhǎng)，下列培育基組分中最合理的是__________（填“甲”“乙”“丙”），緣由是___________。表2培育基組分：甲葡萄糖、牛肉膏、蛋白脈、NaCl、瓊脂、水乙葡萄糖、蔗糖、NaCl、瓊脂、水丙葡萄糖、牛肉膏、NaCl、蔗糖、水（3）培育基配制完成后須要馬上進(jìn)行滅菌，常用的滅菌方法為_(kāi)__________。（4）依據(jù)D的染色結(jié)果，可推斷B平板中的___________（填圖中數(shù)字）是產(chǎn)油脂芽孢桿菌的菌落。（5）將B平板中的產(chǎn)油脂芽孢桿菌的單菌落進(jìn)一步純化培育得到E。將E中的菌落接種到試管F的固體斜面培育基上，經(jīng)培育后放入4℃冰箱中臨時(shí)保藏，以后每3-6個(gè)月須要轉(zhuǎn)接一次。這種方法不適合長(zhǎng)期保藏菌種的緣由是___________。如需長(zhǎng)期保存可采納___________的方法。【答案】（1）土壤菌數(shù)量較多，菌液濃度較大，如干脆接種，菌落密集，在固體培育基表面無(wú)法形成單個(gè)菌落（2）甲培育基甲含有碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽這幾類(lèi)養(yǎng)分物質(zhì)，且加入了瓊脂作為凝固劑，可以達(dá)到試驗(yàn)效果（3）高壓蒸汽滅菌法（4）3（5）菌種簡(jiǎn)單污染或產(chǎn)生變異甘油管藏【解析】（1）因土壤菌數(shù)量較多，菌液濃度較大，如干脆接種，菌落密集，在固體培育基表面無(wú)法形成單個(gè)菌落，所以要對(duì)土壤菌液進(jìn)行系列梯度稀釋。（2）蛋白胨供應(yīng)的主要養(yǎng)分是氮源和維生素。培育基甲含有碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽這幾類(lèi)養(yǎng)分物質(zhì)，且加入了瓊脂作為凝固劑，可以達(dá)到試驗(yàn)效果；培育基乙不含蛋白胨（氮源），不合理；培育基丙不含凝固劑（瓊脂），無(wú)法形成固體培育基，無(wú)法在培育基表面形成菌落。（3）培育基配制完成后須要馬上進(jìn)行滅菌，常用的滅菌方法為高壓蒸汽滅菌法。（4）蘇丹黑B將脂類(lèi)染成黑色，而C又是B平板上菌落的原位影印，比照試驗(yàn)結(jié)果可知，平板B中的3是產(chǎn)油脂芽孢桿菌的菌落。（5）該種低溫臨時(shí)保藏菌種的方法，簡(jiǎn)單污染或產(chǎn)生變異，如需長(zhǎng)期保存，可在溫度為-20℃下采納甘油管藏的方法。【點(diǎn)評(píng)】本題考查無(wú)菌操作技術(shù)、培育基、菌落的培育及篩選的相關(guān)學(xué)問(wèn)。關(guān)鍵要求考生駕馭試驗(yàn)的原理及基本試驗(yàn)操作技能。3．腐乳是我國(guó)傳統(tǒng)的發(fā)酵豆制品，已有近千年的歷史。腐乳的生產(chǎn)過(guò)程一般分為前酵期（培菌）和后酵期（裝瓶后常溫條件下放置，自然發(fā)酵3個(gè)月），采集各時(shí)段腐乳坯樣品，測(cè)定相關(guān)物質(zhì)含量如圖1所示?；卮鹣铝袉?wèn)題：（1）毛霉產(chǎn)生的酶能將酪蛋白分解而產(chǎn)生透亮圈，將三種純化的毛霉菌種接種在酪蛋白培育基中得到三種單菌落甲、乙、丙，其菌落直徑平均值分別為3.2cm、2.8cm、2.9cm，菌落與透亮圈一起的直徑平均值分別為3.7cm、3.5cm、3.3cm。應(yīng)選擇菌落____________（填“甲”、“乙”或“丙”）作為產(chǎn)蛋白酶活力高的毛霉候選菌。（2）裝瓶腌制腐乳時(shí)，在接近瓶口的表面要將鹽鋪厚一點(diǎn)，緣由是。鹵水中的香辛料和料酒（食用酒）的作用是_________________________。（3）據(jù)圖1分析從“白塊”到“晾曬2d”，腐乳坯中游離氨基酸含量改變的最主要緣由是______________________________________；加鹽腌制(腌坯)之后，腐乳坯中的游離氨基酸含量下降的緣由___________________________________________（答出兩點(diǎn)）。請(qǐng)預(yù)料后酵期發(fā)酵瓶中的游離氨基酸的改變是___________?！敬鸢浮浚?）乙（1分）（2）瓶口處被雜菌污染的可能性較大，加多點(diǎn)鹽可以有效抑制微生物的生長(zhǎng)抑菌防腐和調(diào)味（3）毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶將蛋白質(zhì)分解成氨基酸，使氨基酸含量增加食鹽使毛霉的酶活性降低；加鹽使豆腐中的水分析出，部分氨基酸隨之析出（2分）增加4．2024年世界性的新型冠狀病毒肺炎大流行，為了能更好地對(duì)病毒綻開(kāi)相關(guān)探討，科學(xué)家須要分別和培育病毒。如圖是其流程示意圖：（1）將采集到的病毒樣本進(jìn)行稀釋?zhuān)鐖D所示，用____________________吸取100μL的病毒樣本，注入到①中，使樣本與稀釋液充分混勻，依次操作后，④號(hào)試管中病毒濃度是樣本的____________________倍。（2）分別病毒標(biāo)本須要無(wú)菌操作的緣由____________________。是依據(jù)病毒的特征，培育體系A(chǔ)中必需含有____________________，病毒才能繁殖。（3）為鑒定B是目標(biāo)病毒，需進(jìn)行____________________檢測(cè)或抗原抗體檢測(cè)，兩種檢測(cè)的原理分別是____________________和____________________。（4）試驗(yàn)結(jié)束后，對(duì)全部廢棄物必需進(jìn)行____________處理?！敬鸢浮浚?）移液管10?8（2）防止其它微生物對(duì)試驗(yàn)造成影響活細(xì)胞（3）核酸檢測(cè)每一種生物的核酸都具有特異性，都有特定的核苷酸序列，都遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則抗原、抗體的特異性結(jié)合（4）滅菌【解析】（1）識(shí)圖分析可知，該圖將采集到的病毒樣本進(jìn)行稀釋操作，操作過(guò)程中利用移液管吸取100μL的病毒樣本，注入到①中，使樣本與稀釋液充分混勻，每次操作后樣本稀釋了100倍，因此依次操作后，④號(hào)試管中病毒被稀釋了108，因此病毒的濃度是樣本的10?8倍。（2）進(jìn)行微生物的培育過(guò)程中，做到無(wú)菌操作是培育的關(guān)鍵。因此為了防止其它微生物（雜菌）對(duì)試驗(yàn)造成的影響，分別病毒標(biāo)本須要無(wú)菌操作。病毒全部營(yíng)寄生生活，病毒必需在活的宿主細(xì)胞內(nèi)才能進(jìn)行表現(xiàn)誕生命活動(dòng)，因此培育體系A(chǔ)中必需含有活的宿主細(xì)胞，病毒才能繁殖。（3）鑒定病毒可以采納核酸檢測(cè)法或抗原抗體檢測(cè)，核酸檢測(cè)的原理是每種生物的核酸都具有特異性的特點(diǎn)，且都遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，因此依據(jù)核酸中核苷酸特定的序列進(jìn)行檢測(cè)，抗原抗體檢測(cè)法的原理是：依據(jù)抗體可以和抗原進(jìn)行識(shí)別并發(fā)生特異性結(jié)合的原理。（4）試驗(yàn)結(jié)束后，對(duì)全部廢棄物必需進(jìn)行滅菌處理，防止病毒帶出試驗(yàn)室對(duì)生物以及人類(lèi)健康等造成影響?！军c(diǎn)評(píng)】本題以新型冠狀病毒為背景，考查微生物的分別和培育的過(guò)程，要求學(xué)生駕馭稀釋涂布平板法的操作過(guò)程和留意事項(xiàng)，把握微生物培育過(guò)程中操作的要點(diǎn)和目的，理解病毒的特點(diǎn)和鑒定的方法及原理，識(shí)記滅菌的意義，能夠結(jié)合題意和所學(xué)是學(xué)問(wèn)點(diǎn)解決問(wèn)題。5．植物芳香油氣味芳香，自然的芳香可使人精神處于最舒適的狀態(tài)。此外，植物芳香油還可預(yù)防傳染病、對(duì)抗細(xì)菌、病毒、霉菌等。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1)植物芳香油是從植物中提取的特有的芳香物質(zhì)，提取時(shí)的原料可取自植物的______________________________(答出兩種即可)，以及莖、地下莖、樹(shù)干、樹(shù)皮等器官，主要成分是萜類(lèi)化合物及其衍生物。植物芳香油通常用________________________(答出兩種即可)等方法提取。(2)玫瑰精油是高級(jí)香水的主要成分，因?yàn)槠鋉___________________________，故常采納水蒸氣蒸餾法提取，原理是利用________將其攜帶出來(lái)，形成油水混合物。此法在提取的過(guò)程中，對(duì)收集到的液體冷卻后加入NaCl，其目的是____________________________。(3)對(duì)于植物中另一些有效成分，如胡蘿卜素之類(lèi)，可以依據(jù)其____________________的特點(diǎn)，采納萃取法提取。萃取的效率主要取決于________________________。提取的胡蘿卜素粗品可通過(guò)________法進(jìn)行鑒定。【答案】（1）花、葉、根、果實(shí)、種子蒸餾、壓榨、萃取化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，難溶于水，易溶于有機(jī)溶劑，能隨水蒸氣一同蒸餾水蒸氣促使油水混合物分層易溶于有機(jī)溶劑萃取劑的性質(zhì)和運(yùn)用量紙層析【解析】(1)提取植物芳香油的材料可以是植物的花、葉、根、果實(shí)、種子等，常用的植物芳香油提取方法有蒸餾法、壓榨法和萃取法等。(2