淋巴細(xì)胞庫的發(fā)育課件

第三章：淋巴細(xì)胞庫的發(fā)育

(Thedevelopmentoflymphocyterepertoires)第一節(jié)：B淋巴細(xì)胞的發(fā)育第二節(jié)：T淋巴細(xì)胞的發(fā)育淋巴細(xì)胞庫的發(fā)育

HSC是存在于造血組織中的一群原始造血細(xì)胞。具有自我分化與增值的特點(diǎn)，是各種血細(xì)胞的共同祖先，也稱多能干細(xì)胞（Pluripotenthematopoieticstemcell，PSC）。所有的血細(xì)胞,包括參與特異性免疫的淋巴細(xì)胞,都是由骨髓內(nèi)的多能干細(xì)胞發(fā)育、分化而來的。造血干細(xì)胞：

(hematopoieticstemcell，HSC)淋巴細(xì)胞庫的發(fā)育BloodSerumorPlasmaLeukocytes,PlateletsandRBCSerumProteinsMononuclearCellsPolymorphonuclearleukocytes(orGranulocytes)ImmunoglobulinsComplementClottingfactorsManyothersNeutrophilsEosinophilsBasophilsLymphocytes(Tcells,Bcells&NKcells)Monocytes血液的成分淋巴細(xì)胞庫的發(fā)育免疫細(xì)胞的產(chǎn)生plateletsmegakaryocyteeosinophilneutrophilbasophilmastcellcommonmyeloidprogenitormonocytemacrophageNaturalKillercellplasmacellBLymphocyteTLymphocyte

commonlymphoidprogenitorPluripotenthematopoieticstemcell淋巴細(xì)胞庫的發(fā)育第一節(jié)：B淋巴細(xì)胞的發(fā)育

（ThedevelopmentofBlymphocytes）

鳥類的法氏囊(bursaoffabricius)是B細(xì)胞分化的場(chǎng)所。哺乳動(dòng)物在胚胎早期，B細(xì)胞分化的最早部位是卵黃囊，此后在脾和骨髓，出生后則在骨髓內(nèi)分化成熟。淋巴細(xì)胞庫的發(fā)育一、B細(xì)胞發(fā)育的二個(gè)時(shí)期:非抗原依賴期：

B細(xì)胞分化在中樞免疫器官（骨髓）內(nèi)進(jìn)行。不依賴于抗原，但依賴于骨髓基質(zhì)細(xì)胞?？乖蕾嚻冢?/p>

B細(xì)胞分化在周圍免疫器官內(nèi)進(jìn)行，成熟B細(xì)胞受抗原刺激后，繼續(xù)分化為漿細(xì)胞。6淋巴細(xì)胞庫的發(fā)育B細(xì)胞發(fā)育的二個(gè)時(shí)期：7淋巴細(xì)胞庫的發(fā)育(一)非抗原依賴期：四個(gè)階段：(1)祖B細(xì)胞（pro-B）階段(2)前B細(xì)胞（pre-B）階段(3)不成熟（immature）

B細(xì)胞階段(4)成熟（mature）

B細(xì)胞階段8淋巴細(xì)胞庫的發(fā)育1、(始)祖B細(xì)胞（pro-B）階段：

發(fā)生于人胚胎的第9周，小鼠胚胎的第14天。Stemcell→EarlyPro-Bcell→LatePro-Bcell↑↑DH－JH基因重排，無smIg表達(dá)VH－DJH基因重排，無smIg表達(dá)，CD19+9淋巴細(xì)胞庫的發(fā)育2、前B細(xì)胞（pre-B）階段：LatePro-Bcell→LargePre-Bcell→SmallPre-Bcell↑↑終止H鏈基因重排，無smIg表達(dá)，但部分Pre-Bcell受體(鏈)在細(xì)胞表面表達(dá)VL－JL重排，Pre-Bcell受體(鏈)在細(xì)胞表面表達(dá)，同時(shí)有MHC-II表達(dá)，CD19+、20+10淋巴細(xì)胞庫的發(fā)育3、不成熟(immature)B細(xì)胞階段：SmallPre-Bcell→immatureBcell

↑→L鏈重排完成，smIgM，MHC-II類分子表達(dá)量增多，CD19+、CD20+，CD21+smIgM同自身抗原結(jié)合可產(chǎn)生抑制信號(hào)，使B細(xì)胞處于無功能抑制狀態(tài)，產(chǎn)生自身耐受。未與自身抗原結(jié)合的發(fā)育為MatureBcell11淋巴細(xì)胞庫的發(fā)育B細(xì)胞發(fā)育的不同階段：12淋巴細(xì)胞庫的發(fā)育4、成熟（mature）B細(xì)胞階段：immatureBcell→MatureBcell←↑→表達(dá)smIgM、smIgD，CD19+、CD20+，CD21+具有接受抗原的刺激并發(fā)生增殖分化的能力，是抗體產(chǎn)生的源泉細(xì)胞；其中部分可成為記憶性B細(xì)胞又稱為幼稚B細(xì)胞(Na?veBcell)13淋巴細(xì)胞庫的發(fā)育(二)抗原依賴期：幼稚B細(xì)胞釋放至周圍淋巴組織，構(gòu)成B細(xì)胞庫，經(jīng)抗原刺激后，可繼續(xù)分化為合成和分泌抗體的漿細(xì)胞，即抗原依賴的分化階段。14淋巴細(xì)胞庫的發(fā)育B細(xì)胞的發(fā)育15淋巴細(xì)胞庫的發(fā)育B細(xì)胞發(fā)育的部位16淋巴細(xì)胞庫的發(fā)育細(xì)胞周期與B細(xì)胞的激活：17淋巴細(xì)胞庫的發(fā)育二、骨髓基質(zhì)細(xì)胞(stromalcell)的作用：(一)骨髓基質(zhì)細(xì)胞：包括：巨嗜細(xì)胞血管內(nèi)皮細(xì)胞前脂肪細(xì)胞脂肪細(xì)胞纖維母細(xì)胞細(xì)胞外基質(zhì)等等18淋巴細(xì)胞庫的發(fā)育HSC的發(fā)育需要骨髓基質(zhì)細(xì)胞：19淋巴細(xì)胞庫的發(fā)育(二)骨髓基質(zhì)細(xì)胞的作用：1、連接作用：通過stromalcell上的細(xì)胞粘附分子(CAMs)與發(fā)育中的B細(xì)胞上的配基反應(yīng)，使兩者粘附在一起。2、提供生長(zhǎng)因子：如干細(xì)胞因子(SCF)等。20淋巴細(xì)胞庫的發(fā)育基本過程：

(1)stemcell和earlypro-Bcell通過其表面的配基（整合素）與stromalcell表面的CAMs結(jié)合。(2)這一結(jié)合啟動(dòng)了earlypro-Bcell表面的絡(luò)氨酸激酶受體與stromalcell上的SCF結(jié)合。(3)激酶被激活，導(dǎo)致early

pro-Bcell分化成latepro-Bcell和pre-Bcell。(4)stromalcell分泌細(xì)胞因子IL-7，被latepro-Bcell和pre-Bcell識(shí)別。(5)pre-Bcell發(fā)育為immatureBcell。21淋巴細(xì)胞庫的發(fā)育三、B細(xì)胞的選擇：1、與自身抗原結(jié)合：(1)immatureBcell與多價(jià)的自身抗原結(jié)合后，被克隆刪除(clonaldeletion)，導(dǎo)致細(xì)胞程序性死亡(apoptosis)。(2)immatureBcell與可溶的(低價(jià))自身抗原結(jié)合后，遷移到外周，產(chǎn)生無反應(yīng)的Bcell。2、不與自身抗原結(jié)合：immatureBcell遷移到外周，發(fā)育為matureBcell。22淋巴細(xì)胞庫的發(fā)育四、B細(xì)胞的動(dòng)態(tài)變化：當(dāng)matureBcell進(jìn)入外周時(shí)：一部分不進(jìn)入淋巴小泡，不能與抗原結(jié)合，只能存活3天左右，稱short-livedBcell。一部分進(jìn)入淋巴小泡，可被抗原結(jié)合，可存活3－8周，稱long-livedBcell。23淋巴細(xì)胞庫的發(fā)育第二節(jié)：T淋巴細(xì)胞的發(fā)育

（ThedevelopmentofTlymphocytes）

T細(xì)胞是在骨髓內(nèi)產(chǎn)生，在胸腺內(nèi)分化成熟的。T細(xì)胞分化的成熟要經(jīng)過遷移和繁殖、分化和選擇的過程。在機(jī)體的T細(xì)胞庫中，除具有不同抗原特異性外，還有兩個(gè)基本特點(diǎn)：(1)T細(xì)胞識(shí)別抗原受到自身MHC分子的限制。(2)成熟T細(xì)胞庫是自我耐受的，即：它不能單獨(dú)識(shí)別自身MHC分子以及和自身MHC分子結(jié)合的自身抗原。24淋巴細(xì)胞庫的發(fā)育一、T細(xì)胞發(fā)育的三個(gè)階段:（一）早期胸腺細(xì)胞階段：雙陰性細(xì)胞階段(doublenegative，DN)

（二）不成熟胸腺細(xì)胞階段：雙陽性細(xì)胞階段(doublepositive，DP)（三）成熟T細(xì)胞階段：?jiǎn)侮栃约?xì)胞階段(singlepositive，SP)25淋巴細(xì)胞庫的發(fā)育（一）早期T細(xì)胞發(fā)育階段：

——雙陰性細(xì)胞階段(DN)

Stemcell→double

negativethymocytescells↑TCR－，CD4－，CD8－但出現(xiàn)一些細(xì)胞表面分子，如CD2、CD5及CD7

TCRγ、δ、βchain基因重組26淋巴細(xì)胞庫的發(fā)育（二）不成熟胸腺細(xì)胞階段：

——雙陽性細(xì)胞階段(DP)

Double

negativethymocytes

↓↓少數(shù)表達(dá)γ:δCD3+(1-5%)↓

Largeactivedoublepositivethymocytes

→↓Smallrestingdoublepositivethymocytes

↑表達(dá)PTα:β+,CD3＋,CD4+,CD8+表達(dá)α:β+,CD3＋,CD4+,CD8+27淋巴細(xì)胞庫的發(fā)育（三）成熟T細(xì)胞階段：

——單陽性細(xì)胞階段(SP)

Smallrestingdoublepositivethymocytes↓負(fù)選擇(＞95%)↓正選擇(＜5%)克隆刪除，細(xì)胞程序性死亡↓Smallrestingsinglepositivethymocytes

→↓進(jìn)入外周淋巴系統(tǒng)表達(dá)CD4+8－或CD4－8＋28淋巴細(xì)胞庫的發(fā)育T細(xì)胞發(fā)育的幾個(gè)主要階段29淋巴細(xì)胞庫的發(fā)育二、CD3、CD4、CD8：1、成熟T細(xì)胞亞群（subset）：

（1）CD4+Tcellsubset：與MHCclassII分子識(shí)別的T細(xì)胞群。

（2）CD8+Tcellsubset：與MHCclassI分子識(shí)別的T細(xì)胞群。30淋巴細(xì)胞庫的發(fā)育2、CD3：

與TCR形成復(fù)合體(T-cellreceptorcomplex)。3、CD4，CD8：（1）做為TCR的共受體(co-receptor)。（2）作為粘附分子(adhesionmolecules)協(xié)助T細(xì)胞與抗原呈遞細(xì)胞緊密連接。（3）在T細(xì)胞內(nèi)部傳遞信號(hào)(signaltransducers)。31淋巴細(xì)胞庫的發(fā)育CD4與CD8：32淋巴細(xì)胞庫的發(fā)育CD4的作用：33淋巴細(xì)胞庫的發(fā)育三、T細(xì)胞的選擇：T細(xì)胞發(fā)育過程中CD4+CD8+T細(xì)胞可通過正選擇（positiveselection）和負(fù)選擇（negativeselection）作用而分化出具單一表面分子（CD4+8－或CD4－8＋）的T細(xì)胞（singlepositiveTcells）。34淋巴細(xì)胞庫的發(fā)育1、正選擇（positiveselection）：又稱“陽性選擇”或“胸腺教