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PAGEPAGE6課題1微生物的試驗(yàn)室培育(建議用時(shí):30分鐘)考點(diǎn)基本目標(biāo)發(fā)展目標(biāo)1.微生物培育基的種類(lèi)及功能1,2,311,12,13,14,152.無(wú)菌技術(shù)4,5,6,73.制備牛肉膏蛋白胨固體培育基84.純化大腸桿菌的兩種接種方法的比較9,10[基本目標(biāo)]1.不同的微生物對(duì)養(yǎng)分物質(zhì)的需求各不相同。下列有關(guān)一種以CO2為唯一碳源的自養(yǎng)微生物的養(yǎng)分物質(zhì)的描述中,不正確的是()A.氮源物質(zhì)為該微生物供應(yīng)必要的氮元素B.碳源物質(zhì)也是該微生物的能源物質(zhì)C.水是該微生物的養(yǎng)分要素之一D.無(wú)機(jī)鹽是該微生物不行缺少的養(yǎng)分物質(zhì)B解析對(duì)于無(wú)機(jī)碳源CO2來(lái)說(shuō),只能作為碳源物質(zhì)而不能作為能源物質(zhì)。2.自養(yǎng)型微生物與異養(yǎng)型微生物的培育基的主要差別是()A.碳源 B.氮源C.無(wú)機(jī)鹽 D.生長(zhǎng)因子A解析自養(yǎng)微生物能夠利用二氧化碳和水合成有機(jī)物,不利用現(xiàn)成的含碳有機(jī)物,而異養(yǎng)微生物只能利用現(xiàn)成的含碳有機(jī)物,所以它們的培育基的主要差別是碳源不同。3.微生物培育過(guò)程中,肉眼鑒別金黃色葡萄球菌和枯草桿菌的重要依據(jù)是()A.細(xì)菌的大小、形態(tài)、顏色B.菌落的大小、形態(tài)、顏色C.有無(wú)鞭毛D.培育基的不同B解析微生物的鑒別與分別一般要用固體培育基,由于不同微生物在固體培育基上長(zhǎng)出菌落的形態(tài)、顏色等各不相同,所以可以作為鑒別的標(biāo)準(zhǔn)。而一個(gè)細(xì)菌細(xì)胞很小,肉眼無(wú)法看到其顏色、形態(tài)等。4.在微生物的試驗(yàn)室培育中,下列各項(xiàng)操作中不須要在無(wú)菌條件下進(jìn)行的是()A.配制培育基 B.倒平板C.接種 D.培育A解析配制培育基時(shí)不須要無(wú)菌操作,因?yàn)榕渲坪蟮呐嘤氁M(jìn)行高壓蒸汽滅菌。5.以下部位不含有微生物的是()A.洗干凈的臉上B.洗完澡后的皮膚C.刷完牙后的口腔D.灼燒之后的接種環(huán)D解析用清水洗臉、洗澡、刷牙只是起清潔作用,達(dá)不到滅菌效果,只有灼燒過(guò)的接種環(huán)才是真正無(wú)菌的。6.消毒和滅菌是兩個(gè)不同的概念,滅菌是指徹底殺滅微生物使其恒久丟失生長(zhǎng)繁殖的實(shí)力,消毒僅指殺死一部分對(duì)人體有害的病原菌而對(duì)被消毒的物體基本無(wú)害。下列哪些事物適用于消毒處理()①皮膚②飲用水③牛奶④注射器⑤培育皿⑥接種環(huán)⑦培育基⑧果汁⑨醬油⑩手術(shù)刀A.①②③⑧⑨ B.④⑤⑥⑦⑩C.①②④⑤⑥⑧ D.以上全部A解析消毒指用比較溫柔的方法殺死微生物的養(yǎng)分細(xì)胞,適用于那些不耐高溫的液體,如③牛奶、⑧果汁、⑨醬油,這樣可以使其中的養(yǎng)分成分不被破壞;另外對(duì)要求不是很?chē)?yán)格的,如①皮膚、②飲用水,也用消毒的方法處理。而對(duì)于④注射器、⑤培育皿、⑥接種環(huán)、⑦培育基、⑩手術(shù)刀等,必需進(jìn)行滅菌處理。7.金黃色葡萄球菌有很強(qiáng)的致病性,還可能引起食物中毒。下述試驗(yàn)結(jié)束后的做法錯(cuò)誤的是()A.對(duì)接種環(huán)進(jìn)行灼燒處理B.帶菌培育基須經(jīng)加熱后才能倒掉C.帶菌培育基須經(jīng)高壓蒸汽滅菌鍋滅菌后才能倒掉D.接種后雙手須經(jīng)肥皂洗凈,再用70%的酒精棉球擦拭B解析加熱不肯定能完全殺滅金黃色葡萄球菌的孢子和芽孢,所以帶菌培育基須要滅菌,不能加熱后倒掉。8.牛肉膏蛋白胨培育基中需加入瓊脂這一志向的凝固劑,下列關(guān)于瓊脂的說(shuō)法,不正確的是()A.不被所培育的微生物分解利用,對(duì)所培育的微生物無(wú)毒害作用B.在微生物生長(zhǎng)溫度范圍內(nèi)保持固體狀態(tài)C.瓊脂凝固點(diǎn)低,利于微生物的生長(zhǎng)D.瓊脂在滅菌過(guò)程中不會(huì)被破壞,透亮度好,凝固力強(qiáng)C解析在液體培育基中加入凝固劑如瓊脂后,可制成瓊脂固體培育基,它是試驗(yàn)室中最常用的培育基之一。固體培育基中可形成肉眼可見(jiàn)的單個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的子細(xì)胞群體,即菌落,用于微生物的分別、計(jì)數(shù)和菌種鑒定等。瓊脂作為一種志向的凝固劑,是由其性質(zhì)確定的,瓊脂不會(huì)被微生物利用且對(duì)微生物無(wú)毒害作用;只起固化作用,對(duì)微生物的生長(zhǎng)不會(huì)產(chǎn)生作用;在滅菌過(guò)程中不會(huì)被破壞,透亮度好,凝固力強(qiáng);瓊脂在98℃以上可溶解于水,在45℃以下凝固,所以在微生物生長(zhǎng)溫度范圍內(nèi)保持固體狀態(tài)。9.在微生物的試驗(yàn)室培育過(guò)程中,下列關(guān)于平板劃線操作的敘述,正確的是()A.運(yùn)用已滅菌的接種環(huán)、培育皿,操作過(guò)程中不再滅菌B.打開(kāi)含菌種的試管須要通過(guò)火焰滅菌,取出菌種后需立刻塞好棉塞C.將沾有菌種的接種環(huán)快速伸入平板內(nèi),劃三至五條平行線即可D.最終應(yīng)將平板倒置,放入培育箱中培育D解析運(yùn)用已滅菌的接種環(huán)、培育皿,操作過(guò)程中仍要滅菌;打開(kāi)含菌種的試管須要通過(guò)火焰滅菌,取出菌種后含菌種的試管須要再次通過(guò)火焰滅菌后再塞好棉塞;將沾有菌種的接種環(huán)快速伸入平板內(nèi),劃三至五條平行線后灼燒接種環(huán),冷卻后從第一區(qū)劃線末端起先向其次區(qū)域內(nèi)劃線,重復(fù)上述過(guò)程,完成三、四、五區(qū)域內(nèi)的劃線,留意不要將第五區(qū)的劃線與第一區(qū)的相連;為防止皿蓋上的水珠落入培育皿造成污染,應(yīng)將平板倒置,放入恒溫培育箱中培育。10.平板劃線法和稀釋涂布平板法是常用的兩種接種方法。下列相關(guān)敘述中錯(cuò)誤的是()A.平板劃線法要求連續(xù)多劃幾次,且除了第一次劃線外,每一次劃線的起點(diǎn)都是上一次劃線的終點(diǎn)B.除了第一次劃線須要將接種環(huán)灼燒滅菌外,以后的劃線不用滅菌即可劃線C.假如菌液原來(lái)濃度不高,則可以適當(dāng)降低稀釋倍數(shù)D.充分稀釋和連續(xù)劃線的目的都是為了使形成的菌落是由單個(gè)細(xì)菌繁殖而成B解析平板劃線法連續(xù)劃線的目的是降低細(xì)菌的濃度,所以除了第一次劃線外,以后每次劃線的起點(diǎn)都是上一次劃線的終點(diǎn),A項(xiàng)正確;每一次劃線后灼燒的目的是殺死接種環(huán)上殘留的菌種,使每次劃線的菌種都來(lái)自上次劃線末端,B項(xiàng)錯(cuò)誤;稀釋倍數(shù)要依據(jù)菌液的濃度而定,假如菌液的濃度太大,則須要更高的稀釋倍數(shù),否則就可以適當(dāng)降低稀釋的倍數(shù),C項(xiàng)正確;稀釋涂布平板法中的充分稀釋及平板劃線法中的連續(xù)劃線,目的都是為了保證菌落是由單個(gè)細(xì)菌繁殖而成,D項(xiàng)正確。[發(fā)展目標(biāo)]11.下列有關(guān)微生物試驗(yàn)室培育的敘述,不正確的是()A.在熔化瓊脂時(shí),須要限制火力并不斷攪拌,以免發(fā)生焦糊B.灼燒、高壓蒸汽滅菌、紫外線照耀等都屬于無(wú)菌技術(shù)C.樣品中活菌數(shù)量統(tǒng)計(jì)時(shí),接種方法應(yīng)采納劃線法D.用平板培育基培育微生物時(shí),應(yīng)將平板倒過(guò)來(lái)放置C解析瓊脂熔化時(shí)簡(jiǎn)單糊底,須要用玻璃棒不斷攪拌,以免發(fā)生焦糊;灼燒、高壓蒸汽滅菌屬于滅菌,紫外線照耀是常用的消毒方法,都屬于無(wú)菌技術(shù);統(tǒng)計(jì)樣品中活菌數(shù)量時(shí),接種方法應(yīng)采納稀釋涂布平板法;用平板培育基培育微生物時(shí),應(yīng)將平板倒過(guò)來(lái)放置,防止冷凝水污染培育基。12.為了保持菌種的純凈,須要進(jìn)行菌種的保藏,下列有關(guān)敘述不正確的是()A.對(duì)于頻繁運(yùn)用的菌種,可以采納臨時(shí)保藏的方法B.臨時(shí)保藏的菌種一般是接種到試管的斜面培育基上C.臨時(shí)保藏的菌種簡(jiǎn)單被污染或產(chǎn)生變異D.對(duì)于須要長(zhǎng)期保存的菌種,可以采納低溫-4℃保藏的方法D解析對(duì)于須要長(zhǎng)期保存的菌種,可采納甘油管藏法,即在3mL甘油瓶中加入1mL甘油后滅菌,將1mL培育的菌液轉(zhuǎn)移到甘油瓶中,與甘油充分混勻后,放在-20℃的冷凍箱中保存。13.為探究大葉木姜子多糖的抑菌效果,探討人員將下列4種菌分別用無(wú)菌水稀釋成菌懸液,于固體培育基上制成含菌平皿,在平皿上放置經(jīng)不同濃度大葉木姜子多糖溶液浸泡2~3小時(shí)的濾紙片,培育一段時(shí)間后,測(cè)定各供試菌的抑菌圈直徑,結(jié)果如下表。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.金黃色葡萄球菌與另外三種菌的主要區(qū)分是沒(méi)有核膜B.制備含菌平皿可用稀釋涂布平板法或平板劃線法C.每個(gè)濃度每種菌重復(fù)多次試驗(yàn),所得數(shù)據(jù)取平均值D.大葉木姜子多糖對(duì)黑曲霉抑制效果最差B解析金黃色葡萄球菌屬于細(xì)菌,沒(méi)有核膜包被的細(xì)胞核,其余三種微生物都是真菌,A項(xiàng)正確;依據(jù)題干,接種運(yùn)用的是菌懸液,探究的是大葉木姜子多糖的抑菌效果,應(yīng)當(dāng)運(yùn)用稀釋涂布平板法接種,B項(xiàng)錯(cuò)誤;為避開(kāi)試驗(yàn)誤差,每個(gè)濃度每種菌重復(fù)多次試驗(yàn),所得數(shù)據(jù)取平均值,C項(xiàng)正確;黑曲霉在含有不同濃度的大葉木姜子多糖的濾紙上產(chǎn)生的抑菌圈的直徑最小,抑制效果最差,D項(xiàng)正確。14.為了檢測(cè)飲用水中是否含有某種細(xì)菌,配制的培育基的配方如下:蛋白胨乳糖蔗糖K2HPO4伊紅美藍(lán)蒸餾水10g5g5g2g0.4g0.065g1000ml將培育基pH調(diào)至7.2(1)該培育基所含碳源有____________________________,其功能是____________________________________________________________。(2)該培育基所含氮源有________,其功能是_______________________________。(3)該培育基除含碳源、氮源外,還含有微生物須要的養(yǎng)分物質(zhì)是_____________。(4)該細(xì)菌在同化作用上的代謝類(lèi)型是________型。(5)該培育基可用來(lái)鑒別哪種細(xì)菌()A.霉菌 B.酵母菌C.大腸桿菌 D.乳酸菌解析依據(jù)培育基的配方,該培育基用于培育異養(yǎng)微生物,含C、H、O、N的蛋白胨既是碳源,又是氮源。培育微生物需碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)因子等養(yǎng)分物質(zhì)。各種微生物繁殖的最適pH是不同的,大多數(shù)細(xì)菌相宜在中性至微堿性(pH為7.0~7.5)環(huán)境中生長(zhǎng),而酵母菌和霉菌則相宜在偏酸性(pH為4.5~6.0)環(huán)境中生長(zhǎng),伊紅—美藍(lán)培育基可用來(lái)鑒定是否含有大腸桿菌。答案(1)乳糖、蔗糖、蛋白胨主要用于構(gòu)成微生物的細(xì)胞物質(zhì)和供應(yīng)能源物質(zhì)(2)蛋白胨主要用于合成蛋白質(zhì)、核酸以及含氮的代謝產(chǎn)物(3)水、無(wú)機(jī)鹽(或K2HPO4)(4)異養(yǎng)(5)C15.據(jù)報(bào)道,從部分企業(yè)生產(chǎn)的速凍食品中檢出葡萄球菌超標(biāo),“細(xì)菌門(mén)”事務(wù)引起公眾普遍關(guān)注。葡萄球菌能分解卵黃中的卵磷脂,在含卵黃的固體培育基上形成的菌落四周會(huì)出現(xiàn)特有的乳白色的乳濁環(huán)。某愛(ài)好小組欲檢測(cè)某果汁類(lèi)食品中是否含有葡萄球菌,進(jìn)行了如下試驗(yàn)?;卮鹣铝袉?wèn)題:(1)配制培育基:稱取適量的牛肉膏、蛋白胨、NaCl、瓊脂等,加入蒸餾水,攪拌加熱至完全溶解后調(diào)整pH,分裝到錐形瓶后進(jìn)行____________,在無(wú)菌狀態(tài)下加入卵黃液搖勻后馬上倒平板。培育基中的牛肉膏和蛋白胨為葡萄球菌生長(zhǎng)和繁殖供應(yīng)____________________________。葡萄球菌能耐受高濃度的NaCl溶液,所以在配制培育基時(shí)加入高濃度的NaCl溶液可以將它分別出來(lái),此培育基屬于________培育基。(2)接種:取待檢測(cè)果汁2.5mL加入22.5mL滅菌生理鹽水,制成接種樣液。①試驗(yàn)組:將接種樣液用平板劃線法接種在含卵黃的固體培育基上。②比照組:將______________用平板劃線法接種在含卵黃的固體培育基上或不接種作為_(kāi)_______比照。(3)培育:將上述接種后的培育皿同時(shí)放在36℃(4)視察:培育基表面______________________。(5)結(jié)論:①若培育基上________________________,則該果汁類(lèi)食品中含有葡萄球菌。②若培育基上________________________,則該果汁類(lèi)食品中不含有葡萄球菌。解析(1)培育基的制備流程:計(jì)算→稱量→溶化→滅菌→倒平板。培育基中的牛肉膏可以為葡萄球菌的生長(zhǎng)和繁殖供應(yīng)氮源、磷酸鹽和維生素,蛋白胨可以為葡萄球菌的生長(zhǎng)和繁殖供應(yīng)碳源、氮源和維生素。加入高濃度NaCl溶液的培育基可以抑制大多數(shù)微生物的生長(zhǎng)繁殖,因此該培育基屬于選擇培育基。(2)比較試驗(yàn)組和比照組可知,試驗(yàn)的自變量為是否接種樣液。比照組接種無(wú)菌生理鹽水,或不接種,為空白
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