動物實驗的基本操作方法

動物實驗的基本操作方法

一、動物實驗與實驗動物二、動物實驗前準備

三、實驗動物的抓取固定與編號標記方法

四、實驗動物的隨機分組方法

五、實驗動物被毛的去除方法六、實驗動物給藥途徑和方法七、實驗動物用藥量的確定及計算方法八、實驗動物的麻醉九、實驗動物采血方法十、急性動物實驗中常用的手術(shù)方法十一、實驗動物的急救措施十二、實驗動物的處死方法目錄在醫(yī)學教學、科研和醫(yī)療工作中，不論是從事基礎醫(yī)學還是臨床醫(yī)學或預防醫(yī)學，都需要用實驗動物來進行各種實驗。通過對動物實驗的觀察、分析，來研究需要解決的問題，動物實驗已成為研究工作中必不可少的重要手段。動物實驗方法是多種多樣的，在醫(yī)學的各個領域內(nèi)都有其不同的應用，其中一些基本方法都是共同性的，如動物的選擇、抓取、固定、麻醉、脫毛、給藥、采血、采尿、急救、處死、尸檢等。一、動物實驗一、動物實驗分類細胞實驗組織實驗器官實驗1.動物實驗(按機體水平不同分）無損傷整體實驗有損傷整體實驗亞細胞實驗離體實驗整體實驗2.動物實驗(按實驗時間長短分)急性實驗（2天以內(nèi)）亞急性實驗（1～4周）慢性實驗（2～6個月或更長時間眼眶靜脈叢采血4.③飲水水質(zhì)應符合國家規(guī)定的生活飲水衛(wèi)生標準；當實驗進行中因麻醉過量、大失血、過強的創(chuàng)傷、窒息等各種原因，而使動物血壓急劇下降甚至測不到。動物實驗(按機體水平不同分）⑶采血用的注射器和試管必須保持清潔干燥；1%，應注射多少ml？藥物吸收速率與給藥途徑密切相關，一般而言，吸收速率的大小為：靜脈注射>呼吸吸入>肌肉注射>皮下注射>口服>直腸>皮膚。物種來源于SPF動物或無菌動物。（1）直接計算法

即按：七、實驗動物用藥量的確定及計算方法④具備親代雙親的特點，應用范圍大。③工作人員需更換滅菌工作服、鞋帽、口罩等后工作；二、實驗動物的抓取方法(二)按攜帶微生物分類

1.近交系(inbredstrain)

生理學的動物實驗方法病理生理學的動物實驗方法藥理學的動物實驗方法病理解剖、組織學動物實驗方法微生物、免疫學的動物實驗方法一、動物實驗分類3.動物實驗(按不同學科分)實驗動物分類

(一)按基因遺傳學分類近交系(inbredstrain)封閉群(closedcolony)突變系(mutantstrain)雜交群(hybridstock)(二)按攜帶微生物分類普通動物(CV)---一級動物清潔動物(CL)---二級動物SPF級動物(SPF)---三級動物無菌動物(GF)---四級動物一、實驗動物(一)按基因遺傳學分類

1．近交系(inbredstrain)

是指連續(xù)20代以上兄妹交配(BXS，brother-sistermating)或親子交配(PXO，Parent-offspringmating)培育而成的動物品系。

常見的近交系動物：

①普通近交系

②重組近交系

③同源突變近交系

④同源導入近交系一、實驗動物

近交系動物的特點：

①基因型相同，表現(xiàn)型一致，近交系數(shù)大于99％；

②對受試物反應一致，實驗結(jié)果重復性好，可比性強；

③遺傳學背景明確；

④抵抗力差，對營養(yǎng)及飼養(yǎng)管理條件要求高；

⑤不同品系具有各自明顯的特性。

一、實驗動物2．封閉群(closedcolony)

它是指一個不從外界引入新的血緣，采用非近親交配方式進行繁殖一定代次的實驗動物種群。又稱遠交系(outbredstock)。

常見的封閉群有兩類：

(1)近交系封閉群：由近交系種群采用非同胞交配至少連續(xù)繁殖在4代以上的群體稱近交系封閉群。

(2)非近交系封閉群：以非近親交配方式在一定群體內(nèi)連續(xù)隨機繁殖15代以上的群體稱非近交系封閉群。一、實驗動物

封閉群動物具有以下特點：

①群體遺傳特異性保持相對穩(wěn)定；

②個體間具有雜合性，存在一定的差異；

③與人類群體遺傳異質(zhì)性相似；

④繁殖能力較強；

⑤生產(chǎn)成本低，生產(chǎn)量大，供應充足。

一、實驗動物3．突變系(mutantstrain)

突變系(mutantstrain)是指由于遺傳基因發(fā)生突變而表現(xiàn)出某種遺傳缺陷的品系動物。

突變系動物的共同特點是：

①突變系動物因其突變多為病態(tài)；

②其生活能力較弱；

③飼養(yǎng)管理要求嚴格，繁殖保種較為困難；

④適用于某一疾病機制研究。一、實驗動物

4．雜交群(hybridstock)

雜交群(hybridstock)又稱異系雜交，它是由兩個不同的近交品系雜交而繁殖的第一代動物，又稱為雜交一代（簡稱F1雜交動物）。

雜交群動物的特點：

①它不具有育種功能；

②雜交F1代動物遺傳和表現(xiàn)均一性好；

③生活適應能力較近交系動物強；

④具備親代雙親的特點，應用范圍大。一、實驗動物(二)按攜帶微生物分類

1.普通動物（conventionalanimals，CVA），又稱一級動物。

特點：

①不帶有動物烈性傳染病和人獸共患病病原體;

②對實驗的反應性較差，實驗結(jié)果不可靠，僅可供教學示范及作為預備試驗之用。

飼養(yǎng)要求：

①飼養(yǎng)于普通環(huán)境；②全價飼料飼養(yǎng)；

③飲水水質(zhì)應符合國家規(guī)定的生活飲水衛(wèi)生標準；

④飼料與墊料要消毒，室內(nèi)溫度與濕度能人工控制；

⑤能防止蚊蠅等昆蟲及野鼠進入;

⑥飼養(yǎng)環(huán)境應定期清潔消毒。

物種來源于清潔動物或SPF動物。

一、實驗動物2.清潔動物（cleananimals，CLA）

又稱二級動物，除不帶有普通動物應排除的病原體外，還不應攜帶對動物危害大和對科學實驗干擾大的病原體。

飼養(yǎng)要求：

①必須飼養(yǎng)于半屏障環(huán)境中或屏障環(huán)境中；

②飼料、飲水、墊料、籠具等均須消毒；

③工作人員需更換滅菌工作服、鞋帽、口罩等后工作；

④飼養(yǎng)環(huán)境必須能控制溫度、濕度、光照強度和光照時間。

物種來源于SPF動物或無菌動物。一、實驗動物3.SPF動物(specificpathogenfreeanimals,SPFA)

又稱三級動物，除不帶有普通動物、清潔動物應排除的病原體外，還應排除潛在感染或條件性致病的病原體，以及對科學實驗干擾大的病原體。

飼養(yǎng)要求：

①必須飼養(yǎng)于屏障系統(tǒng)環(huán)境中；

②飼料、飲水、墊料、籠具等必須滅菌；

③操作人員必須嚴格執(zhí)行操作規(guī)程；

④保種最好飼養(yǎng)于隔離器中。

物種來源于無菌動物或悉生動物。一、實驗動物4.無菌動物(germfreeanimals，GFA)

又稱四級動物，指采用當前手段無法檢出一切其他生命體的動物。

飼養(yǎng)要求：

①必須飼養(yǎng)于隔離的無菌環(huán)境；

②飼料、飲水、籠具必須嚴格滅菌，確保無菌；

③飼料中的營養(yǎng)成分必須齊全，滿足無菌動物的

需要，特別是維生素類營養(yǎng)物質(zhì)。

物種來源于剖腹產(chǎn)或無菌卵的孵化。一、實驗動物實驗動物選擇

(一)動物種屬的選擇

選擇原則：

1.相似性原則

2.特殊性原則

3.標準化原則

4.經(jīng)濟性原則一、實驗動物1.相似性原則

相似性原則是指利用動物與人類生命現(xiàn)象（如機能、代謝、結(jié)構(gòu)及疾病特點等)的相似性來選擇實驗動物。

例如：

燒傷研究模型動物-小型豬

因為小型豬的皮膚組織結(jié)構(gòu)與人類相似，其上皮再生、皮下脂肪層、燒傷后的內(nèi)分泌及代謝等也類似人體。

自發(fā)性高血壓模型動物-SHR大鼠2.特殊性原則

特殊性原則是指利用不同種系實驗動物機體存在的特殊結(jié)構(gòu)或某些特殊反應選擇解剖、生理特點符合實驗目的和要求的動物。

例如：

熱源試驗-家兔

嘔吐試驗-家犬、猴和貓

過敏性試驗-豚鼠

耳毒性試驗-豚鼠

觀察切除甲狀旁腺后的生理現(xiàn)象-犬3.標準化原則

標準化實驗動物主要是指遺傳背景明確，具有已知菌叢和模型性狀顯著且生物學特征穩(wěn)定的動物。

例如：

許多突變品系動物具有與人類相似的疾病或缺損。

4.經(jīng)濟性原則

經(jīng)濟性原則是指盡量選用容易獲得、價格便宜和容易飼養(yǎng)的動物。

常用動物種屬：

①嚙齒類動物：小鼠、大鼠、地鼠、豚鼠

特點：繁殖周期短，具多胎性，飼養(yǎng)容易，遺傳和微生物控制方便，經(jīng)濟。

②非嚙齒類動物：狗、家兔、豬。

③非人靈長類動物：猴、猩猩等實驗動物選擇

(二)動物個體的選擇

1.年齡（根據(jù)試驗目的與試驗周期選擇）

2.體重

3.性別（根據(jù)受試物用途）

4.生理及健康狀況一、實驗動物一、實驗動物一、實驗動物一、實驗動物一、實驗動物健康實驗動物基本標志1．動物的購入購入或領取實驗動物時，實驗人員應向供應部門索取所用動物相應等級的由國家主管部門所頒發(fā)的質(zhì)量合格證書，動物的遺傳背景資料、動物微生物檢查資料及動物年齡和健康等方面的資料。若是購入或領取清潔級以上實驗動物，應采用帶有空氣過濾膜的無菌運輸罐或帶過濾帽的籠盒運輸，并嚴格檢查其密封狀況。

二、動物實驗前準備2.動物外觀健康檢查主要內(nèi)容：①皮毛：有無光澤、出血、干燥；②眼：有無眼屎、流淚、白內(nèi)障、角膜損傷等；③耳：有無外傷、耳殼曲折、中耳炎等；④四肢：有無彎曲、脫臼、外傷、關節(jié)炎；⑤肛門：有無下痢、血便、脫肛等。二、動物實驗前準備3.動物飼養(yǎng)室及飼養(yǎng)器具準備飼養(yǎng)室面積應根據(jù)所購入動物的數(shù)量來確定。飼養(yǎng)動物的器具等，應在動物購入前準備好。墊料、飼料應按購入動物數(shù)量準備。各籠箱的編號及卡片、飼喂動物所用器材，如給餌器、糞便托盤、搬運車、臺秤、飼料桶、電源插板等也應準備放好。動物飼養(yǎng)室的環(huán)境應根據(jù)所計劃使用動物的微生物控制級別來進行準備，屬于屏障系統(tǒng)的應調(diào)整好送排風系統(tǒng)、空氣凈化系統(tǒng)，控制好溫度、濕度、風速、噪聲等環(huán)境因素。動物飼養(yǎng)室在啟用前，應對設施、籠具及用具等統(tǒng)一進行徹底消毒。二、動物實驗前準備

正確的抓取固定動物，是為了不損害動物健康，不影響觀察指標，并防止被動物咬傷，保證實驗順利進行。抓取固定動物的方法依實驗內(nèi)容和動物類而定。三、實驗動物的抓取與編號（一）小鼠抓取固定方法（二）大鼠的抓取固定方法（三）蛙類的抓取固定方法（四）豚鼠的抓取固定方法（五）兔的抓取固定方法（六）狗的抓取固定方法二、實驗動物的抓取方法二、實驗動物的抓取方法大、小鼠抓取方法步驟：

1.帶上帆布手套，用右手拇指和食指捏住鼠尾巴中部將鼠提起，放在飼養(yǎng)盒蓋上。

2.用左手拇指和食指迅速、準確地捏住鼠的兩耳后、頸背部的皮膚，將鼠提起。3.對大鼠而言，當大鼠向前爬行時，用左手食指和中指夾住大鼠頸部，同時拇指和無名指滑向其左右腋下，分開前肢，拿起動物反轉(zhuǎn)為仰臥位，即可進行實驗操作。二、實驗動物的抓取方法豚鼠的抓取二、實驗動物的抓取方法家兔的抓取方法二、實驗動物的抓取方法家兔抓取步驟：

1.用右手把兔的兩耳拿在手心并抓住頸后部皮膚，把兔提起。

2.然后用左手托住兔的臀部。二、實驗動物的抓取方法比格狗照射固定架二、實驗動物的抓取方法馴服動物的固定

動物在實驗前常常需要作適當?shù)姆纸M，那么就要將其標記，使各組加以區(qū)別。標記的方法很多，良好的標記方法應滿足標號清晰、耐久、簡便、適用的要求。常用的標記法有染色、耳緣剪孔、烙印、號牌等方法。三、實驗動物編號標記方法（一）顏料涂染

這種標記方法在實驗室最常使用，也很方便。使用的顏料一般有：3-5%苦味酸溶液（黃色）2%硝酸銀溶液（咖啡色）0.5%中性品紅（紅色）

煤焦油的酒精溶液(黑色)標記時用毛筆或棉簽蘸取上述溶液，在動物體的不同部位涂上斑點，以示不同號碼。編號原則：先左后右，從上而下。三、實驗動物編號標記方法顏色被毛涂擦標記法（二）烙印法用刺數(shù)鉗在動物耳上刺上號碼，然后用棉簽蘸著溶在酒精中的黑墨在刺號上加以涂抹，烙印前最好對烙印部位預先用酒精消毒。三、實驗動物編號標記方法（三）號牌法

用金屬制的牌號固定于實驗動物的耳上，大動物可系于頸上。對猴、狗、貓等大動物有時可不做特別標記，只記錄它們的外表和毛色即可。三、實驗動物編號標記方法

動物實驗時，常常需要將選擇好的實驗動物，按研究需要分成若干個組，分組時為了避免人為的因素影響，常應用隨機數(shù)字表進行完全隨機化的分組。四、實驗動物的隨機分組方法1.將實驗單位隨機分成兩組設有小鼠14只，試用隨機數(shù)字表將其分成兩組。先將小鼠依次編為1、2、3……14號，然后任意從隨機數(shù)字表的某一行某一列的數(shù)字開始抄錄14個數(shù)，編排如下（見下表），現(xiàn)令單數(shù)代表A組，雙數(shù)代表B組。四、實驗動物的隨機分組方法普通動物(CV)---一級動物用左手拇指和食指迅速、準確地捏住鼠的兩耳后、頸背部的皮膚，將鼠提起。所以有條件時，最好同時用幾個劑量作實驗，以便迅速獲得關于藥物作用的較完整的資料。犬為20次/分鐘，每次100ml/kg(即2000ml/kg/分鐘)。物種來源于清潔動物或SPF動物。五、實驗動物被毛的去除方法3．化學藥品可參考化學結(jié)構(gòu)相似的已知藥物，特別是化學結(jié)構(gòu)和作用都相似的藥物的劑量。先將小鼠依次編為1、2、3……14號，然后任意從隨機數(shù)字表的某一行某一列的數(shù)字開始抄錄14個數(shù)，編排如下（見下表），現(xiàn)令單數(shù)代表A組，雙數(shù)代表B組。腎上腺素具有增強心肌收縮力，使心肌收縮幅度增大與加速房室傳導速度、擴張冠狀動脈、增強心肌供血、供氧及改善心肌代謝、刺激高位及低位心臟起搏點等作用。腹主動脈采血8.如以狗為例：6個月以上的狗給藥量為1份時，3-6個月的給1/2份，45-89日1/4份，20-44日的給1/8份，10-19日的給1/16份。①皮毛：有無光澤、出血、干燥；心臟采血6.動物外觀健康檢查主要內(nèi)容：37，故家兔用藥量為0.動物編號1234567891011121314隨機數(shù)目5790120207234737173154080188歸組ABBBAAAAAABBAB隨機數(shù)字表：eg.從第15行第6列開始選取14個數(shù)，如遇重復數(shù)字則剔除第2個繼續(xù)往后選取。

結(jié)果列入A組的動物有8只，列入B組的動物有6只。如要使兩組相等，須將A組減少一只，劃入B組。應把哪一只小鼠劃入B組，仍可用隨機數(shù)字表，在上述抄錄的14個數(shù)后面再抄錄一個數(shù)字為63，此數(shù)以8除之，因為歸入A組的小鼠有8只，故以8除，得余數(shù)7。于是把第7個A（即編寫為第10號的小鼠）劃給B組。四、實驗動物的隨機分組方法A組15678913B組23410111214經(jīng)過這樣調(diào)整，兩組小鼠的分配如下：四、實驗動物的隨機分組方法

動物的被毛常能影響實驗操作和結(jié)果的觀察，因此實驗中常需去除或剪短動物的被毛。

除毛的方法有剪毛、拔毛和脫毛三種。五、實驗動物被毛的去除方法1.剪毛：固定動物后，用粗剪刀剪去所需部位的被毛。需注意以下幾點：⑴把剪刀貼緊皮膚剪，不可用手提起被毛，以免剪破皮膚；⑵依次剪毛，不要亂剪；⑶剪下的毛集中放在一個盛水的容器內(nèi)，勿遺留在手術(shù)區(qū)和兔臺周圍，以保證手術(shù)野的清潔和防止注射器等夾毛。五、實驗動物被毛的去除方法2.拔毛：兔耳緣靜脈注射或取血時以及給大、小白鼠作尾靜脈注射時，需用拇指、食指將局部被毛拔去，以利操作。3.脫毛：脫毛系指用化學藥品脫去動物的被毛，適用于無菌手術(shù)野的準備以及觀察動物局部皮膚血液循環(huán)和病理變化。五、實驗動物被毛的去除方法常用脫毛劑的配方：1.適用于家兔、大白鼠、小白鼠等小動物的脫毛配方⑴硫化鈉3g、肥皂粉1g，淀粉7g，加水適量調(diào)成糊狀。⑵硫化鈉8g、淀粉7g、糖4g、甘油5g、硼砂1g，加水75ml。⑶硫化鈉8g，溶于100ml水中。2.適用于狗等大動物的脫毛配方硫化鈉10g、生石灰15g，溶于100ml水內(nèi)，此配方適用于狗等大動物的脫毛。五、實驗動物被毛的去除方法

使用以上各種脫毛劑，都應事先剪短被毛，以節(jié)省脫毛劑，并減少對皮膚的刺激反應，應用時用棉球蘸脫毛劑，在所需局部涂一薄層，2-3分鐘后，用溫水洗去脫落的被毛，以紗布擦干局部，涂一層油脂即可。五、實驗動物被毛的去除方法

給藥的途徑和方法是多種多樣的，可根據(jù)實驗目的、實驗動物種類和藥物劑型等情況確定。六、實驗動物給藥途徑和方法（一）皮下注射（二）皮內(nèi)注射：可見皮膚表面鼓起一小皮丘。（三）肌肉注射（四）腹腔注射（五）靜脈注射（六）淋巴囊注射（七）經(jīng)口給藥（八）其它途徑給藥1．呼吸道給藥2．皮膚給藥3．脊髓腔內(nèi)給藥4．小腦延髓池給藥5．腦內(nèi)給藥6．直腸內(nèi)給藥7．關節(jié)腔內(nèi)給藥六、實驗動物給藥途徑和方法皮下注射腹腔注射靜脈注射小鼠的灌胃給藥注射途徑小鼠大鼠豚鼠兔狗腹腔0.2-1.01-32-55-105-15肌肉0.1-0.20.2-0.50.2-0.50.5-1.02-5靜脈0.2-0.51-21-53-105-15皮下0.1-0.50.5-1.00.5-21-33-10幾種動物不同給藥途徑的常用注射量（ml）動物名稱項目灌胃皮下注射肌肉注射腹腔注射靜脈注射小白鼠最大給藥量使用針頭1ml9(鈍頭)0.4ml5(1/2)0.4ml5(1/2)1ml5(1/2)0.8ml4大白鼠最大給藥量使用針頭1ml靜脈切開針1ml60.4ml62ml64ml5豚鼠最大給藥量使用針頭3ml靜脈切開針1ml6(1/2)0.5ml6(1/2)4ml75ml5兔最大給藥量使用針頭20ml10號導尿管2ml6(1/2)2ml6(1/2)5ml710ml6貓最大給藥量使用針頭20ml10號導尿管20ml72ml75ml710ml6蛙淋巴囊注射最大注射量1ml/只常用實驗動物的最大給藥量和使用針頭規(guī)格

（一）動物給藥量的確定

在觀察一個藥物的作用時，應該給動物多大的劑量是實驗開始時應確定的一個重要問題。劑量太小，作用不明顯，劑量太大，又可能引起動物中毒致死，可以按下述方法確定動物的給藥劑量：七、實驗動物用藥量的確定及計算方法

1．先用小鼠粗略地探索中毒劑量（如LD50）或致死劑量，然后用小于中毒量的劑量，或取致死量的若干分之一為應用劑量，一般可取1/10-1/5。2．植物藥粗制劑的劑量多按生藥折算。3．化學藥品可參考化學結(jié)構(gòu)相似的已知藥物，特別是化學結(jié)構(gòu)和作用都相似的藥物的劑量。

七、實驗動物用藥量的確定及計算方法

4．確定劑量后，如第一次實驗的作用不明顯，動物也沒有中毒的表現(xiàn)（體重下降、精神不振、活動減少或其他癥狀），可以加大劑量再次實驗。如出現(xiàn)中毒現(xiàn)象，作用也明顯，則應降低劑量再次實驗。在一般情況下，在適宜的劑量范圍內(nèi)，藥物的作用常隨劑量的加大而增強。所以有條件時，最好同時用幾個劑量作實驗，以便迅速獲得關于藥物作用的較完整的資料。如實驗結(jié)果出現(xiàn)劑量與作用強度之間毫無規(guī)律時，則更應慎重分析。七、實驗動物用藥量的確定及計算方法

5．用大動物進行實驗時，開始的劑量可采用給鼠類劑量的1/15～1/2，以后可根據(jù)動物的反應調(diào)整劑量。6．確定動物給藥劑量時，要考慮給藥動物的年齡大小和體質(zhì)強弱。一般說確定的給藥劑量是指成年動物的，如是幼小動物，劑量應減少。如以狗為例：6個月以上的狗給藥量為1份時，3-6個月的給1/2份，45-89日1/4份，20-44日的給1/8份，10-19日的給1/16份。七、實驗動物用藥量的確定及計算方法

7．確定動物給藥劑量時，要考慮因給藥途徑不同，所用劑量也不同，以口服量為100時，灌腸量應為100-200，皮下注射量30-50，肌肉注射量為25-30，靜脈注射量為25。藥物吸收速率與給藥途徑密切相關，一般而言，吸收速率的大小為：靜脈注射>呼吸吸入>肌肉注射>皮下注射>口服>直腸>皮膚。七、實驗動物用藥量的確定及計算方法

2．封閉群(closedcolony)

它是指一個不從外界引入新的血緣，采用非近親交配方式進行繁殖一定代次的實驗動物種群。動物飼養(yǎng)室在啟用前，應對設施、籠具及用具等統(tǒng)一進行徹底消毒。(一)按基因遺傳學分類

1．近交系(inbredstrain)

是指連續(xù)20代以上兄妹交配(BXS，brother-sistermating)或親子交配(PXO，Parent-offspringmating)培育而成的動物品系。A組動物或成人大鼠為50次/分鐘，每次8ml/kg(即400ml/kg/分鐘)；十一、實驗動物的急救措施例如：

燒傷研究模型動物-小型豬

因為小型豬的皮膚組織結(jié)構(gòu)與人類相似，其上皮再生、皮下脂肪層、燒傷后的內(nèi)分泌及代謝等也類似人體。動物飼養(yǎng)室的環(huán)境應根據(jù)所計劃使用動物的微生物控制級別來進行準備，屬于屏障系統(tǒng)的應調(diào)整好送排風系統(tǒng)、空氣凈化系統(tǒng)，控制好溫度、濕度、風速、噪聲等環(huán)境因素。四、實驗動物的隨機分組方法當實驗進行中因麻醉過量、大失血、過強的創(chuàng)傷、窒息等各種原因，而使動物血壓急劇下降甚至測不到。動物飼養(yǎng)室的環(huán)境應根據(jù)所計劃使用動物的微生物控制級別來進行準備，屬于屏障系統(tǒng)的應調(diào)整好送排風系統(tǒng)、空氣凈化系統(tǒng)，控制好溫度、濕度、風速、噪聲等環(huán)境因素。（1）直接計算法

即按：⑤能防止蚊蠅等昆蟲及野鼠進入;

⑥飼養(yǎng)環(huán)境應定期清潔消毒。所以有條件時，最好同時用幾個劑量作實驗，以便迅速獲得關于藥物作用的較完整的資料。動物飼養(yǎng)室的環(huán)境應根據(jù)所計劃使用動物的微生物控制級別來進行準備，屬于屏障系統(tǒng)的應調(diào)整好送排風系統(tǒng)、空氣凈化系統(tǒng)，控制好溫度、濕度、風速、噪聲等環(huán)境因素。（二）實驗動物用藥量的計算方法動物實驗所用的藥物劑量，一般按mg/kg體重或g/kg體重計算，應用時須從已知藥液的濃度換算出相當于每kg體重應注射的藥液量（ml），以便給藥。七、實驗動物用藥量的確定及計算方法

例1：計算給體重1.8kg的家兔靜脈注射20%氨基甲酸乙酯溶液麻醉，按1g/kg的劑量注射，應注射多少ml？解：兔劑量1g/kg，注射液為20％，則氨基甲酸乙酯溶液的注射量應為5ml/kg，現(xiàn)在兔體重為1.8kg，應注射20%氨基甲酸乙酯溶液用量=5×1.8=9ml。七、實驗動物用藥量的確定及計算方法

例2：計算給體重23g的小白鼠，注射鹽酸嗎啡15mg/kg，溶液濃度為0.1%，應注射多少ml？解：小白鼠需嗎啡量為15mg/kg，則0.1%鹽酸嗎啡溶液的注射量應為15ml/kg，現(xiàn)小白鼠體重為23g，應注射0.1%鹽酸嗎啡溶液的用量=15×0.023=0.345ml。七、實驗動物用藥量的確定及計算方法

（三）人與動物及各類動物間藥物劑量的換算方法1．人與動物用藥量換算

人與動物對同一藥物的耐受性相差很大。一般說來，動物的耐受性要比人大，也就是單位體重的用藥量動物比人大。人的各種藥物的用量在很多書上可以查得，但動物用藥量可查的書較少，而且動物用的藥物種類遠不如人用的那么多。七、實驗動物用藥量的確定及計算方法

因此，必須將人的用藥量換算成動物的用藥量。一般可按下列比例換算：人用藥量為1，小白鼠、大白鼠為25-50，兔、豚鼠為15-20，狗、貓為5-10。此外，可以采用人與動物的體表面積計算法來換算。七、實驗動物用藥量的確定及計算方法

各籠箱的編號及卡片、飼喂動物所用器材，如給餌器、糞便托盤、搬運車、臺秤、飼料桶、電源插板等也應準備放好。若是購入或領取清潔級以上實驗動物，應采用帶有空氣過濾膜的無菌運輸罐或帶過濾帽的籠盒運輸，并嚴格檢查其密封狀況。③工作人員需更換滅菌工作服、鞋帽、口罩等后工作；例2：計算給體重23g的小白鼠，注射鹽酸嗎啡15mg/kg，溶液濃度為0.性別（根據(jù)受試物用途）

4.（一）動物給藥量的確定3．脊髓腔內(nèi)給藥4．小腦延髓池給藥淋巴囊注射最大注射量1ml/只例如：已知某藥對小鼠的最大耐受量為20mg/kg（20g小鼠用0.九、實驗動物采血方法九、實驗動物采血方法又稱遠交系(outbredstock)。一般說來，動物的耐受性要比人大，也就是單位體重的用藥量動物比人大。動物實驗時，常常需要將選擇好的實驗動物，按研究需要分成若干個組，分組時為了避免人為的因素影響，常應用隨機數(shù)字表進行完全隨機化的分組。心臟采血6.2．人及不同種類動物之間藥物劑量的換算（1）直接計算法

即按：

七、實驗動物用藥量的確定及計算方法

例：某利尿藥大白鼠灌胃給藥時的劑量為250mg/kg，試粗略估計狗灌胃給藥時可以試用的劑量。解：實驗用大白鼠的體重一般在200g左右，其體表面積（A）為：

七、實驗動物用藥量的確定及計算方法

250mg/kg的劑量如改以mg/m2表示，即為：七、實驗動物用藥量的確定及計算方法

實驗用狗的體重一般在10kg左右，其體表面積（A）為：七、實驗動物用藥量的確定及計算方法

(2)按人與各種動物以及各種動物之間用藥劑量換算已知A種動物每kg體重用藥量，欲估算B種動物每kg體重用藥劑量時，可先查表找出折算系數(shù)(W)，再按下式計算：

B種動物的劑量(mg/kg)=W×A種動物的劑量(mg/kg)七、實驗動物用藥量的確定及計算方法

折算系數(shù)WA組動物或成人小白鼠(20g)大白鼠0.2Kg豚鼠0.4Kg家兔1.5kg貓2.0kg狗12kg人60kgB種動物或成人小白鼠20g1.01.61.62.73.24.89.01大白鼠0.2Kg0.71.01.141.882.33.66.25豚鼠0.4Kg0.610.871.01.652.053.05.55家兔1.5kg0.370.520.61.01.231.762.30貓2.0kg0.300.420.480.811.01.442.70狗12kg0.210.280.340.560.681.01.88人60kg0.110.160.180.3040.3710.5311.0動物與人體的每公斤體重劑量折算系數(shù)表

例如：已知某藥對小鼠的最大耐受量為20mg/kg（20g小鼠用0.4mg），需折算為家兔的用藥量。

解：查A種動物為小鼠，B種動物為兔，交叉點為折算系數(shù)W=0.37，故家兔用藥量為0.37×20mg/kg=7.4mg/kg，1.5kg家兔用藥量為11.1mg。七、實驗動物用藥量的確定及計算方法

(一)常用的麻醉劑1.揮發(fā)性麻醉劑2．非揮發(fā)性麻醉劑3．中藥麻醉劑（二）動物的麻醉方法1．全身麻醉2．局部麻醉八、實驗動物的麻醉麻醉劑動物給藥方法劑量(mg/kg)常用濃度%維持時間戊巴比妥鈉狗、兔靜脈3032-4小時中途加上1/5量，可維持1小時以上，麻醉力強，易抑制呼吸。腹腔40-503大小鼠、豚鼠腹腔40-502硫噴妥鈉狗、兔靜脈15-20215-30分鐘，麻醉力強，宜緩慢注射。大白鼠腹腔401小白鼠腹腔15-201氯醛糖兔靜脈80-10023-4小時，誘導期不明顯大白鼠腹腔502烏拉坦兔靜脈750-1000302-4小時，毒性小，主要適用小動物的麻醉。大小鼠皮下或肌肉800-100020蛙淋巴囊注射0.1ml/100g20-25蟾蜍淋巴囊注射1ml/100g10常用麻醉劑的用法及劑量

采血方法的選擇

主要決定于實驗目的所需血量以及動物種類。1.需血量較少：如檢驗項目紅、白細胞計數(shù)、血紅蛋白的測定，血液涂片以及酶活性微量分析法等，可刺破組織取毛細血管的血。2.需血量較多：靜脈采血。九、實驗動物采血方法采血時要注意：⑴采血場應有充足的光線；室溫夏季最好保持在25-28℃，冬季，15-20℃為宜；⑵采血用具及采血部位一般需要進行消毒；⑶采血用的注射器和試管必須保持清潔干燥；⑷若需抗凝全血，在注射器或試管內(nèi)需預先加入抗凝劑。九、實驗動物采血方法動物品種最大安全采血量(ml)最小致死采血量(ml)小鼠0.20.3大鼠12豚鼠510兔1040狼狗100500獵狗50200猴1560常用實驗動物的最大安全采血量與最小的致死采血量

(一)小鼠、大鼠采血法1.割(剪)尾采血2.鼠尾刺血法3.眼眶靜脈叢采血4.斷頭取血5.心臟采血6.頸動、靜脈采血7.腹主動脈采血8.股動（靜）脈采血九、實驗動物采血方法（二）豚鼠采血法1.耳緣剪口采血2.心臟采血3.股動脈采血4.背中足靜脈取血九、實驗動物采血方法（三）兔采血法1.耳靜脈采血2.耳中央動脈采血3.心臟取血4.后肢脛部皮下靜脈取血九、實驗動物采血方法

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