《藥物分析與檢驗(yàn)技術(shù)》課件-無(wú)菌檢查

無(wú)菌檢查法藥典規(guī)定凡是直接進(jìn)入人體血液循環(huán)系統(tǒng)、皮下組織、肌肉或者作用于燒（燙）傷、潰瘍等部位的藥品或要求無(wú)菌的材料，必須進(jìn)行【無(wú)菌檢查】。制劑包括各種注射劑、眼用及外傷用制劑、植入劑、可吸收的止血?jiǎng)┑取o(wú)菌檢查法系用于檢査藥典要求無(wú)菌的藥品、生物制品、醫(yī)療器具、原料、輔料及其他品種是否無(wú)菌的一種方法，可用于判斷供試品是否被微生物污染。常用的無(wú)菌檢查方法將藥品或材料，在嚴(yán)格的無(wú)菌操作條件下，接種于適合各種微生物生長(zhǎng)的不同培養(yǎng)基中，置于不同的適宜溫度下培養(yǎng)一定的時(shí)間，逐日觀察微生物的生長(zhǎng)情況，并結(jié)合陽(yáng)性和陰性對(duì)照試驗(yàn)的結(jié)果，判斷供試品是否染菌。包括薄膜過(guò)濾法和直接接種法兩種方法。一、培養(yǎng)基的種類硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基、胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基、中和或滅活用培養(yǎng)基、0.5%葡萄糖肉湯培養(yǎng)基（用于硫酸鏈霉素等抗生素的無(wú)菌檢查）、酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基、沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基、沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。7種硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基主要用于厭氧菌的培養(yǎng)，也可用于需氧菌的培養(yǎng)。胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基用于真菌和需氧菌的培養(yǎng)。一、培養(yǎng)基的種類二、培養(yǎng)基的適用性檢查（一）無(wú)菌性檢查每批培養(yǎng)基隨機(jī)取不少于5支（瓶），置各培養(yǎng)基規(guī)定的溫度培養(yǎng)14天，

應(yīng)無(wú)菌生長(zhǎng)。（二）靈敏度檢查用以證明在作無(wú)菌檢查時(shí)，所加的菌種能夠在培養(yǎng)基中生長(zhǎng)良好。菌種：金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌、生孢梭菌、白念珠菌和黑曲霉。三、方法適用性試驗(yàn)確認(rèn)所采用的方法適合于該產(chǎn)品的無(wú)菌檢查，排除供試品是否具有抑細(xì)菌和抑真菌作用，避免假陰性結(jié)果。操作方法包括薄膜過(guò)濾法和直接接種法。結(jié)果判斷：與對(duì)照管比較

如含供試品各容器中的試驗(yàn)菌均生長(zhǎng)良好，則說(shuō)明供試品的該檢驗(yàn)量在該檢驗(yàn)條件下無(wú)抑菌作用或其抑菌作用可以忽略不計(jì)；

如含供試品的任一容器中的試驗(yàn)菌生長(zhǎng)微弱、緩慢或不生長(zhǎng)，則說(shuō)明供試品的該檢驗(yàn)量在該檢驗(yàn)條件下有抑菌作用，需消除供試品的抑菌作用，并重新進(jìn)行方法適用性試驗(yàn)。消除供試品抑菌作用的方法：增加沖洗量、增加培養(yǎng)基的用量、使用中和劑或滅活劑、更換濾膜品種等。四、無(wú)菌檢查法（一）檢驗(yàn)數(shù)量及檢驗(yàn)量“批出廠產(chǎn)品及生物制品的原液和半成品最少檢驗(yàn)數(shù)量表”“上市抽驗(yàn)樣品的最少檢驗(yàn)數(shù)量表”“供試品的最少檢驗(yàn)量表”四、無(wú)菌檢查法（二）對(duì)照試驗(yàn)1陽(yáng)性對(duì)照：應(yīng)根據(jù)供試品特性選擇陽(yáng)性對(duì)照菌。陽(yáng)性對(duì)照管培養(yǎng)72小時(shí)內(nèi)應(yīng)生長(zhǎng)良好。陽(yáng)性對(duì)照試驗(yàn)用以證明微生物確實(shí)可在應(yīng)用的試驗(yàn)條件下生長(zhǎng)。

陽(yáng)性對(duì)照試驗(yàn)用于確認(rèn)試驗(yàn)結(jié)果是否為假陰性。四、無(wú)菌檢查法（二）對(duì)照試驗(yàn)不同特性的供試品陽(yáng)性對(duì)照菌無(wú)抑菌作用及抗革蘭氏陽(yáng)性菌為主金黃色葡萄球菌抗革蘭氏陰性菌為主大腸埃希菌抗厭氧菌的供試品生孢梭菌抗真菌的供試品白色念珠菌四、無(wú)菌檢查法（二）對(duì)照試驗(yàn)2陰性對(duì)照：陰性對(duì)照試驗(yàn)用于確認(rèn)試驗(yàn)結(jié)果是否為假陽(yáng)性。也就是確認(rèn)無(wú)菌試驗(yàn)的環(huán)境、無(wú)菌操作及試驗(yàn)相關(guān)材料的無(wú)菌性，且對(duì)微生物生長(zhǎng)及存活無(wú)影響。陰性對(duì)照不得有菌生長(zhǎng)。四、無(wú)菌檢查法（二）對(duì)照試驗(yàn)反復(fù)使用全封閉式薄膜過(guò)濾器薄膜過(guò)濾器（三聯(lián)不帶泵）四、無(wú)菌檢查法（二）對(duì)照試驗(yàn)3檢查方法：無(wú)菌檢查法包括薄膜過(guò)濾法和直接接種法。薄膜過(guò)濾法直接接種法四、無(wú)菌檢查法（二）對(duì)照試驗(yàn)薄膜過(guò)濾法開放式薄膜過(guò)濾法操作四、無(wú)菌檢查法（二）對(duì)照試驗(yàn)薄膜過(guò)濾法開放式薄膜過(guò)濾法操作四、無(wú)菌檢查法（二）對(duì)照試驗(yàn)直接接種法培養(yǎng)及觀察培養(yǎng)基按規(guī)定的溫度，培養(yǎng)14日逐日觀察并記錄新鮮培養(yǎng)物或劃線接種培養(yǎng)培養(yǎng)液涂片，染色，鏡檢判斷是否有菌渾濁五、無(wú)菌檢查法結(jié)果判斷1陽(yáng)性對(duì)照管應(yīng)生長(zhǎng)良好，陰性對(duì)照管不得有菌生長(zhǎng)。否則，試驗(yàn)無(wú)效。2若供試品管均澄清，或雖顯渾濁但經(jīng)確證無(wú)菌生長(zhǎng)，判供試品符合規(guī)定。3若供試