EB病毒BNLF2b抗體檢測試劑盒（磁微?；瘜W(xué)發(fā)光法）（CSZ2200140）

申請人名稱：廈門萬泰凱瑞生物技術(shù)有限公司 3 3 3 3 4 4 6 10 13一、申請人名稱一、產(chǎn)品概述（一）產(chǎn)品主要組成成分25mL），含EB病毒BNLF2b抗原（P85）包被的磁微粒，磷酸鹽緩沖液，防腐劑ProClin300。25mL含吖啶酯標(biāo)記的EB病毒BNLF2b抗原（P85磷酸鹽緩沖液，防腐劑ProClin300。校準(zhǔn)品1：1mL×1瓶，不含BNLF2b抗體，檢測值<0.40COI，含磷酸鹽緩沖液，含防腐劑ProClin300。含磷酸鹽緩沖液，含防腐劑ProClin300。（二）產(chǎn)品預(yù)期用途本產(chǎn)品用于體外定性檢測人血清和血漿樣本中EB病毒本產(chǎn)品可為EB相關(guān)的鼻咽癌診斷提供輔助參考信息。EB病毒（EBV）屬皰疹病毒γ亞科淋巴淺隱病毒屬，具有嗜淋巴細(xì)胞和上皮細(xì)胞的特性，為雙鏈DNA病毒，在自然界廣泛分布，人群普遍易感。EB病毒感染與多種疾病有關(guān)，如傳染性單核細(xì)胞增多癥、非霍奇金淋巴瘤、鼻咽癌等。EB病毒在宿主細(xì)胞內(nèi)有兩種感染方式，增殖感染和潛伏感染，因其基因活動殼抗原（VCA）、核抗原（NA1）等。有研究表明，EB病毒裂解早期表達的BNLF2b蛋白(P85)與鼻咽癌的發(fā)生密切相關(guān)，BNLF2b基因在鼻咽癌組織中高水平轉(zhuǎn)錄。（三）產(chǎn)品包裝規(guī)格（四）產(chǎn)品檢驗原理該試劑采用雙抗原夾心法原理定性檢測人血清和血漿中的BNLF2b抗體（P85-Ab）。首先，將樣本、BNLF2b抗原（P85）包被的磁微粒、吖啶酯標(biāo)記的BNLF2b抗原（P85）混合，形成“BNLF2b抗原包被的磁微粒-BNLF2b抗體-吖啶酯標(biāo)記的BNLF2b抗原”復(fù)合物。其次，洗滌去除未與磁微粒結(jié)合的物質(zhì)后，加入預(yù)激發(fā)液和激發(fā)液。復(fù)合物可發(fā)出發(fā)光儀可檢測強度的光信號，以相對發(fā)光值（RLU）表示。光信號強度與樣本中BNLF2b抗體（P85-Ab）的量成正比，儀器通過校準(zhǔn)結(jié)果即可自動計算出樣本中BNLF2b抗體（P85-Ab）的S/CO（COI）值。二、臨床前研究概述（一）主要原材料1.主要原材料的選擇主要原材料包括EB病毒BNLF2b抗原、磁微粒、吖啶酯和EB病毒BNLF2b抗體（鼠均為外購原料。申請人通過功能性試驗，確定了最佳原材料和供應(yīng)商，制定了各主要原材料的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)并經(jīng)檢驗合格。2.企業(yè)參考品和質(zhì)控品設(shè)置情況企業(yè)參考品包括企業(yè)陽性參考品、陰性參考品、檢測限參考品和重復(fù)性參考品。企業(yè)陽性參考品由BNLF2b抗體為陽性的不同分期鼻咽癌患者血清或血漿制備。企業(yè)陰性參考品由BNLF2b抗體為陰性的血清或血漿樣本制備，包含不同類風(fēng)濕因子、自身抗體、EB病毒感染各個階段的其他各種抗體、鼻咽部良性疾病患者樣本、其它皰疹病毒、其它腫瘤患者樣本。企業(yè)檢測限參考品由BNLF2b抗體陽性血清或血漿樣本制備，并設(shè)有檢出限濃度。企業(yè)重復(fù)性參考品由BNLF2b抗體陽性血清或血漿樣本制備，且包含檢出限附近濃度。所用企業(yè)參考品均已采用合適的方法進行了濃度確認(rèn)。申請人對申報產(chǎn)品的配套質(zhì)控品進行了單獨注冊申報，并已獲得注冊證書（國械注準(zhǔn)20243401090）。（二）生產(chǎn)工藝及反應(yīng)體系研究申請人對生產(chǎn)工藝和反應(yīng)體系的研究包括：抗原包被磁微粒試劑制備工藝的研究、吖啶酯標(biāo)記抗原試劑制備工藝的研究、樣本加樣量的研究和試劑各組份加樣量的研究等，通過一系列研究，最終確定了最佳的生產(chǎn)工藝及反應(yīng)體系。（三）分析性能評估分析性能包括適用樣本類型、檢出限、包容性、準(zhǔn)確度、精密度、分析特異性（交叉反應(yīng)、干擾試驗）、鉤狀效應(yīng)等。申請人提交了在有效運行的質(zhì)量管理體系下生產(chǎn)的三批產(chǎn)品在適用機型上的性能評估資料。針對適用樣本類型，申請人對同一病例血清、血漿樣本（含弱陽性樣本）進行了比對研究，血漿樣本抗凝劑類型包括EDTA、肝素鋰和檸檬酸鈉等不同抗凝類型，結(jié)果顯示血清和血漿檢測結(jié)果符合率為100%。檢出限研究中，申請人使用不同的樣本分別在適用機型上進行了檢出限的確定與驗證，結(jié)果為抗體滴度為1:30的樣本，按照1:30的倍數(shù)進行稀釋，陽性檢出率為95%以上。包容性研究中，申請人對來源于不同地區(qū)的10份樣本進行了驗證，結(jié)果顯示申報產(chǎn)品的檢測包容性符合要求。準(zhǔn)確度研究中，申請人采用380例含不同鼻咽癌分期的確診樣本進行研究，結(jié)果顯示申報產(chǎn)品對不同分期鼻咽癌確診病例的檢測靈敏度為86.5%至96.4%。精密度研究中，申請人使用包含陰性、弱陽性和中強陽性樣本在內(nèi)的不同濃度的樣本，分別評價了產(chǎn)品的批內(nèi)、批間、實驗室內(nèi)和實驗室間精密度，結(jié)果顯示精密度均小于10%。干擾試驗中，申請人對常見的內(nèi)源性干擾如血紅蛋白、甘油三酯、膽紅素、類風(fēng)濕因子、生物素、HAMA、ANA、AMA進行了評估，結(jié)果顯示血紅蛋白含量小于500mg/dL、甘油三酯含量小于3000mg/dL、膽紅素含量小于40mg/dL、RF含量小于含量小于929.43ng/ml時均不會對申報產(chǎn)品的檢測結(jié)果產(chǎn)生干EAIgG、EBVNA1IgG、CMVIgG、IgM、VZVIgG、HHV-6IgG、RSVIgM、ADVIgM、RubellaIgG、TPAb、HDVIgG、HEVIgG、B19IgG、總IgG、總IgM、抗雙鏈DNA抗體、抗環(huán)瓜氨酸肽抗體、抗SSB抗體、抗SSA抗體、抗核小體抗體、抗Sm抗體等陽性樣本進行了評價，結(jié)果顯示均不會產(chǎn)生交叉反應(yīng)。申請人另外對鼻咽部良性疾病如鼻出血、慢性鼻竇炎、腺樣體肥大和其它腫瘤病例樣本如胃癌、食管癌、肝癌、肺癌、直腸癌、喉癌、宮頸癌、結(jié)腸惡性腫瘤、卵巢惡性腫瘤、乳腺癌、前列腺癌和淋巴瘤樣本進行評估，結(jié)果顯示不會影響申報產(chǎn)品的檢測結(jié)果。鉤狀效應(yīng)研究中，申請人對抗體滴度為1:1057、1：1456和1：1237的BNLF2b抗體陽性樣本進行了梯度稀釋研究，結(jié)果顯示不存在鉤狀效應(yīng)。（四）陽性判斷值的研究申請人對518例含不同分期的鼻咽癌確診病例和781例非鼻咽癌病例（包含EB病毒感染引起的其它疾病，如傳染性單核細(xì)胞增多癥、淋巴瘤、慢性EB病毒感染等，以及癥狀相似的其它鼻咽部疾病樣本）進行了檢測，通過ROC曲線分析確定了試劑陽性判斷值。申請人進一步采用206例不同分期的鼻咽癌確診病例樣本和186例非鼻咽癌病例樣本進行了陽性判斷值的驗證，結(jié)果符（五）穩(wěn)定性研究6、9、12、15個月，采用企業(yè)參考品進行檢測，結(jié)果顯示試劑在2~8℃條件下可保存12個月。此外，申請人對申報產(chǎn)品的機載穩(wěn)定性、校準(zhǔn)品開瓶穩(wěn)定性和試劑運輸穩(wěn)定性及適用樣本的穩(wěn)定性進行了研究，結(jié)果顯示，產(chǎn)品性能均可滿足產(chǎn)品說明書聲稱的要求。三、臨床評價概述申請人在中山市人民醫(yī)院、梧州市紅十字會醫(yī)院、華中科技大學(xué)同濟醫(yī)學(xué)院附屬同濟醫(yī)院、中山大學(xué)腫瘤防治中心共四家臨床機構(gòu)完成了臨床試驗。采用申報產(chǎn)品與臨床參考標(biāo)準(zhǔn)進行比較研究，入組人群為疑似鼻咽癌相關(guān)癥狀的人群，其中，鼻咽癌采用細(xì)胞或組織病理確診，其它疾病根據(jù)相關(guān)診療指南等綜合診斷確診。樣本類型為血清和血漿。臨床試驗共納入有效病例3291例，其中鼻咽癌病例1400例（覆蓋鼻咽癌所有分期），非鼻咽癌的其他病例1891例（包括其他易產(chǎn)生干擾的腫瘤、各種良性疾病病例及其他干擾樣本）。試驗結(jié)果顯示：本產(chǎn)品的臨床靈敏度為93.3%（95%CI：總符合率為95.7%（95%CI：94.9%，96.3%)。上述結(jié)果顯示試驗體外診斷試劑具有較好的臨床靈敏度和特異度，滿足臨床使用此外，臨床試驗還納入500例疑似鼻咽癌患者進行血清和血漿的同源比對研究。試驗結(jié)果顯示：陽性符合率為99.7%99.9%），總符合率為99.6%（95%CI：98.6%，99.9%）。上述結(jié)果顯示試驗體外診斷試劑的血清和血漿兩種樣本類型具有良好的一致性。綜上所述，臨床試驗設(shè)計滿足體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導(dǎo)原則要求，臨床試驗結(jié)果顯示本產(chǎn)品的臨床性能滿足技術(shù)審評要求。四、產(chǎn)品受益風(fēng)險判定本產(chǎn)品根據(jù)YY/T0316-2016醫(yī)療器械風(fēng)險管理對醫(yī)療器械產(chǎn)品的安全風(fēng)險分析方式，對本產(chǎn)品進行風(fēng)險分析。本試劑用于體外定性檢測人血清和血漿樣本中的EB病毒BNLF2b抗體。本產(chǎn)品可為EB相關(guān)的鼻咽癌診斷提供了一種更多的輔助參考信息。（二）風(fēng)險評估申請人對已知危險（源）進行風(fēng)險評價，按照風(fēng)險可接受準(zhǔn)則判斷每個危險（源）的風(fēng)險是否達到可接受水平，對合理可行降低的風(fēng)險、不經(jīng)過風(fēng)險/收益分析既判定為不可接受的風(fēng)險采取控制措施，并對具體措施進行實施驗證，同時重新對采取措施后的風(fēng)險進行估計，確認(rèn)其風(fēng)險水平是否可接受。為保證產(chǎn)品使用安全，基于對主要剩余風(fēng)險的規(guī)避，需要在產(chǎn)品說明書中提示以下信息：（1）本試劑的檢測結(jié)果僅供臨床參考，對患者的臨床診治應(yīng)結(jié)合癥狀、體征、病史、其他實驗室檢查及治療反應(yīng)等情況綜合考慮。（2）產(chǎn)品說明書中介紹了該產(chǎn)品檢驗方法的局限性及使用本申報項目為境內(nèi)第三類醫(yī)療器械產(chǎn)品注冊。申請人的注家市場監(jiān)督管理總局令第48號）等相關(guān)醫(yī)療器械法規(guī)與配套規(guī)章，經(jīng)對申請人提交的注冊申報資料進行系統(tǒng)評價，申報產(chǎn)品符合安全性、有效性的要求，符合現(xiàn)有認(rèn)知水平，建議準(zhǔn)予注附件：產(chǎn)品說明書EB病毒BNLF2b抗體檢測試劑盒（磁微粒化學(xué)發(fā)光法）說明書100人份/盒、100人份/盒（含校準(zhǔn)品）、3EB病毒（EBV）屬皰疹病毒γ亞科淋巴淺隱病毒屬，人群普遍易感。EB病毒感染與多種疾病有關(guān)，如傳染性單核細(xì)胞增多癥、非霍奇金淋巴瘤、鼻咽癌等。EB病毒感染方式，增殖感染和潛伏感染，因其基因活動狀況的改變而表高水平轉(zhuǎn)錄。），），），注意：每批校準(zhǔn)品的具體濃度可能會有不同，不同批號試劑盒中的各試劑不可廈門優(yōu)邁科醫(yī)學(xué)儀器有限公司生產(chǎn)的全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀，型號：Caris2001.按照通常的采樣技術(shù)收集樣本，并按照標(biāo)準(zhǔn)3.本試劑檢測樣本為人血清和血漿。含有EDTA、枸櫞酸鈉（4.發(fā)光儀不具備識別樣本類型的能力，操作人員應(yīng)當(dāng)5.特殊情況下需手工處理患者樣本時必須小心，建議使用一次性移液管或6.可檢測溶血（血紅蛋白含量<500mg/dL）、黃疸（膽紅素含量<40mg/dL）、脂血（甘油三酯含量<307.若樣本中有肉眼可見的顆粒物質(zhì)、纖維蛋9.若離心后的樣本上覆蓋著脂質(zhì)層，那么可以將樣本轉(zhuǎn)移至樣本杯或新試管12.樣本在血塊或紅細(xì)胞不存在的情況下，室溫（15-30℃)放置不宜超過1天，2～8℃放置不宜超過7天，-20±5℃可放置3個月。14.樣本在運輸時，盡量保證樣本低溫運輸。裝運前，建議將樣本從血塊、1.首次將試劑盒裝載到發(fā)光儀上時，需要將試劑1瓶中的試劑混勻，使在儲存和運輸期間可能沉淀下來的磁微粒重新懸浮。2.校準(zhǔn)品從2～8℃取出后應(yīng)平衡至室3.執(zhí)行校準(zhǔn)命令：執(zhí)行校準(zhǔn)命令信4.檢查樣本杯中樣本量，保證每次檢測前樣本杯中的樣本量保持在200μL以上。如果使用的是采血管，血清/血漿的液體量l添加預(yù)激發(fā)液和激發(fā)液各100μL），或其它需要進行重新校準(zhǔn)的情況，需重新進行校準(zhǔn)。檢測過程應(yīng)保證校定的控制限內(nèi)，若失控，每個檢測機構(gòu)必須采取相應(yīng)的糾正措施。質(zhì)控值的建立對于質(zhì)控品的獲取，推薦使用廠家提供的配套質(zhì)控品，各檢測機構(gòu)可自制質(zhì)控品或使用合適的第），1.00COI，采用206例不同分期的鼻咽癌確診病例樣本和1863.本試劑的檢測結(jié)果僅供臨床參考，對患者的臨床診治應(yīng)結(jié)合癥狀、體征、病史、其1.本試劑可用于人血清和血漿樣本的檢測，用于唾液、尿液3.在近幾個月內(nèi)接受過輸血或其他血液制品在BNLF2b抗體，應(yīng)結(jié)合臨床癥狀或病原體接1.4重復(fù)性：用企業(yè)重復(fù)性參考品進行檢測，10次檢測結(jié)果應(yīng)均為陽性3.采用來源于不同地區(qū)的樣本對試劑的最低檢出限和重復(fù)性進4.依據(jù)CLISEP05-A3在兩度評估實驗?zāi)Ｐ偷脑u估結(jié)果如下表。IgG）、人皰疹病毒6型（HHV-6IgG、弓形蟲（ToxoIgG、ToxoIgM）、其它腫瘤患者樣本(胃癌、食管癌、肝癌、肺癌、直腸肽抗體、抗SSB抗體、抗SSA抗體9.試劑檢測380例含不同鼻咽癌分期的確診樣本，結(jié)果顯示申報產(chǎn)品對不同分期鼻咽癌異度為97.4%，總符合率為95.7%。此外，臨床試驗還進行血清和血漿的同源比對研究，1.本試劑盒僅用于體外診斷，不得用于其他2.不能使用過期的試劑盒；不同批次的試劑盒不能混用3.EB病毒BNLF2b抗體（P85-Ab）的測定因?qū)嶒灧椒?、?.本試劑內(nèi)含有的某些組分對極少數(shù)過敏體質(zhì)者可能會引起過敏反代表試劑盒向