DB41T 1103-2015 太行菊組織培養(yǎng)技術(shù)規(guī)程_第1頁
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DB41河南省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布I1太行菊組織培養(yǎng)技術(shù)規(guī)程有機母液按100倍配制。使用時再稀釋100倍，配好的母液放置于棕色瓶保分別溶解FeSO4·7H2O和Na2-EDTA，加熱并不斷攪拌，使完全溶解，冷卻后，將2種溶液混合，再用蒸溜水加至所需容積，按100倍配制。使用時再稀釋100倍，配好的母液放置于棕色瓶保存于4℃冰箱2），f)稍微冷卻后，用精密試紙或酸度計調(diào)整pH至5.7～5.8，分裝；4組織培養(yǎng)4.1培養(yǎng)材料及消毒4.1.1培養(yǎng)材料的選擇和確定4.1.2消毒滅菌將種子用自來水沖洗2h后，在超凈工作臺內(nèi)用75%酒精漂洗15s，后用2%的次氯酸鈉浸泡8min（加2），用無菌濾紙把種子表面附著的水分吸干凈，然后在在超凈工作臺內(nèi)用鑷子將種子接種到1/2MS培養(yǎng)基上，置入溫度為20℃~25℃光照培養(yǎng)室內(nèi)誘導(dǎo)種子萌發(fā)，待種子發(fā)芽長出2片真葉，進行光照處理，光照強度2500lx，光照時間14h/d，培養(yǎng)30d4.3誘導(dǎo)及分化34.4增殖繼代培養(yǎng)4.5培養(yǎng)環(huán)境4.6生根培養(yǎng)4.6.1生根苗的選擇從組培苗中切取生長健壯、葉色正常、葉片舒4.6.2誘導(dǎo)生根在超凈工作臺內(nèi)，將無根苗上長至4cm以上的再生芽從基部切下，接種到生根培養(yǎng)基上，誘導(dǎo)根原基的形成，黑暗培養(yǎng)3d～5d。后將其接種到無激素MS培養(yǎng)基誘導(dǎo)根的伸長，光照培養(yǎng)205.1煉苗3d，再打開瓶蓋，加入3mL800倍多菌后逐漸降低濕度，每天葉面噴水2～3次，當(dāng)試管苗根4MS培養(yǎng)基成分見表A.1。硝酸鉀（KNO3)硝酸銨（NH4NO3)磷酸二氫鉀（KH2PO4)硼酸（H3BO3)乙二胺四乙酸二鈉（Na2-EDTA)2鹽酸硫胺素（VB1)鹽酸吡哆醇（V

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