新城疫病毒D90株對人乳腺癌細(xì)胞系BT549體外作用的研究的任務(wù)書

新城疫病毒D90株對人乳腺癌細(xì)胞系BT549體外作用的研究的任務(wù)書一、任務(wù)背景新城疫病毒是一種單股RNA病毒，屬于冠狀病毒科。新型冠狀病毒（COVID-19）的爆發(fā)讓人們對疫病毒進(jìn)行更加深入的了解和研究。近年來的研究發(fā)現(xiàn)，某些病毒可用于治療癌癥。新城疫病毒D90株對腫瘤細(xì)胞并不具有明顯的致死作用，但可以激活機(jī)體的免疫系統(tǒng)，幫助機(jī)體抵抗腫瘤。人乳腺癌是女性最常見的惡性腫瘤，如果新城疫病毒D90株具有對其體外作用的可能，將對減輕人類癌癥的疾病負(fù)擔(dān)具有重要意義。二、目的及目標(biāo)本研究旨在探究新城疫病毒D90株對人乳腺癌細(xì)胞系BT549體外作用的影響。通過對新城疫病毒D90株和人乳腺癌細(xì)胞系BT549之間的相互作用進(jìn)行實(shí)驗(yàn)和分析，從而探討其可能的作用機(jī)制。研究目標(biāo)如下：1.分離和培養(yǎng)人乳腺癌細(xì)胞系BT549，構(gòu)建體外模型。2.測定新城疫病毒D90株在不同濃度下的毒性效應(yīng)。3.檢測新城疫病毒D90株是否可以感染BT549細(xì)胞。4.觀察新城疫病毒D90株是否具有抑制BT549細(xì)胞生長的能力。5.評估新城疫病毒D90株對BT549細(xì)胞的凋亡作用。三、任務(wù)內(nèi)容在研究過程中，需要完成以下任務(wù)：1.細(xì)胞培養(yǎng)：分離和培養(yǎng)人乳腺癌細(xì)胞系BT549。2.病毒感染：用不同的病毒濃度感染BT549細(xì)胞，并對其進(jìn)行觀察。3.細(xì)胞生長率檢測：用MTT法檢測BT549細(xì)胞的生長情況，并確定新城疫病毒D90株是否具有抑制細(xì)胞生長的能力。4.細(xì)胞凋亡檢測：利用AnnexinV-FITC/PI雙染法檢測BT549細(xì)胞的凋亡情況，評估新城疫病毒D90株的凋亡作用。四、實(shí)驗(yàn)方法1.細(xì)胞培養(yǎng)：用DMEM高糖培養(yǎng)基培養(yǎng)人乳腺癌細(xì)胞系BT549，添加10%的胎牛血清和1%的抗生素。在5%CO2孵育箱中放置細(xì)胞，并定期更換培養(yǎng)基。2.病毒感染：用1,10和100MOI的新城疫病毒D90株感染BT549細(xì)胞，并以未感染細(xì)胞為對照組。在不同時(shí)間內(nèi)，利用倒置顯微鏡及酶聯(lián)免疫吸附檢測法觀察病毒感染情況。3.細(xì)胞生長率檢測：在病毒感染后48小時(shí)，分別加入MTT試劑，在孵育箱中孵育4小時(shí)。隨后，將培養(yǎng)基吸走，并用DMSO溶解MTT形成的晶體，最后用微孔板閱讀器測量OD值，確定BT549細(xì)胞的生長率。4.細(xì)胞凋亡檢測：采用AnnexinV-FITC/PI雙染法檢測BT549細(xì)胞是否凋亡。使用FITC標(biāo)記的AnnexinV染色，使用PI染色區(qū)分細(xì)胞的階段，進(jìn)一步確定細(xì)胞的凋亡程度。五、預(yù)期結(jié)果通過實(shí)驗(yàn)方法的操作和結(jié)果分析，本研究假設(shè)可能得到以下預(yù)期結(jié)果：1.新城疫病毒D90株在不同濃度下對BT549細(xì)胞的毒性效應(yīng)呈現(xiàn)劑量依賴的趨勢。2.新城疫病毒D90株可以成功感染BT549細(xì)胞，但并不具有明顯的致死作用。3.新城疫病毒D90株對BT549細(xì)胞的生長抑制作用具有一定的程度。4.新城疫病毒D90株的應(yīng)用可能誘導(dǎo)BT549細(xì)胞的凋亡。六、意義和應(yīng)用該項(xiàng)研究探討了新城疫病毒D90株對人乳腺癌細(xì)胞系BT549體外作用的影響，為了解腫瘤