DB41T 2371-2022 豬冷凍精液生產(chǎn)技術(shù)規(guī)范

41I 2 2 2 2 3 3 4 4 5 6 8本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定1豬冷凍精液生產(chǎn)技術(shù)規(guī)范查、精液冷凍、解凍品質(zhì)檢測、凍精包裝、儲存及運NY/TNY/T經(jīng)特殊方法處理經(jīng)超低溫冷凍并可在液氮中（-196℃)長期保存的精液。簡稱凍精。24基本要求4.1種公豬4.2原精液應(yīng)符合GB/T25172—2020中5.2.4.3操作環(huán)境4.4采集量4.5環(huán)境精液采集室、精液檢測室的環(huán)境條件應(yīng)符合NY/T2077—2011中7.4～74.6儀器設(shè)備4.6.1儀器設(shè)備的配置應(yīng)滿足豬冷凍精液生產(chǎn)的要求(生產(chǎn)儀器設(shè)備見附錄A4.6.3計量儀器（電子天平、恒溫箱等）、超純水儀、恒溫?zé)崤_、高壓鍋等應(yīng)定期校準(zhǔn)或維護保養(yǎng)。5稀釋液配制5.1配制稀釋液用水應(yīng)為新鮮無菌的蒸餾水、重蒸水或超純水。稀釋液所用化學(xué)試劑應(yīng)為分析純以上5.2使用商品稀釋液應(yīng)嚴(yán)格按照使用說明書的要求操作。精液品質(zhì)檢查應(yīng)按照GB/T23238—2021附錄A中的3經(jīng)過質(zhì)量評估合格的精液，用等溫預(yù)熱且與精液溫度一致的預(yù)稀釋液（配制見附錄B）按照1:1~1:1.2比例稀釋，稀釋后的精液于室溫（25℃)靜置1h，轉(zhuǎn)入17℃恒溫冰箱，平衡2h～3h。），用17℃預(yù)冷的冷藏保護液(Ⅰ液配制見附錄燒杯中，于4℃冰箱或低溫操作柜中緩慢降溫至4℃~5℃（2.5h～3h）。按1:1加入冷凍保護液(Ⅱ液配制見附錄B）混勻，在4℃下繼續(xù)平衡0.5h～1h,然后在低溫操作柜中進行灌裝。在灌裝的同時開啟程序冷凍儀，選定冷凍曲線，待冷凍儀溫度穩(wěn)定在初始溫度（4℃~5℃)后，將液氮倒入深度50cm以上的專用冷凍箱預(yù)冷10min,保持冷凍支架上的細(xì)管在液氮面之上2cm,熏），紗布袋（每袋6管在紗布袋或拇指管上標(biāo)記或貼上打印好的標(biāo)迅速置于50℃水浴中解凍16s，擦干表面水分后，釋液（配制見附錄B）作10倍稀釋。在37℃水浴中維持10min～15min，子活力，如活力合格，即可將凍精轉(zhuǎn)入液氮罐中長期保外包裝上標(biāo)明生產(chǎn)場、品種、種公豬號、生儲存方法應(yīng)符合GB/T30396—2013中的要求，容器質(zhì)量應(yīng)符合GB/T5458—2049.1精子活力9.2精子畸形率≤1600個/mL，按GB/T41435溫度測量，0℃~60℃細(xì)管精液冷凍，控溫范圍30℃~180℃6），主要成分：葡萄糖、檸檬酸、檸檬酸鈉、HEPES鈉、Tris、EDTA-2Na、碳酸氫鈉、半胱取2L量杯和1L加厚采精袋各3個，每個量杯套一將250mL蛋黃加入到1L基礎(chǔ)營養(yǎng)液中，為冷藏液，使用前置于恒溫箱內(nèi)17取I液276mL置于500mL的燒杯中，用注射器抽取18mL豬冷凍試劑C和移液器吸取6mL豬冷凍試劑稱取適量（2mL/0.5mL冷凍細(xì)管）豬凍精試劑E（解凍7C.1.1離心前應(yīng)準(zhǔn)確稱量離心管凈重（g）,做v0——濃縮后精子體積，單位為mL；w1——離心瓶加精子重，單位為g